生化考研重点知识总结.docx
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生化考研重点知识总结
生化考研重点知识总结
第一章单糖
①多糖与碘显色，至少需要的葡萄糖残基数：
6
②唾液淀粉酶激活剂：
Cl-
③几个典型非还原糖：
蔗糖、糖原、淀粉
④形成N-糖肽键的单糖或衍生物是：
第二章油脂
①几个非饱和脂肪酸双键数：
⑴油酸：
1
⑵亚油酸：
2
⑶亚麻酸：
3
②人不能自身合成的必须脂肪酸：
亚油酸、亚麻酸
③四种脂类转运脂蛋白：
⑴CM：
乳糜微粒，转运外源性三酰甘油酯
⑵VLDL：
极低密度脂蛋白，转运内源性三酰甘
油酯
⑶LDL：
低密度脂蛋白，转运内源性胆固醇
⑷HDL：
高密度脂蛋白，转运外源性胆固醇
第三章氨基酸与蛋白质
①几种主要氨基酸及三字母缩写
⑴两特殊：
Pro、Gly
⑵芳香：
酪（Tyr）色（Trp/Try，吸光最强）苯（Phe）
⑶八种必需氨基酸：
甲携来一本亮色书，Met/Val/Lys/Ile/Phe/Leu/Trp/Thr
⑷侧链为羟基氨基酸：
苏（Thr）丝（Ser）酪（Tyr）
⑸酸性氨基酸：
天（Asp）谷（Glu）※对应两酰胺：
Asn、Gln
⑹碱性氨基酸：
赖（Lys）精（Arg）组（His）
⑺其它：
丙氨酸（Ala）
②PI
⑴PI的计算：
PI=（PK1+PK2）/2=（PK1+PKRCOOH）/2=（PK2+PKRNH2）/2
⑵PH的计算：
PH=PK1+Lg（R/R+）=PK2+Lg（R-/R）
⑶PH=7的水中溶蛋白，PH=6，则该蛋白PI<6：
蛋白溶后PH下降为6，表明蛋白的COOH电离出H+，则产生了R-，PH=6>PI时有R-
③蛋白二级结构
⑴α螺旋：
Sn=，存在Pro时不形成α螺旋，右手螺旋
⑵β折叠：
同/反向，肽键中H与O成氢键，轴距
⑶β转角：
转角处为Gly
④超二级结构：
无规卷曲、结构域
⑤三级结构：
作用力（二硫键、疏水作用力、氢键、静电离子键、范德华力）
⑥蛋白结构分析
⑴N端分析法：
FDNB（Sanger）、PITC（Edman）、DNS-Cl（丹磺酰氯）、氨肽酶法
⑵C端分析法：
羧肽酶法、无水肼解法※羧肽酶A：
不能水解C端为Lys、Arg、Pro的肽键；羧肽酶B：
能水解C端为Lys、Arg的肽键；C端倒数第二位是Pro时，A、B都不能水解
⑶打开二硫键：
还原法（巯基化合物，碘乙酸保护）、氧化法（过甲酸）
⑷专一切断：
胰蛋白酶（Lys、Arg-COOH肽键）；CNBr（Met-COOH肽键）；胰凝乳蛋白酶（）；
⑦显色反应
⑴Follin酚：
蓝色，酚基（Tyr）、吲哚基（Trp），组分（CuSO4+磷钼酸）
⑵Millon：
红色，酚基（Tyr），组分（HgNO3+Hg（NO3）2）
⑶坂口反应：
红色，胍基（Arg），组分（α萘酚，NaClO）
⑷黄色反应：
黄色，芳香氨基酸，组分（浓HNO3）
⑸双缩脲反应：
紫红色，肽键，多肽，组分（NaOH+CuSO4）
⑹乙醛酸反应：
紫色，吲哚基（Trp）
⑧几种重要氨基酸
⑴提供活性甲基的：
S-腺苷Met
⑵形成N-糖肽键的：
Asp
⑶胶原蛋白中含量高的氨基酸：
Gly、Ala、Pro、HO-Pro、HO-Lys
⑨蛋白分离纯化技术：
透析、超滤；密度梯度离心；凝胶过滤；PI法、盐析、有机溶剂法；电泳、离子交换；吸附层析；亲和层析
※凝胶过滤大分子先出，凝胶电泳相反：
机理
△分子运动速度决定因素：
大小、电荷量、形状
※蛋白离子交换层析与洗脱：
※凝胶电泳三效应：
电荷、分子筛、浓度效应
⑩蛋白含量测定
⑴测N：
凯氏定氮、紫外吸光、双缩脲吸光、福林酚显色吸光
⑵测M：
沉降离心、凝胶过滤（凝胶排阻层析）、SDS-PAGE
※凯氏定氮：
HNO2反应，生成的N2中氨基酸占1/2
⑾其它
⑴分离二硫基的肽段可用：
SDS-PAGE
⑵几个主要氨基酸的PI值：
⑶几种重要蛋白：
⑷镰刀贫血病：
Glu→Val，第6位
⑸与烷化剂（碘乙酸）反应的氨基酸：
Cys（半胱氨酸）
第四章酶学
①酶活化中心组成：
结合部位、催化部位
②计算：
活力单位（IU、Kat）、比活力（IU/mg）、转化数/转化周期、米氏方程
③各可逆抑制作用的动力学特点：
Km、Vmax
※几个抑制作用：
竞争抑制（丙二酸对琥珀酸脱氢酶）；有有机磷（与丝氨酸羟基共价不可逆）；CO、CN（作用于Cytaa3）；不可逆抑制（重金属、有机砷、CN化物、硫化物、CO）
④酶促反应初速度与[E]、T有关
⑤以“三点结合”模型作用的酶：
甘油激酶
⑥酶的专一性
⑴专一水解葡萄糖形成的二酯键的酶：
⑵以O2为直接氢受体的氧化酶：
VC氧化酶、细胞色素氧化酶
⑦别构酶
⑴两独立功能部位：
活性中心、变构中心
⑵动力学曲线：
S型，其它为双曲线
⑶具有效应：
协同效应、变构效应
※典型代表—血红蛋白：
协同效应、波尔效应、变构效应
⑧酶分离纯化
⑴要求：
纯化倍数高、回收率高
※纯化倍数=比活力/纯化前总比活力
回收率=活力单位数/纯化前活力单位数
⑵方法：
同蛋白质
⑨竞争性抑制剂：
增[S]可减弱抑制作用
⑩患尿黑酸症的病人是由于：
缺少尿黑酸氧化酶（尿黑酸氧化酶遗传缺陷）
第五章核酸
①反向互补配对：
ACG-CGT（U）
②N-苷键：
Ψ（C1‘-C5），嘌呤（N9-C1‘），嘧啶（N1-C1’）
③SnRNA：
核仁不均一RNA，功能（促进转录、）
④核酸分离技术
2凝胶电泳：
三效应、分子运动速度决定因素见蛋白质
⑵离子交换层析：
阳离子交换层析，核苷酸脱下顺序：
U→G→C→A
阴离子交换层析，核苷酸脱下顺序：
C→A→U→G
3亲和层析：
可用亲和层析法分离的核酸：
mRNA（PolyA尾）
⑤DNA测序三法：
加减法（Sanger、1975），化学断裂法，双脱氧终止法（Sanger、1977、原理）
⑥不能形成两性离子的核苷酸是UMP：
原因
⑦cNMP
⑴最重要的cNMP：
cAMP、cGMP
⑵cAMP：
第二信使
⑷cAMP分子内有：
环化的磷酸二酯键
cAMP与cGMP：
生物作用并不是完全相反
第六章分子生物学与基因工程
①基因组学
⑴启动子组成3部分：
识别部位（-35、CG/CAAT），结合部位（-10、TATA），转录起始点
⑵高度重复序列：
卫星DNA、小卫星DNA、微卫星DNA
⑶原核生物基因重叠类型：
⑷基因家族按特点分三类：
简单多基因家族、复杂多基因家族、发育调控的复杂多基因家族
基因家族按组成分三类：
②DNA复制
⑴DNA复制方式：
线性（眼型），环状【θ（大肠杆菌）、滚环（病毒质粒）、D型（线粒
体、叶绿体）】
⑵DNA复制需引物：
转录不需引物
※原核DNA聚合酶功能：
损伤修复、校正、合成DNA
③基因工程酶
⑴RNase:
RNaseA（嘧啶3’→5’）、RNaseT1（G的3’→5’）、RNaseT2（A的3’→5’）
⑵DNA连接酶所需能量：
原核ATP、真核NAD+
⑶转移水解DNA-RNA中的RNA的酶：
RNaseH、逆转录酶（有RNaseH活性）
⑷牛脾磷酸二酯酶水解RNA所得产物：
5’磷酸切开，产生3’单磷酸核苷
⑸蛇毒磷酸二酯酶水解RNA所得产物：
3’-OH切开，产生5’单磷酸核苷
⑹核酸合成酶：
DDDP（依赖DNA的DNA聚合酶）、RDDP（依赖RNA的DNA聚合酶）、DDRP（依赖DNA的RNA聚合酶）
⑺RNAPol2：
RNAPolB，合成hnRNA，分布在核质中
⑻RNA用强碱水解产生：
2’-核苷酸、3’-核苷酸混合物
⑼限制内切酶切割特点：
4-8bp、6bp主要，成黏性、平齐末端，成回文序列，甲基化难切
④tRNA结构
⑴含稀有碱基最多：
D（二氢尿嘧啶）、ψ（假尿嘧啶）、I（次黄嘌呤）
⑵四环四臂五区：
D臂、TψC臂、氨基酸臂（受体臂）、反密码子臂
⑶二级：
三叶草
⑷三级：
倒L
⑤基因表达
⑴DNA重组过程中DNA连接四方式：
粘性末端连接、同聚物加尾法、加衔接物连接法、加
DNA接头连接法
⑵转位：
三类转位因子【（插入序列IS）、转座子（Tn）、可转座噬菌体】，转位后遗传
效应（突变、产生新基因、染色体畸变）
⑶转录：
转录5’端常见起始核苷酸是G、A，原核终止子在终止位点前有PolyU
⑷翻译：
参与肽链延伸的因子（EF-Tu、EF-TS、移位酶/G因子），肽基转移酶催化组分（23SrRNA），蛋白合成时生成肽键的能量来自高能酯键水解
⑸转录抑制剂：
利福平、利迪链霉素、放线素D、α-鹅膏蕈碱
⑹翻译抑制剂：
抗生素（氯霉素、链霉素、卡那霉素、新霉素、四环素、土霉素）※机理
干扰素（使起始因子eIF2磷酸化失活），毒素（抑制真核肽链延长）
⑥基因工程
⑴基因工程载体：
必备条件（自主复制、有标志基因便于筛选、易引入受体细胞、酶切位
点少、M大可携带大片基因）
常用载体（质粒、病毒、噬菌体、人工大染色体改造而来）
⑵DNA文库：
含某种生物体全部被转录成mRNA的所有基因序列
⑦密码子
⑴起始密码子：
原核（AUG、GUG、UUG，对应fMet）真核（AUG，对应Met）
※起始tRNA：
tRNAMet、tRNAfMet
⑵终止密码子：
UAA、UAG、UGA
⑶无义密码子：
UAA、UAG、UGA
⑷线粒体中三种特殊密码子：
UGA-色氨酸
⑸原核RF1识别的密码子：
UAA、UAX※RF2识别的密码子：
UAA、UGA
⑹密码子性质：
不重叠、特殊性、通用性、简并性、连续性、摆动性
※摆动性：
A-U，U-A、G，C-G，G-C、U，I-A、U、C
⑧其它
⑴SnRNA功能：
RNA成熟加工、与染色质结合、调节基因活性
⑵多拷贝基因有：
组蛋白基因、
⑶3种印迹法对应检测对象：
S-DNA、N-RNA、W-Pro
⑸Tm的影响三因素：
C三G、盐浓度（Na+）、DNA均一性（均一→窄）
Tm=（C+G）%×+
第七章维生素与激素
①几种重要酶的辅酶
⑴脱羧酶：
α酮酸脱羧酶（TPP/VB1）、氨基酸脱羧酶（磷酸吡哆醛（VB6）
※磷酸吡哆醛：
氨基酸脱羧酶、转氨酶的辅酶
⑵以FAD为辅酶的酶：
二氢硫辛酰胺脱氢酶、脂酰辅酶A脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、线粒体α磷酸甘油脱氢酶
⑶羧化酶的辅酶：
生物素（VB7）
⑷VB12：
钴胺素（参与甲基转移）
⑸氧化还原酶的辅酶：
NAD+
⑹以NADP为辅酶的酶：
苹果酸酶、6-p-G脱氢酶
⑺以FAK为辅酶的酶：
脂酰辅酶A脱氢酶
②几种特定功能的维生素
⑴凝血维生素：
VK，脂溶
⑵抗血维生素：
VC，水溶
⑶含A的维生素：
NAD+、NADP、FAD、CoASH
※VD：
体内活性最高的VD是：
1,25-二羟基胆钙化醇[1,25-（OH）2D3]
两种VD原：
VD3（7-脱氢胆固醇），VD2（麦角固醇）
VD3的形成：
胆固醇→7-脱氢胆固醇→VD3
③胰岛素等激素的受体是：
④含N激素受体在激素作用下与腺苷酸环化酶的耦联是由G蛋白介导实现的
⑤蛋白质类激素受体位于：
细胞质膜上
⑥类固醇激素受体位于：
细胞内
第八章生物氧化
①肌肉或神经细胞储存能量的高能化合物是：
磷酸肌酸（IP3）
②高能化合物有：
磷酸肌酸、1,3-二磷酸甘油酸、磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）、
③生物合成中主要的还原剂；NADPH，来源于HMS（磷酸戊糖途径/磷酸己糖旁路）
④生物氧化过程中，ATP生成方式：
底物水平磷酸化、氧化磷酸化
⑤线粒体的嵴：
外表面与基质接触，含有氧化磷酸化组分
⑥ATP合成酶
⑴F0F1-ATPase是：
催化ATP合成的酶形式，一种膜结合复合物，单独存在时没ATP酶活性
⑵F0：
含H+通道
⑦ATP合成机理
⑧细胞质脱下的一对氢进入线粒体的三方式：
异柠檬酸穿梭、苹果酸穿梭、甘油磷酸穿梭
⑨丙氨酸脱氢酶系的辅因子：
TPP（VB1）、CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、Mg2+
丙氨酸脱氢酶系的酶：
丙酮酸脱羧酶、硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸脱氢酶
⑩醛缩酶的底物是：
F-1,6-2P
⑾在TCA、有氧呼吸链中产生的ATP最多的是：
α-酮戊二酸→琥珀酸
第九章糖代谢
㈠糖酵解
①部位：
胞液
②过程：
葡萄糖、糖元转变为丙酮酸
③三关键酶：
⑴己糖激酶：
包括（葡糖糖激酶、果糖激酶），不受ATP/AMP的调节
⑵磷酸果糖激酶：
限速，主要激活剂（2,6-二磷酸果糖），抑制剂（ATP、柠檬酸）
⑶丙酮酸激酶：
受ATP/AMP的抑制
④产能：
2ATP
⑤醛缩酶的底物：
F-1，6-P2（1，6-二磷酸果糖）
※糖代谢中既催化脱氢又催化脱羧的两种酶：
异柠檬酸脱氢酶、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶
㈡糖的有氧氧化
①丙酮酸→乙酰辅酶A：
⑴部位：
线粒体内膜
⑵丙酮酸脱氢酶系：
3酶（丙酮酸脱羧酶、硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸脱氢酶）
5辅（TPP（VB1）、CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、Mg2+）
②TCA循环：
柠檬酸循环、Krebs循环
⑴调节TCA循环运转最主要的酶：
异柠檬酸脱氢酶（限速）、α-酮戊二酸脱氢酶系
⑵部位：
线粒体基质、内膜
⑶酶：
柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶（限速）、α-酮戊二酸脱氢酶系
③1分子葡萄糖有氧氧化产生ATP数：
36（38）=2+6（4）+6+24
④草酰乙酸来源三途径：
苹果酸酶和苹果酸脱氢酶、丙酮酸脱羧酶、磷酸丙酮酸脱羧酶
㈢磷酸戊糖途径、磷酸己糖旁路HMS
①核糖的分解途径是：
HMS
②生物合成中除ATP供能外
⑴合成糖还需：
UTP
⑵合成脂肪还需：
GTP
⑶生物合成的还原力是NADPH，来源是HMS
※反应部位总结
糖酵解（EMP）：
胞质
TCA：
线粒体基质、内膜
氧化磷酸化：
线粒体内膜
㈣糖元代谢
①合成糖元时，葡萄糖先活化成：
UDPG
②植物合成淀粉时需：
ADPG
③合成蔗糖需：
UDPG、6-P-G
㈤糖异生
第十章脂代谢
㈠三酰甘油代谢
①分解代谢
⑴β-氧化：
反应部位：
线粒体基质
产物：
偶数碳（乙酰CoA）、奇数碳（几个乙酰CoA+1个丙酰CoA）
反应过程：
二步脱氢（生成1FADH2+1NADH）、产ATP（5个）
⑵饱和脂肪酸分解
※酮体
生成部位：
肝内
成分：
乙酰乙酸、β-羟丁酸、丙酮
利用部位：
肝外，脑、肌
⑶不饱和脂肪酸氧化分解：
两特殊酶：
顺-反烯酯酰CoA异构酶、顺-反-β羟酯酰CoA异构酶
1分子软脂酸（16C）彻底氧化分解成CO2、H2O生成ATP数：
②脂肪酸合成
⑴脂肪酸合成代谢还原力是NADPH，来源是HMS
⑵催化胞液脂肪酸合成的限速反应由乙酰CoA羧化酶催化
⑶酰基载体为ACP，β-氧化中酰基载体是乙酰CoA
㈡磷脂代谢
①合成磷脂所需能量来自：
CTP
㈢胆固醇代谢
①在体内可直接合成胆固醇的化合物是：
脂酰CoA
第十一章氨基酸与蛋白质代谢
①几种氨基酸
⑴生酮氨基酸：
Leu、Lys
⑵生糖氨基酸：
除Leu、Lys外的
⑶生酮兼生糖氨基酸：
Phe、Tyr、Trp、Thr、Ile、Lys
⑷可转变为乙酰CoA的氨基酸：
⑸能与糖链发生糖基化的氨基酸：
②脱氨基
⑴氧化脱氨基：
L-Glu
⑵联合脱氨基：
组织中
⑶嘌呤核苷酸循环：
骨骼肌、心肌中
③直接排氨的动物：
水生动物（鱼）、原生动物
④氨的代谢
⑴氨的储存与转运：
储存方式：
转运方式：
丙氨酸-葡萄糖循环、谷氨酰胺-谷氨酸循环
※骨骼肌中脱氨基产生的氨通过什么途径转入肝脏：
丙氨酸-葡萄糖循环
⑵氨的去路-鸟氨酸循环（尿素循环）
部位：
肝（线粒体、胞质）
终产物：
尿素
关键酶：
※鸟氨酸循环生成尿素的前体是：
Arg
产物-尿素中N的来源：
N2-Asp
⑤个别氨基酸的代谢
⑴组胺的形成：
His脱羧
第十二章核苷酸代谢
㈠核苷酸合成代谢
①嘌呤碱基与嘧啶碱基中各原子来源
⑴嘌呤碱基
N1-Asp
C2、C8-C1（一碳单位）
N3、N9-Gln
C4、C5、N7-Gly
C6-CO2
⑵嘧啶碱基
C2-CO2
N3-Gln
N1、C4、C5、C6-Asp
②脱氧核苷酸的合成
⑴脱氧发生在NDP（核苷二磷酸）水平
⑵dTMP生成发生在NMP水平
※合成嘌呤需氨基酸：
Asp、Gln、Gly
合成嘧啶需氨基酸：
Gln、Asp
嘧啶核苷酸合成的重要中间产物是：
OMP
㈡核苷酸分解代谢
①嘌呤分解代谢
⑴人体嘌呤分解代谢主要终产物：
尿酸
⑵人、猿以外哺乳动物嘌呤代谢终产物：
尿囊素
※代谢综合总结：
联系糖、脂、蛋白三大物质代谢的关键物质是：
乙酰CoA、丙酮酸
氨甲蝶呤抑制：
嘌呤核苷酸、胸腺嘧啶核苷酸的从头合成
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