职业性慢性铅中毒诊断标准及处理原则GB 115041989 职业性慢性铅中毒是.docx

1、职业性慢性铅中毒诊断标准及处理原则GB 115041989 职业性慢性铅中毒是职业性慢性铅中毒诊断标准及处理原则GB 115041989职业性慢性铅中毒是生产中长期接触铅烟或铅尘所致的全身性疾病。其早期表现为卟啉代谢障碍、神经衰弱综合征和消化系统症状，中毒较重时出现贫血、腹绞痛，严重时出现铅性麻痹或中毒性脑病。1 主题内容与适用范围本标准规定了职业性慢性铅中毒诊断标准及处理原则。本标准适用于生产中接触铅烟或铅尘而引起的慢性中毒。2 诊断原则应根据确切的职业史和以神经、消化、血液系统损害为主的临床表现及有关实验室检查，参考作业环境调查，进行综合分析后，方可诊断。3 诊断及分级标准31 铅吸收有密

2、切铅接触史，尚无铅中毒的临床表现，尿铅039molL（008mgL）或048mol24h（01mg24h）；或血铅241molL（50gdL）；或诊断性驱铅试验后尿铅145molL（03mgL）而386molL（08mgL）者。32 轻度中毒321 常有轻度神经衰弱综合征，可伴有腹胀、便秘等症状，尿铅或血铅量增高。具有下列一项表现者，可诊断为轻度中毒：a尿氨基乙酰丙酸305molL（4mgL）或458mol24h（6mg24h）；b尿粪卟啉半定量（）；c血红细胞游离原卟啉（FEP）231molL（130gdL），或红细胞锌原卟啉（ZPP）208molL（130gdL）。322 经诊断性驱铅试验

3、，尿铅386molL（08mgL）或482mol24h（1mg24h）者。33 中度中毒在轻度中毒的基础上，具有下列一项表现者，可诊断为中度中毒：a腹绞痛；b贫血；c中毒性周围神经病。34 重度中毒具有下列一项表现者，可诊断为重度中毒：a铅麻痹；b铅脑病。4 治疗原则可用金属络合剂如依地酸二钠钙、二巯基丁二酸钠等驱铅治疗，同时辅以对症疗法。铅吸收者是否需予驱铅治疗，可根据具体情况而定。5 劳动能力鉴定51 铅吸收可继续原工作，36月复查一次。52 轻度中毒驱铅治疗后可恢复工作，一般不必调离铅作业。53 中度中毒驱铅治疗后原则上调离铅作业。54 重度中毒必须调离铅作业，并根据病情给予治疗和休息。

4、6 健康检查的要求铅作业工人应作就业前体检，并每年定期体检一次。体检时需作内科检查、尿铅或血铅、尿粪卟啉或尿氨基乙酰丙酸、红细胞游离原卟啉或锌原卟啉测定。7 职业禁忌证a明显贫血；b神经系统器质性疾病；c明显的肝、肾疾病；d心血管器质性疾病；e妊娠和哺乳期妇女。附录 A尿中铅的测定双硫腙比色法（补充件）A1 原理在酸性介质中，利用硫酸、硝酸、高氯酸的氧化作用，破坏尿中的有机质，使铅呈离子态，然后在pH85110与双硫腙反应，生成红色络合物，经氯仿萃取后比色定量。A2 仪器分光光度计。A3 试剂a硫酸（优级纯）；b硝酸（优级纯）；c高氯酸（优级纯）；d1110(上标始)3(上标终)molL（00

5、4）酚红指示剂：称取01g酚红放在小乳钵中，加2滴无铅水研磨溶解，再加无铅水至250mL；e氯仿：每100mL氯仿中加1mL乙醇；f缓冲液：称取100g柠檬酸溶于70mL无铅水中，置冷水浴中，分次加入100mL氨水，边加边振摇，冷却后加入3g无水亚硫酸钠，溶解后加氨水至250mL，将此液移至1L分液漏斗中，用透光度60双硫腙氯仿溶液萃取铅，至双硫腙氯仿液保持绿色不变为止。再用适量氯仿洗去残留的双硫腙至氯仿层呈无色透明为止，弃去氯仿层，加500mL氨水，于冰箱内保存；g15molL（10）氰化钾溶液：取10g氰化钾（优级纯），溶于无铅水中，并稀释至100mL；h双硫腙氯仿溶液。双硫腙的提纯：溶解

6、005g双硫腙于50mL氯仿中，如有不溶物可过滤，然后移入250mL分液漏斗中，用1100氨水萃取23次（每次约25mL），此时双硫腙转入氨水层中，合并氨水溶液，过滤后放至分液漏斗中，用盐酸酸化，使双硫踪析出，用氯仿萃取23次，每次约20mL，此时双硫腙转入氯仿层，将此浓双硫腙氯仿溶液用重蒸馏水洗涤氯仿提取液2次，然后放在棕色瓶内，于冰箱中保存。取提纯的双硫踪用氯仿稀释至透光度为60（于波长510nm下测量）；i双硫腙洗除液：取10mL15molL（10）氰化钾溶液与30mL氨水混合，用无铅水稀释至500mL；j铅标准溶液：称取15984g硝酸铅（105烘2h），用少量水溶解，移入1L量瓶中，

7、加10mL硝酸，用无铅水稀释至刻度，此溶液浓度为4810(上标始)3(上标终)molL（10mgmL）的铅，作为贮备液，将此液用199硝酸稀释100倍，成为4810(上标始)5(上标终)molL（10gmL）的铅溶液，作应用液。A4 尿样分析步骤A41 取50mL尿样于锥形烧瓶中，同时另取2个锥形烧瓶，各加50mL无铅水，作为空白对照，各加3mL硫酸、5mL硝酸，加热消化至炭化，离火稍冷。A42 加05mL高氯酸，摇匀，加热使瓶内产生大量白色烟雾，继续加热使白色烟雾升至瓶口且溶液为无色透明，取下放冷。A43 混色法：用40mL无铅水分次溶解内容物，并转移至125mL分液漏斗中，加2滴酚红指示剂

8、，摇匀。加缓冲液至溶液呈红色，再加1mL缓冲液，冷却后，加1mL15molL（10）氰化钾溶液，摇匀，加10mL60透光度的双硫踪氯仿溶液，振摇100次，待分层后，将氯仿层用脱脂棉过滤，于波长510nm下以氯仿为参比液比色。A44 单色法：向混色法所得的双硫腙铅氯仿萃取液中加入30mL双硫腙洗涤液，振摇50次，分层后吸去水层，再加20mL双硫腙洗涤液，振摇30次，分层后，将氯仿层用脱脂棉过滤。于波长510nm下以氯仿为参比液比色。A5 标准曲线的绘制A51 取0、01、03、05、07、09mL铅标准应用液（相当于0、1、3、5、7、9g铅）分别置于150mL锥形烧瓶中，各加50mL无铅水。A

9、52 各加3mL硫酸、5mL硝酸，加热消化至水分蒸尽，离火稍冷。A53 按A42A44操作。A54 以吸光度为纵坐标，铅量为横坐标，绘制成标准曲线。A6 计算根据测得样品吸光度减去试剂空白吸光度，查标准曲线，得样品中铅的含量，按式（A1）计算：A7 说明a本法的检测下限为00006mg；b本法的回收率为98100；c本法的精密度（以变异系数表示）为3092（19gPb范围）；d应取新鲜尿样进行测定，如样品需要放置，则按50mL尿加30mL硫酸保存；e所用试剂可根据空白试验结果，决定是否需要提纯，一般试剂空白的吸光度不超过002；f玻璃仪器使用前需用079molL（5）硝酸浸泡、洗涤，再用无铅水

10、冲洗；g双硫腙易被氧化，日光、高温、一些金属离子及氧化剂均能氧化双硫腙为二苯硫代偕二腙，因此在提纯、保存、分析各个环节应注意保持双硫腙的纯度和稳定性；h酚红指示剂在酸性溶液中呈橙红色，中性溶液中呈黄色，碱溶液中（pH85及以上时）才呈红色。附录 B血中铅的测定无焰原子吸收光谱法（补充件）B1 原理血液经稀硫酸处理后，随即导入石墨炉原子化器原子化，并根据其特征谱线的吸收强度定量。B2 仪器a配有石墨炉的原子吸收分光光度计；b铅空心阴极灯；c石墨管原子化器；d微量取样器；e具塞聚四氟乙烯（塑料）样品杯（管）；f旋涡混匀器。B3 试剂a铅标准液：精确称取光谱纯金属铅10000g溶于少量浓硝酸后，移至

11、1L容量瓶内，以超纯水稀释至1L，此液浓度为4810(上标始)3(上标终)molL（10mgmL），测试时将此液用0024molL（015）硝酸逐级稀释成4810(上标始)7(上标终)molL（01gmL）和9710(上标始)7(上标终)molL（02gmL）的铅标准应用液；b硝酸（MOS级）；c实验用水：由纯水器制成的超纯水（18Mcm）或将重蒸水经石英亚沸蒸馏提纯；d肝素。B4 血样分析步骤B41 取20L血样，置于盛有018mL0024molL（015）硝酸的具塞样品杯中，充分摇匀使溶血。B42 试剂空白，以0024molL（015）硝酸作为试剂空白。B43 自动进样（手动进样）10L注

12、入石墨管中进行原子化，测其原子吸光度，测得样品的吸光度减去试剂空白吸光度，查标准曲线，得样品中铅的含量，再乘以稀释倍数。B5 标准曲线的绘制取新鲜人血（肝素抗凝），用旋涡器充分混匀，在6个具盖样品杯中，分别加入铅标准溶液4810(上标始)7(上标终)molL（01gmL）000、002、005、010、015mL和铅标准溶液9710(上标始)7(上标终)molL（02gmL）01mL，用0024molL（015）硝酸使各管体积为018mL，加入正常人血20L，此时各管相应浓度为04810(上标始)7(上标终)molL（0100gL），加盖剧烈振摇，使其溶血，按上述分析步骤进行测定，以不同浓度所

13、测得的吸光度为纵坐标，铅浓度为横坐标，绘成标准曲线。B6 说明a本法的检测下限为20810(上标始)9(上标终)molL（043gL）稀释血样； b本法的回收率为98104；c本法的精密度（以变异系数表示）为1742（002005gPb范围）；d使用的玻璃、塑料器皿及注射器等洗净后，必须在1：1硝酸中浸泡过夜，用重蒸水淋洗干净后，最后用超纯水至少淋洗三次，烘干包装备用；e采血房间应洁净，防止环境中的铅污染血样；f采血时，用048molL（3）硝酸棉球、超纯水棉球、酒精棉球依次擦净被检者取血部位的皮肤；g仪器工作条件（PE3030型原子吸收分光光度计，HGA500型石墨炉，AS40自动进样器）：

14、波 长 283.3nm 干 燥 100 50s 10s灯电流 8mA 灰 化 500 30s 10s狭 缝 0.7nm 原子化 2200 0s 4s石墨容器 热解涂层石墨管 净 化 2600 1s 4s能 量 59 载气流量为300mLmin原子化时停气 附录 C血中原卟啉的测定荧光光度法（补充件）C1 原理原卟啉（FEP）为一荧光物质。血样经生理盐水稀释后，用乙酸乙酯和冰乙酸混和液破坏血中红细胞，使原卟啉溶解于混和液中，再以稀盐酸萃取原卟啉，在激发光波长403nm时，发射光在605nm波长处显示其荧光谱峰，根据荧光强度定量。C2 仪器a离心机：801型；b旋涡混合器：XW80型；c电磁低压吸

15、引器：CX-1型；d具塞试管；e荧光分光光度计或930型荧光光度计。C3 试剂a肝素抗凝剂：取一支12500u肝素抗凝剂，用0154molL（09）氯化钠溶液稀释至25mL（500umL）；b50gL（5）硅藻土生理盐水悬浮液：称取5g硅藻土（kieslgubr 化学纯），以生理盐水配制成100mL；c41乙酸乙酯冰乙酸混和液；d05molL盐酸；e原卟啉标准贮备液：用十万分之一天平精确称取000100g原卟啉加入125mL盐酸溶解，移入100mL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，此溶液浓度为18molL（100gmL）原卟啉；f原卟啉标准应用液：取050mL贮备液置于50mL容量瓶中，用41乙

16、酸乙酯冰乙酸混合液稀释至刻度，此溶液为018molL（01gmL）的原卟啉。C4 血样分析步骤C41 取20L耳垂或手指血置于盛有01mL肝素抗凝剂溶液的小试管中，加入2滴硅藻土生理盐水悬浮液，混匀，加入40mL乙酸乙酯冰乙酸混和液。C42 另取2个小试管，一为空白管，一为标准管，各加2滴硅藻土生理盐水悬浮液；在空白管中加入40mL乙酸乙酯冰乙酸混合液，标准管中加入05mL原卟啉标准应用液（含原卟啉005g）再加35mL乙酸乙酯冰乙酸混和液。C43 将溶液混匀后，离心（3000rmin）15min，将上清液分别移入25mL具塞试管中，各加40mL 05molL盐酸，用旋涡混合器旋涡2min或手

17、振摇5min，待分层后，弃去上层有机溶剂。C44 将下层稀盐酸溶液在30min内，分别用比色皿，在激发光波长403nm（狭缝10nm）、发射波长605nm（狭缝5nm）处，灵敏度3+0，测其荧光强度。C5 标准曲线的绘制取6支离心管，向各管中加入2滴硅藻土生理盐水混悬液，然后配制表C1中标准系列：表C1将溶液混匀后，按上述操作步骤C43C44进行操作，以峰高（扣除空白的峰高）为纵坐标，原叶啉量为横坐标，在坐标纸上绘制标准曲线。注：如用930型荧光光度计测定，则应选用第一滤色片波长420nm（581G型光电比色计上42号滤色片）；第二滤色片波长550nm；机械调零；调节100开关至最大；灵敏度开

18、关至5档时，测定荧光强度。C6 计算在标准曲线的线性范围内，根据样品测得的峰高（cm或格数）按式（C1）计算：血中原卟啉（FEP）的含量molL（g100mL血）C7 说明C71 本法的检测下限为0005g。C72 本法的回收率为90100。C73 本法的精密度（以变异系数表示）为：a023106（00101g）荧光分光光度计。b024833（00101g）930型荧光计。C74 样品收集和保存的要求：a采血时，血样中要加入肝素抗凝剂，防止血液凝固；b血样要冷藏保存，一般可保存3天。C75 操作中的有关注意事项：a操作中使用的玻璃器皿，要用清洁液浸泡，不能用肥皂粉清洗；b各种试剂一定要用去离子

19、水配制。附录 D血中锌原卟啉的测定仪器法（补充件）D1 原理锌原卟啉（ZPP）具有特征性的荧光光谱，在激发光波长420nm时，发射光波长为594nm，用表面荧光法测量其荧光强度进行定量。D2 仪器a血液荧光计（AVIV Hematofluorometer）；b盖玻片24mm24mm；c血红蛋白吸管。D3 血样分析步骤将ZPP标准片置于仪器的测量架上进行测定，如显示数据与标准片一致，说明仪器工作正常。换上清洁的盖玻片，先测空白时的读数，然后加一滴血（约1020L），使铺满测量区测样品读数。 D4 计算如仪器测定值用ggHb表示，则需同时测定血红蛋白，并用式（D1）、（D2）计算：ZPPggHb样

20、品读数空白读数（D1）ZPPmolL（gdL）ZPPggHbHbgL（g）（D2）式中：HbgL用氰化高铁血红蛋白法测定的1000mL血中血红蛋白的克数。D5 注意事项a所用盖玻片必须很清洁，如手指触及测量区即能引起结果偏高；b血液标本如未铺满测量区，或内有气泡，都能影响测定结果；c缺铁性贫血患者锌原卟啉亦可能增高；d本仪器宜在室温1825下操作。附录 E尿中氨基乙酰丙酸的测定乙酰乙酯萃取比色法（补充件）E1 原理在pH为46及温度100的条件下，尿中氨基乙酰丙酸（ALA）与乙酰乙酸乙酯缩合生成吡咯化合物。此化合物可被乙酸乙酯萃取，并与改良显色剂（对二甲氨基苯甲醛）作用生成红色化合物，根据颜色

21、深浅进行比色定量。E2 仪器a具塞比色管（10mL），具塞离心管（10mL）；b离心机；c水浴锅；d分光光度计。E3 试剂a乙酰乙酸乙酯；b乙酸乙酯；c乙酸盐缓冲液（pH46）：于700mL水中加入57mL冰乙酸、82g无水乙酸钠，溶解后加水1000mL；d对二甲氨基苯甲醛改良显色剂：于50mL量筒中，依次加入30mL冰乙酸、1g对二甲氨基苯甲醛、5mL116molL（70）高氯酸（原装）、5mL水，溶解后，用冰乙酸稀释至50mL，混匀，转入试剂瓶中，贮于冰箱中；eALA标准液贮备液：准确称取氨基乙酰丙酸盐酸盐（-ALAHCl）128mg，用水溶解，并稀释至100mL。此液浓度为7628mol

22、L（1mL100g）ALA，贮于冰箱中可保存两个月以上。应用液：取贮备液10mL于100mL容量瓶中，并稀释至刻度，此液浓度约等于7628molL（1mL10g）ALA。E4 尿样分析步骤E41 分别量取2mL尿样于两支10mL具塞比色管内，各加入2mL乙酸缓冲液，混匀，其一为样品管，另一为尿样空白管。向样品管中加入04mL乙酰乙酸乙酯，向尿样空白管中补加04mL乙酸缓冲液，分别混匀，同时置沸水浴中加热10min，取出冷却至室温。E42 以下步骤按标准曲线的绘制E53E55进行。E5 标准曲线的绘制E51 取10mL具塞离心管6支，按表E1配制标准色列：表E1E52 各加2mL乙酸缓冲液，04

23、mL乙酰乙酸乙酯，混匀，于沸水浴中加热10min，取出冷至室温。E53 各加4mL乙酸乙酯，加塞振摇50次，离心5min，取出静置分层。E54 各取2mL乙酸乙酯萃取液，于另外6支10mL具塞比色管中，各加改良显色剂2mL，加塞振摇，静置10min。E55 用比色皿在波长553nm（或绿色滤光片）下，以乙酸乙酯作参比，测得各标准管吸光度。E56 以吸光度（扣除空白吸光度）为纵坐标，ALA量为横坐标，在坐标纸上绘制标准曲线。E6 计算样品管吸光度减去尿空白管吸光度，查标准曲线得样品管中ALA含量mol（g）。尿中ALA的含量mo1L（mgL）E7 说明a乙酸乙酯、乙酰乙酸乙酯最好为近期产品。改良

24、显色剂宜新鲜配制；b加入显色剂后，应静置10min，比色应在30min内完成；c尿液易腐败，可导致pH升高，影响测定结果。如不能及时测定，应将尿液保存在冰箱中；d其他与对二甲氨基苯甲醛显色剂反应的阳性物质，由于不被乙酸乙酯萃取，故不干扰测定；e测定尿样时，可同时做标准测定（取2mL标准应用液）。计算：式中：U测定管吸光度；O空白管吸光度；S标准管吸光度。附录 F尿中氨基乙酰丙酸的测定氯仿萃取比色法（补充件）F1 原理尿中ALA与乙酰乙酸乙酯在pH68及100条件下，作用生成吡咯衍生物，与对二甲氨基苯甲醛反应生成红色化合物，用氯仿提取，比色定量（尿中干扰物质在弱酸性条件下先用正丁醇抽取去除）。F

25、2 仪器721分光光度计。F3 试剂a35molL（20）乙酸溶液（VV）；b正丁醇（分析纯）；c氯仿（分析纯）；d0.5molL（M）磷酸盐缓冲液（pH68）：05molL（M）Na(下标始)2(下标终)HPO(下标始)4(下标终)溶液：称取Na(下标始)2(下标终)HPO(下标始)4(下标终)12H(下标始)2(下标终)O8954g，用蒸馏水稀释至500mL。05molL（M）NaH(下标始)2(下标终)PO(下标始)4(下标终)溶液：称取NaH(下标始)2(下标终)PO42H(下标始)2(下标终)O3001g，用蒸馏水稀释至500mL。以上两种溶液等量混合即成pH68磷酸盐缓冲液；e02

26、molL（M）二氯化汞液：称取二氯化汞54304g，用蒸馏水稀释至100mL置棕色瓶，保存在37水温箱中；f显色剂：称取对二甲氨基苯甲醛4g，加入冰乙酸128mL 116molL（70）浓高氯酸40mL，02molL（M）二氯化汞液10mL，浓盐酸40mL，混匀，置棕色瓶，冰箱备用；g乙酰乙酸乙酯磷酸盐缓冲液：乙酰乙酸乙酯1份加入19份磷酸盐缓冲液即成（临用时需振摇）；hALA贮存标准液7628molL（100gmL）：准确称取氨基乙酰丙酸盐酸盐（C(下标始)5(下标终)H(下标始)9(下标终)NO(下标始)3(下标终)HC1）128mg置于100mL容量瓶中，用蒸馏水溶解并稀释至刻度；iAL

27、A应用标准液1525molL（20gmL）：精确吸取ALA贮存标准液20mL，置于100mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度。F4 尿样分析步骤F41 提取：于25mL具塞试管中加入尿液2mL，35molL（20）乙酸溶液2mL及正丁醇8mL，紧塞，用力振摇30s，静置分层，另取具塞试管2只，作为空白管和测定管。各管加入经正丁醇抽提后的下层尿液05mL。F42 显色：在测定管中加入15mL乙酰乙酸乙酯缓冲液，空白管中加入pH68磷酸盐缓冲液15mL，分别混匀后置沸水浴中加热10min，取出用冷水迅速冷却后，各管中加入2mL显色剂，混匀，放置10min，加入氯仿8mL，紧塞振摇20次，分层后用水泵或

28、毛细管吸弃上层水液，加入无水硫酸钠约1g，振摇除去水分，在1030min内，用光径（1cm）比色杯于556nm处比色，以空白管校正吸光度至零点，读取吸光度，查阅标准曲线。F5 标准曲线的绘制取具塞试管6只，分别标号为1、2、3、4、5、6，然后按表F1进行操作：表F1加35molL（20）乙酸溶液2mL及正丁醇8mL，紧塞，用力振摇30s，静置分层，吸取经正丁醇抽提后的下层液05mL于另外6只具塞试管中，然后按尿样分析法中显色步骤进行操作，以1号管作空白管，读取各管吸光度读数，绘制标准曲线。F6 计算测定时，尿液、乙酸和正丁醇混匀抽提后，下层液05mL仍相当于原来的尿标本05mL。尿ALAmo

29、lL（mgL）05mL尿内ALA之mol（g）数（标准曲线中查出）1/0.505mL尿中ALA之mol（g）数2（F1）F7 说明a当尿中ALA含量在7628mol（10g）范围内，呈直线关系，当其含量高时，宜稀释后进行测定；b尿提取液须加入管之底部，使之与乙酰乙酸乙酯充分混匀，不然结果偏低；c显色剂置于冰箱内；d空白管在一般情况下可省去；e尿样宜新鲜，腐败尿不能用；f正常人尿中含有少量ALA。注：上海市杨浦区中心医院1978年测定101例正常人（一次尿），其结果ALA为1778527molL（297088mgL）。附录 G尿中粪卟啉（棕色素）的半定量测定（补充件）G1 原理尿液中粪卟啉原经过氧化氢氧化成粪卟啉，粪卟啉在弱酸性尿中，用乙醚提取，含有粪卟啉的醚层在紫外灯下现红色荧