最新促甲状腺激素TSH定量试剂盒化学发光法.docx

1、最新促甲状腺激素TSH定量试剂盒化学发光法促甲状腺激素(TSH)定量试剂盒(化学发光法)标题：促甲状腺激素（TSH）测定版本号：A修订号：0文件编号：CJYYLAB-FG-SOP-001发布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日发布部门：质量管理小组编制人：何顺卿审核人：钟尊勇批准人：张范页码：第 1 页，共 6 页【概述】促甲状腺素（TSH）是垂体前叶分泌的一种糖蛋白激素，其主要作用是调控甲状腺的功能活动。测定血清中TSH的浓度是判断甲状腺功能是否正常的首选指标，也是研究下丘脑垂体甲状腺轴反馈调节机制等的重要参数，临床上多用于甲状腺功能亢进（甲亢）和减退（甲减）的诊断、

2、原发与继发性甲减的鉴别诊断、监测甲亢和甲减的疗效、亚临床甲亢的诊断、新生儿甲低的筛查以及垂体TSH瘤的实验室诊断等。【测定原理】本试剂盒采用双抗夹心法测定血清中TSH水平，用两株不同的单克隆抗体分别与TSH分子上不同的抗原决定簇发生反应。用一株单抗包被微孔板制成固相抗体，用另一株单抗标记酶制成酶标抗体。在包被板微孔中加入校准品或待测血清及酶标抗体，温育后即形成固相抗体抗原酶标抗体的复合物，充分洗涤后加入化学发光底物液，于3090分钟内测定其发光强度（RLU），根据校准曲线即可算出样品中TSH的含量，样品的RLU值随TSH浓度的增加而升高。标题：促甲状腺激素（TSH）测定版本号：A修订号：0文件

3、编号：CJYYLAB-FG-SOP-001发布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日发布部门：质量管理小组编制人：何顺卿审核人：钟尊勇批准人：张范页码：第 2 页，共 6 页【试剂组成和配制】数量48孔96孔包被板1块48孔/块96孔/块校准品7瓶0.5ml/瓶0.5ml/瓶浓度0、0.1、0.5、2.5、10、40、120uIU/ml酶标记物1瓶3ml/瓶6ml/瓶化学发光底物液1瓶3ml/瓶6ml/瓶浓缩洗涤液1瓶30ml/瓶30ml/瓶 使用时用蒸馏水稀释20倍（水应为新鲜制备的去离子水或蒸馏水）说明书1份1张/份1张/份封板膜1份1张/份2张/份【样本要求】病人标

4、本无需特殊处理，采用正确医用技术收集全血标本，离心分离后吸取血清用于检测。待测血清如在24小时之内使用，可于28。C保存，若需长期存放应保存在-20。C以下，并避免反复冻溶。请不要使用严重溶血、脂血或黄疸标本。标题：促甲状腺激素（TSH）测定版本号：A修订号：0文件编号：CJYYLAB-FG-SOP-001发布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日发布部门：质量管理小组编制人：何顺卿审核人：钟尊勇批准人：张范页码：第 3 页，共 6 页【测定方法】自4。C冰箱中取出试剂盒，室温平衡15分钟，然后按下表程序操作：TSH加样测定程序表 单位：ul包被板 空白孔 校准孔 样品孔

5、校准品 50 待测样品 50酶标记物 50 50 用微量震荡器充分振荡混匀，用封板膜封板37。C温育2小时。 用稀释后的洗涤液洗板5次，最后在干净的吸水纸上扣干。发光底物液 50 50 50 用微量震荡器充分振荡混匀，室温（2027。C）避光反应30分钟。测量 必须于加化学发光底物液后的第3090分钟内测量，在化学发光测量仪上依序测量各孔的发光强度（RLU），测量时间1秒/孔。注：若室温低于20。C，加入化学发光底物液后应将微孔板置于2030。C烘箱内温育30分钟后再测量；加入化学发光底物液后其发光强度（RLU）在3090分钟之间比较稳定，此段时间为可靠测量期。【适用仪器】微孔板光子计数分析仪

6、，微孔板洗板机。【结果计算】待测样品的浓度按下方法计算：用化学发光测量仪中的数据处理程序（拟合类型：线性拟合，坐标选择：log(x)log(Y),实验方法：夹心法）直接给出校准曲线及样品的浓度值。标题：促甲状腺激素（TSH）测定版本号：A修订号：0文件编号：CJYYLAB-FG-SOP-001发布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日发布部门：质量管理小组编制人：何顺卿审核人：钟尊勇批准人：张范页码：第 4 页，共 6 页【正常参考值】各实验室应建立自己的临床正常值，下列正常值范围仅供参考。正常参考值：0.35.0uIU/ml【对实验结果的解释】本试剂盒的检测结果不是临床

7、诊断的唯一确认指标，应结合临床症状及其它检测指标综合判定。【方法的局限性】1、本试剂盒仅限用于血清样本的测定，对于其它体液样本测定的可靠性尚未得到充分的实验确认。2、本试剂盒准确的测定范围应不超出校准品曲线的浓度范围，超出曲线范围的样品需要适当稀释后测定结果才能准确。3、通过其它方法得到的TSH浓度值与本试剂盒的测定结果不具有直接的可比性。【技术参数】1、灵敏度：0.02uIU/ml2、精密性：用本方法检测低、中、高三组样品（n=10）。 批内变异系数：CV%15.0%；批间变异系数：CV%20.0%3、线性：r0.9900标题：促甲状腺激素（TSH）测定版本号：A修订号：0文件编号：CJYY

8、LAB-FG-SOP-001发布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日发布部门：质量管理小组编制人：何顺卿审核人：钟尊勇批准人：张范页码：第 5 页，共 6 页【注意事项】1、检测必须符合实验室管理规范的规定，严格防止交叉污染。所有样品、洗弃液和各种废弃物都应当按传染物处理。2、操作前应仔细阅读使用说明书，严格按照说明书的操作程序进行，不同批号的试剂和包被板不能混用。包被板要干燥保存，用完后立刻放回密封袋中封严后保存。3、各试剂必须摇匀后使用，用前应平衡到室温，严格控制每步反应的时间和温度。4、加样操作应快速准确手法一致，慢吸快打，不要使溶液粘到孔壁上，尽量缩短整个加样时

9、间。5、每次加样完毕后，应用微量震荡器充分振荡混匀，并避免产生气泡防止溶液溅出。6、以洗板机洗板时，每孔注液量不应少于400ul，洗板次数不少于5次，浸泡时间不短于10秒，并注意检查加液头是否堵塞。洗板完后还应在干净的吸水纸上扣干。7、以手工洗板时，每次洗液都应加满微孔，最后应在干净的无纸屑吸水纸上扣干以防影响检测结果的准确性。8、加发光底物液的加样器应专用，加样吸头应确保干净无污染，标题：促甲状腺激素（TSH）测定版本号：A修订号：0文件编号：CJYYLAB-FG-SOP-001发布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日发布部门：质量管理小组编制人：何顺卿审核人：钟尊勇

10、批准人：张范页码：第 6 页，共 6 页在加发光底物液的过程中应避免加样吸头与板孔或手指接触，以防底物爱到污染而造成本底升高。9、为防止样品蒸发及避免污染，温育时应将反应板放于密闭干净的塑料袋内或用不干胶覆盖。标题：三碘甲腺原氨酸（T3）测定版本号：A修订号：0文件编号：CJYYLAB-FG-SOP-002发布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日发布部门：质量管理小组编制人：何顺卿审核人：钟尊勇批准人：张范页码：第 1 页，共 5 页【概述】三碘甲腺原氨酸（T3）是含碘的氨基酸衍生物，由一个分子一碘酪氨酸和一个分子二碘酪氨酸偶联而成，分子量651D。血循环中的T3有80

11、%来自游离T4在外周组织脱去一个碘原子而成，直接来自甲状腺的T3只占20%。血中的T3有99.7%与甲状腺结合球蛋白（TBG）等结合。血清T3浓度的测定对甲状腺功能的评价和早期诊断甲亢很有价值，同时对甲亢的疗效观察及判定预后也有重要价值。【测定原理】本试剂盒采用竞争法测定血清中T3水平。将T3抗体包被微孔板制成固相抗体，用酶标记T3抗原制成酶标抗原。在包被板微孔中加入校准品或待测血清和酶标记物，温育后即形成固相抗体非标记抗原或酶标记抗原复合物，充分洗涤后加入化学发光底物液测定其发光强度（RLU），根据校准曲线即可算出样品中T3的含量，样品的RLU值随T3浓度的增加而降低。标题：三碘甲腺原氨酸（

12、T3）测定版本号：A修订号：0文件编号：CJYYLAB-FG-SOP-002发布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日发布部门：质量管理小组编制人：何顺卿审核人：钟尊勇批准人：张范页码：第 2 页，共 5 页【试剂组成和配制】数量96孔包被板1块96块/块校准品6瓶0.5ml/瓶 浓度为：0、0.5、1.0、2.5、5.0、7.5ng./ml酶浓缩液1瓶1.1ml/瓶酶稀释液1瓶11ml/瓶酶工作液：按1：10用酶稀释液（1.0ml）稀释酶浓缩液（0.1ml）并混合均匀，现用现配。化学发光底物液A1瓶6ml/瓶化学发光底物液B1瓶6ml/瓶使用前根据需要量将底物液A和B等

13、体积（1：1）混合，现用现配。浓缩洗涤液1瓶30ml/瓶使用时用蒸馏水稀释20倍（水应为新鲜制备的去离子水或蒸馏水）说明书1份1张/份封板膜1份2张/份【样本要求】病人标本无需特殊处理，采用常规医用技术收集全血标本，离心分离后吸取血清用于检测。待测血清如在24小时之内使用，可于28。C保存，若需长期存放应保存在-20。C以下，并避免反复冻溶。请不要使用严重溶血、脂血或黄疸标本。标题：三碘甲腺原氨酸（T3）测定版本号：A修订号：0文件编号：CJYYLAB-FG-SOP-002发布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日发布部门：质量管理小组编制人：何顺卿审核人：钟尊勇批准人：

14、张范页码：第 3 页，共 5 页【测定方法】自4。C冰箱中取出试剂盒，室温平衡15分钟，然后按下表程序操作：T3加样测定程序表 单位：ul包被板 空白孔 校准孔 样品孔校准品 50 待测样品 50酶工作液 100 100 用微量震荡器充分振荡混匀，用封板膜封板室温（2027。C）温育45分钟。用稀释后的洗液洗板5次，最后在干净的吸水纸上扣干。发光底物混合液 100 100 100 用微量震荡器充分振荡混合均匀，室温（2027。C）避光反应5分钟。测量 必须于加化学发光底物液后的第530。C 分钟内测量，在化学发光 测量仪上依序测量各孔的发光强度（RLU），测量时间1秒/孔。【适用仪器】微孔板光

15、子计数分析仪，微孔板洗板机。【结果计算】待测样品的浓度计算按下列方法进行：用化学发光分析仪中的数据处理程序（拟合类型：线性拟合，坐标选择：log(X)logit(Y)，实验方法：竞争法）直接给出校准曲线及样品的浓度值。【正常参考值】各实验室应建立自己的正常参考值，下列正常值仅供参考。正常参考值：0.521.90ng/ml (单位换算：1nmol/L=0.651ng/mL)标题：三碘甲腺原氨酸（T3）测定版本号：A修订号：0文件编号：CJYYLAB-FG-SOP-002发布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日发布部门：质量管理小组编制人：何顺卿审核人：钟尊勇批准人：张范页

16、码：第 4 页，共 5 页【对实验结果的解释】本试剂盒的检测结果不是临床诊断的唯一确认指标，应结合临床症状及其它检测指标综合判定。【方法的局限性】1、本试剂盒仅限用于血清样本的测定，对于其它体液样本测定的可靠性尚未得到充分的实验确认。2、本试剂盒准确的测定范围应不超出校准品曲线的浓度范围，超出曲线范围的样品需要适当稀释后测定结果才能准确。3、通过其它方法得到的T3浓度值与本试剂盒的测定结果不具有直接的可比性。4、待测血清中存在抗T3等自身抗体以及人抗鼠等异嗜抗体会干扰测定结果。【技术参数】1、灵敏度：0.04ng/ml2、精密度：用本方法检测低、中、高三组样品（n=10）。分析内变异系数：CV

17、%15%；分析间变异系数：CV%20%3、线性：| r | 0.99004、特异性：与10ug/ml的T4交叉反应率小于0.02%【注意事项】1、检测必须符合实验室管理规范的规定，严格防止交叉污染。所标题：三碘甲腺原氨酸（T3）测定版本号：A修订号：0文件编号：CJYYLAB-FG-SOP-002发布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日发布部门：质量管理小组编制人：何顺卿审核人：钟尊勇批准人：张范页码：第 5 页，共 5 页有样品、洗弃液和各种废弃物都应当按传染物处理。2、操作前应仔细阅读使用说明书，严格按照说明书的操作程序进行，不同批号的试剂和包被板不能混用。包被板要

18、干燥保存，用完后立刻放回密封袋中封严后保存。3、各试剂必须摇匀后使用，用前应平衡到室温，严格控制每步反应的时间和温度。4、加样操作应快速准确手法一致，慢吸快打，不要使溶液粘到孔壁上，尽量缩短整个加样时间。5、每次加样完毕后，应用微量震荡器充分振荡混匀，并避免产生气泡防止溶液溅出。6、以洗板机洗板时，每孔注液量不应少于400ul，洗板次数不少于5次，浸泡时间不短于10秒，并注意检查加液头是否堵塞。洗板完后还应在干净的吸水纸上扣干。7、以手工洗板时，每次洗液都应加满微孔，最后应在干净的无纸屑吸水纸上扣干以防影响检测结果的准确性。8、加发光底物液的加样器应专用，加样吸头应确保干净无污染，在加发光底物

19、液的过程中应避免加样吸头与板孔或手指接触，以防底物受到污染而造成本底升高。9、为防止样品蒸发及避免污染，温育时应将反应板放于密闭干净的塑料袋内或用不干胶覆盖。标题：甲状腺素（T4）测定版本号：A修订号：0文件编号：CJYYLAB-FG-SOP-003发布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日发布部门：质量管理小组编制人：何顺卿审核人：钟尊勇批准人：张范页码：第 1 页，共 6 页【概述】甲状腺素(T4)是甲状腺分泌的两种主要激素之一，分子量777D，全部由甲状腺产生。T4的主要作用是促进合成和能量代谢，使基础代谢和耗氧量增加，促进生长和发育。在血中的T4有99.97%与甲

20、状腺结合球蛋白（TBG）及甲状腺结合前蛋白（TBPA）结合。T4的合成和分泌主要受下丘脑及垂体的控制。T4是甲状腺功能亢进（甲亢）和减退（甲减）的诊断和疗效评价的指标之一。【测定原理】本试剂盒采用竞争法测定血清中T4水平，用T4抗体包被微孔板制成固相抗体，用T4抗原标记酶制成酶标记物。在包被微孔中加入T4校准品或待测血清和酶标抗原，温育后竞争形成固相抗体非标记抗原或标记抗原复合物，充分洗涤后加入化学发光底物液于530分钟内测定其发光强度（RLU），根据标准曲线即可算出样品T4的含量，样品的RLU值随T4浓度的增加而降低。标题：甲状腺素（T4）测定版本号：A修订号：0文件编号：CJYYLAB-F

21、G-SOP-003发布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日发布部门：质量管理小组编制人：何顺卿审核人：钟尊勇批准人：张范页码：第 2 页，共 6 页【试剂组成和配制】数量96孔包被板1块96孔/块校准品6瓶0.5ml/瓶浓度为：0、2、5、10、15、25ug/dl酶浓缩液1瓶1.1ml/瓶酶稀释液1瓶11ml/瓶酶工作液：按1：10用酶稀释液（1.0ml）稀释酶浓缩液（0.1ml）并混合均匀，现用现配。化学发光底物液A1瓶6ml/瓶化学发光底物液B1瓶6ml/瓶使用前根据需要量将底物液A和B等体积（1：1）混合，现用现配。浓缩洗涤液1瓶30ml/瓶使用时用蒸馏水稀释2

22、0倍（水应为新鲜制备的去离子水或蒸馏水）说明书1份1张/份封板膜1份1张/份【样本要求】病人标本无需特殊处理，采用常规医用技术收集全血标本，离心分离后吸取血清用于检测。待测血清如在24小时之内使用，可于28。C保存，若需长期存放应保存在-20。C以下，并避免反复冻溶。请不要使用严重溶血、脂血或黄疸标本。标题：甲状腺素（T4）测定版本号：A修订号：0文件编号：CJYYLAB-FG-SOP-003发布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日发布部门：质量管理小组编制人：何顺卿审核人：钟尊勇批准人：张范页码：第 3 页，共 6 页【测定方法】自4。C冰箱中了出试剂盒，室温平衡15

23、分钟，然后按下表程序操作：T4加样测定程序表 单位：ul包被板 空白孔 校准孔 样品孔校准品 25 待测样品 25酶工作液 100 100 用微量震荡器充分振荡混匀，用封板膜封板室温（2027。C）温育45分钟。用稀释后的洗液洗板5次，最后在干净的吸水纸上扣干。发光底物混合液 100 100 100 用微量震荡器充分振荡混合均匀，室温（2027。C）避光反应5分钟。测量 必须于加化学发光底物液后的第530。C 分钟内测量，在化学发光 测量仪上依序测量各孔的发光强度（RLU），测量时间1秒/孔。【适用仪器】微孔板光子计数分析仪，微孔板洗板机。【结果计算】待测样品的浓度计算按下列方法进行：用化学发

24、光分析仪中的数据处理程序（拟合类型：线性拟合，坐标选择：log(X)logit(Y)，实验方法：竞争法）直接给出校准曲线及样品的浓度值。【正常参考值】各实验室应建立自己的正常值，下列正常值仅供参考。正常参考值：男性4.410.8ug/dl；女性4.811.6ug/dl （单位换算1nmol/L=0.077ug/dL）标题：甲状腺素（T4）测定版本号：A修订号：0文件编号：CJYYLAB-FG-SOP-003发布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日发布部门：质量管理小组编制人：何顺卿审核人：钟尊勇批准人：张范页码：第 4 页，共 6页【对实验结果的解释】本试剂盒的检测结果

25、不是临床诊断的唯一确认指标，应结合临床症状及其它检测指标综合判定。【方法的局限性】1、本试剂盒仅限用于血清样本的测定，对于其它体液样本测定的可靠性尚未得到充分的实验确认。2、本试剂盒准确的测定范围应不超出校准品曲线的浓度范围，超出曲线范围的样品需要适当稀释后测定结果才能准确。3、通过其它方法得到的T4浓度值与本试剂盒的测定结果不具有直接的可比性。4、血清中存在抗T4等自身抗体以及人抗鼠等异嗜抗体会干扰测定结果。【性能指标】1、灵敏度：0.1ug/dL2、精密度：用本方法检测低、中、高三组样品（n=10）。分析内变异系数：CV%15%；分析间变异系数：CV%20%3、线性相关系数绝对值 | r

26、| 0.99004、特异性：与浓度为100ug/dL右旋三碘原氨酸交叉反应率为1.5%，与浓度为100ug/dL的左旋三碘原氨酸交叉反应率为3.0%。标题：甲状腺素（T4）测定版本号：A修订号：0文件编号：CJYYLAB-FG-SOP-003发布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日发布部门：质量管理小组编制人：何顺卿审核人：钟尊勇批准人：张范页码：第 5 页，共 6 页【注意事项】1、检测必须符合实验室管理规范的规定，严格防止交叉污染。所有样品、洗弃液和各种废弃物都应当按传染物处理。2、操作前应仔细阅读使用说明书，严格按照说明书的操作程序进行，不同批号的试剂和包被板不能

27、混用。包被板要干燥保存，用完后立刻放回密封袋中封严后保存。3、各试剂必须摇匀后使用，用前应平衡到室温，严格控制每步反应的时间和温度。4、加样操作应快速准确手法一致，慢吸快打，不要使溶液粘到孔壁上，尽量缩短整个加样时间。5、每次加样完毕后，应用微量震荡器充分振荡混匀，并避免产生气泡防止溶液溅出。6、以洗板机洗板时，每孔注液量不应少于400ul，洗板次数不少于5次，浸泡时间不短于10秒，并注意检查加液头是否堵塞。洗板完后还应在干净的吸水纸上扣干。7、以手工洗板时，每次洗液都应加满微孔，最后应在干净的无纸屑吸水纸上扣干以防影响检测结果的准确性。8、加发光底物液的加样器应专用，加样吸头应确保干净无污染

28、，在加发光底物液的过程中应避免加样吸头与板孔或手指接触，以标题：甲状腺素（T4）测定版本号：A修订号：0文件编号：CJYYLAB-FG-SOP-003发布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日发布部门：质量管理小组编制人：何顺卿审核人：钟尊勇批准人：张范页码：第 6 页，共 6 页防底物受到污染而造成本底升高。9、为防止样品蒸发及避免污染，温育时应将反应板放于密闭干净的塑料袋内或用不干胶覆盖。标题：游离三碘甲腺原氨酸（FT3）测定版本号：A修订号：0文件编号：CJYYLAB-FG-SOP-004发布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日发布部门：质量

29、管理小组编制人：何顺卿审核人：钟尊勇批准人：张范页码：第 1 页，共 6 页【概述】三碘甲腺原氨酸（T3）是含碘的氨基酸衍生物，由一个分子一碘酪氨酸和一个分子二碘酪氨酸偶联而成，分子量651D。血循环中的T3有80%来自游离T4在外周组织脱去一个碘原子而成，直接来自甲状腺的T3只占20%。血中的T3有99.7%与甲状腺结合球蛋白（TBG）等结合。同TBG等蛋白质结合的T3无生物活性，而0.3%未结合的T3即游离T3（FT3）的生物活性则比游离T4强510倍。因此测定血清FF3对于甲亢的诊断、疗效和预后的判断具有重要的临床价值，对甲减的诊断也有一定的参考价值。【测定原理】 本试剂盒采用竞争法测定血清中FT3水平。用T3抗体包被微孔板制成固相抗体，酶标记T3抗原制成酶标记物，该酶标记物不能够与TBG和白蛋白结合。在包被板微孔中加入FT3校准品或待测血清和酶标记物，酶标记物与样品的FT3竞争性结合出样品中FT3的含量，样品的RLU值随