各种培养基配方.docx
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各种培养基配方
146种培养基配方
1、牛肉膏蛋白胨培养基〔培养细菌用〕
牛肉膏
3g
蛋白胨
5g
氯化钠
10g
琼脂
15~20g
pH
7.0~7.2
水
1000mL
2、2、高氏〔Gause〕1号培养基〔培养放线菌用〕
可溶性淀粉
20g
硝酸钾
1g
氯化钠
0.5g
磷酸氢二钾
0.5g
硫酸镁
0.5g
硫酸亚铁
0.01g
琼脂
20g
水
1000mL
pH
7.2～7.4
配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边参加其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
查氏〔Czapek〕培养基〔培养霉菌用〕
硝酸钠
2g
磷酸氢二钾
1g
氯化钾
0.5g
硫酸镁
0.5g
硫酸亚铁
0.01g
蔗糖
30g
琼脂
15~20g
水
1000mL
pH
自然
121℃灭菌20min。
4、马丁氏〔Martin〕琼脂培养基〔别离真菌用〕
葡萄糖
10g
蛋白胨
5g
磷酸二氢钾
1g
七水合硫酸镁
0.5g
1/3000孟加拉红〔rosebengal，玫瑰红水溶液〕
100mL
琼脂
15—20g
pH
自然
蒸馏水
800mL
112℃灭菌30min。
临用前参加0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基〔简称PDA〕〔培养真菌用〕
马铃薯
200g
蔗糖〔或葡萄糖〕
20g
琼脂
15—20g
pH
自然
培养基的配制：
马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基
培养基的配制：
（1）、取大麦或小麦假设干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。
（2）、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
（3）、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
（4）、将滤液稀释到5—6波美度，pH约6.4，参加2%琼脂即成。
121℃灭菌30min。
7、无氮培养基〔自生固氮菌、钾细菌〕
甘露醇〔或葡萄糖〕
10g
磷酸二氢钾
0.2g
七水合硫酸镁
0.2g
氯化钠
0.2g
二水合硫酸钙
0.2g
碳酸钙
5g
蒸馏水
1000mL
pH
7.0—7.2
113℃灭菌30min。
8、半固体肉膏蛋白胨培养基
肉膏蛋白胨液体培养基
100mL
琼脂
0.35—0.4g
pH
7.6
121℃灭菌20min。
9、合成培养基
偏磷酸铵
1g
氯化钾
0.2g
七水合硫酸镁
0.2g
豆芽汁
10mL
琼脂
20g
蒸馏水
1000mL
pH
7.0
加12mL0.04%的溴钾酚紫〔pH5.2—6.8，颜色由黄变紫，作指示剂〕。
121℃灭菌20min。
10、豆芽汁蔗糖〔或葡萄糖〕培养基
黄豆芽
100g
蔗糖〔或葡萄糖〕
50g
水
1000mL
pH
自然
培养基的配制：
称新鲜豆芽100g，放入烧杯中，参加水1000mL，煮沸约30min，用纱布过滤。
用水补足原量，再参加蔗糖〔或葡萄糖〕50g，煮沸熔化。
121℃灭菌20min。
11、油脂培养基
蛋白胨
10g
牛肉膏
5g
氯化钠
5g
香油或花生油
10g
1.6%中性红水溶液
1mL
琼脂
15—20g
蒸馏水
1000mL
pH
7.2
121℃灭菌20min
注：
（1）、不能使用变质油。
（2）、油和琼脂及水先加热。
（3）、调好pH值后，再参加中性红。
（4）、分装时，需不断搅拌，使油均匀分布于培养基中。
12、淀粉培养基
蛋白胨
10g
牛肉膏
5g
氯化钠
5g
可溶性淀粉
2g
蒸馏水
1000mL
琼脂
15—20g
121℃灭菌20min
13、明胶培养基
牛肉膏蛋白胨液
100mL
明胶
12—18g
pH
7.6
在水浴锅中将上述成分溶化，不断搅拌。
溶化后调pH7.2—7.4。
121℃灭菌30min。
14、蛋白胨水培养基
蛋白胨
10g
氯化钠
5g
蒸馏水
1000mL
pH
7.6
121℃灭菌20min。
15、糖发酵培养基
蛋白胨水培养基
1000mL
1.6%溴钾酚紫乙醇溶液
1—2mL
pH
7.6
另配制20%糖溶液〔葡萄糖、乳糖、蔗糖等〕各10mL。
培养基的配制：
（1）、将上述含指示剂的蛋白胨水培养基〔pH7.6〕分装于试管中，在每管内放一倒置的小玻璃管〔Durhamtube〕，使之充满培养液。
（2）、将已分装好的蛋白胨水和20%的各种糖溶液分别灭菌，蛋白胨水121℃灭菌20min；糖溶液112℃灭菌30min。
（3）、灭菌后，每管以无菌操作分别参加20%无菌糖溶液0.5mL〔按每10mL培养基中参加20%的糖液0.5mL，那么成1%的浓度〕。
配制用的试管必须洗干净，防止结果混乱。
16、葡萄糖蛋白胨水培养基
蛋白胨
5g
葡糖糖
5g
磷酸氢二钾
2g
蒸馏水
1000mL
将上述各成分溶于1000mL水中，调pH7.0—7.2，过滤。
分装试管，每管10mL，112℃灭菌30min。
17、麦氏〔Meclary〕琼脂〔酵母菌〕
葡萄糖
1g
氯化钾
1.8g
酵母浸膏
2.5g
醋酸钠
8.2g
琼脂
15—20g
蒸馏水
1000mL
113℃灭菌20min。
18、柠檬酸盐培养基
磷酸二氢铵
1g
磷酸氢二钾
1g
氯化钠
5g
硫酸镁
0.2g
柠檬酸钠
2g
琼脂
15—20g
蒸馏水
1000mL
1%溴麝香草酚蓝乙醇液
10mL
培养基的配制：
将上述各成分加热溶解后，调pH6.8，然后参加指示剂，摇匀，用脱脂棉过滤。
制成后为黄绿色，分装试管，121℃灭菌20min后制成斜面，注意配制时控制好pH，不要过碱，以黄绿色为准。
19、醋酸铅培养基
pH7.4的牛肉膏蛋白胨琼脂
100mL
硫代硫酸钠
0.25g
10%醋酸铅水溶液
1mL
培养基的配制：
将牛肉膏蛋白胨琼脂100mL加热溶解，待冷却至60℃时参加硫代硫酸钠0.25g，调至pH7.2，分装于三角瓶中，115℃灭菌15min。
取出后待冷却至55—60℃，参加10%醋酸铅水溶液〔无菌的〕1mL，混匀后倒入灭菌试管或平板中。
20、血琼脂培养基
pH7.6的牛肉膏蛋白胨琼脂
100mL
脱纤维羊血〔或兔血〕
10mL
培养基的配制：
将牛肉膏蛋白胨琼脂加热熔化，待冷却至50℃时，参加无菌脱纤维羊血〔或兔血〕摇匀后倒平板或制成斜面。
37℃过夜检查无菌生长即可使用。
21、玉米粉蔗糖培养基
玉米粉
60g
磷酸二氢钾
3g
维生素B1
100mg
蔗糖
10g
七水合硫酸镁
1.5g
水
1000mL
121℃灭菌30min，维生素B1单独灭菌15min后另加。
22、酵母膏麦芽汁琼脂
麦芽粉
3g
酵母浸膏
0.1g
水
1000mL
121℃灭菌30min。
24、棉籽壳培养基
培养基的配制：
棉籽壳50%，石灰粉1%，过磷酸钙1%，水65%—70%，按比例称好料，充分搅拌均匀后装瓶，较薄地平摊盘上。
25、复红亚硫酸钠培养基〔远藤氏培养基〕
蛋白胨
10g
乳糖
10g
磷酸氢二钾
3.5g
琼脂
20—30g
蒸馏水
1000mL
5%碱性复红乙醇溶液
20mL
培养基的配制：
先将琼脂参加900mL蒸馏水中，加热溶解，再参加磷酸氢二钾及蛋白胨，使溶解，补足蒸馏水至1000mL，调pH至7.2—7.4。
参加乳糖，混匀溶解后，115℃灭菌20min。
称取亚硫酸钠置一无菌空试管中，参加无菌水少许使溶解，再在水浴中煮沸10min后。
立刻滴加于20mL5%碱性复红乙醇溶液中，直至深红色褪成淡粉红色为止。
将此亚硫酸钠与碱性复红的混合液全部加至上述已灭菌的并仍保持熔化状态的培养基中，充分混匀，倒平板，放冰箱中备用，贮存时间不宜超过2周。
26、伊红美蓝培养基〔EMB培养基〕
蛋白胨水培养基
100mL
20%乳糖溶液
2mL
2%伊红水溶液
2mL
0.5%美蓝水溶液
1mL
培养基的配制：
将已灭菌的蛋白胨水培养基〔pH7.6〕加热熔化，冷却至60℃左右时，再把已灭菌的乳糖溶液，伊红水溶液及美蓝水溶液按上述量以无菌操作参加。
摇匀后，立即倒平板。
乳糖在高温灭菌易被破坏必须严格控制灭菌温度，115℃灭菌20min。
27、乳糖蛋白胨培养液〔“水的细菌学检查〞用〕
蛋白胨
10g
牛肉膏
3g
乳糖
5g
氯化钠
5g
1.6%溴甲酚紫乙醇溶液
1mL
蒸馏水
1000mL
培养基的配制：
将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠加热溶解于1000mL蒸馏水中，调pH至7.2—7.4。
参加1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL，充分混匀，分装于有小倒管的试管中。
115℃灭菌20min。
28、石蕊牛奶培养基
牛奶粉
100g
石蕊
0.075g
水
1000mL
pH
6.8
121℃灭菌15min。
29、LB〔Luria-Bertani〕培养基
蛋白胨
10g
酵母膏
5g
氯化钠
10g
蒸馏水
1000mL
pH
7.0
121℃灭菌20min。
30、根本培养基
磷酸氢二钾
10.5g
磷酸二氢钾
4.5
硫酸铵
1g
二水合柠檬酸钠
0.5g
蒸馏水
1000mL
121℃灭菌20min。
需要时灭菌后参加：
糖〔20%〕
10mL
维生素B1〔硫胺素〕〔1%〕
0.5mL
七水合硫酸镁〔20%〕
1mL
链霉素〔50mg/mL〕4mL，终浓度200μg/mL
氨基酸〔10mg/mL〕4mL，终浓度40μg/mL
pH自然〔—7.0〕
31、庖肉培养基
培养基的配制：
（1）、取已去肌膜、脂肪之牛肉500g，切成小方块，置1000mL蒸馏水中，以弱火煮1小时，用纱布过滤，挤干肉汁，将肉汁保存备用。
将肉渣用绞肉机绞碎，或用刀切成细粒。
（2）、将保存的肉汁加蒸馏水，使总体积为2000mL，参加蛋白胨20g，葡萄糖2g，氯化钠5g，及绞碎的肉渣，置烧瓶摇匀，加热使蛋白胨溶化。
（3）、取上层溶液测量pH，并调整其到达8.0，在烧瓶壁上用记号笔标示瓶内液体高度，121℃灭菌15min后补足蒸发的水分，重新调整pH值8.0，再煮沸10—20min，补足水量后调整pH7.4。
（4）、将烧瓶内容物摇匀，将溶液和肉渣分装于试管中，肉渣约占培养基的1/4左右。
经121℃灭菌15min后备用，如当日不用，应以无菌操作参加已灭菌的石蜡凡士林，以隔绝氧气。
32、乳糖牛肉膏蛋白胨培养基
乳糖
5g
牛肉膏
5g
酵母膏
5g
蛋白胨
10g
葡萄糖
10g
氯化钠
5g
琼脂粉
15g
pH
6.8
水
1000mL
33、马铃薯牛乳培养基
培养基的配制：
200g马铃薯〔去皮〕煮出汁，脱脂鲜乳100mL，酵母膏5g，琼脂粉15g，加水1000mLpH7.0。
制平板培养基时，牛乳与其他成分分开灭菌，倒平板前再混合。
34、尿素琼脂培养基
尿素
20g
琼脂
15g
氯化钠
5g
磷酸二氢钾
2g
蛋白胨
1g
酚红
0.012g
蒸馏水
1000mL
pH
6.8±0.2
培养基的配制：
在蒸馏水或去离子水100mL中，参加上述所有成分〔除琼脂外〕。
混合均匀。
过滤灭菌。
将琼脂参加900mL蒸馏水或去离子水中，加热煮沸腾。
在15磅121℃灭菌15min。
冷却至50℃，参加灭菌好的根本培养基，混匀后，分装于灭菌的试管中，放在倾斜位置上使其凝固
培养基及成分
1.AcetobacterMedium（醋酸菌培养基）
Glucose（葡萄糖）100gYeasstextract（酵母膏）10g
CaCO320gAgar（琼脂）15g
Distilledwater（蒸馏水）1000mlAdjust（调）pHto6.8
适用范围：
恶臭醋酸杆菌混浊变种
2.NutrientAgar（营养肉汁琼脂）
Pepton（蛋白胨）5gBeefextract（牛肉膏）30g
NaCl5gAgar（琼脂）15g
Distilledwater（蒸馏水）Adjust（调）pHto7.0-7.2
[Note]：
WhencultivationofBacillus，5mgoftoMnSO4.H2Omaybeadded.
Itisfavorabletopromotesporeformation.
适用范围：
产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种〔青虫菌〕、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌〔大肠杆菌〕、铜绿假单胞菌〔绿脓杆菌〕、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌
3.AzotobacterMedium（固氮菌培养基）
KH2PO40.2gK2HPO40.8g
MgSO4.7H2O0.2gCaSO4.2H2O 0.1ｇ
Ｎa2MoO4.2H2OTrace（微量）Yeastaxtract（酵母膏）0.5g
Mannitol（甘露醇）20gFeCl3Tract（微量）
Distilledwater（蒸馏水）1000mlAgar（琼脂）15g
Adjust（调）pHto7.2
适用范围：
固氮菌、胶质芽孢杆菌
4.CornMealMedium（玉米粉培养基）
Maizeflour（玉米粉）5gPeptone（蛋白胨）0.1g
Glucose（葡萄糖）1gTapwater（自来水）1000ml
[Note]:
Boilthemixtureinautoclaveat121℃for1hr.distributethemediuminto18ⅹ18mmtubes,eachcontains10mloftheliquid,thenautoclaveat121℃for1hr.again（15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。
15磅再次灭菌15小时。
）
5.Lactic-bacteriaMediumI（乳酸菌培养基I）
Yeastextract（酵母膏）7.5gPeptone（蛋白胨）7.5g
Glucose（葡萄糖）10gKH2PO42g
Tomatojuice（西红柿汁）100mlTween（吐温）800.5ml
Distilledwater（蒸馏水）900mlpH7.0
适用范围：
植物乳杆菌〔胚芽乳杆菌〕、嗜热乳酸链球菌
6.Lactic-bacteriaMidiumⅡ（乳酸菌培养基Ⅱ）
Lacto-caseinpeptone（乳酪蛋白胨）10g
Beefextract（蛋白胨）10g
Yeastextract（酵母膏）5gGlucose（葡萄糖）5g
Tween（吐温）801gK2HPO42g
Na-acetate（醋酸钠）5gDiaminecitrate（柠檬酸二胺）2g
MgSO4.7H2O0.2gMnSO4.H2O0.05g
Distilledwater（蒸馏水）1000mpH6.5-6.8
适用范围：
植物乳杆菌〔胚芽乳杆菌〕
7.PeotoneGlucoseYeastextractMediumPGY〔蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基〕
Peptone〔蛋白胨〕10gYeastextract〔酵母膏〕5g
Glucose〔葡萄糖〕1gDistilledwater〔蒸馏水〕1L
8.GlycerolAgar〔甘油琼脂〕
Peptone〔蛋白胨〕5gBeefextract〔酵母膏〕3g
Glycerol〔甘油〕20gTopwater〔自来水〕1000ml
Agar〔琼脂〕15gpH7.0-7.2
9.Rhizobiummedium〔根瘤菌培养基〕AS9
Yeasteztract〔酵母膏〕1gSoileztract〔土壤浸提液〕200ml
Mannitol〔甘露醇〕10gAgar〔琼脂〕15g
Distilledwater〔蒸馏水〕800mlpH7.2
[Note]：
Soilextract：
Suspend50gfinelyanddriedgardonsoilin200mloftapwater.Autoclaveat121℃for1hr.Decantthroughcotton-cloth,fillerthoughpaper,makeupvolumeto200ml.Resterilizefor20minutesat121℃,thenmixedwithothringredientsanddistributed.（土壤浸提液的制法：
取土壤50克，加水200毫升，15磅蒸煮1小时，经滤纸过滤后加水补足到200毫升。
）
适用范围：
大豆根瘤菌〔慢生型〕、豇豆慢生根瘤菌、花生根瘤菌、紫云英根瘤菌、
大豆根瘤菌〔快生型〕、大豆根瘤菌、豌豆根瘤菌、苜蓿根瘤菌、田菁根瘤菌
10.MannitolAgar（甘露醇琼脂）
Yeastextract（酵母膏）5gPeptone（蛋白胨）3g
Mannitol（甘露醇）25gAgar（琼脂）15g
Distilledwater（蒸馏水）1000ml
11.GlucoseAsparagine〔葡萄糖、天门冬素琼脂〕
Glucose〔葡萄糖〕10gAsparagine〔天门冬素〕0.5g
K2HPO40.5gWater〔水〕1000ml
pH7.2-7.4
适用范围：
刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌〔绛红小单孢菌〕
12.Gause′sSyntheticAgar〔高氏合成一号琼脂〕
KNO31gSolublestarch〔可溶性淀粉〕20g
K2HPO40.5gMgSO4.7H2O0.5g
NaCl0.5gFeSO40.01g
Agar〔琼脂〕20gwater〔水〕1000ml
pH7.2-7.4
适用范围：
刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌〔绛红小单孢菌〕、白黄链霉菌、白色链霉菌、抗生链霉菌、双重轮丝链霉菌、产色链霉菌、烬灰链霉菌、天蓝色链霉菌、灭蚊链霉菌、红霉素链霉菌、青色链霉菌、球孢链霉菌、浅灰链霉菌、灰色链霉菌、吸水链霉菌、淡紫灰链霉菌、黄色长孢链霉菌、藤黄色链霉菌、细黄链霉菌、黑化链霉菌、玫瑰色链霉菌、华美链霉菌、嗜热链霉菌、委内瑞拉链霉菌、紫色直丝链霉菌、紫色链霉菌、绿色链霉菌
13.WortAgar〔麦芽汁琼脂〕
Dilutetheworld（withouthop）to12Brix.Add15gagarinto1000mlofthedilutedword..Melttheagarbyheating,thendistributethemediumintotubes.Autoclaveat110for30minutes.（将发酵啤酒的原料〔未加酒花〕，稀释至12柏林，加琼脂15克，溶化后分装。
15磅灭菌30分钟。
）
适用范围：
克鲁斯假丝酵母、郎比可假丝酵母、解脂假丝酵母、马其顿假丝酵母、拟热带假丝酵母、粗壮假丝酵母、皱褶假丝酵母、热带假丝酵母、产朊假丝酵母、阿舒假囊酵母、白地霉、果香地霉、地霉属、异常汉逊酵母、异常汉逊酵母变种、阿拉伯糖醇汉逊酵母、施氏汉逊酵母、菅囊酵母、伯顿毕赤酵母、膜醭毕赤酵母、粘红酵母、小红酵母、胶红酵母、深红酵母、卡尔斯伯酵母、酿酒酵母、椰园酿酒酵母、发酵性酵母、洛格酵母、罗斯酵母、鲁氏酵母多形鲁氏酵母、威尔酵母、酵母、路德类酵母、栗酒裂殖酵母、掷抱酵母、贝雷丝孢酵母、皮状丝孢酵母、糙孢曲霉、无壳曲霉、鲜橙曲霉、红曲霉、紫红曲霉、红色红曲霉、红曲霉菌
14.PotatoDextroseAgarPDA（马铃薯、葡萄糖琼脂）
Potatoextract（马铃薯汁
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