UF500i仪器的SOP.docx
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UF500i仪器的SOP
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第一版
UF500i标准操作规程
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记
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修订日期
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修订内容
第一版
19
全部
发行章
批准
审核
编制
制定部门
检验科
文件持有部门：
检验科临检室
UF500i标准操作程序
目录
1、检验目的………………………………………………（3）
2、检验原理………………………………………………（3-4）
3、性能参数………………………………………………（4-6）
4、标本准备………………………………………………（6-7）
5、实验器材………………………………………………（7）
6、仪器……………………………………………………（7）
7、试剂……………………………………………………（7-10）
8、校准……………………………………………………（10-11）
9、操作步骤………………………………………………（11-13）
10、质控…………………………………………………（13-14）
11、干扰…………………………………………………（14-15）
12、结果报告……………………………………………（15-16）
13、生物参考区间………………………………………（16-17）
14、临床意义………………………………………………（17-19）
15、注意事项………………………………………………（19-20）
16、对照表………………………………………………（20）
17、参考文献………………………………………………（20）
1、检验目的
1.1.目的：
对尿液有形成分分析
1.2.分析参数：
1.2.1.定量检测参数（12项）：
RBC、WBC、EC、CAST、BACT、P-CAST、SRC、YLC、CRYSTAL、SPERM、MUCUS、COND。
1.2.2.研究参数信息（3项）：
红细胞形态学信息（血尿来源判断）；尿电导率分级（尿液浓度信息）；UTI信息（尿路感染致病菌初筛）。
2、检验原理
2.1.UF-500i用红色半导体激光束照射经过核酸荧光染色后在鞘流贯流分析池中形成的鞘流样本，并通过对从各粒子产生的前向散射光、侧向散射光以及侧向萤光信号转换成的光电信号进行分析，从
而对各个粒子进行识别。
2.2.流式细胞计数法:
UF-500i全自动尿细胞分析仪使用流式细胞计数法（FCM）技术来获得尿细胞前向散射光及前向荧光的强度参数。
在对细胞中的特定物质进行荧光染色并调节到悬浮状后，使用鞘液包围此物质然后通过喷嘴以单柱形式喷出。
此时每个尿细胞都将暴露在高度密集的激光束照射之下。
单个细胞会按不同角度发出荧光和散射光。
系统将对这些电信号进行分析，为各尿细胞按照荧光强度生成一维直方图，并按照荧光强度和散射光强度生成二维散点图，以便各个尿细胞进行识别,从激光源向前至侧面发出的散射光称为散射光。
从前向散射光的发光度即可获知细胞的大小和表面状态等。
由于荧光标识抗体的性质和荧光色素的作用，从染色尿细胞发出的荧光能够反映量化的细胞表面和胞质内的性状，以及细胞核的性质（核糖核酸和脱氧核糖核酸的数量）。
UF-500i分析仪基于流式细胞计数原理分析尿样中的五个有机成份，如RBC（红细胞）、WBC（白细胞）、EC（上皮细胞）、CAST（管型）和BACT（细菌），并可定量显示。
3、性能参数
3.1.技术参数：
〈SEDIMENT-ch〉
S_FSCW（前向散射光宽度）：
粒子长度
S_FLH（荧光强度（高灵敏度））：
粒子染色程度
S_FLLW（荧光宽度（低灵敏度））：
粒子染色部分宽度
S_FLL（荧光强度（低灵敏度））：
粒子染色程度
S_SSC（侧向散射光强度）：
粒子内部复杂性
S_FLLW2（荧光宽度2（低灵敏度））：
粒子内重度染色位置的宽度
S_FSC（前向散射光强度）：
粒子大小/高度、折射率
B_FSCW（前向散射光宽度（高灵敏度））：
粒子长度
B_FSC（前向散射光强度（高灵敏度））：
粒子大小/高度
B_FLH（荧光强度（高灵敏度））：
粒子核染色程度
B_FSC2（前向散射光强度（低灵敏度））：
服务时使用（维护）
3.2.UF-500i性能/规格
环境温度
15~30℃（25℃最佳）
相对湿度
30-85%
电源
100–240VAC（50/60Hz）
耗电量
主机、进样器：
等于或低于500VA
保护类型
一级仪器（IEC60601-I）
显示范围
RBC:
0.0–99999.9/μL；WBC:
0.0–99999.9/μL；
EC:
0.0–99999.9/μL；CAST:
0.00–9999.99/μL；
BACT:
0.0–99999.9/μL；
本底界限值
RBC:
1.0/μL；WBC:
1.0/μL；
EC:
1.0/μL；CAST:
0.1/μL；BACT:
1/μL
分析范围
RBC:
1.0–5000.0/μL；WBC:
1.0–5000.0/μL；
EC:
1.0–200.0/μL；CAST:
1.00–30.00/μL；
BACT:
5.0–10000.0/μL；
再现性
RBC:
10.0%以内；WBC:
10.0%以内；
EC:
30.0%以内；CAST:
40.0%以内；
BACT:
10.0%以内；
准确度
RBC:
±10.0%以内；WBC:
±10.0%以内；
EC:
±30.0%以内；CAST:
±40.0%以内；
BACT:
±10.0%以内；
经时稳定性
24小时后
RBC:
±10.0%以内；WBC:
±10.0%以内；
EC:
±30.0%以内；CAST:
±40.0%以内；
BACT:
±10.0%以内（6μL模式）；
±20.0%以内（1μL模式）；
携带污染
RBC:
0.1%以内，或5.0/μL以内；
BACT:
0.05%以内，或5.0/μL以内；
4、标本准备
尿液标本种类的选择和收集取决于临床医师的送验目的、病人的状况和试验的要求。
理想情况下，为了达到筛查、检出分析物和有意义有形成分的目的，应收集浓缩尿液。
临床常用尿被标本种类如下。
4.1.晨尿清晨起床后，在未进早餐和做其他运动之前排泄的尿掖，又称为首次晨尿。
住院病人最适宜收集此类标本，但在采集前一天应提供收集容器和书面收集说明，如外阴、生殖器清洁方法，留中段清洁尿等。
若采集后2h内不能进行分析的，要采取适当的防腐措施。
晨尿常用于筛查、直立性蛋白尿检查和细胞学研究。
4.2.随机尿随时排泄，无需患者做任何准备的尿液，称为随机尿，适用于常规及急诊筛查，但是，患者如摄入大量液体和剧烈运动后将直接影响尿液成分，从而不能准确反映患者疾病状况。
另一种方法是收集首次晨尿排泄后2-4h内的尿液标本，作为第二次晨尿，但要求患者在前晚22:
00点起到收集标本止，只能饮用200ml水，以提高细菌培养和有形成分计数的灵敏度。
4.3.计时尿收集一段时间内的尿液标本，如收集治疗后、进餐后、白天或卧床休息后的3h、12h或24h内全部尿液。
准确的计时和规范的说明是确保计时尿结果可靠的重要前提。
计时尿常用于定量测定和细胞学研究。
4.4.容器：
用洁净加盖的塑料或玻璃器皿留取新鲜尿15ml以上（注：
每个器皿醒目地方贴上病人的姓名、床号、住院号，最好有留尿时间）及时送到实验诊断室，操作人员把标本倒入100×78mm的试管中约10ml，即为尿标本。
有条形码的贴上条形码。
4.5.尿液标本检测完后，弃入含有2000mg/L有效氯消毒溶液的废物筒中。
5、试验器材
5.1.一次性尿杯、试管、乳胶手套、试管架
6、仪器
6.1.SysmexUF-500i全自动尿液有形成分分析仪
7、试剂
7.1.UFIISHEATH（鞘液）
7.1.1.试剂品牌:
SYSSMEX；代码:
UTS-900A；包装规格:
20L
7.1.2.试剂主要成份：
Tris缓冲液0.14%
7.1.3.储存条件：
储藏温度为2-35℃，须存储于干净闭光环境中,请勿冰冻。
7.1.4.使用期限:
在有效期内使用，开封后有效期为60天。
7.1.5.注意事项:
在15-30℃下使用，打开后避免污染及灰尘和细菌进入；浑浊或变色后不能使用；避免接触皮肤，一旦接触立即用大量清水冲洗，采取必要的医疗措施。
7.2.UFIISEARCH-SED（染色液）
7.2.1.试剂品牌:
SYSMEX；代码：
USS-800；包装规格：
29mL
7.2.2.试剂主要成份:
7.2.2.1.Polymethine聚甲炔染料——对各有形成份的细胞膜、细胞核、细胞质进行特异性的核酸荧光染色；
7.2.2.2.乙烯乙二醇溶媒（辅助色素）——对精子进行特异性染色。
7.2.3.储存条件:
储藏温度2-35℃，须存储在干净闭光环境中,请勿冰冻。
7.2.4.使用期限:
在有效期内使用，开封后有效期为60天
7.2.5.注意事项:
在15-30℃下使用，打开后避免污染及灰尘和细菌进入；浑浊或变色后不能使用；避免接触皮肤，一旦接触立即用大量清水冲洗，采取必要的医疗措施。
7.3.UFIIPACK-SED（稀释液）
7.3.1.试剂品牌：
SYSMEX；代码：
UPS-300；包装规格：
2.1L
7.3.2.试剂主要成份：
7.3.2.1.中性等渗缓冲液；酵母样菌染剂——对酵母样菌进行特异性染色；
7.3.2.2.溶血抑制成份——避免红细胞被破坏；
7.3.2.3.EDTA-3K——去除无定形的磷酸盐（形成螯合物）
7.3.3.储存条件:
储藏温度为2-35℃，须存储在干净闭光环境中，请勿冰冻。
7.3.4.使用期限:
在有效期内使用，开封后有效期为60天
7.3.5.注意事项:
在15-30℃下使用，打开后避免污染及灰尘和细菌进入；浑浊或变色后不能使用；避免接触皮肤，一旦接触立即用大量清水冲洗，采取必要的医疗措施。
7.4.UFIISEARCH-BAC（染色液）
7.4.1.试剂品牌：
SYSMEX；代码：
USB-800；包装规格：
25mL
7.4.2.试剂主要成份:
7.4.2.1.Polymethine聚甲炔染料——对细菌进行特异性的核酸荧光染色；
7.4.2.2.乙烯乙二醇溶媒（辅助色素）——除细菌外细胞碎片、杂质颗粒与细菌的区别。
7.4.3.储存条件：
储藏温度为2-35℃，须存储在干净闭光环境中，请勿冰冻。
7.4.4.使用期限:
在有效期内使用，开封后有效期为60天
7.4.5.注意事项:
在15-30℃下使用，打开后避免污染及灰尘和细菌进入；浑浊或变色后不能使用；避免接触皮肤，一旦接触立即用大量清水冲洗，采取必要的医疗措施。
7.5.UFIIPACK-BAC（稀释液）
7.5.1.试剂品牌：
SYSMEX；代码：
UPB-300；包装规格:
2.1mL
7.5.2.试剂主要成份:
7.5.2.1.含有阳离子表面活性剂的酸性高渗缓冲液——破坏所有细胞;
7.5.2.2.含有去除亚硝酸的药物——去除所有含有亚硝酸的残留物（防止颜色干扰）；
7.5.2.3.非特异性染色抑制剂——抑制除细菌外其他杂质颗粒的非特异性染色（防止颜色干扰）。
7.5.3.储存条件：
储藏温度为2-35℃，须存储在干净闭光环境中，请勿冰冻。
7.5.4.使用期限:
在有效期内使用，开封后有效期为60天
7.5.5.注意事项:
在15-30℃下使用，打开后避免污染及灰尘和细菌进入；浑浊或变色后不能使用；避免接触皮肤，一旦接触立即用大量清水冲洗，采取必要的医疗措施。
8、校准
8.1.每年校准2次上半年一次下半年一次（工程师负责校准）。
8.2.仪器的校准条件：
排除各种原因后质控未能通过，主要部件更换后或仪器远距离搬动，或严重故障须重新校准。
8.3.仪器进行维修和保养校准后需做质控，校准后如比对失败，工程师应验证质控品是否变质，在室内质控历史数据和室间质控数据表示良好时校准品可能变质，需更换重新的校准品，直至通过校准。
8.4.校准验证：
校准后即做质控，结果符合质控范围，校准后及时做精密度测试和线性测试。
随机取两份不同值病人尿液标本，和校准前样本值比对，结果符合比对标准。
每次校准完后，取10份样本做手工进样和自动进样两种进样方式的比对，并做记录，并由仪器商出校准报告。
8.4.1.精密度：
取两个不同值标本，每份连续测11次结果，去除第一次结果进行统计。
要求符合精密度标准。
8.4.2.线性：
分别取富含白细胞和红细胞的尿液,高、中、低值三份用改良牛鲍氏计数池计数20次取均值作为理论值。
各稀释尿样（鞘液稀释）用UF-500i各计数20次，取均值做回归分析。
结果判断：
b要在1.00±0.1。
8.4.3.校准后取20份标本进行手工WBC、RBC镜检比对，换算系数0.18µl=1HPF。
比对、精密度要求
项目
比对要求CV%
精密度要求CV%
RBC
B±20%或±18/μl
≤10%或±18/μl
WBC
B±20%或±18/μl
≤10%或±18/μl
EC
B±30%或±20/μl
≤30%或±20/μl
CAST
B±40%或±3/μl
≤40%或±3/μl
BACT
B±20%或±40/μl
≤20%或±40/μl
9、操作步骤
9.1.打开外围设备电源——打开IPU电源——打开总开关——打开启动开关——执行质控分析——分析标本——手动模式或进样模式——显示输出分析结果——操作完成后执行关机程序——关闭总开关——关闭IPU电源——关闭外围电源。
9.2.仪器自检每天开机仪器会自动进行自检。
9.2.1.温度自检仪器开机后,UF500i将自动执行自检。
当开启主机后，控制程序将载入到主机，依次执行液体机械部件初始化、温度稳定化、自动清洗、本底检查等操作。
仪器会对反应室、鞘流加热器及光电倍增管的温度进行监测并显示在温度稳定性对话框内，当稳定后，温度监测对话框自动关闭。
9.2.2.本底检查当仪器内部的温度稳定之后,系统将显示自动清洗本底检查对话框。
主机将执行三次自动清晰/本底分析。
本底达值到达容许值为止。
主机进入就绪状态。
9.3.样本分析
9.3.1.样本分析分为手动模式和进样器模式。
当仪器处于就绪状态或者手动抽吸就绪状态时，两种模式均可执行。
在抽吸就绪状态下可执行手动模式分析。
在手动模式下，操作人员手动混匀样本在进样分析。
9.3.2.在自动进样器模式下，样本被放置在样本架上自动搅拌与抽吸，然后进行分析。
使用样本架型进样器（选配件），一次可自动分析50个样本。
操作人员可以装载更多的样本架。
在该模式下，系统自动搅拌、抽吸并按照下列步骤处理样本：
（1）准备样本；
（2）输入分析所需的信息（样本架位置、试管位置）；（3）样本分析。
9.3.3.手动模式下,当仪器处于就绪状态时就可以执行手动模式分析。
在该模式下，均由操作人员人手工搅拌样本，并将尿样试管放置于分析位置。
按照下列步骤处理样本。
（1）采集并准备样本。
（2）输入必要的信息（样本号、样本状态及患者ID）。
（3）样本分析。
9.4.每日维护：
检查气动组件真空闸室内的水量，并进行排水；当执行关机操作时，检测器和稀释管线将被予清洗；如果仪器处于连续运行状态，您必须在每天分析结束后或者至少每24时或每500个样本执行一次关机操作。
仪器关机的步骤为：
运行主机关机程序→关闭主机电源→关闭IPU→关闭操作系统（关闭IPU电源）→关闭打印机电源。
操作人员每天应记录填写UF500i维护和检查表
9.5.每月维护：
清洗样本旋转阀（SRV）
9.6.如果仪器长时间不用，则蒸发作用可能会导致仪器内的试剂成分粘附在仪器上，使其无法使用。
请定期开启IPU和主机的电源，检查其是否可以正常启动并进入就绪状态。
即使没有进行分析作业，也要确保在关闭电源前执行关机程序。
如果预期仪器将长时间闲置不用，请联系您的Sysmex服务代表。
10、质控
10.1.质控品:
UFIICONTROL有以下两种浓度类型：
UFIICONTROL-H和UFIICONTROL-L
10.2.质控品品牌：
SYSMEX；代码：
UTL-100；包装规格：
47mL
10.3.质控方法:
两种质控方法均可利用质控材料来观察每日的变化；X-barControl和L-JControl。
10.3.1.X-barControl方法：
质控材料被连续分析两次，所得的平均数据将被作为质控数据使用。
10.3.2.L-JControl方法：
质控材料分析后所得数据即被作为质控数据使用。
L-JControl的质控界限值容易受到分析再现性的影响，因此要比X-barControl的质控界限值更广
10.4.第一次做质控和更换批号时需在IPU的质控文档里建立质控文件,文件里包含:
质控名、文件编号、质控品批号、靶值、限制范围、有效期等。
10.5.每次使用质控品时,反复摇动几次，直至瓶底沉淀颗粒完全消失，然后再颠倒该瓶30次，立即滴入试管，进行检测。
10.6.质控图表窗口显示与质控文件窗口中所选质控文件相对应的图表。
每个质控文档可以记录并显示300张绘图。
如果有更多绘图要显示，则超出的部分将自动被删除，删除操作将从最早的绘图开始。
10.7.质控文件窗口中选择的绘图可以输出至图表打印机，或者您也可以将绘图数据输出至主计算机或行式打印机。
11、干扰
11.1.应用误差来源分析：
11.1.1.采样误差；
11.1.2.样本超时放置；
11.1.3.标本搞错；
11.1.4.操作者装错试剂；
11.2.仪器：
11.2.1.管道污染或堵塞
11.2.2.试剂过期失效
11.2.3.激光状态不良
11.3.样本：
11.3.1.样本中有可被激光激发产生荧光作用的药物或抗生素成份；
11.3.2.被检者做过血管造影，眼底血管造影等；
11.3.3.样本中混有化学物品，如防腐剂、甲苯、酒精、福尔马林、戊二醛等
11.4.环境：
11.4.1.电压不稳定；
11.4.2.环境灰尘颗粒过多；
11.4.3.散热条件不好；
11.5RBC参数的应用误差分析
11.5.1.假性升高:
11.5.2.假性降低：
11.5.2.1.溶血或潜血阳性样本；
11.5.2.2.尿中有影响检测的荧光物质,如药物,造影剂；
11.5.2.3.低渗尿液可以造成红细胞破坏；
12、结果报告
12.1.UF-500i报告定量检测参数（12项）：
RBC、WBC、EC、CAST、BACT、P-CAST、SRC、YLC、CRYSTAL、SPERM、MUCUS、COND.研究参数信息（3项）：
红细胞形态学信息（血尿来源判断）；尿电导率分级；UTI信息（尿路感染致病菌初筛）
UF-500i各项参数的报告方式
参数
报告方式
白细胞
XX/uL
红细胞
XX/uL
上皮细胞
XX/uL
管型
XX/uL
细菌
XX/uL
病理管型
XX/uL
小圆细胞
XX/uL
结晶
XX/uL
酵母菌
XX/uL
粘液丝
XX/uL
精子
XX/uL
电导率
XXmS/cm
13、生物参考区间
13.1.UF-50Oi全自动尿液有形成分分析仪各检验参数参考范围见下表:
UF-500i全自动尿液有形成分分析仪各检验参数参考范围
参数
首字母缩写
参考范围
白细胞
WBC
/l
红细胞
RBC
/l
上皮细胞
EC
/l
管型
CAST
/l
细菌
BACT
/l
病理管型
Path.CAST
/uL
小圆细胞
SRC
/uL
结晶
X’TAL
/uL
酵母菌
YLC
/uL
粘液丝
MUCUS
/uL
精子
SPERM
/uL
电导率
Cond
mS/cm
13.2.换算系数：
0.18l=1个HPF
2.9l=1个LPF
14、临床意义
14.1.红细胞
14.1.1.正常人特别是青少年在剧烈运动、急行军、冷水浴，久站或重体力劳动后可出现暂时性镜下血尿，这种一过性血尿属于生理性变化范围。
女性患者还应注意月经污染问题，应通过动态观察加以区别。
14.1.2.泌尿系统自身疾病:
泌尿系统各部位的炎症、肿瘤、结核、结石、创伤、肾移植排异、先天畸形等均可引起不同程度的血尿，如急、慢性肾小球肾炎，肾盂肾炎，泌尿系统感染，肾结石，肾结核等等都是引起血尿的常见原因。
14.1.3.全身系统疾病:
主要见于各种原因引起的出血性疾病,如特发性血小板减少性紫癜、血友病、DIC、再生障碍性贫血和白血病合并有血小板减少时；某些免役系统性疾病如系统性红斑狼疮也可发生血尿。
14.1.4.泌尿系统附近器官的疾病:
如前列腺炎、精囊炎、盆腔炎等患者尿中也偶见红细胞。
14.2.白细胞:
14.2.1.泌尿系统炎症时均可见到尿中白细胞增多,尤其在细菌感染时为甚,如急、慢性肾盂肾炎，膀胱炎，尿道炎，前列腺炎，肾结核，肾移植后发生排异反应等；
14.2.2.女性阴道炎或宫颈炎、附件炎时可因分泌物进入尿中，而见白细胞增多，常拌大量扁平上皮细胞
14.3.透明管型可偶见于正常人清晨浓缩尿中；当有轻度或暂时性肾功能改变时，尿内可有少量透明管型；尿液内管型的出现常提示存在肾实质性病变，可见于急性肾小球肾炎、慢性肾炎、慢性肾小球肾炎、慢性肾功能衰竭等
14.4.血尿来源的鉴别：
仪器不仅能计数尿中红细胞的总量，而且可显示每个红细胞大小分布的情况，并提示红细胞形态学信息。
14.4.1.当Fsc-P70≤70，告示“非均一红细胞”的信息，提示肾小球性血尿可能；
14.4.2.当Fsc-P70≥100且Fsc-DWSDFsc≤50，告示“均一性红细胞”的信息，提示非肾小球性血尿可能；
14.4.3.当Fsc-P70≥70且Fsc-DWSDFsc≥50，告示“混合性红细胞”的信息，提示肾小球或非肾小球性血尿均可能。
14.5.上皮细胞可少量出现于正常女性的尿中；上皮细胞大量出现，提示泌尿系统有炎症。
14.6.尿内细菌数量增加，提示泌尿系统有感染。
伴随尿内白细胞数量的增加是诊断尿路感染的主要依据。
15、注意事项
15.1.最佳检测尿液是晨尿，不用防腐剂，及时送检，以保持尿液细胞成分维持原来的形态特征。
15.2.应准备干净、干燥采尿杯，在一般情况下，由患者自己采集中段尿。
女性患者应清洗外阴部后留取。
15.3.试剂应在失效期前使用，开封后应在试剂外包装上注明开封日期和失效期。
及时检测添加试剂。
15.4.每天开机后先做质控，质控结果在控时方可进行标本分析和结果的报告。
如质控失控应及时查找原因，质控正常后在做标本。
15.5.质控品摇匀后放置
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