生长激素GH检测作业指导书医学查验.docx

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生长激素GH检测作业指导书医学查验

《文件已阅声明表》

《Procedurecirculationform》

文件名称:

生长激素（GH）检测作业指导书表号:

KM-MP03•02•02

已阅声明：

本人承诺已了解此文件中的相关内容,今后的工作中将严格按照此文件执行,不随意对外传阅此文件,如有因与文件不相符的操作,责任由本人承担。

（Ihaveunderstoodtherelevantcontentofthewillkeepthedocumentsecretandberesponsibletoproperlyperformprocedure）

阅读人签名表

姓名（NAME）

职务（POSITION）

签名（SIGNATURE）

签名日期（DATE）

文件修改记录页

（Procedureamendmentform）

表号:

KM-MP03•02•03

序号

NO.

页码（Page）

内容更改说明（DescriptionofModifiedcontents）

审批人

（Approvedby）

批准生效日期

（Approveddate）

1

换版

文件信息表

（Procedureinformationform）

表号:

KM-MP03•02•02

文件名称

TitleofDOC.（Doc.Code）

生长激素（GH）检测作业指导书（KM-SOP0300•349）

版本号

（EditionNo.）

Edition

生效日期（Operativedate）

2008-03-13

文控部门

（Doc.ControlDept.）

实验室文控室

回顾日期/签名（Reviewdate/signature）

回顾日期（Reviewdate）

回顾人员签名（Signature）

替代文件（Replaces）

生长激素（GH）检测作业指导书（Edition

存放地点（Location）/持有人（Holder）

No.Location（Holder）No.Location（Holder）

1实验室文控室（陈彬）

2化学发光室（段学成）

作者签名/日期（Authorsignature/date）

廖巍俊

审批人签名/日期（Authorizedby:

Signature/Date）

陈建波

接收人签名/日期

（Receiptor/Date）

副本数（copyNo.）

生长激素（GH）检测作业指导书

（StandardoperationprocedureforanalysisofGrowthHormone）

1.原理（Testprinciple）:

固相、双位点夹心法化学发光免疫量度检测。

固相（包被珠）包被有鼠单克隆hGH抗体，试剂含有碱性磷酸酶标记的兔抗hGH多克隆抗体。

试剂与样本中的hGH同时与包被有鼠单克隆hGH抗体的包被珠温育，形成抗体夹心复合物。

未结合的酶标记物经离心去除，最终加入化学发光底物，产生与结合酶成比例的光信号。

2.样本搜集和贮存（SpecimenCollectionandStorage）:

标本搜集（Specimencollection）:

类型（Ttype）:

血清（Serum）;用量（Volume）抽取不抗凝血分离的血清,仪器加样量（Samplingvolume）50μl（样本杯中样本量要超过样本用量至少100μL）。

搜集样本前，病人应空肚并休息30分钟。

拒收标本（Specimenrejection）：

推荐利用超速离心清除脂血（lipoprotein）样本。

溶血（hemolysis）样本提示样本在送达实验室之前处置不妥，因此检测结果将受到阻碍，应予以注意。

血清（serum）样本在未充分凝集前离心将致使纤维蛋白的存在。

为幸免纤维蛋白对结果的阻碍必需确保离心处置前样本已经完全充分凝集。

关于正在同意抗凝剂医治的病人样本，需要延长凝集时刻。

源于不同生产商的血样搜集试管，由于原材料和添加剂不同，包括凝胶或物理涂层、促凝剂和/或抗凝剂，可能致使取得不同的结果。

本试剂盒没有对所有可能应用的搜集管类型进行测试。

标本贮存条件（Samplestorage）：

冷藏8小时;冷冻2个月；十天后处置标本。

3、试剂（Reagent）：

美国IMMULITE原装试剂。

3.1.1试剂内组份（Components）：

试剂盒组分必需成套利用，条码为实验必需。

hGH检测单位（LGH1）

每一个带有条码的检测单位内有一个包被珠，包被有单克隆鼠抗hGH抗体。

2-8℃可稳固至失效期。

（Storedin2～8℃basedonmanufacturerinsturction）

LKGH1：

100个，LKGH5：

500个

打开包装之前应恢复至室温，从包装顶部剪开，完整保留拉链隆起缘。

利用后将拉链从头封好，幸免潮湿。

hGH试剂楔（LGH2）

试剂楔带有条码。

碱性磷酸酶标记的兔多克隆羊抗hGH抗体缓冲液，含防腐剂。

封盖低温保留：

2-8℃可稳固至失效期。

建议打开包装后在提示保留条件下30天内用完。

LKGH1：

1个，LKGH5：

5个

hGH校正（LGHL，LGHH）

两瓶（低、高）冻干的含hGH的非人血清基质，含防腐剂。

利用前至少30分钟复溶，每瓶加蒸馏水或去离子水。

轻轻翻转混匀，直到冻干粉全数充分溶解。

复溶后2~8℃可稳固30天，或-20℃可稳固6个月（分装）。

LKGH1：

1套，LKGH5：

2套

3.1.2未随试剂盒提供的组分

hGH样本稀释液：

（LGHZ）

用于人工稀释病人样本。

每瓶25mL，为不含hGH的非人血清/缓冲液基质，含防腐剂。

开封后，2~8℃可稳固30天，或-20℃可稳固6个月（分装）。

LSUBX：

化学发光底物

LPWS2：

探针清洗液

LKPM：

探针清洗试剂盒

LCHx-y：

样本杯架（带条码）

LSCP：

样本杯（一次性）

LSCC：

样本杯盖（可选）

CON6：

三水平，多成份质控。

其它必需：

样本加样戏管、蒸馏水或去离子水、质控。

试剂预备：

将试剂从冰箱中掏出并平稳至室温；不同批号的试剂不能混用；新试剂与前一批号试剂不同，那么需做样本结果的比对，并记录，不同在许诺范围内方可利用。

Putreagentfromrefrigeratorytoroomtemperatureforpropertime;Newreagentlotsmustbetestedinparallelwitholdlotsbeforeorconcurrentlywithbeingplacedinservicetoensurethatthecalibrationofthenewlotofreagenthasmaintainedconsistentresultsforpatientspecimens.Recodtheresults.

4仪器（Instrument）：

IMMULITE.

仪器预备（Prepareapparatus）：

利用前将仪器的液体与固体垃圾清空；加入足够的蒸馏水，清冼液，底物及样本杯。

然后运行仪器操作软件。

而后排水及底物，避免内有残留气柱。

将仪器的试剂盘中加入所需的试剂。

5.平安防范（SafetyPrecautions）：

操作时必需穿着手套和

工作服；工作后的台面应消毒擦洗；用过的加样枪头等耗材应作为医用垃圾处置；为了幸免形成气溶胶，所有样品尽可能不要在空气当中暴露太长时刻；碰到样本洒出，被污染的区域应当即用次氯酸钠溶液清洗，擦拭用的物品应抛弃在标有生物污染的垃圾筒中。

6校准（Calibration）：

校准品贮存和利用（Calibrationmaterialstorageandusage）：

美国IMMULITE原装校准品。

要求在有效期内利用，过时的校准液应停止利用，保留于2-8℃可稳固到有效期。

Stopusingoverduecalibrationitwithinexpirationdate,storagein2-8℃

配制（Calibrationmaterialredissolve）：

开封后用有盖小子弹头分装600μL/个，标明开封日期，校准品批号，分装人和有效日期，于－20℃冻存备用。

Labelconfectingdate,calibrationlot,personwhoconfected,expiration

开封后校准品成份的稳固性：

保留于15~25℃，可稳固8小时

保留于2~8℃，可稳固2天

保留于（-15）~（-25）℃，可稳固1个月（不可反复冻融）。

当以下任何一种情形显现时，请从头校准：

（Ifoneofthetwohappens,recalibration）

（1）试剂批号改变（Reagentlotchanges）

（2）依照质控需要进行校准（Recalibrationbasedonqualitycontrolproblem）

（3）校准周期（Frequencyofcalibration）：

两周（Twoweeks）。

步骤：

在运算机屏幕上选择kitEntry项，用扫码器扫描药盒上的条码，选择PatientEntry项，输入校正信息.然后将两个样本杯中别离加入至少600ul的A，B校准品，放在加样履带上。

点击GO。

仪器自动识别校准是不是通过，可是每次做校准后，必需跟做所有浓度的质控，如质控在控那么校准通过。

校准结果判定标准:

仪器自动识别校准是不是通过，可是每次做校准后，必需跟做所有浓度的质控，如质控在控那么校准通过。

7操作进程（ProceduralSteps）：

将从标本组取回的带有编号的血清标本离心取血清.本项目编号为2xxx（一个x代表一个阿拉伯数字）。

掏出空样本杯架，将空的样本杯放入样本杯架上。

将离好的血清加入对应的样本杯中。

将样品杯放到进样链条的箭头处，其后放入hGH反映杯。

在Worklist

Enter中输入样品杯中样品相对应的实验号。

结果出来后，打印机自动打印出结果，作为原始记录加以保留，而且操作者要签上名字及操作日期。

数据联机入系统（senddatatoLIS）

数据审核（datacheckup）：

联机是不是正确？

对照申请表格与仪器LIST中的实验号和加样杯号是不是一一正确对应，原始导出结果与系统结果是不是对应。

8质量操纵（Qualitycontrol）：

利用CON6做中值和高值质控。

当室内质控失控时，重取质控品从头检测一次；假设室内质控仍不能知足要求，那么检查校准是不是过时，从头校准，再检测室内质控；仍不能知足要求时，那么做期间核查，检查仪器是不是正常。

室内质控操作进程：

从冰箱冷冻格拿出的分装质控品必需放置室温半小时以上，每次用量至少180ul，上机操作同日常标本。

GH最大许诺误差ALE为20%，室内质控CV为%（低）、%（高），偏移为%,进程稳固性<2%.依照公式:

△SEc=（ALE-Bias）/利用计算软件可得,低值选择的质控规那么:

13s/22s/R4s/41sN=2;高值选择的质控规那么13s/22s/R4s/41sN=2,当质控失控时，应依照《室内质量操纵程序》处置

9计算（Calculations）：

N/A

10参考范围：

（Referenceinterval）

男性：

<1ng/mL

女性：

<10ng/mL

11结果说明：

（InterpretationofResults）

生长激素在下丘脑垂体腺的分泌为偶然发生和跳跃性的，而且发觉正常个体的刹时浓度水平高达40ng/mL。

因为在正常人血清中，两次刹时的高浓度水平之间的浓度相当低，因此要将病人异样的低水平数值与正常个体偶然降低的正常范围的低限区别开来，就必需有很高的灵敏度。

因此不管是基础水平仍是随机的浓度水平都仅能为临床提供很少的诊断信息。

在某些个体中，有两种方式能够更好地监控自发生长激素的分泌：

一是利用持续的抑制调控装置；二是在12~24小时那个时期内每隔20~30分钟抽取病人血清检测其生长激素水平并将结果作图分析。

许多刺激性实验即依照预定的实验方案刺激或抑制激素的释放，一样也能够用来评定生长激素的分泌状态。

12方式的局限性（MethodLimitations）：

病人在同意生长激素医治时可能致使产生生长激素抗体，从而对实验产生干扰并致使显现假性低水平。

人血清中的嗜异性抗体会与试剂盒组分中的免疫球蛋白发生反映，从而干扰体外免疫检测【见BoscatoLM，Stuartantibodies:

aproblemforallChem1988:

34:

27-33】。

常常接触动物或动物血清制品的病人样本可证明这种潜在致使异样结果干扰的存在。

已经证明这些试剂能够将这种风险最小化，可是少数情形下血清与实验组分之间潜在的交叉反映仍是会显现。

为达到诊断目的，次实验的检测结果要与临床检查、病史和其它的检查结合利用。

周密度（Precision）:

批间周密度:

MeanSDCV%

%

%

批内周密度:

选择医学决定水平周围的病人样本,在相当短的时刻测定10个数据,测按时带质控,且质控在控:

经统计,得:

（此为CPS值）

MeanSDCV%

%

灵敏度（Sensitivity）：

mL

分析测试范围（AMR）：

~40ng/mL

病人结果报告范围（CRR）：

~160ng/mL

稀释（Dilution）：

需要手工稀释的样品，用去离子水将样本用水稀释4倍（加150uL水，50uL血清稀释），其他操作跟样本操作相同。

最大稀释倍数为4倍。

稀释材料（Dilutionmaterial）:

去离子水

最大稀释倍数（Dilutiontimes）:

1:

4（50ulSample:

150ulDiluent）

干扰物质（InterferingSubstances）：

胆红素阻碍（Bilirubin）：

样本中胆红素的浓度直至20mg/dl，对检测结果无阻碍。

溶血阻碍（Hemolysis）：

样本中血红蛋白的浓度直至500mg/dL，对检测结果无阻碍。

脂血阻碍（Lipoprotein）：

样本中甘油三酯的浓度直至3000mg/dL

，对检测结果无阻碍。

注意事项（Notices）。

仅供体外诊断利用（Useonlyforinvitrodiagnosis）。

●试剂：

2～8℃保留。

其处置应遵守相应的法律规定。

●关于所有组份都要将其视为传染原，依照全世界传染病预防法来处置和防范。

源自人血的原材料全数通过查验，与梅毒、HIV1&2抗体、HBsAg和HCV抗体没有反映。

●加入浓度小于0.1g/dL的叠氮钠作为防腐剂。

其处置方法应采纳在铅或铜质容器中以大量水冲洗，幸免易爆的金属叠氮化合物聚集而产生潜在爆炸危险。

●化学发光底物：

幸免污染和日光直射。

（参见说明）

●水：

利用蒸馏水或去离子水

13临床意义：

（ClinicalSignificance）

GH升高常见于：

垂体ＧＨ瘤（肢端肥大症及巨人症），异位ＧＨ分泌综合征，ＧＨ不灵敏性侏儒症，营养不良，肾衰，长期禁食，应激状态，低血糖猛烈活动等。

降低：

垂体性侏儒症，全垂体功能消退症，肾上腺皮质功能亢进症等。

14参考文献：

（References）

1BoscatoLM，Stuartantibodies:

aproblemforallChem1988:

34:

27-33

2IMMULITEGrowthHormone试剂说明书

3中华医学查验全书

4IMMULITE操作说明书