GPC操作步骤Word下载.docx

1、超声15min，恢复到室温后才可利用。2.分析操作步骤2.1.开机及平稳进程2.1.1.打开空调，使室内温度维持在25左右。2.1.2.打开电脑及仪器（包括输液泵LC-20AD、自动进样器SIL-20A、检测器RID-10A、柱温箱CTO-20A）。在打开仪器的时候，通常操纵器最后开。若是操纵器装在输液泵内部，那么该输液泵最后开。2.1.3.运行LCsolution。双击电脑桌面，打开LCsolution程序，点击第一个图标。Login窗口点击OK，无密码。2.1.4.点击“Instrument Parameters View”中“Normal”，设定方式参数。仪器参数窗口设定方式参数： 流动

2、相流速（pump a flow）：1ml/min 测按时刻（time）：大于溶剂峰出峰时刻2-3min 柱温（oven temperature）：40（与检测器温度相同）选中Advanced窗口，pump，pressure：max：8mPa（参照柱子说明书，两根柱子串联那么相加）点击Download按钮，显现对话框选择是，将参数下载到仪器。“Instrument Parameters View”中“Advanced”为各设备的运行参数，参考相关说明书制定。2.1.5.输液泵排气：逆时针拧开LC-20AD排液阀，按purge按钮，3min后自动终止，顺时针拧紧排气阀。排液阀拧开不要超过180度，

3、不然反而容易在purge时引入气泡。2.1.6.进样器冲洗：按自动进样器上purge按钮，25min后自动终止；自动进样器清洗液利用与流动相相同溶剂，可是去除添加的盐和酸等物质。2.1.7.平稳GPC柱：待终止后，按（Instrument On/Off）使仪器依照方式参数开始运转，一样60min左右基线能够走平。能够与步同时进行。2.1.8.示差检测器平稳2.1.8.1.按R flow on/off键冲洗参比池。2.1.8.2.20min后，按R flow on/off键停止冲洗，反复点击3-4次以排除池内气泡。2.1.8.3.调零，等基线平稳后检查balance值，若是大于50，就进行光路平

4、稳，若是小于50，没必要进行。2.1.8.4.在仪器监视窗口查看检测器能量应处于6000和9000之间，不然在面板上调剂电压使之座落在该范围内。能够在步流动相完全置换色谱柱中溶液后开始进行。2.1.9.待基线大体稳固，按Zeros Detector A键调零。2.2.分析操作进程2.2.1.放入样品瓶，记录放置孔号。样品架应推倒底，瓶垫应该白色朝上。2.2.2.编辑批处置表2.2.2.1.右边助手烂点击“Batch processing”2.2.2.2.New；2.2.2.3.输入第一个样品进样器孔号（Vial#），右键fill detail；2.2.2.4.跳出窗口中依次填入行数（由第1行到

5、第6行）、第一个样品孔号（2）与重复次数（1次）；点击“OK”；2.2.2.5.依次输入sample name（样品名）、sample ID（样品编号）；2.2.2.6.method file列中输入方式文件（*.lcm文件），左键选定列，右键单击，选择fill down向下填充；2.2.2.7.确信数据文件保留地址及名称；2.2.2.8.输入进样体积：50l-100l（标样浓度高则进样量少，低那么进样量多；所有的标准品和代测样品应该采纳相同的进样体积）；2.2.2.9.保留批处置文件。2.2.3.运行批处置表。点击Batch start按钮，开始进样。测试进程中可按助手栏中“Pause”暂停

6、，插入样品后保留批处置表，按restart；也可按“Stop” 停止，对话框弹出选择“停止这一针分析”和“停止那个样品表的分析”。手动进样器点击single start进行单次进样。2.3.分析完冲洗及关机进程2.3.1.第二天将会再次利用2.3.1.1.点击仪器操纵栏图标，停止温控。2.3.1.2.使流动相以min流速流入填充柱，直至柱温冷却至室温；2.3.1.3.点击“intrument on/off”2.3.1.4.依次关闭程序、电脑和仪器。2.3.2.仪器长时刻不用2.3.2.1.点击仪器操纵栏图标，停止温控。2.3.2.2.换上保留溶剂，以min流速流入填充柱，时刻为3-4倍方式时刻

7、，直至柱温冷却至室温；2.3.2.3.点击“intrument on/off”2.3.2.4.将填充柱从仪器上拆下，两头用堵头堵住，放置在包装盒中。2.3.2.5.依次关闭程序、电脑和仪器。柱子的利用和保藏应该依照柱子利用说明书来操作。改换溶剂时注意缓冲盐不要析出和溶剂之间的互溶性。3.分子量计算进程以sample目录下的演示文件为例介绍分子量校正曲线制作及操作进程。3.1.校正曲线制作第一双击桌面LCsolution图标，单击GPC Postrun，打开GPC Postrun Analysis窗口。所有的操作均在该窗口中进行。1双击数据资源治理器窗口GPC_Data-001文件，打开GPC标

8、准品数据文件。（001,002,003,004均为分子量标准品数据文件，每一个标准品数据文件中含有两个不同分子量的标准品，因此有两个峰。005为未知品数据文件）2单击工具栏Data Analysis Parameters图标显现Data Analysis Parameters窗口，利用如下图的积分参数。单击Data Analysis Parameters窗口中的Program图标。设定积分时刻程序，确保只有标准品的峰被积分出来。通常将溶剂峰开始时刻20min输入Time列，在Command列当选择Integration Off，如此溶剂峰就不被积分。设好后单击OK按钮。单击Data Analy

9、sis Parameters窗口的Advanced按钮。设定为5000，单击OK按钮。单击确信。3单击助手栏Apply to Method按钮。给方式文件取个名字GPC_test，单击保留按钮。显现Select Method Parameters窗口，直接单击OK按钮。单击如下图的按钮，关闭GPC_Data-001数据文件。提示是不是保留数据文件，选择是。4单击数据资源治理器窗口Method标签，显示方式文件。双击适才保留的GPC_test方式文件，显现方式文件编辑窗口。5窗口中显示了以前的分子量校准曲线信息，先将以前的信息清除掉。（若是没有以前的信息，跳过这一步）单击校准表查看窗口Edit按

10、钮，切换到编辑模式。选中所有列，鼠标右键单击，选择Delete Row，删除所有行。单击View按钮，切换到查看模式。显现对话框，直接单击确信。如此就将以前的信息清除掉了。6单击工具栏Data Analysis Parameters图标。显现数据分析参数编辑窗口，选择Curve类型为三次方曲线。单击GPC Calculation标签。采纳窄散布校正法时，在上图Q Factor一栏输入RQF值（Q因子比）。采纳普适校正法时，在上图Viscosity栏中输入标样的和K值。并点击Calibration Curve标签，选中Mark-Houwink，点击settings，输入样品的和K值。将GPC C

11、alculation选项打勾。显现窗口，直接单击确信。7单击Chromatogram View窗口的Multi view标签，切换到显示多色谱图界面。单击Data Explorerer窗口的Data标签，显示所有的数据文件。选中001-004这四个数据文件。将选中的四个数据文件拖到Multi View窗口中，同时显示四个色谱图的八个峰。8单击校准表查看窗口的Edit按钮，切换到编辑模式。单击校准表查看窗口右下角的Pick up按钮。显现GPC Method Edit窗口，单击All peaks按钮选择所有积分出来的峰。单击New按钮，新建校准表。校准表中显现所有峰的保留时刻，检查确认是不是正确

12、。输入各个峰所对应的分子量。单击View按钮。Calibration Curve View显现制作好的校准曲线图谱和方程。9单击工具栏Save按钮，保留方式文件。显现对话框，单击是。3.2.样品平均分子量计算1双击打开未知品数据文件GPC_Data-005。单击Method标签。将适才保留的GPC_test方式拖到右边的色谱图窗口中，加载方式参数。显现选择方式参数对话框，直接单击OK。2单击工具栏Molecular Weight Distribution按钮。查看分子量计算结果。3单击助手栏Data Report按钮查看数据文件中的报告。显示包括在数据文件中的报告。单击File菜单，打开报告格式文件，能够修改报告格式。选择Calculation Results目录。（该目录中寄存的都是针对单个GPC数据文件的报告模板）选择如下图的报告格式文件。（共有四种不同格式的报告格式文件可供选择）单击助手栏Preview按钮。在打印前预览报告。单击打印按钮，就能够够打印出报告。