1、气相色谱方法验证方 案第1版 顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B含量的验证药业有限公司 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第 1 页 生效日期: 编写人: 日 期: 审阅人: 日 期: 批准人: 日 期: QA经理最初方案批准: 总经理:日 期:质量检验部经理:日 期:质量保证部经理:日 期:最终方案批准: 总经理:日 期:质量检验部经理:日 期:质量保证部经理:日 期: 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第 2
2、 页名 称 页 数1 目的32 范围33 仪器与试剂及色谱条件34 验证实验内容45 最终报告20 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: MVP- 017版本号: 第1版共21页: 第 3 页一、目 的1. 验证顶空气相色谱法能否准确、精密的测定一定浓度范围内的原料药中溶剂A和溶剂B的含量。2. 验证顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B含量是否具有良好的选择性。3. 验证方法在环境、条件发生一定变化时,能否有一定的耐受性。二、范 围适用于药业有限公司原料药中溶剂A和溶剂B含量的验证,包括:空白试验、精密度、定量限、线性范围、准确度、
3、耐受性等。三、仪器与试剂及色谱条件仪器与试剂GC HP6890N(FID)Column:DB-1301(30m0.32mmI.D.1m)Oven:90Inlet:150Detector: 200Column Pressure:4.8psiColumn flow rate: 0.8ml/minSplit rate: 1:25Sampler Condition: 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第 4 页Agilent 7694 Head-space SamplerEquilibration tempera
4、ture: 80Equilibration time: 45minTransfer-line temperature: 105Carrier gas: 25ml/minPressurisation time: 0.5minInjection time: 0.20min移液管:25 ml,10ml,2ml 吸量管:2ml 胶头滴管 分析天平 顶空瓶(22ml),容量瓶:50ml微量注射器:25l试剂:DMF(AR)、溶剂B(AR)、溶剂A(AR)、原料药(批号 )无残溶的原料药四、验证实验内容1. 空白试验(1)DMF用称液管移取2mlDMF于22ml顶空瓶中,加盖,作色谱处理。可接受标准:在溶
5、剂B和溶剂A出峰位置处无干扰峰验证结果:结论:操作者: 核对者: 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第 5 页(2)空白取无残留溶媒(在水相结晶,不用溶媒处理)的普青_g于22ml顶空瓶中,用移液管加入2mlDMF,加盖,摇匀,作色谱分析。可接受标准: 在溶剂B和溶剂A出峰位置处无干扰峰。验证结果:结论:操作者: 核对者:2. 精密度2.1 系统适应性溶液配制贮备液:向50ml容量瓶中精确加入溶剂B0.05g,溶剂A0.5g,用DMF定容。标准溶液A:称取贮备液1.2800g于50ml容量瓶中,用DMF溶
6、液定容。精密称1.0g无残留的原料药于22ml顶空瓶中,加入2ml标准溶液A,加盖作色谱处理,各重复4次,计算4次的平均值,相对标准偏差。可接受标准: RSD5验证结果: 1.贮备液配制:称取溶剂B g,溶剂A g,用DMF定容至50ml。 2.标准溶液A:称取贮备液 g于50 ml容量瓶中,用DMF溶液定容. 3.称取无残留的原料药 , , , ,于22ml顶空瓶中,加入2 ml标准溶液A,加盖作色谱处理。 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第 6 页标准溶液A色谱数据表瓶号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1.
7、 2. 3. 4. 平均RSD结论:操作者: 核对者:3. 线性范围:3.1 线性标准溶液配制:贮备液a:用移液管移取10ml贮备液于50ml容量瓶中,用DMF定容,摇匀。1标准液:用吸量管移取1.25ml贮备液于50ml容量瓶中,用DMF定容,摇匀,制成1贮备液。然后精密称 g无残留的原料药于22 ml顶空瓶中,加入2ml上述溶液,混匀。(约含500ppm溶剂A及50ppm溶剂B)。2标准液:用移液管移取25ml1贮备液于50ml容量瓶中,用DMF定容,摇匀,制成2贮备液。然后精密称 g无残留的原料药于22ml顶空瓶中,加入2ml上述溶液,混匀。(约含250ppm溶剂A及25ppm溶剂B)。
8、3标准液:用移液管移取25ml2贮备液于50ml容量瓶中,用DMF定容,摇匀,制成3贮备液。然后精密称 g无残留的原料药于22ml顶空瓶中,加入2ml上述溶液,混匀。(约含125ppm溶剂A及12.5ppm溶剂B)。 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第 7 页4标准液:用移液管移取25ml3贮备液于50ml容量瓶中,用DMF定容,摇匀,制成4贮备液。然后精密称 g无残留的原料药于22ml顶空瓶中,加入2ml上述溶液,混匀。(约含62.5ppm溶剂A及6.25ppm溶剂B)。5标准液:用移液管移取25ml
9、4贮备液于50ml容量瓶中,用DMF定容,摇匀,制成5贮备液。然后精密称 g无残留的原料药于22ml顶空瓶中,加入2ml上述溶液,混匀。(约含31.3ppm溶剂A及3.13ppm溶剂B)。分别取1、2、3、4、5线性标准液,加盖作色谱处理。按照线性标准液15的浓度与其对应的溶剂B及溶剂A的峰面积,作线性回归得到溶剂B和溶剂A的工作曲线。可接受标准:0.99线性范围数据表序号溶剂A浓度溶剂B浓度溶剂A峰面积溶剂B峰面积12345 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第8页溶剂A线性回归结果:a b r工作曲线
10、: y 溶剂B线性回归结果:a b r工作曲线: y 结论:操作者: 核对者:4. 定量限3#贮备液逐级稀释,作色谱分析,按照色谱峰的信噪比为1:10时的浓度作为溶剂A和溶剂B的定量限。结论:溶剂B的定量限: 溶剂A的定量限:操作者: 核对者: 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第 9 页5. 准确度5.1 系统适用性 a:称取贮备液 g于50ml容量瓶中,用DMF定容,摇匀。b:取a液2ml于22ml顶空瓶中,加盖作色谱处理,各重复4次,计算4次的平均值,相对标准偏差。可接受标准: RSD5 瓶号溶剂A
11、峰面积溶剂B峰面积1.2.3.4.平均RSD结论:5.2 准确度称取1.0g普鲁卡因青毒素产品,测出其溶剂B和溶剂A的残留量,然后加入一定量的标准溶液,加入三次, ,计算其回收率,可接受标准:回收率应在90110之间。验证结果:5.2.1溶剂B回收率 称取原料药产品 g于22ml顶空瓶中,加入2mlDMF溶液作色谱处理,根据工作曲线计算出该批产品中的溶剂B和溶剂A的含量。称量溶剂B峰面积溶剂A峰面积溶剂B含量溶剂A含量 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第10 页称取原料药产品1.0g 于22ml顶空瓶中
12、,加入2mlDMF及10l,20l,25l的贮备液a,加盖作色谱处理,根据工作曲线计算溶剂B和溶剂A的含量。 称样量(g)贮备液a(l)溶剂B峰面积溶剂B含量丁醇峰面积丁醇含量溶剂B回收率: 溶剂A回收率:结论:操作者: 核对者: 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第 11 页6. 中间精密度对同一样品进行三次平行测定,连续测定三天(三天均用同一个标准品和检品),由不同人测定。可接受标准:当天测定结果的RSD 溶剂B20;溶剂A15 大与天之间的测定结果RSD: 溶剂B30;溶剂A20 6.1 系统适用性
13、(第一天)溶液配制: a:称取贮备液 g于50ml容量瓶中,用DMF定容,摇匀。b:取a液2ml于22ml顶空瓶中,加盖作色谱处理,共重复4次,计算4次的平均值,相对标准偏差。C:分别称原料药 批 g, g, g于22 ml顶空瓶中,加入2mlDMF,混匀,加盖作色普处理,根据工作曲线计算出该批产品中溶剂A和溶剂B含量.可接受标准: RSD5标准号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1234RSD 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第12 页名称溶剂B峰面积溶剂B浓度溶剂A峰面积溶剂A浓度样1样2样3RSD结论: 操
14、作人: 核对者:6.2 系统适用性(第二天)溶液配制: a:称取贮备液 g于50ml容量瓶中,用DMF定容,摇匀。b:取a液2ml于22ml顶空瓶中,加盖作色谱处理,共重复4次,计算4次的平均值,相对标准偏差。C:分别称原料药 批 g, g, g于22 ml顶空瓶中,加入2mlDMF,混匀,加盖作色普处理,根据工作曲线计算出该批产品中溶剂A和溶剂B含量.可接受标准: RSD5标准号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1234RSD 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第13 页名称溶剂B峰面积溶剂B浓度溶剂A峰面积溶剂
15、A浓度样1样2样3RSD结论: 操作人: 核对人: 6.3 系统适用性(第三天)溶液配制: a:称取贮备液 g于50ml容量瓶中,用DMF定容,摇匀。b:取a液2ml于22ml顶空瓶中,加盖作色谱处理,共重复4次,计算4次的平均值,相对标准偏差。C:分别称原料药 批 g, g, g于22 ml顶空瓶中,加入2mlDMF,混匀,加盖作色普处理,根据工作曲线计算出该批产品中溶剂A和溶剂B含量.可接受标准: RSD5标准号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1234RSD 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第14 页名称溶
16、剂B峰面积溶剂B浓度溶剂A峰面积溶剂A浓度样1样2样3RSD结论: 操作人: 核对人: 三天验证结果统计时间溶剂A含量()溶剂B含量()第一天第二天第三天RSD结论:操作人: 核对人:7. 耐受性对比如下条件的测量结果: a不同柱温的耐受性 b不同流速的耐受性可接受标准: RSD5 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第15 页7.1 使用不同柱温的耐受性7.1.1 第一种柱温 T = 88系统精密度a:称取贮备液 g于50ml容量瓶中,用DMF定容,摇匀。b:取a液2ml于22ml顶空瓶中,加盖作色谱处理
17、,共重复4次,计算4次的平均值,相对标准偏差。序号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1234平均RSD结论:操作人: 核对人:7.1.2 第二种柱温 T90 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第 16 页系统精密度 a:称取贮备液 g于50ml容量瓶中,用DMF定容,摇匀。b:取a液2ml于22ml顶空瓶中,加盖作色谱处理,共重复4次,计算4次的平均值,相对标准偏差。序号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1234平均RSD结论:操作人: 核对人:7.1.3 第三种柱温 T92系统精密度a:称取贮备液 g于50ml容量瓶中,用
18、DMF定容,摇匀。b:取a液2ml于22ml顶空瓶中,加盖作色谱处理,共重复4次,计算4次的平均值,相对标准偏差。 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第17 页序号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1234平均RSD结论:操作人: 核对人:7.1.4 对比分析7.1.5结论:7.2 不同流速的耐受性7.2.1 第一种流速0.7ml/min系统精密度a:称取贮备液 g于50ml容量瓶中,用DMF定容,摇匀。b:取a液2ml于22ml顶空瓶中,加盖作色谱处理,共重复4次,计算4次的平均值,相对标准偏差。 有 限 公 司
19、方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第18 页系统精密度序号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1234平均RSD结论:操作人: 核对人:7.2.2 第二种流速0.8ml/min系统精密度a:称取贮备液 g于50ml容量瓶中,用DMF定容,摇匀。b:取a液2ml于22ml顶空瓶中,加盖作色谱处理,共重复4次,计算4次的平均值,相对标准偏差。 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第 19 页序号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1234平均RSD结论:操作人
20、: 核对人:7.2.3 第三种流速0.9ml/min系统精密度a:称取贮备液 g于50ml容量瓶中,用DMF定容,摇匀。b:取a液2ml于22ml顶空瓶中,加盖作色谱处理,共重复4次,计算4次的平均值,相对标准偏差。 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第 20 页系统精密度序号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1234平均RSD结论:操作人: 核对人:7.2.4对比分析:7.2.5结论:五. 最终报告 有 限 公 司方 法 验 证名 称: 顶空气相色谱法测定原料药 中溶剂A和溶剂B的含量方案号: 版本号: 第1版共21页: 第 21 页续前页:欢迎您的下载,资料仅供参考!致力为企业和个人提供合同协议,策划案计划书,学习课件等等打造全网一站式需求
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