家兔颈部动脉和神经的分离及减压神经放电的引导实验报告.docx

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家兔颈部动脉和神经的分离及减压神经放电的引导实验报告

 

中央民族大学生命与环境科学学院

生理学实验报告

 

家兔颈部动脉和神经的分离及减压神经放电的引导

家兔动脉血压的神经与体液调节

 

 

2011年10月28日

【目的与要求】

1.学习家兔颈部手术与分离主动脉神经的方法。

2.学习在体神经冲动引导与记录的方法,理解主动脉神经的生理功能。

3.掌握记录和测量家兔动脉血压的直接测量方法。

4.观察神经和体液因素改变对家兔动脉血压调节的影响,并分析该些因素的作用机制。

【实验原理】

主动脉神经是主动脉弓压力感受器的传入神经,又称减压神经。

神经传入冲动的频率,在一定范围内随主动脉血压的升高或降低而相应增加或减少,从而使压力感受性反射增强或减弱,以维持动脉血压的相对稳定。

由于家兔主动脉神经独成一束,易于分离,故常用家兔为实验动物,进行主动脉神经冲动的引导与血压实验。

在正常的生理情况下,人和高等动物的动脉血压是相对稳定的。

这种相对稳定性是通过神经和体液因素的调节而实现的,其中以颈动脉窦-主动脉弓压力感受器反射尤为重要。

此反射即可使升高的血压下降,又可使降低的血压升高,故有血压缓冲反射之称谓。

家兔的主动脉神经在解剖上独成一支,易于分离与观察其作用。

【实验动物及器材】

家兔、兔手术台,常用手术器械,止血钳、眼科剪、支架、气管插管、Pc-Lab生物信号采集系统、保护电极、纱布、棉球、丝线、20ml注射器、20%-25%氨基甲酸乙酯,肝素,去甲肾上腺素,生理盐水;RM6240生物信号采集系统,手术剪1把,眼科剪1把,止血钳,镊子,电刺激连线,兔手术台,注射器及针头,血管插管,动脉夹,血压换能器,铁架台,婴儿秤,输液装置,照明灯,有色丝线;

【实验步骤】

1、实验动物准备

1)麻醉:

取家兔一只称重,按4-5ml/Kg(1g/Kg)耳缘静脉注射20%-25%氨基甲酸乙酯进行麻醉。

2)固定剪毛:

背位固定在兔手术台上,剪去颈部手术视野中的被毛。

3)手术分离血管与神经

A、颈部皮肤切口5-7cm,分离皮下组织

B、分离肌肉层:

钝性分离

C、行气管插管:

倒“T”切口,插管固定

D、分离血管与神经:

一侧:

迷走神经

(1)、主动脉神经

(2)、颈动脉

(1)

另一侧:

迷走神经

(1)、颈动脉(3)(插管用)

2、连接仪器引导减压神经放电活动

打开Pc-Lab生物信号采集系统,连接引导电极在第一通道中,设置通道功能为神经放电,输入实验相关信息,采样观察减压神经放电活动。

3、实验装置与连接:

①将压力换能器固定于铁支架上,使换能器的位置尽量与实验动物的心脏在同一水平面上。

然后将换能器输入至RM6240生物信号采集系统一通道。

②压力换能器的另一端与三通管相连。

三通管的一个接头将与动脉插管相连。

在将动脉插管插入左颈总动脉前,先用盛有肝素的注射器与三通管另一接头相连,旋动三通管上的开关,使动脉插管与注射器相通,推动注射器,排空动脉插管中的气体,使动脉插管内充满肝素溶液,然后关闭三通管。

4、仪器调试:

在“实验”菜单中选择“循环——兔动脉血压调节”。

双击一通道,调节增益、采样参数,使基线归零,令图形位于屏幕中央,便于观察。

5、动脉插管:

在左颈总动脉的近心端夹一动脉夹,然后结扎其远心端(保留此结扎线头),在动脉夹与结扎之间一般应相距2cm以上。

在结扎端的下方用眼科剪作一斜口,向心脏方向插入动脉插管,用已穿好的丝线扎紧插入管尖嘴部分稍后处(注意此处务必扎紧),并以远心端丝线将插管缚紧固定,以防插管从插入处滑出。

6、静脉插管:

用一丝线将右侧颈外静脉远心端提起,用眼科剪在其下方做一斜口,向心脏方向插入静脉插管,用已穿好的丝线扎紧插入管尖嘴部分稍后处,并以远心端丝线将插管缚紧固定,结扎血管同时防插管从插入处滑出,静脉插管成功后立即开始输液,并将输液速度调慢。

7、记录血压:

一切准备完毕,移去动脉夹,启动记录按钮,开始记录血压曲线。

8、实验观察:

(1)记录正常血压曲线。

(2)用血管夹夹闭右侧颈总动脉20s,观察血压变化,待血压曲线显示正常后再进行下一个实验。

(3)静脉注射去甲肾上腺素:

从右侧颈外静脉注射0.3ml去甲肾上腺素,观察血压变化,待血压曲线显示正常后再进行下一个实验。

(4)刺激主动脉神经,:

以5V,频率25Hz,持续10s的定时刺激刺激右侧主动脉神经,观察血压变化,待血压曲线显示正常后再进行下一个实验。

(5)刺激迷走神经:

以1V,频率25Hz,持续10s的定时刺激刺激右侧迷走神经,观察血压变化,待血压曲线显示正常后再进行下一个实验。

【实验结果】

1.夹闭一侧颈总动脉血压变化:

2.按压颈动脉窦是血压变化:

 

 

3.刺激迷走神经:

4.刺激迷走神经中枢端:

 

5.刺激迷走神经外周端:

 

6.刺激减压神经:

7.刺激减压神经外周端:

8.刺激减压神经中枢端:

9.注射肾上腺素:

10.注射乙酰胆碱:

【分析讨论】

1.夹闭一侧颈总动脉15s后,观察到兔动脉血压升高的现象:

    

这是由于颈动脉窦管壁的外膜下分布有丰富的感觉神经末梢,是动脉张力感受器。

这个感受器位于兔颈总动脉的远心端,颈内动脉与颈外动脉的分叉交界处。

夹闭颈动脉后,远心端的颈动脉窦张力感受器感受到血压下降,传出神经冲动的频率减慢。

信息沿窦神经上传至延髓孤束核心血管中枢。

使心迷走紧张减弱,心交感和心缩血管紧张加强,作用于心脏,使心率加快,心输出量增加,血管收缩,血管外周阻力增加。

从而血压恢复性升高。

若血压下降过大,交感缩血管紧张还会扩展到静脉系统,是静脉收缩,促进血液回心,使每博输出量增加。

 2.刺激完整减压神经及其中枢端均可引起血压下降,而刺激该神经外周端基本不变:

    兔减压神经是传入神经,其作用是将主动脉弓感受器发出的冲动传入延髓心血管中枢,反射性引起血压降低。

因此,刺激完整的减压神经或其中枢端,使传入中枢的冲动增加,致血压明显下降,而刺激其外周端虽又冲动传向外周,但不会引起血压变化。

 3.刺激迷走神经后观察到,刺激迷走神经和迷走神经外周端都能引起明显的减压反应,而刺

激迷走中枢端则没有减压反应,只是稍有轻微抬升变化:

    迷走神经中含从延髓下行的传出纤维,通向心脏。

节前纤维末端释放Ach,节后纤维末端释放Ach,属于副交感神经纤维,能使cAMP浓度降低,心率减慢,心房收缩力减弱,传导性减弱。

从而使心输出量变小,平均动脉压降低。

此外,还有主动脉体化学感受器的上行纤维在迷走神经中并行,化学感受器受刺激的效应是血压升高。

所以,刺激迷走中枢不能引起减压反应,却可以使血压轻微抬高。

此外,若切断两侧迷走神经,迷走紧张消失,迷走吸气兴奋反射通路也断了,动物的吸气变深,周期变长,二级曲线周期性变得不明显。

4.加入0.2ml0.01%去甲肾上腺素后,观察到平均动脉压抬高。

    这是由于去甲肾上腺素与血管平滑肌上的α和β2甲肾上腺素能受体结合,使血管收缩,管径变小,外周阻力增加,从而使平均动脉压升高。

此外,去甲肾上腺素还可以使心率增加,心收缩力变大。

只是缩血管效应更明显。

5.加入0.2ml0.01%乙酰胆碱后,观察到一级曲线周期变慢,平均动脉压下降。

    Ach能使cAMP浓度降低,心率减慢,心房收缩力减弱,传导性减弱。

心率变慢则流向外周的血量变多,舒张压更低。

心房收缩力减弱则收缩压也有下降。

平均动脉压降低。

但是因为血回心时间变长,因此,回心血量较多,脉压增加。

而大多数血管没有Ach受体,Ach对外周阻力影响不大。

【结论】

夹闭一侧颈总动脉——家兔的血压上升。

按压颈动脉窦——血压急速降低。

刺激迷走神经——血压降低迅速且明显。

刺激迷走神经中枢端——血压降低迅速且明显。

刺激迷走神经外周端——血压降低幅度较小。

刺激减压神经——血压有所下降。

刺激减压神经外周端——血压基本没变化。

刺激减压神经中枢端——血压有些许降低。

注射肾上腺素——血压升高。

注射乙酰胆碱——血压没多大变化。

 

 

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