倍肯ST4半自动血凝分析仪.docx
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倍肯ST4半自动血凝分析仪
迪瑞ＢＣＣ－３０００血液分析仪――检验科标准操作规程（SOP）
文件编号：
CHS-JY-01~16
第A版
编制：
xx
审核：
xx
批准：
xx
生效日期：
二0XX年X月X日
序号
主题内容
代号
页码
1
血浆凝血酶原时间（PT）测定
CHS-JY-01
4
2
血浆活化部分凝血活酶时间（APTT）测定
CHS-JY-02
8
3
血浆纤维蛋白含量（FIB）测定
CHS-JY-03
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血浆凝血酶时间（TT）测定
CHS-JY-04
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5
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血浆凝血酶原时间（PT）测定
1.实验原理
待测血浆加入过量的含钙组织凝血活酶，与FⅦa存在的情况下激活外源凝血途径，使凝血酶原转变为凝血酶，后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，测定凝固所需时间，即为待测血浆凝血酶原时间。
血浆（50微升）样本经180s预温后，加入37℃的PT试剂传感计时开始，血浆凝固致磁场中钢珠机械振动停止计时结束，然后计时器自动测出凝血酶原时间，再通过参数计算得出凝血酶原活动度及INR值。
2.标本采集
2.1早晨空腹采血（空腹12小时左右），静脉采血。
2.23.8％（2Na3C6H5O7.11H2O）枸椽酸钠溶液与全血1:
9抗凝，混匀。
3.标本存放：
1小时内（3000r/min×15min）分离血浆，室温放置不超过2小时，2～8℃保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70℃不超过6个月），只能冻融1次，在37℃迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试。
4.标本运输：
低温条件下运输。
5.标本拒收的标准：
抗凝剂不符合，采血量不准确，凝固，溶血，脂血标本不能作测定。
6.实验材料：
6.1倍肯公司PT试剂（兔脑提取液和氯化钙），未开封试剂2～8℃保存到说明书上有效期，打开瓶后，原有试剂在2～8℃保存可稳定14天，开瓶后室温（15～25℃）保存有效期7天；不能冷冻。
6.2北京赛科希德质控血浆：
用蒸馏水1ml复溶，在室温（18～25℃）下放置30分钟，使用前轻轻摇匀；复溶后凝血质控品贮存于2～16℃稳定4h，准确性应达到以上要求。
7.仪器设备：
7.1仪器名称：
ST4半自动血凝分析仪
7.2仪器厂家：
北京倍肯恒业科技发展有限责任公司
8.操作步骤：
8.1检查前准备：
8.1.1检查试剂瓶中试剂量，确保试剂充足并将试剂放置在相应位置。
8.1.2复溶质控血浆。
8.1.3准备测试杯及测试珠（钢珠）。
8.2开机：
开机后仪器自动预热，A、B、C三个温度计均显示37℃表示仪器预热完成，进入系统准备工作状态，放置试剂预温10min左右可进行测定。
8.3加样预温：
进入测试界面，选择PT测试，将测试杯置于预温槽中预温，用加珠器在每个测试杯中放一粒钢珠，取50μl血浆加入测试杯中，按相应预温键进行标本预温。
8.4测试与报告结果：
预温结束将测试杯从预温槽移至测试槽中，用联动加样枪加入100μlPT试剂，仪器自动计时测试并打印报告。
可报告时间（S）、Ratio、INR等值。
8.5清除测试槽中已用测试杯。
8.6返回测试界面，准备下一项目测试。
8.7关机：
将测试试剂放置2～8℃保存，关闭电源
9.检验结果的判断与分析：
仪器设定PT参考范围在11.1-14.1秒，如果测定结果大于参考范围高值，应标为异常，并重做。
如果测定结果小于参考范围的低值，表明样品组成或仪器应检查。
确认无误后，报告可靠结果。
10.质量控制：
每批样本同时测定两个浓度水平（高值和正常值）的质控品，以2S为警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
质控规则详见室内质控作业指导书。
11.临床意义：
PT是用于筛查外源性凝血系统（Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ）及口服抗凝药物剂量（如华发令、双香豆素等）的检测项目。
11.1参考范围：
秒数S：
11.1-14.1S（患者结果超过正常对照3s以上有临床意义）
活动度：
88-135％
国际标准化比值INR：
0.87-1.36INR=PTRatioISI
11.2PT延长见于先天性凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏；低（无）纤维蛋白原血症；获得性见于DIC、原发性纤溶症、维生素K缺乏、肝病、血循环中有抗凝物质（如口服抗凝剂、肝素）。
11.3PT缩短：
见于先天性凝血因子V增多、口服避孕药、高凝状态（DIC早期、急性心肌硬塞等）、血栓性疾病（脑血栓形成、急性血栓性静脉炎）、多发性骨髓瘤、洋地黄中毒、乙醚麻醉后。
11.4监测口服抗凝药（如华发令、双香豆素等）的重要指标。
一般要求：
PT（S）：
18-24SINR：
1.43-1.92，不同疾病不同值。
12.变异的潜在来源
12.1抗凝剂：
草酸盐、EDTA、肝素不适用于PT检查
12.2标本采集处理不当，如血与抗凝剂未充分混匀，出现凝块，混匀时过分用力，使标本溶血，造成结果变异。
12.3纤溶药物的影响，如双香豆素、链激酶、尿酶等。
12.4超剂量使用肝素使凝固时间延长。
12.5FDP增加使凝固时间延长。
12.6某些药物，如口服避孕药、雌激素、天门冬酰胺酶、钠络酮等影响测试结果。
13.操作注意事项：
干粉试剂及质控血浆溶解
13.1确认溶剂类型，一般溶解液包括：
蒸馏水、生理盐水、缓冲液、厂家特定溶解液，必须按说明书要求使用。
13.2溶解时，轻轻转动容器，保证干粉完全溶解，避免剧烈振荡。
13.3复溶后，室温放置5-10分钟方可使用。
13.4加珠器严禁放入搅拌孔内，也不要放入邻近孔内，以免钢珠磁化。
14.仪器维护与保养
14.1保持仪器清洁，应使用软布或干刷清除仪器表面的灰尘，允许使用温水或含有中性洗涤剂的水溶液蘸湿棉布擦除仪器表面污垢。
请勿使用含有有机溶剂和磨料的清洗剂。
14.2打开仪器，开机后等待仪器温度升至37℃，方向进行操作，以保证测量精密度。
14.3本仪器为高精密度测量仪器，要在坚固平稳的工作台上使用，不用时用防尘罩盖好。
14.4避免阳光直射，远离强热物体和强电磁场干扰源。
14.5未经服务人员同意，不得自行拆检。
14.6使用样品杯及钢珠应为一次性产品，以免影响测量精密度。
15.参考文献
15.1叶应妩.王毓三等《全国临床检验操作规程》第三版，东南大学出版社.
15.2北京倍肯恒业科技发展有限责任公司《ST4半自动血凝分析仪操作手册》.
血浆活化部分凝血活酶时间（APTT）测定
1.实验原理
在37℃条件下用激活剂（糅花酸）激活因子XII和XI，以脑磷脂替代血小板提供凝血的催化表面，在因子IX的参与下，测定贫血小板血浆的凝固时间。
血浆（50微升）样本与APTT试剂（50微升）混合液经180s预温后，加入37℃的CaCl2（0.025mol/L）试剂传感计时开始，血浆凝固致磁场中钢珠机械振动停止计时结束，然后计时器自动测出活化部分凝血活酶时间。
2.标本采集
2.1早晨空腹采血（空腹12小时左右），静脉采血。
2.23.8％（2Na3C6H5O7.11H2O）枸椽酸钠溶液与全血1:
9抗凝，混匀。
3.标本存放：
1小时内（3000r/min×15min）分离血浆，室温放置不超过2小时，2～8℃保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70℃不超过6个月），只能冻融1次，在37℃迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试。
4.标本运输：
低温条件下运输。
5.标本拒收的标准：
抗凝剂不符合，采血量不准确，凝固，溶血，脂血标本不能作测定。
6.实验材料：
6.1倍肯公司APTT试剂（鞣花酸和豆磷脂）和CaCl2（0.025mol/L）测定试剂，APTT试剂未使用时2～8℃保存到说明书上有效期，开瓶后，在2～8℃保存可稳定30天，室温（15～25℃）保存有效期15天；不能冷冻。
6.2北京赛科希德质控血浆：
用蒸馏水1ml复溶，在室温（18～25℃）下放置30分钟，使用前轻轻摇匀；复溶后凝血质控品贮存于2～16℃稳定4h，准确性应达到以上要求。
7.仪器设备：
7.1仪器名称：
ST4半自动血凝分析仪
7.2仪器厂家：
北京倍肯恒业科技发展有限责任公司
8.操作步骤：
8.1检查前准备：
8.1.1检查试剂瓶中试剂量，确保试剂充足并将试剂放置在相应位置。
8.1.2复溶质控血浆。
8.1.3准备测试杯及测试珠（钢珠）。
8.2开机：
开机后仪器自动预热，A、B、C三个温度计均显示37℃表示仪器预热完成，进入系统准备工作状态，放置试剂预温10min左右可进行测定。
8.3加样预温：
进入测试界面，选择APTT测试，将测试杯置于预温槽中预温，用加珠器在每个测试杯中放一粒钢珠，取50μl血浆和50μlAPTT试剂加入测试杯中，按相应预温键进行标本预温。
8.4测试与报告结果：
预温结束将测试杯从预温槽移至测试槽中，用联动加样枪加入50μlCaCl2（0.025mol/L）试剂，仪器自动计时测试并打印报告。
报告时间（s）值。
8.5清除测试槽中已用测试杯。
8.6返回测试界面，准备下一项目测试。
8.7关机：
将测试试剂放置2～8℃保存，关闭电源。
9.检验结果的判断与分析：
仪器设定APTT参考范围在27.1-36.5秒，测定结果应该和每个实验室正常测定值相关。
测定的时间值延长或缩短均表明病人凝血系统问题。
10.质量控制：
每批样本同时测定两个浓度水平（高值和正常值）的质控品，以2S为警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
质控规则详见室内质控作业指导书。
11.临床意义：
APTT常用于内源性凝血系统（Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ因子）的筛选及肝素抗凝治疗的监测。
11.1参考范围：
27.1-36.5秒（患者结果超过正常对照10秒以上为异常）
11.2APTT延长：
见过先天性凝血因子缺乏（如血友病甲、乙，接触因子Ⅻ、Ⅺ缺乏、VWF等）；多种凝血因子缺乏（如严重肝病、维生素K缺乏、DIC、纤溶亢进等）；血液中有抗凝物质存在。
11.3APTT缩短：
见于DIC高凝期和妊娠高血压综合症等高凝状态。
11.4是监测肝素治疗的首选指标。
12.变异的潜在来源
12.1抗凝剂：
草酸盐、EDTA、肝素不适用于APTT检查。
12.2标本采集处理不当，如血与抗凝剂未充分混匀，出现凝块，混匀时过分用力使标本溶血，造成结果变异。
12.3纤溶药物的影响（如双香豆素、链激酶、尿酶等），超剂量使用肝素。
12.4FDP增加使凝固时间延长。
12.5某些药物的影响（如口服避孕药、雌激素、天门冬酰胺酶、钠络酮等）。
13.操作注意事项：
干粉试剂及质控血浆溶解
13.1确认溶剂类型，一般溶解液包括：
蒸馏水、生理盐水、缓冲液、厂家特定溶解液，必须按说明书要求使用。
13.2溶解时，轻轻转动容器，保证干粉完全溶解，避免剧烈振荡。
13.3复溶后，室温放置5-10分钟方可使用。
13.4加珠器严禁放入搅拌孔内，也不要放入邻近孔内，以免钢珠磁化。
14.仪器维护与保养
14.1保持仪器清洁，应使用软布或干刷清除仪器表面的灰尘，允许使用温水或含有中性洗涤剂的水溶液蘸湿棉布擦除仪器表面污垢。
请勿使用含有有机溶剂和磨料的清洗剂。
14.2打开仪器，开机后等待仪器温度升至37℃，方向进行操作，以保证测量精密度。
14.3本仪器为高精密度测量仪器，要在坚固平稳的工作台上使用，不用时用防尘罩盖好。
14.4避免阳光直射，远离强热物体和强电磁场干扰源。
14.5未经服务人员同意，不得自行拆检。
14.6使用样品杯及钢珠应为一次性产品，以免影响测量精密度。
15.参考文献
15.1叶应妩.王毓三等《全国临床检验操作规程》第三版，东南大学出版社.
15.2北京倍肯恒业科技发展有限责任公司《ST4半自动血凝分析仪操作手册》.
血浆纤维蛋白原含量（FIB）测定
1.实验原理
在待测血浆中加入凝血酶，使纤维蛋白原变为纤维蛋白，血浆凝固。
血浆凝固时间与其纤维蛋白原含量成反比关系，血浆样本用缓冲液10倍稀释（血浆与咪唑缓冲液比例为1:
9）混合液经120s预温后，加入37℃的FIB试剂（凝血酶100NIH/ml）传感计时开始，血浆凝固致磁场中钢珠机械振动停止计时结束，通过计时器自动测出稀释血浆凝集时间，在对数坐标（log-log）图上计算出FIB的含量。
2.标本采集
2.1早晨空腹采血（空腹12小时左右），静脉采血。
2.23.8％（2Na3C6H5O7.11H2O）枸椽酸钠溶液与全血1:
9抗凝，混匀。
3.标本存放：
1小时内（3000r/min×15min）分离血浆，室温放置不超过2小时，2～8℃保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70℃不超过6个月），只能冻融1次，在37℃迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试。
4.标本运输：
低温条件下运输。
5.标本拒收的标准：
抗凝剂不符合，采血量不准确，凝固，溶血，脂血标本不能作测定。
6.实验材料：
6.1倍肯公司咪唑缓冲液和FIB试剂（凝血酶100NIH/ml），未开封试剂2～8℃保存到说明书上有效期，复溶后凝血酶2～8℃密闭保存，稳定5天。
6.2北京赛科希德质控血浆：
用蒸馏水1ml复溶，在室温（18～25℃）下放置30分钟，使用前轻轻摇匀；复溶后凝血质控品贮存于2～16℃稳定4h，准确性应达到以上要求。
7.仪器设备：
7.1仪器名称：
ST4半自动血凝分析仪
7.2仪器厂家：
北京倍肯恒业科技发展有限责任公司
8.操作步骤：
8.1检查前准备：
8.1.1检查试剂瓶中试剂量，确保试剂充足并将试剂放置在相应位置。
8.1.2复溶质控血浆。
8.1.3准备测试杯及测试珠（钢珠）。
8.2开机：
开机后仪器自动预热，A、B、C三个温度计均显示37℃表示仪器预热完成，进入系统准备工作状态，放置试剂预温10min左右可进行测定。
8.3加样预温：
进入测试界面，选择FIB测试，将测试杯置于预温槽中预温，用加珠器在每个测试杯中放一粒钢珠，取20μl血浆和180μl咪唑缓冲液的混合液100μl加入测试杯中，按相应预温键进行标本预温。
8.4测试与报告结果：
预温结束将测试杯从预温槽移至测试槽中，用联动加样枪加入50μlFIB试剂，仪器自动计时测试并打印报告。
报告时间（s）、g/l、mg/dl等值。
8.5清除测试槽中已用测试杯。
8.6返回测试界面，准备下一项目测试。
8.7关机：
将测试试剂放置2～8℃保存，关闭电源
9.检验结果的判断与分析：
正常人群参考范围：
2.0g/L-4.0g/L,建议各实验室建立自己的正常参考范围。
10.质量控制：
每批样本同时测定两个浓度水平（高值和正常值）的质控品，以2S为警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控.质控规则详见室内质控作业指导书.
11.临床意义：
FIB是用于判定血栓前状态或血栓性疾病的必查项目。
11.1参考范围：
2.0-4.0g/L
11.2FIB含量增高：
高凝状态（如糖尿病伴血管病变，急性心肌梗塞，脑血管病变，口服避孕药，妊娠及其中毒症，深静脉血栓形成，动脉粥样硬化，高血脂症等）;亦见于急性传染病，急性感染，肾小球疾病活动期，放射治疗后，烧伤，休克，外科手术后，恶性肿瘤，多发性骨髓瘤等。
11.3FIB含量减少：
肝脏疾病（重症肝炎，慢性肝炎，肝硬化等）；DIC消耗性低凝血期及纤溶期，溶栓治疗的监测，原发性纤维蛋白原缺乏症，原发性纤溶活性亢进，恶性贫血及肺、甲状腺、子宫、前列腺手术等。
11.4纤维蛋白原异常：
纤维蛋白原异常是一种遗传疾病，是常染色体显性遗传。
患者FIB含量可能在正常范围，但纤维蛋白原有质的异常，主要是FIB分子的一个多态上出现一个异常氨基酸，临床上可无症状或有轻度出血倾向。
12.变异的潜在来源
12.1抗凝剂：
草酸盐、EDTA、肝素不能用于FIB测定项目，抗凝比例不当也将
影响结果的准确性。
12.2样本采集处理不当，如血与抗凝剂未充分混匀，出现小凝块；混匀时过分用力，使红细胞破坏出现溶血，均会造成结果变异。
12.3纤溶药物的影响：
如双香豆素、链激酶、尿酶等
12.4妊娠与急性炎症的影响。
13.操作注意事项：
干粉试剂及质控血浆溶解
13.1确认溶剂类型，一般溶解液包括：
蒸馏水、生理盐水、缓冲液、厂家特定溶解液，必须按说明书要求使用。
13.2溶解时，轻轻转动容器，保证干粉完全溶解，避免剧烈振荡。
13.3复溶后，室温放置5-10分钟方可使用。
13.4如果测试时间不在标准曲线范围内，为了减少误差，建议重新稀释血浆；测试时间若长于1:
20稀释点，可作1:
5稀释后测定，结果乘以0.5；测试时间若短于1:
5稀释点，可作1:
20稀释后测定，结果乘以2。
13.5加珠器严禁放入搅拌孔内，也不要放入邻近孔内，以免钢珠磁化。
14.仪器维护与保养
14.1保持仪器清洁，应使用软布或干刷清除仪器表面的灰尘，允许使用温水或含有中性洗涤剂的水溶液蘸湿棉布擦除仪器表面污垢。
请勿使用含有有机溶剂和磨料的清洗剂。
14.2打开仪器，开机后等待仪器温度升至37℃，方向进行操作，以保证测量精密度。
14.3本仪器为高精密度测量仪器，要在坚固平稳的工作台上使用，不用时用防尘罩盖好。
14.4避免阳光直射，远离强热物体和强电磁场干扰源。
14.5未经服务人员同意，不得自行拆检。
14.6使用样品杯及钢珠应为一次性产品，以免影响测量精密度。
15.参考文献
15.1叶应妩.王毓三等《全国临床检验操作规程》第三版，东南大学出版社.
15.2北京倍肯恒业科技发展有限责任公司《ST4半自动血凝分析仪操作手册》.
血浆凝血酶时间（TT）测定
1.实验原理
活化凝血酶TT（10NIH/ml）作用于可溶性的纤维蛋白原将其转化为不溶性的纤维蛋白。
血浆（100微升）样本经60s预温后，加入37℃的TT试剂传感计时开始，血浆凝固致磁场中钢珠机械振动停止计时结束，然后计时器自动测出凝血酶时间。
2.标本采集
2.1早晨空腹采血（空腹12小时左右），静脉采血。
2.23.8％（2Na3C6H5O7.11H2O）枸椽酸钠溶液与全血1:
9抗凝，混匀。
3.标本存放：
1小时内（3000r/min×15min）分离血浆，室温放置不超过2小时，2～8℃保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70℃不超过6个月），只能冻融1次，在37℃迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试。
4.标本运输：
低温条件下运输。
5.标本拒收的标准：
抗凝剂不符合，采血量不准确，凝固，溶血，脂血标本不能作测定。
6.实验材料：
6.1倍肯公司TT试剂（凝血酶10NIH/ml），未开封试剂2～8℃保存到说明书上有效期，复溶后试剂可在室温下稳定长达8h。
6.2北京赛科希德质控血浆：
用蒸馏水1ml复溶，在室温（18～25℃）下放置30分钟，使用前轻轻摇匀；复溶后凝血质控品贮存于2～16℃稳定4h，准确性应达到以上要求。
7.仪器设备：
7.1仪器名称：
ST4半自动血凝分析仪
7.2仪器厂家：
北京倍肯恒业科技发展有限责任公司
8.操作步骤：
8.1检查前准备：
8.1.1检查试剂瓶中试剂量，确保试剂充足并将试剂放置在相应位置。
8.1.2复溶质控血浆。
8.1.3准备测试杯及测试珠（钢珠）。
8.2开机：
开机后仪器自动预热，A、B、C三个温度计均显示37℃表示仪器预热完成，进入系统准备工作状态，放置试剂预温10min左右可进行测定。
8.3加样预温：
进入测试界面，选择TT测试，将测试杯置于预温槽中预温，用加珠器在每个测试杯中放一粒钢珠，取100μl血浆加入测试杯中，按相应预温键进行标本预温。
8.4测试与报告结果：
预温结束将测试杯从预温槽移至测试槽中，用联动加样枪加入100μlTT试剂，仪器自动计时测试并打印报告。
可报告时间（S）。
8.5清除测试槽中已用测试杯。
8.6返回测试界面。
8.7关机：
将测试试剂放置2～8℃保存，关闭电源。
9.检验结果的判断与分析：
仪器设定TT参考范围在14-20秒，如果凝血时间延长，可能是纤维蛋白原含量或活性降低，或者缺乏凝血抑制因子。
10.质量控制：
每批样本同时测定两个浓度水平（高值和正常值）的质控品，以2S为警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
质控规则详见室内质控作业指导书。
11.1参考范围：
14-20秒
11.2TT延长：
患者血循环中AT-Ⅲ活性明显增高，肝素增多或类肝素抗凝物质存在，如SLE、肝病肾病等，异常纤维蛋白原血症，低（无）纤维蛋白原血症，FDP增多（如DIC），异常球蛋白增多（如MM）等。
11.3TT缩短：
常见于血样本有微小凝块或钙离子存在时。
12.变异的潜在来源
12.1抗凝剂：
草酸盐、EDTA、肝素不适用于TT检查
12.2标本采集处理不当,如血与抗凝剂未充分混匀，出现凝块，混匀时过分用力，使标本溶血，造成结果变异。
12.3纤溶药物的影响，如双香豆素、链激酶、尿酶等。
12.4超剂量使用肝素使凝固时间延长。
12.5FDP增加使凝固时间延长。
12.6某些药物，如口服避孕药、雌激素、天门冬酰胺酶、钠络酮等影响测试结果。
13.操作注意事项：
干粉试剂及质控血浆溶解
13.1确认溶剂类型，一般溶解液包括：
蒸馏水、生理盐水、缓冲液、厂家特定溶解液，必须按说明书要求使用。
13.2溶解时，轻轻转动容器，保证干粉完全溶解，避免剧烈振荡。
13.3复溶后，室温放置5-10分钟方可使用。
13.4加珠器严禁放入搅拌孔内，也不要放入邻近孔内，以免钢珠磁化。
14.仪器维护与保养
14.1保持仪器清洁，应使用软布或干刷清除仪器表面的灰尘，允许使用温水或含有中性洗涤剂的水溶液蘸湿棉布擦除仪器表面污垢。
请勿使用含有有机溶剂和磨料的清洗剂。
14.2打开仪器，开机后等待仪器温度升至37℃，方向进行操作，以保证测量精密度。
14.3本仪器为高精密度测量仪器，要在坚固平稳的工作台上使用，不用时用防尘罩盖好。
14.4避免阳光直射，远离强热物体和强电磁场干扰源。
14.5
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