1、超声15min,恢复到室温后才可利用。2.分析操作步骤2.1.开机及平稳进程2.1.1.打开空调,使室内温度维持在25左右。2.1.2.打开电脑及仪器(包括输液泵LC-20AD、自动进样器SIL-20A、检测器RID-10A、柱温箱CTO-20A)。在打开仪器的时候,通常操纵器最后开。若是操纵器装在输液泵内部,那么该输液泵最后开。2.1.3.运行LCsolution。双击电脑桌面,打开LCsolution程序,点击第一个图标。Login窗口点击OK,无密码。2.1.4.点击“Instrument Parameters View”中“Normal”,设定方式参数。仪器参数窗口设定方式参数: 流动
2、相流速(pump a flow):1ml/min 测按时刻(time):大于溶剂峰出峰时刻2-3min 柱温(oven temperature):40(与检测器温度相同)选中Advanced窗口,pump,pressure:max:8mPa(参照柱子说明书,两根柱子串联那么相加)点击Download按钮,显现对话框选择是,将参数下载到仪器。“Instrument Parameters View”中“Advanced”为各设备的运行参数,参考相关说明书制定。2.1.5.输液泵排气:逆时针拧开LC-20AD排液阀,按purge按钮,3min后自动终止,顺时针拧紧排气阀。排液阀拧开不要超过180度,
3、不然反而容易在purge时引入气泡。2.1.6.进样器冲洗:按自动进样器上purge按钮,25min后自动终止;自动进样器清洗液利用与流动相相同溶剂,可是去除添加的盐和酸等物质。2.1.7.平稳GPC柱:待终止后,按(Instrument On/Off)使仪器依照方式参数开始运转,一样60min左右基线能够走平。能够与步同时进行。2.1.8.示差检测器平稳2.1.8.1.按R flow on/off键冲洗参比池。2.1.8.2.20min后,按R flow on/off键停止冲洗,反复点击3-4次以排除池内气泡。2.1.8.3.调零,等基线平稳后检查balance值,若是大于50,就进行光路平
4、稳,若是小于50,没必要进行。2.1.8.4.在仪器监视窗口查看检测器能量应处于6000和9000之间,不然在面板上调剂电压使之座落在该范围内。能够在步流动相完全置换色谱柱中溶液后开始进行。2.1.9.待基线大体稳固,按Zeros Detector A键调零。2.2.分析操作进程2.2.1.放入样品瓶,记录放置孔号。样品架应推倒底,瓶垫应该白色朝上。2.2.2.编辑批处置表2.2.2.1.右边助手烂点击“Batch processing”2.2.2.2.New;2.2.2.3.输入第一个样品进样器孔号(Vial#),右键fill detail;2.2.2.4.跳出窗口中依次填入行数(由第1行到
5、第6行)、第一个样品孔号(2)与重复次数(1次);点击“OK”;2.2.2.5.依次输入sample name(样品名)、sample ID(样品编号);2.2.2.6.method file列中输入方式文件(*.lcm文件),左键选定列,右键单击,选择fill down向下填充;2.2.2.7.确信数据文件保留地址及名称;2.2.2.8.输入进样体积:50l-100l(标样浓度高则进样量少,低那么进样量多;所有的标准品和代测样品应该采纳相同的进样体积);2.2.2.9.保留批处置文件。2.2.3.运行批处置表。点击Batch start按钮,开始进样。测试进程中可按助手栏中“Pause”暂停
6、,插入样品后保留批处置表,按restart;也可按“Stop” 停止,对话框弹出选择“停止这一针分析”和“停止那个样品表的分析”。手动进样器点击single start进行单次进样。2.3.分析完冲洗及关机进程2.3.1.第二天将会再次利用2.3.1.1.点击仪器操纵栏图标,停止温控。2.3.1.2.使流动相以min流速流入填充柱,直至柱温冷却至室温;2.3.1.3.点击“intrument on/off”2.3.1.4.依次关闭程序、电脑和仪器。2.3.2.仪器长时刻不用2.3.2.1.点击仪器操纵栏图标,停止温控。2.3.2.2.换上保留溶剂,以min流速流入填充柱,时刻为3-4倍方式时刻
7、,直至柱温冷却至室温;2.3.2.3.点击“intrument on/off”2.3.2.4.将填充柱从仪器上拆下,两头用堵头堵住,放置在包装盒中。2.3.2.5.依次关闭程序、电脑和仪器。柱子的利用和保藏应该依照柱子利用说明书来操作。改换溶剂时注意缓冲盐不要析出和溶剂之间的互溶性。3.分子量计算进程以sample目录下的演示文件为例介绍分子量校正曲线制作及操作进程。3.1.校正曲线制作第一双击桌面LCsolution图标,单击GPC Postrun,打开GPC Postrun Analysis窗口。所有的操作均在该窗口中进行。1双击数据资源治理器窗口GPC_Data-001文件,打开GPC标
8、准品数据文件。(001,002,003,004均为分子量标准品数据文件,每一个标准品数据文件中含有两个不同分子量的标准品,因此有两个峰。005为未知品数据文件)2单击工具栏Data Analysis Parameters图标显现Data Analysis Parameters窗口,利用如下图的积分参数。单击Data Analysis Parameters窗口中的Program图标。设定积分时刻程序,确保只有标准品的峰被积分出来。通常将溶剂峰开始时刻20min输入Time列,在Command列当选择Integration Off,如此溶剂峰就不被积分。设好后单击OK按钮。单击Data Analy
9、sis Parameters窗口的Advanced按钮。设定为5000,单击OK按钮。单击确信。3单击助手栏Apply to Method按钮。给方式文件取个名字GPC_test,单击保留按钮。显现Select Method Parameters窗口,直接单击OK按钮。单击如下图的按钮,关闭GPC_Data-001数据文件。提示是不是保留数据文件,选择是。4单击数据资源治理器窗口Method标签,显示方式文件。双击适才保留的GPC_test方式文件,显现方式文件编辑窗口。5窗口中显示了以前的分子量校准曲线信息,先将以前的信息清除掉。(若是没有以前的信息,跳过这一步)单击校准表查看窗口Edit按
10、钮,切换到编辑模式。选中所有列,鼠标右键单击,选择Delete Row,删除所有行。单击View按钮,切换到查看模式。显现对话框,直接单击确信。如此就将以前的信息清除掉了。6单击工具栏Data Analysis Parameters图标。显现数据分析参数编辑窗口,选择Curve类型为三次方曲线。单击GPC Calculation标签。采纳窄散布校正法时,在上图Q Factor一栏输入RQF值(Q因子比)。采纳普适校正法时,在上图Viscosity栏中输入标样的和K值。并点击Calibration Curve标签,选中Mark-Houwink,点击settings,输入样品的和K值。将GPC C
11、alculation选项打勾。显现窗口,直接单击确信。7单击Chromatogram View窗口的Multi view标签,切换到显示多色谱图界面。单击Data Explorerer窗口的Data标签,显示所有的数据文件。选中001-004这四个数据文件。将选中的四个数据文件拖到Multi View窗口中,同时显示四个色谱图的八个峰。8单击校准表查看窗口的Edit按钮,切换到编辑模式。单击校准表查看窗口右下角的Pick up按钮。显现GPC Method Edit窗口,单击All peaks按钮选择所有积分出来的峰。单击New按钮,新建校准表。校准表中显现所有峰的保留时刻,检查确认是不是正确
12、。输入各个峰所对应的分子量。单击View按钮。Calibration Curve View显现制作好的校准曲线图谱和方程。9单击工具栏Save按钮,保留方式文件。显现对话框,单击是。3.2.样品平均分子量计算1双击打开未知品数据文件GPC_Data-005。单击Method标签。将适才保留的GPC_test方式拖到右边的色谱图窗口中,加载方式参数。显现选择方式参数对话框,直接单击OK。2单击工具栏Molecular Weight Distribution按钮。查看分子量计算结果。3单击助手栏Data Report按钮查看数据文件中的报告。显示包括在数据文件中的报告。单击File菜单,打开报告格式文件,能够修改报告格式。选择Calculation Results目录。(该目录中寄存的都是针对单个GPC数据文件的报告模板)选择如下图的报告格式文件。(共有四种不同格式的报告格式文件可供选择)单击助手栏Preview按钮。在打印前预览报告。单击打印按钮,就能够够打印出报告。
copyright@ 2008-2022 冰豆网网站版权所有
经营许可证编号:鄂ICP备2022015515号-1