配制溶液的一般试验步骤.docx

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配制溶液的一般试验步骤

配制溶液的一般实验步骤

配制溶液步骤因配置的溶液不同而有所不同，现举两个例子：

举例1：

配置0.05mol/L，400mLNaOH溶液的步骤：

要准确配置氢氧化钠的浓度，则要用容量瓶定容，实验室没有

400毫升的容量瓶，则选用500毫升的容量瓶。

1.计算需要氢氧化钠的质量：

0.5L*0.05mol/L*40.01=1.000克

2.称1.000克氢氧化钠于烧杯中，加少量水溶解，然后倒入

500毫升容量瓶里，分3次洗烧杯，将溶液全部倒入容量瓶

里，最后用水稀释至刻度线，摇匀，即，得到0.05mol/L的

氢氧化钠溶液。

如果不需要很准确的话，可以直接用量筒量400毫升，称的

时候只要称0.8克就可以了。

举例2：

配置1.5mol/L的稀硫

酸200mL步骤：

第1步：

计算：

根据C1V1=C2V2，计算需要浓硫酸的体积；

第2步：

量取，利用刻度吸管吸取需要浓硫酸的体积；

第3步：

稀释，将浓硫酸转移到小烧杯中，加少量水稀释；

第4步：

转移,待溶液温度降低后，将烧杯中的硫酸转移到

200mL容量瓶中；

第5步：

洗涤，洗涤小烧杯，和转移的时候用到的玻璃棒，

至少三次，将洗涤的水一并转移到容量瓶中；

第6步：

定容，加水定容到刻度线，在距离刻度线一厘米左右改用胶头滴管定容；

第7步：

摇匀,将溶液摇匀,如果液面下降也不可再加水定容；

第8步：

将配得的溶液转移至试剂瓶中，贴好标签；举例

碳酸钠溶液步骤及注意事项0.1mol/L：

配制500mL，3所需

的仪器：

烧杯、容量瓶、玻璃棒、胶头滴管、分析天平、药

第一步：

计算：

所需碳酸钠的质量匙、量筒步骤：

5.3克第二步：

称量：

在天平上称量克；=0.5*0.1*106=5.3

第三步：

溶解：

在盛碳酸钠固体，并将它倒入小烧杯中；

有碳酸钠固体的小烧杯中加入适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌，

500mL容第四步：

移液：

将溶液沿玻璃棒注入使其溶解；

2～3次，并倒入第五步：

洗涤：

用蒸馏水洗烧杯量瓶中；

1～2cm处改用胶第六步：

定容：

倒水至刻度线容量瓶中；

头滴管滴到与凹液面平直；第七步：

摇匀：

盖好瓶塞，上

误差分析：

固体第八步：

装瓶、贴签；下颠倒、摇匀；

药品的称量与液体药品的量取是否准确；把溶液向容量瓶

用待配液润洗未洗涤烧杯和玻璃棒；中转移，溶液洒了；

定容时水加多了或加少了；了容量瓶；定容时未平视刻度

★俯视刻度线，实线。

仰视、俯视对溶液浓度有何影响？

际加水量未到刻度线，使溶液的物质的量浓度增大；★仰

视刻度线，实际加水量超过刻度线，使溶液的物质的量浓度

减小。

市售盐酸密度1.19，质量分数36%～38%以37%计算：

步骤：

1.计算：

假若需要2mol/L的硫酸100mL，则需37%浓硫酸16.6mL；计算过程如下：

假设盐酸VmL：

（0.1L*2mol/L*36.5g/mol）/37%=V/1.19V=16.59mL,考虑到量筒的精确度0.1mL，故取16.6mL即可。

2.量取：

16.6mL

浓硫酸；3.溶解：

把16.6mL浓硫酸倒入已经加入蒸馏水的

小烧杯中，用玻璃棒不断搅拌。

4.转移：

待溶液冷却后，将

5.洗涤：

再用少量溶液沿玻璃棒倒入100毫升的容量瓶中。

蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒2-3次，并将全部洗液移入容量瓶

中。

6.定容：

向容量瓶内加蒸馏水，当液面接近刻度线1-2

厘米处时，改用滴管滴加蒸馏水到一面恰好与刻度线相切。

7.摇匀：

塞上瓶塞，反复颠倒容量瓶数次，使瓶内的溶液均

匀，此时可以把溶液倒入到试剂瓶中贴标签保存。

完成配制

过程容量瓶的使用六忌：

1.忌用容量瓶进行溶解（体积不

3.忌加水超过准确）2.忌直接往容量瓶倒液（洒到外面）

刻度线（浓度偏低）4.忌读数仰视或俯视（仰视浓度偏低，

6.5.忌不洗涤玻璃棒和烧杯（浓度偏低）俯视浓度偏高）

1mol/L不是容器）（容量瓶是量器，忌标准液存放于容量瓶

250mL，完成下列步骤：

①用天平称取氢的氢氧化钠溶液

氧化钠固体/克。

②将称好的氢氧化钠固体放入烧杯中加少

量蒸馏水将其溶解，待完全溶解后将溶液沿玻璃棒移入

250mL的容量瓶中。

③用少量蒸馏水冲洗2～3次，将冲洗

液移入容量瓶中，在操作过程中不能损失点滴液体，否则会

使溶液的浓度偏低。

④向容量瓶内加水至刻度线1～2cm时，改用胶头滴管小心地加水至溶液凹液面与刻度线相切，

若加水超过刻度线，会造成溶液浓度偏低应该重新配制。

⑤最后盖好瓶盖，摇匀，将配好的溶液移入试剂瓶中贴好标签。

常用贮液与溶液

1mol/L亚精胺（Spermidine）：

溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10mL。

分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L精胺（Spermine）：

溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积

为10mL。

分装成小份贮存于-20℃。

10mol/L乙酸胺（ammoniumacetate）：

将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定

容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/mL牛血清蛋白（BSA）：

加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5mL水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。

不要涡旋混合。

加水

定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：

在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4mL水，分成小份贮存于-20℃，或转移100mg的二硫苏糖醇

至微量离心管，加0.65mL的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L乙酸钾（potassiumacetate）：

溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100mL。

1mol/L氯化钾（KCl）：

溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100mL。

3mol/L

乙酸钠（sodiumacetate）：

溶解40.8g的三水乙酸钠于

约90mL水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到

100mL。

0.5mol/LEDTA:

配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。

或称取186.1g

的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至

1L。

1mol/LHEPES：

将23.8gHEPES溶于约90mL的水中，

用NaOH调pH（6.8～8.2），然后用水定容至100ml。

1mol/L

HCl：

加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。

25mg/mlIPGT：

溶解250mg的IPGT（异丙基硫代-β-D-半乳糖苷）于10ml水中，分成小份贮存于-20℃。

1mol/LMgCl2:

溶解20.3g

MgCl2·6H2O于足量的水中，定容到100mL。

100mmol/L

PMSF：

溶解174mg的PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的异

丙醇中，定容到10ml。

分成小份并用铝箔将装液管包裹或贮

200mg20mg/mL）：

将proteinaseKK（℃。

存于-20蛋白酶

K9.5mL加入到L水中，轻轻摇动，直至蛋白酶的蛋白酶

完全溶解。

不要涡旋混合。

加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。

10mg/mLR-nase（无D-Nase）（D-Nase－

freeR-Nase）：

溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1mL的10mmol/L

的乙酸钠水溶液中（pH5.0）。

溶解后于水浴中煮沸15min，

使DNA酶失活。

用1mol/L的Tris－HCl调pH至7.5，于-20℃

贮存。

（配制过程中要戴手套）5mol/L氯化钠（NaCl）：

溶

解29.2g氯化钠于足量的水中，定容至100mL。

10N氢氧化钠（NaOH）：

溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯中

（磁力搅拌器搅拌），氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。

10％SDS（十二烷基硫酸钠）：

称取100gSDS慢慢转移到约

含0.9L的水的烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。

用水定容至1L。

2mol/L山梨（糖）醇（Sorbitol）：

溶解36.4g

山梨（糖）醇于足量水中使终体积为100mL。

100％三氯乙

酸（TCA）：

在装有500gTCA的试剂瓶中加入100mL水，用

磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。

（稀释液应在临用前配制）

2.5％X－gal（5-溴-4-氯-3-吲哚－β-半乳糖苷）：

溶解25mg

的X－gal于1ml的二甲基甲酰胺（DMF），用铝箔包裹装液

管，贮存于-20℃。

100×Denhardt试剂（Denhardt'sregent）成分及终浓度配制100mL溶液各成分用量2%聚蔗糖（Ficoll，

400型）

2%聚乙烯吡咯烷酮（PVP-40）

2%BSA（组分V）

水2g

2g

2g

加水至总体积为100mL