注射液申报资料模板10.docx

1、注射液申报资料模板10 目 录10.1原料来源10.2含量限度10.3外观性状10.4鉴别10.5检查10.6含量测定10.7参考文献10.8资料图标中文名称：#注射液汉语拼音：xixinnao zhusheye英文名称：Asarone Injection10.1原料来源原料：生产单位-，批号：-。对照品：单位-，批号-，纯度：99.84 %。（药典收载最好从中检所或地方药检所购买）样品：单位-，连续三批。上市样品：单位-，批号-，规格-。10.2含量限度参照#注射液国家标准（WS-10001-（HD-0437）-2002），本品含#（ C12H16O3）应为标示量的93.0107.0%。三批

2、样品含量测定结果均在上述范围内。10.3外观性状指的是0月的外观形状检查#注射液三批样品，结果见表10-1。表10-1#注射液外观性状检查结果批 号性 状030901无色澄明液体030902无色澄明液体030903无色澄明液体上市样品淡黄色澄明液体 结论：本品为无色澄明液体，上市样品为淡黄色澄明液体。10.4鉴别要有方法依据（原理），空白（干扰）试验，方法来源（药典或其他），鉴别最好化学法和色谱法（紫外，液相，气相等）结合使用。#的结构中有共轭双键存在，紫外吸收强烈，有特征吸收峰。因此，可以用紫外分光光度法进行鉴别。分别取本品自制三批样品及上市样品适量，加乙醇制成每1ml中约含#8g的溶液，另

3、取空白溶剂同法配制；取上述溶液照紫外分光光度法（中国药典2000年版二部附录 A）测定。三批样品及上市样品的紫外吸收光谱见表10-2及附图10-110-5。表10-2#注射液紫外吸收光谱鉴别试验结果批 号max (nm)空白溶剂无吸收峰030901313.0，258.0030902313.0，258.0030903313.0，258.0上市样品313.0，257.5 结论：三批样品及上市样品均在313nm、258nm处有最大吸收；空白溶剂无吸收，不干扰样品。10.5检查1）一般项目，根据药典通则而定，因此一定要熟悉药典内容；2）还要根据项目自身的特点，制订检测项目，比如特定杂质；3）检查的内容

4、，要全面研究，不一定订入质量标准。比如片重差异，脆碎度，装量差异，不溶性微粒，渗透压等4）研究方法结合审评中心的一般指导原则进行，还要紧跟当时的发展和要求，特别注意审评中心的电子刊物。10.5.1 pH 分别取自制三批样品及上市样品适量，照中国药典2000年版二部附录VI H测定溶液的pH值，结果如表10-3：表10-3 样品pH值测定结果批 号pH值0309016.620309026.030309036.16上市样品5.22结论：本品放大三批样品pH值均在5.07.0范围内。10.5.2溶液颜色与澄清度（与澄明度或现在可见异物的区分）分别取自制三批样品及上市样品10ml，照中国药典2000年

5、版二部附录IX A项下第一法检查溶液颜色；分别取自制三批样品及上市样品10ml，照中国药典2000年版二部附录IX B项下检查澄清度，结果见表10-4。表10-4溶液颜色与澄清度检查结果批号颜色澄清度030901无色澄清030902无色澄清030903无色澄清上市样品淡黄色澄清10.5.3装量 取本品，照中国药典2000年版二部附录I B项下检查装量，结果如表10-5：表10-5三批样品装量检查结果批号装 量(ml)12345平均值0309012.122.182.052.212.162.140309022.092.192.212.202.152.170309032.142.172.092.22

6、2.162.16 结果三批样品的装量均符合规定。10.5.4澄明度 取本品，照澄明度检查细则和判断标准的规定检查，结果见表10-6。表10-6澄明度检查结果表批 号澄 明 度030901合格030902合格030903合格10.5.5无菌（必须进行方法学研究）取本品，照中国药典2000年版二部附录XI H项下直接接种法检查，结果见表10-7。表10-7无菌检查结果表批 号无菌030901符合要求030902符合要求030903符合要求 10.5.6热原（常用内毒素的方法替代，如果采用内毒素方法，必须进行方法学研究；如果内毒素有干扰，可以用热原的方法） 取本品，按4mg/kg的剂量，照中国药典2

7、000年版二部附录XI D项下检查，结果见表10-8。 表10-8热原检查结果表批 号热原030901符合要求030902符合要求030903符合要求 10.5.7有关物质（方法学重点）仿制药有关物质研究思路：1， 因为是仿制药，所以必须有仿制的概念，但要求是仿产品，不是仿标准。但产品需要好的标准去体现。2， 方法来源首先要参照已上市样品的转正标准，进口复核标准，国外药典标准，参考文献包括专利等。标准就高不就低。3， 注意选择色谱柱，测定波长，供试品溶剂等；色谱柱的选择，常选C18,C8,苯基柱，氰基柱，离子交换柱，手性柱等。主要是根据原料的结构特点。波长的选择，应该参照杂质，不应该只对原料进

8、行扫描，当杂质是未知杂质时，可以采用DAD检测器进行扫描确定。当然原料必须有吸收峰。注意供试品溶剂的选择，最好选择流动相（原料常用），制剂有时不采用流动相，因为制剂的特殊性和辅料的干扰，不同的溶剂对辅料的选择性不同。另外供试品溶液的稳定性也很重要。4， 首先辅料不干扰已有杂质、降解产物和主药的测定，明确的辅料可以扣除。5， 分析原料的性质，主要是溶解性，极性，稳定性等。为色谱条件提供依据。6， 通过破坏性试验，确定可能的降解途径，主要降解产物的位置，与主药的分离度。7， 确立方法原则，辅料不干扰杂质测定；杂质尤其是相邻杂质与主药分离度好；杂质之间尤其是与已知杂质分离度好；分析时间不超过1小时。

9、8， 如果杂质的极性相差太大，表现为出峰时间差异很大时，可以考虑更换色谱柱，采用梯度的方法，或者对主要杂质分开测定等方式。杂质出峰太晚，峰展宽严重，检测限会变大，对已知杂质影响较大。9， 方法选择次序：杂质对照品法最准确，自身对照法（1%，0.5%最常用，杂质的校正因子在0.9-1.1之间），归一化法；当杂质对照品不易得到时，可采用加校正因子的自身对照法。当都是未知杂质时，首选自身对照法，现在标准中基本不采用归一化方法。10， 通过影响因素试验，确定外界的主要影响因素，主要的讲解产物等11， 通过长期和加速稳定性试验，全面考察有关物质的方法，确定已知和未知杂质的限度。 #注射液国家质量标准（W

10、S-10001-(HD-0437)-2002）项下未列入有关物质检查项，本品参照#原料质量标准项下的方法进行了有关物质检查。10.5.7.1方法10.5.7.1.1仪器与试剂岛津LC-10ATvp泵岛津SPD-10Avp检测器TL-9900色谱数据工作站UV7520紫外分光光度计甲醇（色谱纯，天津市西华特种试剂厂）双蒸水，自制10.5.7.1.2测定法精密量取含量测定项下溶液3ml，置10ml棕色量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液1ml，置100ml棕色量瓶中，加流动相稀释至刻度，作为对照溶液；取-#与#混合物适量，加流动相配成总浓度约50g/ml的溶液，作为

11、溶液（1）。精密量取对照溶液10l注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主峰的峰高约为满量程的10%20%；精密量取溶液（1）10l注入液相色谱仪，记录色谱图，-#与#的分离度应符合规定。再精密量取对照溶液和供试品溶液各10l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的4倍。供试品溶液的色谱图中如显杂质峰，与-#相对应的杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积的1.0倍（1.0%），各杂质峰面积总和不得大于对照溶液的主峰面积的3倍（3.0%）。10.5.7.2方法的建立10.5.7.2.1有关物质检查色谱柱Apollo C18柱，250mm4.6mm，5m。10.5.7.2.2有关物质检查流动相、

12、溶剂及波长的选择注意供试品溶剂的选择，最好选择流动相（原料常用），制剂有时不采用流动相，因为制剂的特殊性和辅料的干扰，不同的溶剂对辅料的选择性不同。另外供试品溶液的稳定性也很重要。参照#原料的质量标准，以甲醇-水（70：30）为流动相；用流动相作为配制样品的溶剂；检测波长为230nm。10.5.7.2.3辅料干扰性试验 取空白辅料溶液3ml，置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取10l，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果见附图10-6。空白溶剂在3分钟以前有2个很小的吸收峰，不干扰测定。10.5.7.3系统适用性试验10.5.7.3.1破坏性试验1）酸、碱、氧化、高温、光照等试验，

13、破坏的程度参照指导原则进行，一般以破坏10%左右为好，破坏样品要经过预处理，才能进样，保护色谱柱；2）注意辅料的干扰，一般辅料是比较稳定的，但有时也干扰杂质测定。要想办法去除辅料干扰。取本品5份，每份各3ml，置10ml试管中，分别加1.0mol/L盐酸1ml，1.0mol/L氢氧化钠溶液1ml，30%双氧水1ml，放置2天，1份在4500lx500lx强光下放置2天，另一份在105恒温箱中放置2小时，取上述样品，加流动相至10ml（酸碱破坏的样品分别用1.0mol/L氢氧化钠溶液和1.0mol/L盐酸调至中性后配制），摇匀，滤过，作为供试品溶液。取上述供试品溶液各10l，分别注入液相色谱仪，

14、记录色谱图，结果见表10-9及附图10-710-11。表10-9 破坏试验结果表名称保留时间（min）相对主峰保留时间酸破坏#11.863/酸破坏有关物质12.3070.19 酸破坏有关物质22.7550.23 酸破坏有关物质33.0270.26 酸破坏有关物质43.220 0.27 酸破坏有关物质53.8870.33 酸破坏有关物质64.2030.35 酸破坏有关物质74.5030.38 酸破坏有关物质84.9420.42 酸破坏有关物质95.1480.43 酸破坏有关物质105.4030.46 酸破坏有关物质116.280 0.53 酸破坏有关物质126.6220.56 酸破坏有关物质13

15、6.8180.57 酸破坏有关物质147.1170.60 酸破坏有关物质1510.1980.86 酸破坏有关物质1610.8430.91 酸破坏有关物质1725.1982.12 酸破坏有关物质1840.1133.38 碱破坏#11.818/碱破坏有关物质12.290 0.19 碱破坏有关物质22.4450.21 碱破坏有关物质33.9020.33 碱破坏有关物质44.1830.35 氧化破坏#11.725/氧化破坏有关物质11.6170.14 氧化破坏有关物质22.5170.21 氧化破坏有关物质33.0280.26 氧化破坏有关物质43.8480.33 氧化破坏有关物质54.1470.35

16、氧化破坏有关物质64.8880.42 氧化破坏有关物质75.0880.43 氧化破坏有关物质810.0690.86 高温破坏#11.983/高温破坏有关物质12.4250.20 高温破坏有关物质23.0420.25 高温破坏有关物质33.8200.32 高温破坏有关物质44.1650.35 高温破坏有关物质54.6070.38 高温破坏有关物质64.8980.41 高温破坏有关物质75.1100.43 高温破坏有关物质810.2470.86 光照破坏#11.737/光照破坏有关物质12.4700.21 光照破坏有关物质22.7650.24 光照破坏有关物质33.0800.26 光照破坏有关物质

17、43.3770.29 光照破坏有关物质53.8380.33 光照破坏有关物质64.1680.36 光照破坏有关物质74.6150.39 光照破坏有关物质84.9100.42 光照破坏有关物质95.1120.44 光照破坏有关物质1010.0870.86 光照破坏有关物质1139.5123.37 结论：在上述色谱条件下，各强制降解产物均不干扰#主峰的测定，符合系统适用性试验要求；各强制降解产物的保留时间均在#保留时间的4倍内。本品在酸性条件和强光照射下，降解产物较多，尤其在强光照射下，所以溶液应避光放置。10.5.7.3.2混合样品系统适用性试验（与特定杂质的分离度试验） 取#及-#的混合物适量

18、，以流动相配成总浓度约50g/ml的溶液，精密量取溶液10l注入液相色谱仪，记录色谱图，结果见附图10-12及表10-10。表10-10混合样品系统适用性试验结果名称保留时间（min）相对保留 时间分离度理论板数拖尾因子-#10.1100.868-159641.034#11.64517.612162521.02110.5.7.3.3最小检测限（定量限）取#适量，经逐级稀释，配制成系列浓度的溶液，精密量取适量注入液相色谱仪，当峰高为噪音信号的3倍时，所进的样品量即为检测限。结果见附图10-13，#的检测限为3.1ng总结：根据系统适用性试验的结果，-#、破坏试验强制降解产物均与主峰的分离良好，出

19、峰时间均在主峰保留时间的4倍以内。主峰理论板数大于3000，拖尾因子在0.951.05之间。主药的检测限在纳克级。说明上述色谱条件适合#有关物质检查。因此将有关物质检查的色谱条件定为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（70:30）为流动相。检测波长230nm。理论板数按#峰计算应不低于3000，#与-#的分离度应不小于2.0。供试品溶液的稳定性考察，可以采用归一化法进行，针对不同的杂质列表比对。10.5.7.4测定结果测定结果，除特定已知杂质外，要记录未知总杂质，单一未知最大杂质。另外，对已知杂质进行定量测定要做方法学研究。取本品，照有关物质测定法项下的方法检查，结果见表10-11及

20、附图10-1410-20。表10-11#有关物质检查结果表批号-#（%）总杂质（%）0309010.020.290309020.020.270309030.030.28上市样品0.0920.68结论：三批样品有关物质检查-#均小于1.0%，总杂质均小于3.0%。且各杂质远低于上市样品。10.6含量测定（如果用液相的方法测定含量，要做两个平行样，每个样进两针，对照最好两个，至少进两针）10.6.1方法参照#注射液国家质量标准（WS-10001-(HD-0437)-2002）项下的方法，采用分光光度法测定本品的含量。考虑到本品溶液对光不稳定，采用棕色量瓶测定。10.6.1.1仪器与试剂UV7520

21、紫外分光光度计 乙醇 AR 北京市化学试剂公司10.6.1.2测定法 取本品5支，混匀，精密量取2ml，置50ml棕色量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另精密称取#20mg，置50ml棕色量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置25ml棕色量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。分别取上述溶液，照分光光度法（中国药典2000年版二部附录IV A），在313nm的波长处测定吸收度，按外标法计算即得。10.6.2方法的建立10.6.2.1波长选择 取#适量，加乙醇制成适宜浓度的溶液，照紫外分光光度法

22、（中国药典2000年版二部附录 A）于200nm400nm波长范围内进行紫外光谱扫描，扫描结果附图10-21，#在313nm、258nm、212nm波长处有最大吸收。精密量取空白辅料溶液2ml，置50ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，于200nm400nm波长范围内进行紫外光谱扫描，扫描结果附图10-22。 结论：参照#注射液国家质量标准（WS-10001-(HD-0437)-2002）项下，选择313nm为含量测定波长，空白辅料在此波长处无吸收，不影响测定。10.6.2.2含量测定线性范围取#20mg，精密称定，置1

23、00ml棕色量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1、2、4、5、6ml溶液，分别置50ml棕色量瓶中，加流动相稀释至刻度，作为供试品溶液。取上述溶液照紫外分光光度法（中国药典2000年版二部附录 A）于313nm波长处测定吸收度（A），以吸收度（A）对溶液浓度（C）作回归，即得。 表10-12 含量测定线性范围试验结果表编号C(g/ml)A14.00.14728.00.290316.00.582420.00.723524.00.872结论：以吸收度对浓度计算，线性方程为：C= 27.794A -0.0013，相关系数r=1.000，#在4.0g/ml24.0g/ml范围内，线性关系良

24、好。10.6.2.3 回收率试验 分别称取#16mg、20mg、24mg，精密称定，置50ml棕色量瓶中，分别加入空白辅料溶液4ml、5ml、6ml，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置25ml棕色量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另精密称取#20mg，置50ml棕色量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置25ml棕色量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。分别取上述溶液，照分光光度法（中国药典2000年版二部附录IV A），在313nm的波长处测定吸收度，按外标法计算即得。表10-13 #注射液含量测定回收率结果浓度加入量(mg)测得量(mg

25、)回收率(%)平均值（）RSD(%)低浓度16.216.3100.50.3316.416.499.87100.315.916.0100.4中浓度20.720.8100.30.3520.520.599.9199.9120.420.399.56高浓度23.823.9100.30.2323.723.799.84100.124.224.2100.2结论：方法回收率在98.0-102.0%之间，符合含量测定要求。10.6.2.4含量测定精密度试验（现在要求中间精密度试验，同一实验室，不同仪器，不同人员进行）取本品10支，混匀，精密量取2ml，置50ml棕色量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，

26、置50ml棕色量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，平行操作6份；另精密称取#20mg，置50ml棕色量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置25ml棕色量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。分别取上述溶液，照分光光度法（中国药典2000年版二部附录IV A），在313nm的波长处测定吸收度，按外标法以A计算含量。表10-14含量测定精密度试验结果表序号A含量(%)平均含量(%)RSD (%)10.578 100.1 99.77 0.20 20.57699.83 30.57699.83 40.57499.48 50.576 99.74 60.57599.65

27、 结论：6份样品的相对标准偏差小于2%，该法精密度良好。10.6.2.5含量测定溶液稳定性试验（如果与有关物质的溶剂相同，可参照，不必重做）取精密度试验项下的1号样品，室温放置8小时，于0、2、4、8小时取样，在313nm的波长处测定吸收度，按外标法以A计算含量。表10-15含量测定溶液稳定性试验结果表放置时间(h)含量(%)平均含量(%)RSD(%)0100.199.610.47 299.74499.65898.96结论：#溶液在8小时内测定含量的相对标准偏差小于2%，说明该溶液在8小时内稳定性良好。10.6.3测定结果取本品三批样品，照测定法测定，结果见表10-16。表10-16放大三批样

28、品含量测定结果表批 号含量(%)03090199.9303090299.59030903100.2结论：三批样品的含量均在93.0107.0%。用紫外分光光度法测定#注射液的含量，准确度高，重现性和精密度好，快捷方便。10号资料，整个资料，主要在研究，不必谈限度和是否定入标准的问题，限度和标准的问题，主要放在11号资料质量标准的起草说明中进行。附图原则，鉴别试验，紫外扫描，溶出曲线，杂质方法学及其研究结果。含量可附代表性图谱。10.7参考文献1#注射液质量标准（WS-10001-(HD-0437)-2002）,化学药地方标准上升国家标准（第五册）。2 #原料的质量标准。10.8资料图标附图10-1#注射液(8mg)鉴别试验空白辅料紫外扫描图谱附图10-2#注射液(8mg)鉴别试验紫外扫描图谱（批号：030901）附图10-3#注射液(8mg)鉴别试验紫外扫描图谱（批号：030902）附图10-4#注射液(8mg)鉴别试验紫外扫描图谱（批号：030903）附图10-5