病理技术理论与操作手册Word文件下载.docx

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一、常规石蜡切片制作法

（一）组织脱水

（二）组织的透明

（三）组织浸蜡

（四）组织块包埋

（五）蜡块的修切

（六）石蜡切片

（七）裱片

（八）烘烤切片

（九）切片的普通染色

（十）苏木素的种类及其配制法

（十一）伊红染液的配制

二、超声波快速石蜡制片法

三、快速石蜡制片法

第五节冰冻切片

（一）冷冻切片的种类

（二）冷冻切片的目的

（三）冷冻切片的制作方法

（四）冷冻切片的快速染色法

（一）MW固定组织

（二）MW快速石蜡制作法

（三）MW技术的特殊染色法

（四）MW技术的免疫组化染色法

第二篇

各种组织特殊染色法

一、胶原纤维染色法

1、VanGieson染色法

2、Masson氏三色染色法

二、网状纤维染色法

1、Gomori’s氨银法

2、Godon和Swet氏法

3、Wilder氏法

4、Foot氏法

三、弹性纤维染色法

1、Weigert氏雷锁辛品红法

2、Gomori醛品红法

3、Unna地衣红技术

4、Verhoff氏酒精苏木素技术

四、横纹肌染色法

1、磷钨酸苏木素染色法（PTAH）

2、Masson氏法染色法

3、VanGieson氏法

五、基底膜的显示

1、六氨银显示法

2、PAS显示法

3、Masson氏三色染色法

4、AFOG法

5、六氨银——AFOG联合染色法

六、纤维素染色法

1、MSB的改良法

2、PTAH法

七、细菌染色法

1、Warthin-Satamy氏法显示幽门螺杆菌

2、甲苯胺蓝染色法

3、Wade-Fite氏抗酸菌染色法

4、Grocott-Gomori氏六氨银改良法显示真菌

5、六氨银改良法显示组织胞浆菌

八、病毒包涵体染色法

1、Macchiaello氏改良法显示SARS病毒包涵体

2、Giemsa法显示多种病毒涵体

3、伊红和甲基蓝显示合胞和巨细胞病毒包涵体

九、淀粉样物的染色法

1、甲基紫法

2、改良的刚果红甲醇法

十、神经系统染色技术

（一）苏木素VG法染中枢神经

（二）神经细胞尼氏体染色

（三）改良的Masland、Glees方法

（四）改良的Palmgren氏法染神经纤维

（五）改良的Eger’s氏法染变性轴索

（六）改良的Loyez氏法染神经髓鞘

第三篇

组织化学及其显示法

一、色素显示法

1、硫酸亚铁法

2、MassonFontana氨银法

二、含铁血黄素显示法

1、Perls亚铁氰化钾法

三、脂褐素显示法

1、PAS法

2、Schmorl氏法

四、钙盐显示法

1、硝酸银法

五、脂类染色法

1、苏丹III·

IV联合法

2、油红法

3、苏丹黑B法

4、Schultz法显示胆固醇与胆固醇酯

六、糖类

1、PAS显示法

2、AB法

3、AB——PAS

七、核酸

1、Feulgen显示DNA法

2、核仁组成区和糖多糖复合显示法

3、粘多糖和核仁组成区双染法

八、酶组织化学

1、改良的Gomori氏硝酸铅法

2、改良的Gomori氏硝酸铅法

3、Gomoris钙钴法

4、α-磷酸萘脂法

5、磷酸奈酯AS-TR（或AS-BJ）法

6、酸、碱性磷酸酶双染色法

第四篇

免疫组织化学技术

一、免疫组织化学的意义

二、免疫组织化学技术的发展概况

（一）免疫荧光细胞化学技术

（二）免疫酶细胞化学技术

（三）非标记抗体酶法

（四）亲和细胞化学法

（五）碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法

（六）免疫金银法

（七）LSAB法

（八）EnVisionTMSystems法

（九）真空负压LSAB法

三、常用免疫组织化学染色方法

（一）ABC法

（二）LSAB法

（三）真空负压LSAB法

（四）EnvisionTMSystems法

（五）免疫组化双染色法（I）

（六）免疫组化双染色法（II）

（七）细胞培养片免疫荧光染色法

（八）真空负压、免疫荧光染色法染细胞培养片

四、抗原修复

（一）为什么要进行抗原修复

（二）用什么方法进行抗原修复

1、真空负压抗原修复法

2、微波辐射抗原修复法

3、高压抗原修复法

4、隔水热抗原修复法

5、电炉加热抗原修复法

（三）抗原修复必须注意的问题

五、作好免疫组化染色必须注意的问题

六、免疫组化阳性病例的评判及相关问题

七、常用抗体的应用范围及选用

（一）常用上皮细胞及肿瘤标记物

（二）常用的时间叶源性组织及其肿瘤的检测抗体

（三）肌组织及其相关肿瘤的常用抗体

（四）淋巴组织及相关肿瘤检测的常用抗体

（五）神经和神经内分泌及其相关肿瘤抗体

（六）其它

八、免疫组织化学在乳腺癌中的应用

第一篇常规标本制作程序

第一节组织标本收集取材固定

一，标本收集和查验程序。

对于所有送检的标本，必须认真执行查验程序，方能进入下一程序，其主要程序是：

1，收集标本时：

要仔细查对申请单上的姓名与标本上的姓名，序号是否一致；

标本的件数与申请单是否相符；

标本是否用固定液固定过。

2，标本经上述验收后，进行编号登记，以防错乱。

编号按年份和流水号两种方法，如果为了今后的查找较为方便，按年份编号为较好。

二，活检组织取材：

在外科送检的诸多材料中，对于每一例病例的材料，大小都不一样，但对于较大的标本，不可能都对其进行制作切片，因此，选择适合于病理技术制作，适合于病理诊断且有利于回顾性研究等各方面的材料，是病理活检的关键，通常把这过程称为取材。

（一）取材时必须注意以下问题：

①取出所有送检的标本，量其大小，称其重量，描写其色泽，质地，形状和肉眼所见表面情况。

当标本切开后，应详细描写其切面的颜色，硬度，病变部位等，必要时绘图说明。

②对于细小标本如肺支气管穿刺物标本胃肠镜活检标本[1]等，应将其染上伊红颜色后，用擦镜纸或特别脱水袋将其包上或装上，以防漏出脱水盒的小孔。

③对于有传染性的标本，让标本彻底固定后再取材。

如结核瘤标本等。

④对于罕见特殊的标本，应小心保存好，在不影响诊断的情况下，尽量保存好大体标本。

以利于教学标本，陈列标本的收集。

⑤边取材边固定，组织标本较多的单位，取材经常要花上几个小时，如果从下午2：

30开始取材，至5：

30完成，那么先取的材料就可以多固定几个小时，如此可以防止固定时间不足，同时也可防止组织发生自溶。

⑥对于骨髓穿刺的组织，可先用10%硝酸浸泡30分钟左右，然后再与其它组织进行处理。

⑦骨组织和钙化组织，应彻底脱钙后，方能进行制作。

具体用大头针能顺利扎入骨组织则可。

⑧活检组织取材，不能太厚，以不超过2mm为宜。

以防脱水不彻底，不利于制片。

⑨每取完一例标本后，所有的工具如刀，剪，盘镊，切板等，必须用水冲洗干净，以免污染，混淆于其它病例。

⑩组织取完即刻放入打印好号码的盒内，放入固定液中固定。

（二）各种器官及其肿瘤取材的方法

1、乳腺：

纤维腺瘤：

肉眼观察其形状、体积、包膜是否完整，切面是否均匀，有无坏死，取材：

肿瘤连包膜1-3块（即周边组织1块，包膜与周边组织1块，如果肿瘤不大，上述几种即周边包膜和肿瘤可取1块）。

乳腺癌：

体积，皮肤颜色，有无水肿或变硬，肿大淋巴结，数量，组别，硬度，及切面情况。

沿乳腺的最长径经过乳头切开，观察肿瘤的面积，颜色，硬度及浸润情况等。

取材：

乳头及其下组织，肿瘤及肿瘤交界处，肿瘤下胸肌，全部淋巴结（注明组别），根据各种病变的情况，确定取材的块数，如切缘、包膜、肿瘤等均应取到各组淋巴结分别全部切材。

2、食管癌：

切除的食管长度及周径，管壁有无水肿或粘连，肿大淋巴结的位置，大小，硬度及数目。

沿肿瘤对侧纵形切开，肿瘤大小及形状。

肿瘤上下交界处各取一块。

或沿长轴通过肿瘤全径取出大切片或分成数段，全部淋巴结，分别切块包埋

3、胃溃疡及胃癌：

全胃或部分切除，大弯及小弯长度，肿大淋巴结的部位、大小，硬度及数目，病变处相应浆膜面有何变化。

一般沿大弯剪开，观察病变大小，深度，边缘及周围变化，如为癌瘤，属何种类型，与大小切端的距离。

病变及与其交界处胃壁全层的胃组织（尽量侧重于小弯，并注意沿长轴切取组织块），上下切端组织，肿大的淋巴结（注明组别）

4、阑尾：

一般于近、中、远三段各取一组织块，远端一块尽量靠近尖端，以免遗漏尖癌。

已被剖开者，沿纵轴取组织块，如检查时不能发现病变所在，需多做断面，以寻觅病变部位和取组织块。

5、肠癌：

切除肠管的长度，肿瘤生长部位、大小、局部浆膜等情况。

如为十二指肠癌，则应注意与特氏壶腹的关系。

肿瘤及交界处肠壁全层组织，上下切端，肿大的淋巴结。

6、肠梗阻：

梗阻部位、长度、直径及表面变化（颜色、水肿、充血、出血）；

检查肠系膜的变化，沿病变血管解剖，作多数横断面，观察血管壁是否变厚，寻找栓塞的起止部位；

肠粘膜有无溃疡。

病变最显著处及肠的两端各切一块，病变血管（带些系膜）各切一块。

7、肠套叠：

注意套叠部位及套叠关系，寻找阑尾，肠壁是否增厚及变硬，以手指放入小肠为引导，沿肠系膜剪开，寻找有无原发病变（在套入部位的最前端寻找有无肿瘤、溃疡等到变化）。

切面观察各层肠壁的厚度、水肿、充血、出血、坏死及硬变等到情况。

原发病变（如肿块，溃疡等）。

有变化的肠壁厚度，阑尾，肿大淋巴结。

8、肠结核：

外部有无粘连，白色斑块、结节、狭窄，病变上下的肠段有何改变，有无淋巴结肿大。

沿病变对侧切开，观察病变情况（溃疡、突起、体积、有无息肉样改变，肠道是否变为狭窄或增厚）。

病变部，上下切缘，肿大的淋巴结。

9、肝活体组织：

大小、形状、颜色、表面及切面有无结节状或纤维组织增生，有无灰白色结节等。

包含各病变的组织，如标本较小，全部切取。

10、阴茎癌：

肿瘤生长的部位，大小，溃烂及向阴茎浸润情况，切端与肿瘤明显浸润处的距离。

纵切（通过尿管）观察切面情况。

肿瘤切面一块，阴茎截除端一块。

11、肾结核：

注入福尔马林固定一周再切，体积，表面是否光滑，有无粘连、灰白色小结节，输尿管长度，直径，及硬度。

沿输尿管及肾盂切开，肾盂是否扩张，切面破坏情况，粘膜变化，主质变化，乳头情况，（注明哪一个）；

输尿管厚度，有否梗塞，粘膜情况。

肾主质包括病变及交界处，输尿管及切端。

12、肾盂积水：

先抽去积液，再注入固定液后再检查。

肾体积、表面性状（色泽、平滑否、结节、粘连）。

沿肾、肾盂及输尿管切开，注意阻塞部位及原因。

观察肾盏、肾盂及输尿管扩张情况，肾实质厚度。

肾实质厚处及薄处各取一块，输尿管各取一块。

13、肾癌：

肾及肿瘤之体积及重量，肿瘤部位及与肾的关系，表面有无水肿或粘连，有无肿大淋巴结。

切面：

肿瘤位置、形状、大小、颜色、包膜、坏死、出血、囊性变，肾盂与输尿管中有无蔓延。

肿瘤包括其旁的正常组织，肿瘤以外的肾组织、输尿管。

14、膀胱癌：

全部或部代分膀胱切除，除非癌瘤位于前侧，一般沿前侧切开，肿瘤位置，与输尿管中及膀胱的关系、体积、生长情况及浸润情况，有无淋巴结（大小，硬度，切面变化）。

沿纵轴方向取材。

肿瘤及膀胱壁全层组织；

乳头状瘤应包括蒂部组织，三角区组织。

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