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毛细管电泳法在药物分析中的应用
课题名称
毛细管电泳法在药物分析中的应用
1.摘要
摘要:
毛细管电泳(capillary electrophoresis;CE)是离子以及荷电粒子采用电场作为驱动力,在毛细管里按照实际淌度、分配系数完成高效、可靠、快速分离检测的一类新型技术手段。
被认为是二十一世纪分析科学领域中最具发展潜力的研究项目,也是近些年来发展进步最为迅猛的分离方法之一。
本文就CE的发展和工作原理做了有关介绍并对其在药物分析里的实际应用以及发展推广展开了详细的论述。
关键词:
毛细管电泳技术药物分析应用
ABSTRACT
ABSTRACT:
Capillaryelectrophoresis(capillaryelectrophoresis,CE)isanion,orchargedparticleinanelectricfieldasadrivingforceinthecapillarytheirmobilityanddifferentdistributioncoefficientsforefficient,rapidseparationofanewtechnicalanalysis.Isconsideredtobethemostdynamiccontemporaryscientificanalysisoffrontierresearch,itisnearly20yearstodeveloponeofthefastestseparationtechnology.ThisarticleCEdevelopmentandintroductionabouttheworksdoneinpharmaceuticalanalysisanditsapplicationandrelevantdevelopmentsdosummarized.
KEYWORDS:
Capillaryelectrophoresisdruganalysisapplication
目录
目录1
1.绪论1
1.1毛细电泳法的介绍1
1.2 毛细管电泳的基本原理 1
2.毛细管电泳在药物分析中的有关应用2
2.1 毛细管电泳在临床分析中的应用 2
2.2毛细管电泳在药物残留分析中的应用2
2.3 毛细管电泳在手性药物分析中的应用 3
2.4 毛细管电泳在药物制剂成分中的分析 3
3.发展方向5
谢辞7
参考文献8
1.绪论
1.1毛细电泳法的介绍
毛细管电泳(毛细管电泳),也称为高性能毛细管电泳或者毛细管分离,通过高压直流电场产生驱动作用力,带电粒子在一个25纳米灵活的熔融石英毛细管柱中流动和迁移速度和分离的液相分离技术的基础上。
在1980年后期发展十分迅速,借助其高效、可靠、完善的电泳技术以及最新分离技术,它是从微升水平催化剂纳水平的科学分析技术,因此成为现如今最具发展潜力的研究课题,现代科学分析技术,是最近十年来发展最为迅猛的分离技术。
[3]
1.2 毛细管电泳的基本原理
CE指的是采用高压电场产生驱动作用力,使用毛细管作为分离通道,结合毛细管和样品之间的微小不同,完成分离作用的一种液相分离方法。
这种分离方式设备主要有高压电场、毛细管、检测设备、双缓冲储存瓶。
石英毛细管柱,在酸碱度大于3的情况下,内部带负电荷,且和他相接处接触的溶液会形成双层。
在较高压强的电场中,水合离子会导致整个流体向负的方向称为电泳的双电层。
在毛细管中电解质微粒的运动速率与两类电泳以及电渗流同方向的速率之和是相同的。
正离子的移动与电渗流的移动方向相同,因此流出的第一;电中性粒子的电泳速率很小,几乎为零,因此其迁移速率和电渗速率相同;负离子的移动方向与电渗流的方向正好相反,但是因为电渗流速率通常来说,都比电泳速率大,因此把电中性粒子最后流出,进而完成对各种不同粒子的迁移分离。
上文所述就是针对毛细管区带电泳的分离原理简介。
[6]
2.毛细管电泳在药物分析中的有关应用
2.1 毛细管电泳在临床分析中的应用
临床药物研究,指的是针对人体消化、吸收、新陈代谢的药物以及代谢产物的科学研究。
毛细管电泳法具有较高的分离效率,可用于生物液体中药物的检测。
测试:
又有通过简单、有效、可靠的预处理之后,才可以把生物流体注射在毛细管里。
然而,当毛细管电泳用于临床分析时,它也有明显的缺点,它的缺点就是灵敏度不够。
因此,在临床分析中我们也要研究高准确度的检测手段,此外,收集、加工等在临床分析研究里常见的预处理手段在毛细管电泳实验里,也具备十分关键的作用。
[1]
测定血液样品中的肝素我们通常会用胶束电动毛细管电泳法。
毛细管电泳分析29中枢神经系统的血液、尿液及胃液的系统分析。
随着国产碳纤维电极柱端安培检测法的内容可以用来确定异尿缠绕。
金其云等人,固相萃取以及毛细管电泳共同分离以及研究分析尿里二十一种基本药物的分析方法。
最低检出浓度为78,16克/L,实验结果表明,高分离效率,分析各种药物,毒药,增加检测概率,减少丢失。
对硫代反义核酸药物癌泰得和张桂等建立了毛细管凝胶电泳方法的药代动力学研究血浆癌泰得的含量测定。
在去除血浆蛋白和脂肪的时候我们会用强阴离子交换柱样品的方法,淡化反相柱渗透膜去掉残余的盐分,采用长度是二十四个碱基的寡核苷酸为内标,使用血浆癌的实际含量检测凝胶电泳法。
2.2毛细管电泳在药物残留分析中的应用
进入二十一世纪以来,人们的生活水平正在不断升高,环境和食品中药物残留问题越来越受到关注。
因此,对兽药残留分析提出了更高的要求,特别是对动物食品中兽药残留的分析。
目前,有许多方法来分析药物残留,其中最广泛使用的方法是高效液相色谱法。
但它的存在色谱柱非常容易遭受污染、重复使用困难,一些色谱价格较高,色谱柱使用时间短;二是因为样品组成比较复杂,分离起来较为困难,分离效果不好。
毛细管电泳具备分离效果好,色谱柱不高,结果可靠等优势[5]。
它是比较容易处理的样品,是适合用于分析的药物残留。
但它也具有检测灵准确度不好的劣势,所以必须寻找其他手段来提升检测准确度。
2.3 毛细管电泳在手性药物分析中的应用
手性化合物的化学性质与它的物理性质十分类似。
手性化合物,尤其是手性药物的分离与研究都十分关键。
它已经发展成为分析化学学科的重要研究方向。
这是由于手性药物的药效与毒效是相差很大。
例如,人体必需氨基酸和升体的氨基酸都是能够充分吸收的。
最近几年,手性化合物的突发意外屡有报道,在比较知名的毒性药品是沙利度胺,麦克在1957由德国路南特尔化工公司生产第一联邦共和国,在临床上用作镇静剂,在接下来的几年里发现了许多早期孕妇生产出不健康的婴儿,因此,在上世纪六十年代开始禁止使用。
为了深入研究不同药物对妊娠的作用,Blashke等人。
1979发现同分异构体,其在,在本次研究中,充分引发了群众对同分异构体药物的重视程度。
为了深入认识药物的有效性、毒性,成立一套简单、实用的手性药物的相应的分离研究手段,同时在临床研究以及药品质量检测里运用。
除此之外,手性中心针对各种农药以及除草剂的分离也十分有用。
液相色谱、气相色谱以及毛细管电泳在手性药物分离研究方面得到广泛的应用。
在毛细管电泳手性分析里,具有如下优点:
分离系数越小的对分离分析也可以达到令人满意的效果;取代分离方式以及转化的方便,在载体电解质里添加一定量的手性试剂,采用不同的手性药剂并且调整背景电解质构成能够有效的提升分离选择性;药物的消耗量很少,成本很低。
近年来,毛细管电泳在手性分离领域的发展非常迅速。
[2]
2.4 毛细管电泳在药物制剂成分中的分析
CE指的是针对药物制剂的检测,例如:
毛细管电泳检测复合维生素B片中维生素B1、B2的方式。
新的石英毛细管分离在20min内常见的止痛药、酒精、苯巴比妥、茶碱等。
复方止痛片、复方去热散,针对儿童感冒发烧糖浆、对乙酰氨基酚、盐酸伪麻黄碱、氢溴酸美沙芬、马来酸氯苯那敏以及防腐剂甲醇等,通过石英毛细管分离就可以生成。
[4]
药物分析包括了两个方面:
一是明确原药的使用量,原药里各种杂质的检测、药剂性能的检测包括针对它们的组成成分有效性的检测方式。
上述检测方式必须具备优良的可操作性、安全性、有效性,高超的分析准确度以及可靠的精确度等。
二是针对吸收入人体之内的药物以及代谢产物的吸收、排泄等多方面的研究分析。
我们要用利用适当的方法来检测,通常是使用检测和分离相结合的方法。
,CE的高分离性能、超微量进样和几乎没有废液的特点,导致大量生物化学研究工作人员来分析,令它在药物研究分析领域的应用得到进一步的迅猛发展,并且保持较长的时间。
3.发展方向
截至目前,毛细管电泳的研究主要有如下两个方面。
一是毛细管电泳的推广应用,指的是针对蛋白质分离、测序等方面。
二是不断改进、提升毛细管电泳法,在此,成立了一类全新的分离方式,并将技术与技术相结合。
现简要介绍研究的应用。
(1)蛋白质分离
实验表明,在调节生命过程中蛋白质有它独特的作用,是人体不可缺少的。
在生命迹象以及分子生物学分析里,我们需要深入研究分析蛋白质,这是由于蛋白质是最根本、最核心的研究对象。
毛细管电泳作为蛋白质进行分离的一种有效方法,但分析中存在的主要问题。
一、蛋白质-蛋白质相互作用。
二是吸附。
首先,我们先来解释一下蛋白质之间的相互作用,蛋白质相互作用被认为是在运输中的所有类型蛋白质。
在相互影响方面,毛细管电泳原理也是这样。
上述的相互影响作用主要有同种类型蛋白质的组合与分离,种类不一样的蛋白质和其它分子之间的相交、汇合以及其他方式的结合。
毛细管电泳的研究方案以及实验结果的分析,我们都要先把蛋白质的相互作用分析清楚。
二是吸附。
至少在三个方面严重影响了吸附作用,一是硅胶的表面性质(主要有电荷数,电荷强度);二是蛋白质的各种性质;最后是是样品和缓冲系统的性能。
其中净电荷对样品和缓冲系统性能的影响和试验中需要分析的材料的性质是主要的。
不仅降低了吸附柱的效率,而且峰值的形状也会受到他的作用,进而造成分辨率减小或者没有峰。
为了有效、合理的处理上述问题,选用了一类方式,称之为极端的PH值,添加物以及径向电场调节手段。
[7]
用。
Thesecondproblemisadsorption.Theadsorptionprocessatleastrelatedtothreefactors,oneisthesilicacapillarysurface(includingnetcharge,ionicstrengthandchargedensity);second,thephysicalpropertiesofprotein(suchasisoelectricpoint,stabilityandchargedistribution);threeissampleandbuffersystemproperties(suchasstrength,buffertype,saltproperties).Oneofthemostimportantistoconsidertheeffectofnetchargeandthenatureofthematerialbeinganalyzed.Notonlyreducetheadsorptioncolumnefficiency,butalsoaffectthepeakshape,theresolutionisdecreasedorevennopeak.Inordertosolvethisproblem,theuseofextremepHvalue,additive,coatingcolumnandradialelectricfieldmodulationmethodisadopted.
(2)DNA测序
核酸它决定了物种的特性、遗传规律、新陈代谢、分化以及进化等。
核酸作为四个核苷酸的组成体,每个核算都具有三个组成部分,一是五元核糖,二是嘌呤或者杂环,三是磷酸。
核酸具有一定带电性以及亲水性。
DNA、RNA是核酸中两类重要的组成方式。
生物的遗传规律就是体现在核酸序列里,这种遗传信息控制着生物进行蛋白质合成、DNA复制以及基因调控等。
基因测序的重要性十分显著。
人类的基因组计划是一项国际性的项目,它是人类基因的一个重要目标,它是一个重要的目标。
基因组是指一组完整的个体遗传物质在细胞或生物体内,一套完整的。
测序流程主要有如下步骤:
(1)把核酸划分成小片段(可以用在水解、降解、化学分裂以及自由复制)。
(2)针对小片段完成序列反应。
(3)对反应生成物展开分离以及毛细管电泳实验。
(4)把片段序列组合成一个有效的全新序列。
谢辞
时间过得可真快,大学生活转眼间就要结束了,感觉昨天还在校园里和同学们一起谈笑,坐在教室里上课,今天却即将离开学校,彻彻底底的走向社会。
不过大学期间也学到了很多专业知识,收获不少。
对未来的迷茫也存在着,不过更多的是期待。
其实论文的撰写完成过程比我想象中要难一些,首先我要感谢我的指导老师周翠英老师,感谢她在百忙中抽空对我的论文的检查与指导,没有周老师专业的指导,我不可能这么顺利的写好论文。
还要感谢我们班的同学他们毫不吝啬地将自己论文的相关资料共享,也给我了一些建议和灵感,让我得以完善自己的想法,终于写好了这篇论文。
还有,我也要感谢在我实习期间遇到的人对我的帮助与配合,真的非常感谢。
面对离别,千言万语只能化作祝福,希望同学们在以后的工作和生活中都事事顺心,希望老师们都身体健康,桃李满天下。
参考文献
[1]赖小平,陈建南,刘中秋等.高效毛细管电泳及其在中药质量分析中的应用[J].中药新药与临床药理,1998,(9):
186.
[2]盛龙生,何一丽等.药物分析[M].化学出版社,2004.9.
[3]吴怡华.浙江大学药学院310031.
[4]刘文英主编,药物分析(第五版),北京:
人民卫生出版社,2003.7
[5]陈义主编,毛细电泳技术及应用,北京化学出版社,2000.1
[6]罗国安,毛细管电泳的原理及应用(第三讲)毛细管电泳的柱技术
[7]傅若农,毛细管电泳法近年进展概况