医学功能学科试验教学大纲.docx
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医学功能学科试验教学大纲
医学功能学科实验教案
实验一实验绪论
【目的要求】
1．掌握功能学实验的性质、目的和要求。
2．了解根据实验的性质选择合适的实验动物与操作方法。
3．了解机能学学实验设计的原则和方法。
【内容与项目】
多媒体电教片
【教学方法】
教师讲授
【教学时数】
2学时。
实验二胃肠道平滑肌收缩
【目的要求】
1．学习哺乳类动物离体器官实验方法。
2．观察哺乳动物离体消化道平滑肌的一般特性。
3．观察与掌握不同药物对消化道平滑肌的作用。
【内容与项目】
1．十二指肠处取长3～4cm的肠管，在器官浴槽内一端用蛙心夹固定，另一端用小钩钩住，通过丝线连于张力换能器上。
2．观察肠管的紧张性（基线的高度）、收缩幅度和蠕动频率等指标。
3．待空肠平滑肌张力稳定后，在器官浴槽内加入1:
10,000肾上腺素1～2滴，观察和记录离体空肠平滑肌的变化。
4．洗涤标本3次，每15分钟一次。
5．待空肠平滑肌张力恢复到基线水平后，加入1:
10,000乙酰胆碱1～2滴，观察和记录20分钟离体肠段平滑肌的变化。
6．待空肠平滑肌张力稳定后，再次加入阿托品和1:
10,000乙酰胆碱各1～2滴，观察和记录其对肠段平滑肌的影响。
7.将器官浴槽内的温水换成室温的水，台氏液换成室温台氏液，停止供氧。
观察和记录此时肠
段平滑肌的影响。
【教学方法】
离体器官实验、学生操作、实验报告。
【教学时数】
3学时。
实验三运动神经兴奋与骨骼肌收缩
【目的要求】
1．利用蟾蜍的坐骨神经-腓肠肌标本，分析与记录神经干复合动作电位和肌肉单收缩和复合收缩产生的机制。
2．分析复合动作电位的幅值与刺激强度的关系，以及测量复合动作电位的潜伏期、时程和幅值。
3．熟悉蟾蜍的坐骨神经-腓肠肌标本制作。
【内容与项目】
1．记录神经干复合动作电位。
2．测量最大刺激时的复合动作电位的潜伏期、时程和幅值。
3．把记录电极与刺激电极的位置交换，在相同刺激条件下，比较两者的曲线。
4．将5%普鲁卡因浸泡过棉球置于刺激和引导记录电极间,记录动作电位值变化。
5．在两记录电极间，用金属镊子夹毁神经，记录单相复合动作电位。
6．逐渐增大刺激强度，直到复合动作电位不随刺激强度而变化。
7．测量复合动作电位的潜伏期1；测量复合动作电位的潜伏期2。
8．神经干复合动作电位和骨骼肌单收缩与刺激强度的关系。
9．测量神经干复合动作电位以及腓肠肌单收缩的潜伏期、时程和幅值。
比较神经干复合动作电位和腓肠肌单收缩的潜伏期、时程和幅度的差异。
10．记录骨骼肌的收缩期复合和舒张期复合的曲线（双次刺激标本）。
11．记录骨骼肌的不完全强直收缩和完全强直收缩的曲线（多次刺激标本）。
12.测量神经纤维的相对不应期和绝对不应期。
【教学方法】
动物实验、学生操作、实验报告。
【教学时数】
5学时。
实验四人体多功能生理指标检测与测定
【目的要求】
1．掌握心音、血压和心电图的成因和特点，掌握肺通气量和人体腱反射的测定方法。
2．熟悉心音听诊的部位和方法，熟悉心电图描记以及血压测量的原理与方法。
3．了解心电图各波的意义。
【内容与项目】
1．人体心电图的描记原理。
2．心音的听诊部位及意义。
3．动脉血压间接测定法的原理和方法。
4．肺通气量的测定及意义。
5．人体腱反射的测定及意义。
【教学方法】
课堂讲授、学生操作、课堂讨论与总结
【教学时数】
4学时
实验五血压调节与心血管药物作用分析
【目的要求】
1．掌握哺乳类动物急性实验的常规操作，动脉血压和中心静脉压的直接测量法。
2．掌握某些重要的生理性神经、体液因素对心血管活动的影响。
3.熟悉动物失血对心血管活动的影响。
4.了解PowerLab8S记录仪的工作原理及使用注意事项。
【内容与项目】
1．观察并同时记录正常动脉血压、心电图、心率和（及减压神经放电活动）。
2．观察记录夹闭和放松颈总动脉、静脉注射去甲肾上腺素和硝普钠对动脉血压、心率和减压神经放电活动的影响。
3．对减压神经进行刺激，观察和记录刺激前后各动脉压和心率的变化。
4．结扎左侧兔耳的交感神经和在靠中枢端（脊髓胸段）剪断交感神经，比较两耳血管网情况。
用连续电刺激对左侧交感神经的外周端进行刺激，再比较两耳血管网的扩张充血情况。
5．结扎左侧迷走神经，靠近中枢端剪断，用刺激保护电极刺激迷走神经的外周端（近心端），观察和记录刺激前后血压、心率和心电图波形变化。
再结扎右侧迷走神经，靠近中枢端剪断，用刺激保护电极刺激迷走神经的外周端（近心端），察和记录刺激上述指标变化；由耳缘静脉注射0.1%阿托品0.2ml/kg,再刺激迷走神经外周端，观察和记录血压、心率和心电图波型变化。
6．由耳缘静脉分别注射1:
100,00肾上腺素1ml/kg、1:
100,00异丙基肾上腺素1ml再观察和记录。
7．由耳缘静脉分别注射2.5%妥拉唑啉0.3ml/kg、0.1普柰洛尔0.3ml/kg后，停药2分钟后再给1:
100,00肾上腺素1ml/kg或1:
100,00去甲肾上腺素1ml/kg，分别观察、受体激动剂和拮抗剂对心血管活动的影响和记录。
8．动脉放血40ml，观察动脉血压、心率和减压神经活动的变化。
【教学方法】
动物实验、学生操作、课堂讨论、实验报告。
【教学时数】
5学时。
实验六动物一侧迷路破坏的效应与人体前庭功能观察
【目的要求】
1．掌握侧迷路功能定位及其对躯体运动的支配特点。
2．熟悉豚鼠一侧迷路破坏时对调节动物姿势中的重要作用。
3．了解观察和记录动物实验结果的方法。
4．人体前庭功能分析。
【内容与项目】
1．麻醉豚鼠的一侧迷路：
使动物侧卧，用滴管向内耳道深处滴入氯仿0.5ml。
2．麻醉后观察动物眼球震颤、自由活动。
3．人体前庭检查。
【教学方法】
动物实验、学生操作、实验报告。
【教学时数】
3学时。
实验七实验性酸碱平衡紊乱与急救
【目的要求】
1．掌握机体酸碱平衡调控机制与血气分析。
2．掌握实验性酸碱平衡紊乱的动物模型复制的方法和原理。
3．熟悉动物在酸碱平衡紊乱时机体的功能变化和血气指标改变。
4．了解纠正酸碱平衡紊乱的治疗方法。
【内容与项目】
1．观察和记录生理状态下，酸碱平衡的呼吸、血压和血气指标。
2．通过给动物注入2.5%乳酸溶液20-30ml/kg复制代谢性酸中毒，观察和记录呼吸、血压和血气指标的变化。
用碱性药物纠正酸中毒。
3．通过给动物注入NaHCO3复制代谢性碱中毒，观察和记录呼吸、血压和血气指标的变化。
用酸性药物纠正碱中毒。
4．通过动物的不完全窒息制造呼吸性酸中毒，观察和记录呼吸、血压和血气指标的变化。
【教学方法】
动物实验、学生操作、课堂讨论、实验报告。
【教学时数】
4学时。
实验八缺氧实验
【目的要求】
1．掌握不同缺氧类型主要的发病原因和机制。
2．观察不同类型缺氧时呼吸、皮肤粘膜颜色、活动以及氧分压的改变。
3．了解机体功能、代谢特点与缺氧对机体影响的关系。
【内容与项目】
1．年龄因素对缺氧耐受性的影响。
2．低张性缺氧实验。
3．一氧化碳中毒。
4．亚硝酸钠中毒。
5．氰化钾中毒。
6.药物对耗氧量的影响
1）甲鼠腹腔注射0.9%NaCL0.03ml/g；
2）乙鼠腹腔注射0.025%氯丙嗪0.03ml/g；
3）丙鼠腹腔注射0.1%普萘洛尔0.03ml/g；
4）丁鼠皮下注射0.05%盐酸异丙肾上腺素0.04ml/g。
【教学方法】
动物实验、学生操作、课堂讨论、实验报告。
【教学时数】
4学时。
实验九血细胞渗透脆性与家兔DIC造病
【目的要求】
1．观察不同浓度的溶液对红细胞稳定性影响，掌握渗透的作用与意义。
2．通过DIC动物模型的复制，掌握DIC的病因及发病机制。
3．熟悉急性DIC各期血液凝固性的变化，及其这些变化的原因及其病理意义。
4．了解DIC的诊断标准，熟悉常用的实验室检查指标及其意义。
【内容与项目】
1．正常对照的各项指标的血标本的制备和检测。
2．血细胞渗透脆性实验：
采集的抗凝血依次加入12支试管内，各1滴血，观察各管的颜色变化和显微镜下观察RBC形态变化，比较其差别。
3．DIC的造病：
（1）经耳缘静脉注入兔脑匀浆，注射过程中发现动物突然挣扎、呼吸急促，应立即停止推注并及时采血。
（2）采集血样：
在全量兔脑匀浆注射完毕后的立即和注射后30或45min时各采血样一次。
（3）血凝检测：
血小板计数，白陶土部分凝血活酶时间（KPTT）、凝血酶原时间（PT），凝血酶时间（TT）、血浆鱼精蛋白副凝试验（3P试验）和纤维蛋白原含量的测定。
【教学方法】
动物实验、学生操作、课堂讨论、实验报告。
【教学时数】
4学时。
实验十呼吸运动调节与实验性急性呼吸衰竭
【目的要求】
1．掌握家兔正常呼吸运动、肺通气变化和血气变化的观察和测定方法。
2．掌握多因素（气道狭窄、增大无效腔，缺氧，吸入高浓度CO2）对呼吸运动曲线变化的机制。
3．熟悉气胸形成后，对呼吸运动与肺通气的变化的影响。
4．了解肺水肿和急性呼吸衰竭模型的复制方法，呼吸中枢药物应用的原则和血气变化测定。
【内容与项目】
1．观察并记录一段正常时呼吸、血压曲线和血气分析。
2．气道狭窄；吸入氮气、高浓度CO2，观察和记录刺激前后各通道的波形变化和黏膜颜色。
3．气道延长，观察和记录刺激前后各通道的波形变化。
4．从耳缘静脉快速注射3%乳酸1ml，观察和记录刺激前后各通道的波形变化,用碱性药物纠正酸中毒。
5．通过给动物注入NaHCO3复制代谢性碱中毒，观察和记录呼吸、血压和血气指标的变化。
用酸性药物纠正碱中毒
6．开放性气胸、张力性气胸，观察和记录各通道的波形变化、血气分析和黏膜颜色改变。
7．静脉快速注入大量生理盐水（油酸/葡萄糖），之后将肾上腺素缓慢静脉推注复制实验性肺水肿。
观察和记录各通道的波形变化、血气分析和黏膜颜色改变。
呼吸衰竭出现后，静脉内注射呼吸中枢兴奋药，观察和记录各通道的波形变化、血气分析和黏膜颜色改变。
【教学方法】
动物实验、学生操作、课堂讨论、实验报告。
【教学时数】
5学时。
实验十一生理与药物因素对尿液生成的影响
【目的要求】
1．掌握生理性影响尿生成的各种因素，并分析其作用机制。
2．掌握非生理性因素对动脉血压和尿生成量的影响。
3．熟悉输尿管插管和尿比重、尿液成分分析的方法。
【内容与项目】
1．观察并同时记录正常动脉血压，每分钟的尿液流量和尿比重。
2．耳缘静脉迅速注射37℃的生理盐水20ml，记录尿流量和尿比重的变化。
3．耳缘静脉注射1:
10,000去甲肾上腺素0.1～0.2ml，记录尿流量的变化。
4．耳缘静脉注射葡萄糖，进行尿糖定性试验和尿比重测定。
5．静脉注射酚红溶液，记录从开始注射酚红到尿中排出酚红所需要的时间。
6．静脉注射垂体后叶素2～4单位。
观察和记录动脉血压和每分钟尿流量的变化。
7．耳缘静脉注射速尿5ml/kg，记录注射速尿前后的血压和尿流量变化。
8．结扎左侧迷走神经，靠近中枢端剪断，用刺激保护电极刺激迷走神经的外周端，观察和记录动脉血压和每分钟尿流量的变化。
9．耳缘静脉注射庆大霉素4.5ml/kg（4500U/kg），记录注射庆大霉素前后的血压和尿流量变化，特别注意肌张力和呼吸等表现。
10．从动脉插管的侧管放出20ml的血液，观察和记录动脉血压和每分钟尿流量的变化。
【教学方法】
动物实验、学生操作、课堂讨论、实验报告。
【教学时数】
5学时。
实验十二消化道运动功能的扩展性自主设计实验
【目的要求】
1．通过学生自主进行扩展性实验设计并进行实践操作，以掌握实验设计的基本原则，培养和提高独立思考，分析解决问题的能力。
2．设计实验，在整体或离体组织分析辣椒素等食物或植物药物成份对胃肠运动功能的影响及其机制3．在实验过程中，观察消化道动力的各种变化，分析和掌握其发生的主要原因和机制。
【内容与项目】
1．立题：
以实验小组为单位，集体酝酿、讨论确立实验实施方案。
2．复制消化道动力实验模型。
3．按实验设计方案完成实验操作步骤和指标观察。
4．对实验中出现的各种观察指标变化进行分析，探讨其变化的发生机制。
【教学方法】
扩展性动物实验操作、多媒体汇报实验结果与分析、答辩、实验报告。
【教学时数】
10学时。
实验十三泼尼松龙和阿司匹林的辨别及药效测定
【目的要求】
1．掌握疼痛和抗炎药效的测定。
2．熟悉甾体类和非甾体类抗炎药物的鉴别。
3．了解实验设计的基本原理及统计方法。
【内容与项目】
1．光电致痛法：
确定用药前的基础痛阈值。
腹腔注射泼尼松龙注射液、阿司匹林、等容量生理盐水，观察用药前后痛阈的变化。
2．鼠耳肿胀致炎法：
将小鼠腹腔注射泼尼松龙注射液、阿司匹林、等容量生理盐水后，复制炎性水肿，观察用药前后肿胀度变化。
【实验动物】
小白鼠，体重18~22g。
【药品与器材】
0.125%泼尼松龙注射液、1.5%阿司匹林、生理盐水、巴豆油（内含2%巴豆油、20%无水乙醇、5%蒸馏水和73%乙醚）、苦味酸。
剪刀、镊子、注射器1ml×3、5号针头×3、鼠瓶×2、测痛仪、9mm打孔器、天平。
【实验步骤】
1．给药方法：
0.125%泼尼松龙注射液0.1ml/10g、1.5%阿司匹林0.1ml/10g、等容量生理盐水均腹腔注射。
2．光电致痛法：
将小鼠置入鼠瓶内，拉出尾巴，塞紧瓶盖，将鼠尾平放入光辐射热测痛仪沟槽中，待鼠安静不动后，按下测痛仪开关，光照鼠尾下1/3处，记录从光照开始到甩尾的时间作为痛阈值。
每只小鼠测痛阈2次（间隔12min），取其均值作为用药前的基础痛阈值。
挑选痛阈值在520秒的小鼠，腹腔注射药物或生理盐水，15分钟后用同样方式光照2次，取其平均值，观察用药前后痛阈的变化。
正常痛阈<5秒或>20秒者，剔除不用。
用药后痛阈>30秒者，以30秒计算。
3．鼠耳肿胀致炎法：
将小鼠腹腔注射药物或生理盐水，1h后各小鼠左侧耳壳前后两面均匀涂抹巴豆油合剂致炎0.03ml/只，另侧耳作对照，记录时间。
1h后，将小鼠脱颈致死，沿耳廓基线剪下两耳，用打孔器于同一部位分别各打一个耳片并称重。
将致炎一侧耳片重量减去对照一侧耳片重量即为肿胀度，观察用药前后肿胀度变化。
涂致炎剂的部位与取下的耳片相吻合。
打孔器应锋利。
【教学方法】
动物实验、学生操作、绘图计算、课堂讨论、实验报告。
【教学时数】
4学时。
实验十四有机磷酸酯类中毒、解救及胆碱酯酶活性测定
【目的要求】
1．掌握动物有机磷酸酯类的中毒症状及阿托品和解磷定的解救作用。
2．从整体水平和分子水平掌握内源性神经递质-乙酰胆碱对M胆碱受体的作用。
3．熟悉胆碱酯酶活力的测定方法以及酶活力的表示方法。
4．了解实验动物在中毒前后及用不同药解救胆碱酯酶活力的变化规律。
【内容与项目】
1．家兔正常呼吸、瞳孔、吐液分泌、尿粪排泄、肌震颤、血压等生理体征观察与记录，血样集与胆碱酯酶活力测定。
2．复制动物有机磷酸酯类的中毒模型，观察与记录中毒的症状与体征。
3．之后，立即静脉注射阿托品和碘解磷定，观察并记录中毒症状有何变化。
4．血液标本采集。
5．胆碱酯酶活力测定。
【教学方法】
动物实验、学生操作、课堂讨论、实验报告。
【教学时数】
4学时。
实验十五药代动力学参数测定
【目的要求】
1．观察与掌握药物对胆碱M受体激动作用和竞争性拮抗作用。
2.理解受体的亲和力、内在活性概念以及受体动力学参数Kd、pD2、Emax及pA2的计算和意义。
【内容与项目】
1．在器官浴槽内悬挂离体空肠段，并与张力换能器相连。
给离体空肠段施加预张力1g。
2．离体空肠段在器官浴槽内孵育30分钟。
期间每隔15分钟洗涤一次，连续3次。
2．待空肠平滑肌张力稳定后，在器官浴槽内依次从低浓度到高浓度加入卡巴胆碱（10-6、10-5、10-4、10-3、10-2mol/L），观察和记录离体空肠平滑肌的变化。
3．洗涤标本3次，每15分钟一次。
4．待空肠平滑肌张力恢复到基线水平后，加入终浓度为310-7mol/L的阿托品，观察和记录20分钟离体空肠平滑肌的变化。
5．待空肠平滑肌张力稳定后，再次从低浓度到高浓度依次加入卡巴胆碱，观察和记录其对空肠平滑肌的影响。
6.比较在加入阿托品前和后空肠平滑肌对卡巴胆碱的反应。
【教学方法】
离体器官实验、学生操作、实验报告。
【教学时数】
4学时。
实验十六生理与病理状态的半数致死量测定（LD50）
【目的要求】
1．掌握药物半数致死量（LD50）的测定原理及基本实验设计。
2．掌握半数致死量测定的基本方法。
3．了解创新药临床前药理、毒理研究的基本要求。
【内容与项目】
LD50的测定（简化机率单位法）
1．半数致死量的概念和意义。
2．动物的分组方法：
取小白鼠20只，称重，随机分为2个不同状态组，每组10只。
3．其中1组动物分别注射肾上腺素为病理状态组。
4．再将每组动物随机分为5个剂量组，每组2只。
5．各组分别腹腔注射不同剂量的1%盐酸普鲁卡因溶液，观察并记录给药后动物反应（中毒症状、外观、行为、呼吸、腺体分泌、大小便等情况），记录动物死亡时间及死亡数。
6．半数致死量的计算：
汇集全班结果，求LD50。
【教学方法】
动物实验、学生操作、实验报告。
【教学时数】
4学时。
实验十七基于离体心脏灌流的扩展性自主设计实验
【目的要求】
1．掌握复制离体心脏灌流的模型。
2．熟悉心肌细胞动作电位的波形特点、动作电位的形成机理。
3．以离体心脏灌流实验平台，自主设计药物或小分子化合物干预离体心脏的功能状态。
4．观察多因素对维持心脏节律性活动的影响。
5．对实验中出现的各种观察指标变化进行分析，探讨其变化的发生机制。
【内容与项目】
1．立题：
以实验小组为单位，集体酝酿、讨论确立离体心脏灌流实验方案。
2．离体心脏灌流模型复制。
3．并按实验的自主设计方案完成实验操作步骤和指标观察。
4．对实验中出现的各种观察指标变化进行分析，探讨其变化的发生机制。
【教学方法】
扩展性动物实验操作、多媒体汇报实验结果与分析、答辩、实验报告。
【教学时数】
8学时。
实验十八家兔失血性休克的扩展性自主设计实验
【目的要求】
1．充分调动学生的学习主动性、积极性和创造性，将所学到的功能学科知识应用于实验的自主扩展性设计。
2．以失血性休克为动物实验平台，完成扩展性实验设计到亲自动手操作全过程。
3．在实验过程中，通过自主设计不同类型、不同程度、不同治疗措施的实验，观察动物的各种功能与代谢变化，分析和掌握其发生的主要原因和机制。
4．了解简单的、基本的科学实验研究方法。
【内容与项目】
1．立题：
以实验小组为单位，集体酝酿、讨论确立失血性休克实验方案。
2．复制失血性休克的动物模型。
3．并按实验的自主设计方案完成动物实验的操作步骤和指标观察。
4．对实验中出现的各种观察指标变化进行分析，探讨其变化的发生机制。
【教学方法】
扩展性动物实验操作、多媒体汇报实验结果与分析、答辩、实验报告。
【教学时数】
10学时。
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