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答案分生练习册2

第一章基因

一.名词解释

1.基因:

基因是核酸分子中贮存遗传信息的遗传单位,是指贮存RNA序列信息和有功能的蛋白质多肽链序列信息,以及表达这些信息所必须的全部核苷酸序列。

大部分生物中构成基因的核酸物质是DNA,少数生物(如RNA病毒)中是RNA。

2.不均一核RNA(heterogeneousnuclearRNA,hnRNA):

是真核生物细胞核内的转录初始产物,含有外显子和内含子转录的序列,分子量大小不均一,经一系列转录后加工变为成熟mRNA。

3.核酶(ribozyme):

具有催化功能的RNA分子或DNA分子称为核酶。

二.选择题

1.1.B2.C3.D4.E5.C6.A7.A

三.填空题

1.超螺旋结构;正超螺旋;负超螺旋;负超螺旋

2.多顺反子;单顺反子

3.RNA;核酸;核酸内切酶

4.m7GpppNm;多聚A尾[poly(A)]

四、简答题

1.动物细胞内主要含有的RNA种类及功能

细胞核与胞液

功能

核糖体RNA

信使RNA

转运RNA

不均一核RNA

小核RNA

rRNA

mRNA

tRNA

hnRNA

snRNA

核糖体的组成成分(1分)

蛋白质合成的模板(1分)

转运氨基酸(1分)

成熟mRNA的前体(1分)

参与hnRNA的剪接、转运(1分)

2.原核生物和真核生物mRNA的相同点:

(1)都含有开放阅读框和非翻译区。

(1分)

(2)开放阅读框编码蛋白质,非翻译区调控翻译起始。

(1分)

原核生物和真核生物mRNA的不同点:

(1)前者常为多顺反子RNA;后者常为单顺反子RNA。

(1分)

(2)前者5'端有与核糖体结合的SD序列;后者5'端有帽子结构,3'端有poly(A)尾。

(1分)

(3)前者合成后很少被加工修饰;后者先合成hnRNA,经一系列修饰才变为成熟mRNA。

(1分)

 

第2章基因组

一、名词解释:

1.细胞或生物体中,一套完整单倍体的遗传物质的总和。

如真核细胞基因组包含细胞核染色体DNA及线粒体DNA,原核细胞基因组包括染色体DNA和质粒DNA。

2.细菌细胞内的、染色体外的DNA分子,是共价闭合的环状DNA分子,能够独立于细胞的染色质DNA而进行复制。

3.真核生物的结构基因中,编码区与非编码区间隔排列。

4.是基因组中的一种高度重复序列,其重复单位一般由2~10bp组成,成串排列,具有调节基因的复制和转录等功能。

5.真核生物基因组中那些来源相同、结构相似、功能相关,在染色体上成串存在的一组基因称为基因家族。

二、选择题:

1.B2.A3.A4.C5.A6.B7.D8.C9.B10.C

三、填空题:

1.遗传信息;遗传物质

2.结构基因;调控区;转录终止信号

3.一个基因;多顺反子RNA;单顺反子RNA

4.3×109

5.断裂基因;间隔DNA;内含子;外显子

6.卫星DNA;反向重复序列

7.线性正链RNA;RNA;二倍体RNA

8.遗传图;物理图;转录图;序列图

四、简答题

1.病毒基因组的核酸有DNA,也有RNA。

其特点如下:

(1)病毒基因组大小相差较大;(0.5分)

(2)不同病毒的基因组可以是不同结构的核酸;(0.5分)

(3)基因有连续的和间断的;(0.5分)

(4)病毒基因组的编码序列大于90%;(0.5分)

(5)单倍体基因组;(0.5分)

(6)相关基因丛集;(0.5分)(7)基因重叠(0.5分)

(8)病毒基因组含有不规则的结构基因,转录出的mRNA分子亦不规范。

(0.5分)

五、论述题

1.

(1)  真核生物基因组的结构特点:

①转录产物多为单顺反子RNA。

(1分)

②基因是不连续的,内部存在不编码蛋白质的内含子。

(1分)

③存在大量的重复序列。

(1分)

④编码区域所占比例较小。

(1分)

⑤基因组远大于原核生物基因组,具有许多复制起点。

(1分)

(2)   原核生物基因组的结构特点

①转录产物多为多顺反子RNA。

(1分)

②基因是连续的,不含内含子。

(1分)

③重复序列很少。

(1分)

④编码区域所占比例较大。

(1分)

⑤基因组较小,只有一个复制起点。

(1分)

 

第三章基因组复制

一、名词解释

1.DNA复制产生的子代双链中,一条链来自亲代,另一条链新合成。

保证了遗传信息忠实传递。

2.是一种逆转录酶,由RNA和蛋白质组成,能以所含的RNA为模板逆转录合成真核生物染色体的端粒DNA重复序列,保证染色体复制的完整性。

3.在DNA复制的起始阶段,由解螺旋酶和引物酶等一些酶和辅助蛋白质构成的一个基本功能单位,引发引物生成。

二、选择题

1.C2.D3.B4.B5.D6.E7.C8.C

三、填空题

1.DNA聚合酶;亲代DNA;dNTP

2.识别作用;校正作用

3.3;DNA-polⅢ;oriC;引发体;DNA-polⅢ;领头链;随从链

4.逆转录酶;蛋白质;RNA;RNA

四、简答题

1.随后链的合成过程

(1)DNA聚合酶Ⅲ催化冈崎片段从5’→3’生成。

(1分)

(2)引物酶合成RNA引物。

(1分)

(3)在引物的3’-OH端发生聚合反应,连接上dNTP,生成冈崎片段。

(1分)

(4)复制叉前进,形成许多冈崎片段。

(1分)

(5)引物消除后,短的冈崎片段由DNA连接酶连成完整的随后链。

(1分)

五、论述题

1.真核生物染色体DNA的复制与原核生物基因组DNA复制的不同之处

(1)复制起点原核生物为一个,真核生物为多个。

(2分)

(2)复制叉移动速度原核生物快(500bp/s),真核生物慢(50bp/s)。

(2分)

(3)复制方向原核生物双向,真核生物大多为双向。

(1分)

(4)RNA引物原核生物长(十几--几十个核苷酸),真核生物短。

(1分)

(5)冈崎片段原核生物长(1000--2000bp),真核生物短(100--200bp)。

(2分)

(6)连续起始原核生物可连续复制,真核生物不可以。

(2分)

第四章DNA损伤与修复

一、名词解释

1.   指依靠重组酶系将另一段未受损伤的DNA移到损伤部位,提供正确的模板,进行修复的过程。

2.  是碱基切除修复的一种特殊形式,可纠正复制和重组中的碱基配对错误及因碱基损伤所致的碱基配对错误、碱基插入、缺失等损伤。

二、选择题

1.D2.E3.D4.E5.C6.A7.B8.A

9.C10.A11.B12.D13.A14.E15.D16.E

三、填空题

1.导致DNA失去作为复制和转录的模板的功能;DNA的结构发生永久性的改变

2.环境因素(外源);生理因素(内源)。

3.DNA损伤程度;细胞的DNA损伤的修复能力

4.电离辐射;非电离辐射;电离辐射;非电离辐射。

5.纠正错配的碱基;清除DNA链上的损伤;恢复DNA正常结构

6.切除修复;碱基切除修复;核苷酸切除修复

7.同源重组;非同源末端连接重组

四、简答题

1. DNA损伤的因素包括

DNA的复制错误(0.5分)

电离辐射(0.5分)

紫外线(0.5分)

碱基类似物(0.5分)

碱基修饰剂(0.5分)

某些化学染料(0.5分)

自由基(0.5分)及病毒感染(0.5分)等

2. 直接修复(1分)、切除修复(1分)、重组修复(1分)、跨越DNA损伤的复制后修复(1分)。

第五章基因表达

一、名词解释

1.结构基因是指能转录出RNA的DNA区段。

2.Σ因子是RNA聚合酶的一个亚基,在转录中起识别起始位点的作用。

3.反式作用因子中,能直接或间接结合RNA聚合酶的,称为转录因子。

4.是分泌性蛋白N端的特征性氨基酸序列,由碱性氨基酸区、疏水氨基酸区和剪切位点组成,能够与细胞液中的信号肽识别颗粒相结合,使蛋白质进入分泌转运途径。

二、选择题

1.D2.E3.D4.E5.E6.C7.C8.B9.D10.C11.E12.C13.D14.C15.A16.D

三、填空题

1.启动子

2.剪切;剪接;碱基修饰

3.m7GpppG-;polvA

4.64、61、AUG、UAA、UAG、UGA

5.N端、C端、5′端、3′端

6.甲酰甲硫氨酸

四、简答题

1.

(1)翻译起始复合物的形成过程涉及mRNA、起始氨基酰-tRNA、核蛋白体和起始因子等因素的参与。

(1分)

(2)核蛋白体:

原核为70S(30S+50S);真核为80S(40S+60S)。

(1分)

(3)mRNA:

原核通过其SD序列结合16SrRNA,使mRNA在30S亚基上就位;真核通过其5’端帽子与帽子结合蛋白复合物相结合,使mRNA在40S亚基上就位。

(1分)

(4)起始氨基酰-tRNA:

原核是fMet-tRNA;真核是Met-tRNAiMet。

(1分)

(5)起始因子:

原核3种(IF1、IF2和IF3);真核10余种(eIFn)。

(1分)

五、论述题

1.

(1)基因组结构方面

1)原核基因组较小,无真正染色体结构;真核基因组庞大,染色体具有核小体结构。

(1分)

2)原核基因组无核膜包围;真核基因组位于细胞核内。

(1分)

3)原核生物结构基因是连续的;真核生物结构基因内部存在内含子。

(1分)

4)与原核生物相比,真核生物基因组中非结构基因区域所占比例很大。

(1分)

(2)转录方面

1)真核基因转录涉及核小体结构解聚过程。

(1分)

2)原核转录与翻译偶联;真核转录在细胞核中进行。

(1分)

3)原核1种RNA聚合酶(α2ββ'σ);真核3种RNA聚合酶(I、II、III)分别负责不同基因的转录。

(1分)

4)原核RNA聚合酶直接结合启动子,转录起始的特异性主要取决于σ因子;真核RNA聚合酶借助基础转录因子结合启动子,转录起始的特异性主要取决于特异转录因子。

(1分)

5)原核基因转录产物是多顺反子RNA;真核基因转录产物是单顺反子RNA。

(1分)

6)原核mRNA不需加工;真核mRNA需加帽、加尾、剪接、编辑。

(1分)

 

第六章基因表达调控

一、名词解释

1.有些蛋白可特异识别、结合自身基因的调节序列,并调节自身基因的开启或关闭,这种调节作用就是顺式作用。

2.RNA编辑指mRNA在转录后因插入、缺失或替换碱基而改变了DNA模板原来的遗传信息。

通过RNA编辑基因可以表达出多种氨基酸序列不同的蛋白质。

3.原核生物绝大多数基因按照功能相关性成簇串联排列,与启动子、操纵基因等调控元件共同组成一个转录单位,实现协调表达。

4.是原核生物中由核蛋白体调控转录终止的方式。

转录起始后由于翻译偶联,核蛋白体所处的位置影响着转录出的先导mRNA的二级结构,从而控制RNA聚合酶是否继续进行转录。

典型的例子是色氨酸操纵子的衰减作用。

二、选择题

1.A2.B3.A4.A5.A6.E7.D8.B9.E10.A11.C12.E13.C14.C15.E16.C

三、填空题

1.基因水平、转录水平、转录后水平、翻译水平、翻译后水平

2.管家基因、可诱导的、可阻遏的

3.反式作用因子

4.转录起始、启动子、RNA聚合酶、调节蛋白

5.去阻遏、转录衰减

6.细胞(或组织)、空间

7.DNA结合域、转录激活域

8.基本转录因子、特异转录因子

四、简答题

4.相同点:

转录起始是基因表达调控的关键环节。

(1分)

不同点:

(1)原核基因表达调控主要包括转录和翻译水平;真核基因表达调控包括染色质活化、转录、转录后加工、翻译、翻译后加工多个层次。

(1分)

(2)原核基因表达调控主要为负调节;真核基因表达调控主要为正调节。

(1分)

(3)原核转录起始不需要转录因子,RNA聚合酶直接结合启动子,由σ因子决定基因表达的特异性;真核转录起始需要基础、特异两类转录因子,依赖DNA-蛋白质、蛋白质-蛋白质相互作用,调控转录激活。

(1分)

(4)原核基因表达调控主要采用操纵子模型,转录出多顺反子RNA,实现协调调节;真核基因转录产物为单顺反子RNA,功能相关蛋白质的协调表达机制更为复杂。

(1分)

五、论述题

1.

(1)正调控的概念:

一些蛋白质如分解代谢基因活化蛋白(CAP)与操纵子DNA结合后,可促进转录过程。

(2分)

(2)cAMP对乳糖操纵子转录的调控:

在RNA聚合酶结合部位(P)上游附近有一个CAP的结合位点。

但只有CAP与cAMP结合后才能与该部位结合。

(2分)

当培养基中无葡萄糖而只有乳糖存在时,阻遏蛋白不与O序列结合,对基因表

达的抑制解除。

(2分)同时,细胞内cAMP水平增加,CAP与cAMP结合成cAMP-CAP复合物,然后与CAP结合部位结合,促进RNA聚合酶与启动子结合和进行转录。

(2分)

当培养基中乳糖和葡萄糖同时存在时,细胞内cAMP水平降低,cAMP-CAP复合物不能形成,游离的CAP不能与CAP结合部位结合,RNA聚合酶也不能与启动序列结合和进行转录。

(2分)

 

第七章细胞信号转导

一、名词解释

1.受体:

是在细胞膜上或细胞内能特异识别、结合配体的蛋白质分子。

2.第二信使:

细胞内的小分子信使物质称为第二信使,如cAMP、cGMP、Ca2+、DAG、IP3、Cer等。

3.在结构上均为单体蛋白,氨基端位于细胞膜外表面,羧基端在胞膜内侧,完整的肽链反复跨膜七次,故又名七次跨膜受体。

由于肽链反复跨膜,在胞外侧和胞内侧形成几个环状结构,分别负责接受外源信号的刺激和细胞内的信号传递。

其细胞质部分可以与三聚体G蛋白相互作用,其胞浆面第三个环能与鸟苷酸结合蛋白(G蛋白)偶联,通过不同的G蛋白影响腺苷酸环化酶或磷脂酶C,改变细胞内第二信使浓度,以实现跨膜信息传递。

此类受体通过G蛋白向下游传递信号,因此又称为G蛋白偶联受体。

4.是一类位于细胞膜胞浆面,能与GTP或GDP结合的膜蛋白,由α、β、γ三个亚基组成。

G蛋白有两种构型,三个亚基形成三聚体为非活化型,与GDP结合;与GTP结合的α亚基为其活化型,βγ亚基二聚体脱落。

活化的G蛋白能调节腺苷酸环化酶、磷脂酶C和某些离子通道等的活性。

二、选择题

1.D2.C3.C4.C5.C6.B7.C8.A9.A10.C11.B12.C13.D14.D15.C16.B

三、填空题

1、7;1

2、G蛋白藕联;酶连

3、磷脂酶C(PLC)

4、GTP酶;GTP;GDP

5、cAMP信号通路(以cAMP为第二信使的信号通路),

磷脂酰肌醇双信使信号通路(磷脂酰肌醇信号通路)

6、细胞内(细胞质内);3

7、腺苷酸环化酶(AC)

8、亲水性;亲脂性

四、简答题

1.受细胞内第二信使调控的蛋白激酶有:

(1)蛋白激酶A(cAMP);(1分)

(2)蛋白激酶C(IP3和DAG);(1分)

(3)Ca2+-CaM激酶(Ca2+);(1分)

(4)蛋白激酶G(cGMP)。

(1分)

2.配体与受体作用的特点有:

高度特异性(1分)、高亲和力(1分)、可饱和性(1分)、可逆性(1分)。

五、论述题

1.cAMP介导的信号转导途径:

如左图

 

第八章癌基因与抑癌基因

一、名称解释

1.癌基因最初的定义是指在体外引起转化,在体内引起肿瘤的一类基因,又称转化基因,癌基因包括病毒癌基因和细胞癌基因两类。

2.指存在于正常细胞内的一类可抑制细胞生长并具有潜在抑癌作用的基因,这类基因的缺失或失活导致细胞癌变。

3.原癌基因:

指一类存在于生物正常细胞基因组中的未激活的癌基因。

这类基因存在于正常细胞当中,并具有促进正常细胞生长、增殖、分化和发育等生理功能。

4.病毒癌基因:

指一类存在于肿瘤病毒中的,能使靶细胞发生恶性转化的基因

二、选择题

1.E2.C3.C4.D5.C6.A7.B8.B9.C10.D

三、填空题

1.启动序列;操纵序列;CAP结合位点;调节基因

2.细胞癌基因;病毒癌基因

3. 获得启动子与增强子;基因易位;基因扩增;点突变

四、简答题

1.根据细胞癌基因的表达产物可分为:

(1)表达蛋白激酶类,如生长因子受体。

(1分)

(2)表达生长因子样活性物质。

(1分)

(3)表达信息传递蛋白。

(1分)

(4)编码核内转录因子,可促进与细胞增殖有关的基因表达,从而产生细胞的增殖效应。

(1分)

2.抑癌基因表达产物主要有:

(1).跨膜受体(1分)

(2).胞质调节因子或结构蛋白(1分)

(3).转录因子和转录调节因子(1分)

(4).细胞周期因子(1分)

(5).DNA损伤修复因子以及其他一些功能蛋白。

(1分)

 

第九章基因重组与基因工程

一、名词解释

1.限制性核酸内切酶:

就是识别双链DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类核酸内切酶。

2.载体:

即基因载体,或称克隆载体,是在基因工程中为“携带”外源DNA、实现外源DNA的无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些都DNA分子,具有自我复制和表达功能。

因此,根据载体的功能和应用目的,可将其分为克隆载体和表达载体。

3.DNA克隆:

就是应用酶学的方法,在体外将各种来源的遗传物质(同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA)与载体DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分子——复制子,继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化细胞,再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子,即DNA克隆,又称基因克隆、重组DNA或基因工程。

4.目的基因:

应用重组DNA技术有时是为分离、获得某一感兴趣的基因或DNA序列,或是为获得感兴趣基因的表达产物——蛋白质。

这些感兴趣的基因或DNA序列就是目的基因,又称目的DNA。

5.基因组DNA文库:

存在于转化细菌内、由克隆载体所携带的所有基因组DNA片段的集合,称为基因组DNA文库。

基因组DNA文库含盖了基因组全部基因信息。

二、选择题

1.A2.B3.C4.D5.B6.B7.D8.B9.B10.D11.C12.A13.D14.C15.A16.A

三、填空题

1.分子水平上的操作、细胞水平上的表达

2.转座子

3.载体

4.原核表达体系、真核表达体系、以细胞培养物为受体、以整个真核生物个体为受体

5.乙肝疫苗、胰岛素

6.安全性、缺陷性、易感性

7.接合作用、转化、转导、转座

8.转化、转染、感染

四、简答题

1.目前获取目的基因的很足要途径和来源有:

①制备基因组DNA文库后从中筛选;②制备cDNA文库后从中筛选;③用PCR技术体外扩增目的基因片段;④化学合成已知序列的长度不是太大的DNA片段;⑤直接用限制酶从基因组DNA、或cDNA片段、或含目的基因的重组体上切取。

(每点1分)

五、论述题

1.

(1)质粒的特性:

质粒分子本身是含有复制功能的遗传结构,能在宿主细胞独立自主地进行复制,并在细胞分裂时恒定地传给子代细胞。

(1分)质粒带有某些遗传信息,所以会赋予宿主细胞一些遗传性状。

(2分)因为质粒DNA有自我复制功能及常携带一些有用的遗传信息,如抗药性等特性,故可作为克隆或表达外源DNA的载体。

(2)天然质粒作为基因载体必须具备的条件:

天然质粒是存在与细菌染色体外的小型环状双链DNA分子。

作为载体的质粒,必须对于天然质粒进行改造,加入所需的克隆位点、真核或原核表达元件或筛选标志;(2分)同时也需要筛选具有高拷贝数的松弛型质粒,才有实际的应用价值。

(1分)

第十章分子生物学实验技术

一、名词解释

1.是DNA定性及定量分析的方法之一,过程为提取细胞中的总DNA,用限制性内切酶水解后进行电泳,并转移到硝酸纤维素膜上,用DNA探针与结合在膜上的DNA分子退火形成双链,检测靶DNA的含量。

2.是RNA定性及定量分析的方法之一,过程为将细胞中的总RNA分子进行电泳分离,并转移到硝酸纤维素膜上,用DNA探针与结合在膜上的RNA分子退火形成双链,检测靶RNA的含量。

3.利用碱基互补配对,以已知的核酸片段作为探针,检测样本中是否存在及有多少与其互补的核酸序列,这是基因诊断最基本的方法,又称为核酸分子探针技术。

4.在人群中,某一RFLP或者主要存在于具有某一疾病基因的染色体上;或者主要存在于正常染色体上,这种非随机的遗传现象称为连锁不平衡。

5.在分子杂交中用来检测互补序列的带有标记的单链DNA或RNA片段。

二、选择题

1.C2.A3.A4.E5.A6.E7.B8.D9.E10.B11.D12.C13.B14.D15.D

三、填空题

1.变性、退火、延伸

2.模板DNA、TaqDNA聚合酶、引物、缓冲液、dNTP

3.原位杂交

4.DNA聚合酶Ⅰ、5’-3’外切酶、5’-3’合成酶

5.ddATP

6.Southern,DNA,Northern,RNA,western,蛋白。

四、简答题

2.1.限制性核酸内切酶:

是细菌产生的一类能识别和切割双链DNA分子内特定的碱基顺序的核酸水解酶(1分).

2.DNA连接酶:

将两段DNA分子拼接起来的酶(1分).

3.DNA聚合酶:

催化单核苷酸链延伸.(1分)

4.逆转录酶:

依赖于RNA的DNA聚合酶,这是一种有效的转录RNA成为DNA的酶,产物DNA又称互补DNA(1分).

5.末端脱氧核糖核酸转移酶:

将脱氧核糖核酸加到DNA的3末端(1分).

6.碱性磷酸酶:

催化去除DNA,RNA等的5磷酸基团(1分).

7.依赖DNA的RNA聚合酶:

识别特异性启动子,RNA转录(1分)

五、论述题

1.

(1)PCR技术实际上是在模板DNA,引物和4种脱氧核糖核苷三磷酸存在的条件下依赖于耐热DNA聚合酶的酶促合成反应。

(1分)

其原理主要有几个方面:

1)DNA合成需要引物,两条互补链上都需要引物;(1分)

2)DNA的复性与变性的原理;(1分)

3)PCR技术的特异性取决于引物和模板DNA结合的特异性。

(1分)

4)耐高温的DNA聚合酶的发现和运用。

(1分)

(2)PCR全过程包括三个基本步骤,即

1)双链DNA模板加热变性成单链(变性);(1分)

2)在低温下引物与单链DNA互补配对(退火);(1分)

3)在适宜温度下TaqDNA聚合酶催化引物3’-OH端加入脱氧核苷酸(延伸)。

(1分)

这三个基本步骤构成的循环重复进行,可以使特异性DNA的扩增率达到数百万倍。

(3)PCR技术的应用

1)分子生物学领域基因克隆;DNA序列测定;突变分析;基因重组;基因定量;鉴定转录调控序列;转座子插入位点的确定;检测基因的修饰;(1分)

2)临床医学领域病原体诊断;遗传病的基因诊断;器官移植;肿瘤诊断;法医学;(1分)

3)动植物学的研究;(0.5分)

其他领域如组织和群体生物学、古生物学等。

(0.5分)

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