常用培养基的配制Word文档下载推荐.docx

1、二十一、克氏双糖铁琼脂（KI）二十二、克氏双糖铁琼脂（换用方法）二十三、动力硝酸盐增养基（A法）（SPS）二十四、动力硝酸盐培养基（B法）二十五、马丁氏肉汤二十六、察氏培养基二十七、马铃薯萄萄糖琼脂（PDA）二十八、马铃薯琼脂二十九、Elek氏培养基（毒索测定用）三十、胰蛋白胨水三十一、3.5氯化钠三糖铁琼脂三十二、牛肉（或中心）消化汤三十三、0.1蛋白胨水稀释剂绞碎牛肉 500g 蛋白胨 10g 磷酸氢二钾 2g氯化钠 5g蒸馏水 1000 ml（二）制法 将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g加蒸馏水1000ml，混合后放冰箱过夜，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，

2、并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后校正pH7476煮沸并过滤，分装烧瓶，121高压灭菌30分。（三）用途 一般细菌培养用。肉水 1000ml 蛋白胨 10g磷酸氢二钾 1g 琼脂 2030g（二）制法 先将琼脂剪碎，用冷水洗净后加入肉汤中，划线补充水分，加热溶化。校正pH7.47.6，用纱布夹棉花过滤至透明。分装中试管或三角瓶。高压灭菌12120分，灭菌后中试管摆成斜面。（三）用途 一般细菌的分离培养，纯培养，观察菌落性状及保存菌种用。为特殊培养基的基础。营养琼脂脱纤维鲜血（马、绵羊、牛、家兔）58。（二）制法 将灭菌的营养琼脂加热溶化，冷至4550时，加入无

3、菌脱纤维鲜血58，分装试管，即摆成斜面或倾注平皿，待凝固后，置37培养1日，有污染者废弃，无菌者保存于冰箱备用。无菌脱纤维鲜血：以无菌手术采取健康动物（马、绵羊、牛用颈静脉采血、家兔用心脏采血）血液，加到盛有玻璃殊的三角瓶内，摇匀510分钟，置冰箱中备用。（三）用途 用于分离培养和保存菌种。肉汤培养基（pH7.4pH76） 100 ml琼脂 0.3g（二）制法 将琼脂加入肉汤培养基中加热溶化，校正pH至76，滤过后分接于试管内，以15磅高压灭菌2030分钟，作成高层，经无菌检查合格后，置冰箱中保存备用。（三）用途 菌种保存，观察细菌的运动性。（一）成分普通肉汤 100 ml 明胶 1215g（

4、冬天少用，夏天多用）（二）制法 将上述成分加热溶化，校正pH至76，趁热过滤，分装试管，用8磅15分钟灭菌或流通蒸气100，30分钟间歇，灭菌，经无菌检验合格的保存于冰箱内备用。蛋白胨 20g 猪胆盐（或牛、羊肠盐） 5g乳糖 10g 0.04溴甲酚紫水溶液 25ml蒸馏水 1000ml（二）制法 将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中，校正pH74，加入指示剂，分装每管10ml，并先放入一个小例立的管，115高压灭菌15分钟。注：双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。蛋白胨 20g 乳糖 10g0.04溴甲酚紫水溶液 25ml （二）制法：将蛋白胨及乳糖溶于水中，校正pH74，加入指示剂，按检验

5、要求分装30ml、10ml或3ml，并放入一个倒立的小管，115高压灭菌15分钟。1、双料乳糖发酵除蒸馏水外，其他成分加倍。2、30ml和10ml乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用，3ml乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用。蛋白胨 10g 磷酸二氢钾 15g磷酸氢二钠（Na2HPO412H2O） 9g氯化钠 5g （二）制法 按上述成分称好后，装入大烧瓶，121高压灭菌15分钟。用时无菌分装，每瓶225ml。本培养基供沙门氏菌前增菌用。1甲液：胰蛋白胨 5g 氯化钠 8g磷酸二氢钾 1.6g 2乙液：氯化镁（化学纯） 40g 蒸馏水 100ml3丙液: 0.4孔雀绿水溶液（二）制法分别按上述成分配好后

6、，121高压，灭菌15分钟备用。临用时取甲液90ml、乙液9ml、丙液0.9ml，以灭菌操作混合即可。本培养基亦称Rappaprt10（R10）增菌液。1基础培养基肠胨 5g 胆盐 1g碳酸钙 10g 硫代硫酸钠 30g蒸馏水 1000 ml2碘溶液碘 6g 碘化钾 5g 蒸馏水 20ml（二）制法 将基础培养基的各成分加入蒸馏水中，加热溶解，分装每瓶100ml。分装时应随时振摇，使其中的碳酸钙混匀。121高压灭菌15分钟临用时每100ml基础培养基中加入碘溶液2ml、01煌绿溶液1ml。蛋白胨 5g 乳糖 4g亚硒酸氢钠 4g 磷酸二氢钾 5.5 g磷酸二氢钾 4.5g L胱氨酸 0.01g

7、1L胱氨酸氢氨化钠溶液的配法：称取L胱氨酸01g（或DL胱氨酸02g），加1N氢氧化钠15ml，使溶解，再加入蒸馏水85ml即成。（二）制法 将除亚硒酸氢钠和L胱氨酸以外的各成份溶解于900ml蒸馏水中，加热煮沸，冷却后备用。另将亚硒酸氢钠溶解于100ml蒸馏水中，加热煮沸，冷却后以无菌操作与上液混合。再加入1L胱氨酸氢氧化钠溶液1ml。分装于灭菌瓶中，每瓶100ml，pH应为7001。胰蛋白胨 20g 葡萄糖 1g甘露醇 2g 柠檬酸钠 5g去氧胆酸钠 0.5g 磷酸氢二钾 4g 磷酸二氢钾 1.5g氯化钠 5g 蒸馏水 1000ml（二）制法 按上述成分配好，加热使溶解，校正pH7.0。分

8、装每瓶225ml，115高压灭菌15分钟。蛋白胨 10g 葡萄糖 5g 牛胆盐 20g磷酸氢二钠 8g 磷酸二氢钾 2g 煌绿 0.015g（二）制法 按上述成分配好，加热使溶解，校正pH72。分装每瓶30ml，115高压灭菌15分钟。1. 基础液:肘胨 12g 牛肉膏 3g 乳糖 12g蔗糖 12g 水杨苷 2g 胆盐 20g氯化钠 5g 琼脂 10g20g0.4溴 香酚蓝溶液 16ml2.Andrade指示剂: 酸性复红 0.5g 1N氢氧化钢溶液 16ml将复红溶解于蒸馏水中，加入氢氧化钠溶液，数小时后如复红褪色不全，再加氢氧化钠溶液12ml。 3. 甲液:硫代硫酸钠 34g 柠檬酸铁铵

9、 4g蒸馏水 100ml4. 乙液:去氧胆酸钠 10g 蒸馏水 100ml （二）制法 将前面八种成分溶解于400ml蒸馏水内作为基础液，将琼脂加入于600ml蒸馏水内，加热溶解。加入甲液20ml和乙液20ml于基础液内，校正pH7.5。再加入Andrade指示剂20ml，并与琼脂液合并，待冷至5055，倾注平板。此培养基不可高压灭菌 牛肉膏 5g 肘胨 5g 三号胆盐 3.5g琼脂 17g 蒸馏水 1000ml制法：将牛肉膏、肘胨和胆盐溶解于400ml蒸馏水中，将琼脂加入于600ml蒸馏水中，煮沸使其溶解，再将二液混合，121高压灭菌15分钟，保存备用。2完全培养基基础培养基 1000ml

10、乳糖 10g柠檬酸钠 8.5g 硫代硫酸钠 8.5g10柠檬酸铁溶液 10ml 1中性红溶液 2.5ml01煌绿溶液 0.22ml加热溶化培养基，按比例加入上述染料以外之各成分，充分混合均匀，校正pH70，加入中性红和煌绿溶液，倾注平板。制好的培养基宜当日使用，或保存于冰箱内于48小时内使用。煌绿溶液配好后应在10天以内使用。可以购用SS琼脂的干燥培养基。蛋白胨 17g 肘胨 3g猪胆盐（或牛、羊胆盐） 5g 氯化钠 5g琼脂 17g 乳糖 10g 001结晶紫水溶液 10ml05中性红水溶液 5ml蒸馏水 1000ml（二）制法1将蛋白胨、肘胨、胆盐和氯化钠溶解于400ml蒸馏水中，校正至p

11、H7.2。将琼脂加入于600ml蒸馏水中，加热溶解。将两液合并，分装于烧瓶内，121高灭菌15分钟备用。2临用时加热溶化琼脂，趁热加入乳糖。冷至5055时，加入结晶紫和中性红水溶液，摇匀后倾注平板。结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌。蛋白胨 10g 乳糖 10g 磷酸氢二钾 2g 琼脂 17g2伊红y溶液 20ml 065美蓝溶液 10ml（二）制法 将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正pH71，分装于烧瓶内，121高压灭菌15分钟备用。临用时加入乳糖并加热溶化琼脂，冷却至5055，加入伊红和美蓝溶液，摇匀，倾注平板。十八、三糖铁琼脂蛋白胨 20g 牛肉膏 5g乳糖 10g 蔗糖 10g葡萄糖 1g 硫酸亚铁铵Fe（NH4）2（SO4）26H2O 0.2g硫代硫酸钠 0.2g 酚红 0.025g琼脂 12g （二）制法 将除琼脂和酚红以外的各成份溶解于蒸馏水中，pH74。加入琼脂，加热煮沸，以融化琼脂。加入02酚红水溶液125ml，摇匀。分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底层。121高压灭菌15