车间环境卫生检测规范doc.docx

1、车间环境卫生检测规范doc车间环境卫生检测规范 1.目的：根据GB 12693-2010乳制品企业良好生产规范及本公司生产洁净区环境、卫生管理规定中的相关规定及要求，特制定本规范。2.范围本规范规定了本公司实验室实施车间环境卫生检测的依据、方法及检测结果判定标准。本规范适用于本公司实验室实施车间环境卫生的各项检测。3检测项目：菌落总数、霉菌、酵母、阪崎肠杆菌、大肠菌群、沙门氏菌4.检测频率及检测时间：每日生产前进行生产设备、工器具、包装材料、员工个人卫生等部位的涂抹试验。 每日生产过程中对生产车间空气进行沉降试验。5.职责 由检验人员负责车间环境卫生检测的具体操作。6.检测方法6.1空气沉降法

2、6.1.1 菌落总数：1）车间空气采样：选取4个采样点，（见附录1车间空气采样位点图）。采样高度为1.2m1.5m。采样点应远离墙壁1 m以上，并避开空调、门窗等空气流通处。2）生产车间空气检测采样部位： 混粉间、杀菌机、预封机、真封机、100g灌装间、软包装灌装间、压片间、储粉间等，每部位为一采样点。3）将营养琼脂平板置于采样点处，打开平皿盖，暴露 30min ,盖上平皿盖。反转平板，置361培养48h。4）若为车间空气菌落总数测定，则应计算4个采样点菌落的平均数；若为生产车间空气检测采样部位菌落总数测定，则应计数每个平板上的菌落数，均以每皿菌落数（CFU/皿）报告结果。6.1.2 霉菌、酵

3、母：1）、2）同6.1.1 菌落总数。3）将虎红琼脂平板置于采样点处，打开平皿盖，暴露 30min ,盖上平皿盖。反转平板，置251培养3d5 d。4）若为车间空气霉菌、酵母总数测定，则应计算4个采样点菌落的平均数；若为生产车间空气检测采样部位霉菌、酵母总数测定，则应计数每个平板上的菌落数，均以每皿菌落数（CFU/皿）报告结果。6.1.3阪崎肠杆菌1）车间空气采样：选取4个采样点，（见附录1车间空气采样位点图）。采样高度为1.2m1.5m。采样点应远离墙壁1 m以上，并避开空调、门窗等空气流通处。2）将阪崎肠杆菌显色平板置于采样点处，打开平皿盖，暴露 30min ,盖上平皿盖。反转平板，置36

4、1培养48h。3）计数每个阪崎肠杆菌显色平板上蓝绿色菌落，并计算4个采样点蓝绿色菌落的平均数，以每皿阪崎肠杆菌菌落数（CFU/皿）报告结果。6.2表面涂抹法6.2.1物体表面涂抹：6.2.1.1菌落总数、霉菌和酵母6.2.1.1.1将经灭菌的内径为5cm5cm的规格板放在被检物体表面，用一浸有灭菌生理盐水的棉签在其内涂抹，然后剪去手接触的部分棉棒，将棉签放入装有10mL灭菌生理盐水/乳糖胆盐发酵管的采样管内及时送检。6.2.1.1.2将每支灭菌生理盐水采样管充分混匀后，取1mL样液，分别放入灭菌平皿内，加入冷至45左右的营养琼脂/虎红琼脂约15mL，每个样品平行接种2个平皿，将营养琼脂平板置3

5、61培养48h.；虎红琼脂平板置2528培养35d.6.2.1.1.3.计数平板上的细菌/霉菌、酵母菌落数，以每毫升检样中的菌落总数（CFU）的平均数报告结果。6.2.1.2 阪崎肠杆菌6.2.1.2.1将经灭菌的内径为5cm5cm的规格板放在被检物体表面，用一浸有灭菌营养肉汤的棉签在其内涂抹，然后剪去手接触的部分棉棒，将棉签放入装有10mL灭菌营养肉汤的采样管内及时送检。6.2.1.2.2 将每支灭菌营养肉汤的采样管充分混匀后，取1mL样液，以0.3 mL、0.3 mL、0.4 mL 接种量分别加入三个阪崎肠杆菌显色平板，然后用无菌L 棒涂布整个平板，注意不要触及平板边缘。使用前，如阪崎肠杆

6、菌显色平板表面有水珠，可放在25 50 的培养箱里干燥，直到平板表面的水珠消失方可使用。6.2.1.2.3 反转平板，置361培养48h。6.2.1.2.4 挑取蓝绿色可疑菌落，采用API 20E进行生化鉴定及进行氧化酶、产黄素试验。6.2.1.2.4 根据鉴定及试验结果报告检出或未检出阪崎肠杆菌。6.2.1.3 沙门氏菌6.2.1.3.1将经灭菌的内径为5cm5cm的规格板放在被检物体表面，用一灭菌的棉签在其内涂抹，然后剪去手接触的部分棉棒，将棉签放入装有10mL灭菌营养肉汤的采样管内及时送检。6.2.1.3.2将灭菌营养肉汤的采样管于于361培养818h。6.2.1.3.3轻轻摇匀采样管内

7、的混合物，取1mL样液转种于10mL亚硒酸盐胱氨酸（SC）内，于361培养1824h。6.2.1.3.4 用接种环取增菌液1环，划线接种于一个科马嘉显色培养基平板，于361培养1824h。6.2.1.3.5 挑取紫红色可疑菌落，采用API 20E进行生化鉴定试验。6.2.1.3.6 根据鉴定及试验结果报告检出或未检出沙门氏菌。6.2.1.4大肠菌群 6.2.1.3.1将每支乳糖胆盐发酵管置361培养24h2 h。6.2.1.3.2若产气，即初步判定为大肠菌群阳性。以大肠菌群阳性/阴性报告结果。6.2.2员工手部涂抹：6.2.2.1被检人五指并拢，用一浸有灭菌生理盐水的棉签在右手指曲面，从指尖到

8、指端来回涂抹10次，然后剪去手接触的部分棉棒，将棉签放入装有10mL灭菌乳糖胆盐发酵管内及时送检。6.2.2.2将每支乳糖胆盐发酵管置361培养24h2 h。若产气，即初步判定为大肠菌群阳性。6.2.2.3以员工手表面大肠菌群阳性或阴性/手报告结果。6.2.3涂抹部位： 6.2.3.1生产设备、工器具的涂抹：预混机、混粉缸、混粉缸上/下料口、筛粉机下料口、下粉漏斗、填充器、筛网、受粉槽、钢管、软管、盆、勺等。6.2.3.2包装材料的涂抹： 底盖、内袋等。6.2.3.3员工卫生状况涂抹：连体服、手套、手。涂抹及检测方法同6.2.1。7判定依据菌落总数：空气暴露30min 10 CFU/皿，表面涂

9、抹 50 CFU/mL ；霉菌、酵母：空气暴露30min 10 CFU/皿, 表面涂抹 10 CFU/mL；阪崎肠杆菌：空气暴露30min 0 CFU/皿，表面涂抹 不得检出大肠菌群：阴性。8.检测报告检验员应真实、准确填写生产车间环境微生物检测报告，经实验室主管审核后，报送品控部和生产部。9.说明9.1 混粉间、杀菌机、预封机、真封机为每天必须检测的部位，100g灌装间、软包装灌装间、压片间、储粉间仅在使用时进行检测。9.2 钢管、软管应每次拆卸清洗后进行检测。9.3 一般情况下，仅进行车间空气中的阪崎肠杆菌检测，必要时可采用涂抹法对某些部位进行阪崎肠杆菌检测。9.4员工手部涂抹样仅检测大肠菌群。附录车间空气采样位点图 代表空气采样点； 代表车间人员入口风淋室； 代表混粉间门口；