常用培养基的配制Word文档下载推荐.docx

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二十一、克氏双糖铁琼脂（KI）

二十二、克氏双糖铁琼脂（换用方法）

二十三、动力硝酸盐增养基（A法）（SPS）

二十四、动力硝酸盐培养基（B法）

二十五、马丁氏肉汤

二十六、察氏培养基

二十七、马铃薯萄萄糖琼脂（PDA）

二十八、马铃薯琼脂

二十九、Elek氏培养基（毒索测定用）

三十、胰蛋白胨水

三十一、3.5％氯化钠三糖铁琼脂

三十二、牛肉（或中心）消化汤

三十三、0.1％蛋白胨水稀释剂

绞碎牛肉500g

蛋白胨10g

磷酸氢二钾2g

氯化钠5g

蒸馏水1000ml

（二）制法将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g加蒸馏水1000ml，混合后放冰箱过夜，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。

加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后校正pH7．4～7．6煮沸并过滤，分装烧瓶，121℃高压灭菌30分。

（三）用途一般细菌培养用。

肉水1000ml

蛋白胨10g

磷酸氢二钾1g

琼脂20～30g

（二）制法先将琼脂剪碎，用冷水洗净后加入肉汤中，划线补充水分，加热溶化。

校正pH7.4～7.6，用纱布夹棉花过滤至透明。

分装中试管或三角瓶。

高压灭菌121℃20分，灭菌后中试管摆成斜面。

（三）用途一般细菌的分离培养，纯培养，观察菌落性状及保存菌种用。

为特殊培养基的基础。

营养琼脂

脱纤维鲜血（马、绵羊、牛、家兔）5～8％。

（二）制法将灭菌的营养琼脂加热溶化，冷至45～50℃时，加入无菌脱纤维鲜血5～8％，分装试管，即摆成斜面或倾注平皿，待凝固后，置37℃培养1日，有污染者废弃，无菌者保存于冰箱备用。

无菌脱纤维鲜血：

以无菌手术采取健康动物（马、绵羊、牛用颈静脉采血、家兔用心脏采血）血液，加到盛有玻璃殊的三角瓶内，摇匀5～10分钟，置冰箱中备用。

（三）用途用于分离培养和保存菌种。

肉汤培养基（pH7.4～pH7．6）100ml

琼脂0.3g

（二）制法将琼脂加入肉汤培养基中加热溶化，校正pH至7．6，滤过后分接于试管内，以15磅高压灭菌20～30分钟，作成高层，经无菌检查合格后，置冰箱中保存备用。

（三）用途菌种保存，观察细菌的运动性。

（一）成分

普通肉汤100ml明胶12～15g（冬天少用，夏天多用）

（二）制法将上述成分加热溶化，校正pH至7．6，趁热过滤，分装试管，用8磅15分钟灭菌或流通蒸气100℃，30分钟间歇，灭菌，经无菌检验合格的保存于冰箱内备用。

蛋白胨20g

猪胆盐（或牛、羊肠盐）5g

乳糖10g

0.04％溴甲酚紫水溶液25ml

蒸馏水1000ml

（二）制法将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中，校正pH7．4，加入指示剂，分装每管10ml，并先放入一个小例立的管，115℃高压灭菌15分钟。

注：

双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。

蛋白胨20g

乳糖10g

0.04％溴甲酚紫水溶液25ml

（二）制法：

将蛋白胨及乳糖溶于水中，校正pH7．4，加入指示剂，按检验要求分装30ml、10ml或3ml，并放入一个倒立的小管，115℃高压灭菌15分钟。

1、双料乳糖发酵除蒸馏水外，其他成分加倍。

2、30ml和10ml乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用，3ml乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用。

蛋白胨10g

磷酸二氢钾1．5g

磷酸氢二钠（Na2HPO4·

12H2O）9g

氯化钠5g

（二）制法按上述成分称好后，装入大烧瓶，121℃高压灭菌15分钟。

用时无菌分装，每瓶225ml。

本培养基供沙门氏菌前增菌用。

1．甲液：

胰蛋白胨5g

氯化钠8g

磷酸二氢钾1.6g

2．乙液：

氯化镁（化学纯）40g

蒸馏水100ml

3．丙液:

0.4％孔雀绿水溶液

（二）制法分别按上述成分配好后，121℃高压，灭菌15分钟备用。

临用时取甲液90ml、乙液9ml、丙液0.9ml，以灭菌操作混合即可。

本培养基亦称Rappaprt10（R10）增菌液。

1．基础培养基

肠胨5g

胆盐1g

碳酸钙10g

硫代硫酸钠30g

蒸馏水1000ml

2．碘溶液

碘6g

碘化钾5g

蒸馏水20ml

（二）制法将基础培养基的各成分加入蒸馏水中，加热溶解，分装每瓶100ml。

分装时应随时振摇，使其中的碳酸钙混匀。

121℃高压灭菌15分钟临用时每100ml基础培养基中加入碘溶液2ml、0．1％煌绿溶液1ml。

蛋白胨5g

乳糖4g

亚硒酸氢钠4g

磷酸二氢钾5.5g

磷酸二氢钾4.5g

L—胱氨酸0.01g

1％L—胱氨酸—氢氨化钠溶液的配法：

称取L—胱氨酸0．1g（或DL—胱氨酸0．2g），加1N氢氧化钠1．5ml，使溶解，再加入蒸馏水8．5ml即成。

（二）制法将除亚硒酸氢钠和L—胱氨酸以外的各成份溶解于900ml蒸馏水中，加热煮沸，冷却后备用。

另将亚硒酸氢钠溶解于100ml蒸馏水中，加热煮沸，冷却后以无菌操作与上液混合。

再加入1％L—胱氨酸—氢氧化钠溶液1ml。

分装于灭菌瓶中，每瓶100ml，pH应为7．0±

0．1。

胰蛋白胨20g

葡萄糖1g

甘露醇2g

柠檬酸钠5g

去氧胆酸钠0.5g

磷酸氢二钾4g

磷酸二氢钾1.5g

氯化钠5g

蒸馏水1000ml

（二）制法按上述成分配好，加热使溶解，校正pH7.0。

分装每瓶225ml，115℃高压灭菌15分钟。

蛋白胨10g

葡萄糖5g

牛胆盐20g

磷酸氢二钠8g

磷酸二氢钾2g

煌绿0.015g

（二）制法按上述成分配好，加热使溶解，校正pH7．2。

分装每瓶30ml，115℃高压灭菌15分钟。

1.基础液:

肘胨12g

牛肉膏3g

乳糖12g

蔗糖12g

水杨苷2g

胆盐20g

氯化钠5g

琼脂10g～20g

0.4％溴香酚蓝溶液16ml

2.Andrade指示剂:

酸性复红0.5g

1N氢氧化钢溶液16ml

将复红溶解于蒸馏水中，加入氢氧化钠溶液，数小时后如复红褪色不全，再加氢氧化钠溶液1～2ml。

3.甲液:

硫代硫酸钠34g

柠檬酸铁铵4g

蒸馏水100ml

4.乙液:

去氧胆酸钠10g

蒸馏水100ml

（二）制法将前面八种成分溶解于400ml蒸馏水内作为基础液，将琼脂加入于600ml蒸馏水内，加热溶解。

加入甲液20ml和乙液20ml于基础液内，校正pH7.5。

再加入Andrade指示剂20ml，并与琼脂液合并，待冷至50～55℃，倾注平板。

此培养基不可高压灭菌

牛肉膏5g

肘胨5g

三号胆盐3.5g

琼脂17g

蒸馏水1000ml

制法：

将牛肉膏、肘胨和胆盐溶解于400ml蒸馏水中，将琼脂加入于600ml蒸馏水中，煮沸使其溶解，再将二液混合，121℃高压灭菌15分钟，保存备用。

2．完全培养基

基础培养基1000ml

乳糖10g

柠檬酸钠8.5g

硫代硫酸钠8.5g

10％柠檬酸铁溶液10ml

1％中性红溶液2.5ml

0．1％煌绿溶液0.22ml

加热溶化培养基，按比例加入上述染料以外之各成分，充分混合均匀，校正pH7．0，加入中性红和煌绿溶液，倾注平板。

①制好的培养基宜当日使用，或保存于冰箱内于48小时内使用。

②煌绿溶液配好后应在10天以内使用。

③可以购用SS琼脂的干燥培养基。

蛋白胨17g

肘胨3g

猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g

氯化钠5g

琼脂17g

乳糖10g

0．01％结晶紫水溶液10ml

0．5％中性红水溶液5ml

蒸馏水1000ml

（二）制法

1．将蛋白胨、肘胨、胆盐和氯化钠溶解于400ml蒸馏水中，校正至pH7.2。

将琼脂加入于600ml蒸馏水中，加热溶解。

将两液合并，分装于烧瓶内，121℃高灭菌15分钟备用。

2．临用时加热溶化琼脂，趁热加入乳糖。

冷至50～55℃时，加入结晶紫和中性红水溶液，摇匀后倾注平板。

结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌。

蛋白胨10g

乳糖10g

磷酸氢二钾2g

琼脂17g

2％伊红y溶液20ml

0．65％美蓝溶液10ml

（二）制法将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正pH7．1，分装于烧瓶内，121℃高压灭菌15分钟备用。

临用时加入乳糖并加热溶化琼脂，冷却至50～55℃，加入伊红和美蓝溶液，摇匀，倾注平板。

十八、三糖铁琼脂

蛋白胨20g

牛肉膏5g

乳糖10g

蔗糖10g

葡萄糖1g

硫酸亚铁铵[Fe（NH4）2（SO4）2·

6H2O]0.2g

硫代硫酸钠0.2g

酚红0.025g

琼脂12g

（二）制法将除琼脂和酚红以外的各成份溶解于蒸馏水中，pH7．4。

加入琼脂，加热煮沸，以融化琼脂。

加入0．2％酚红水溶液12．5ml，摇匀。

分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底层。

121℃高压灭菌15