PCR试题.docx

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PCR试题

【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案（最佳答案）。

1．以下哪种物质在PCR反应中不需要（）

A．TaqDNA聚合酶

B．dNTPs

C．Mg2+

D．RNA酶

E．合适pH缓冲液

2．以下哪种酶可耐高温（）

A．TaqDNA聚合酶

B．HindⅢ

`

C．T4连接酶

D．RNA酶

E．Klenow片段

3．PCR反应正确过程应为（）

A．退火→变性→延伸

B．变性→退火→延伸

C．退火→延伸→变性

D．变性→延伸→退火

E．延伸→变性→退火

4．PCR技术的本质是（）

#

A．核酸杂交技术

B．核酸重组技术

C．核酸扩增技术

D．核酸变性技术

E．核酸连接技术

5．TaqDNA聚合酶酶促反应最适温度为（）

A．37℃

B．50℃～55℃

C．70℃～75℃

D．80℃～85℃

：

E．94℃～95℃

6．温度均一性较好的PCR仪为（）

A．水浴锅PCR基因扩增仪和压缩机PCR基因扩增仪

B．半导体PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪

C．压缩机PCR基因扩增仪和半导体PCR基因扩增仪

D．压缩机PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪

E．水浴锅PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪

7．一步就可以摸索出最适合反应条件的PCR仪为（）

A．普通PCR仪

B．梯度PCR仪

/

C．原位PCR仪

D．荧光PCR仪

E．实时PCR仪

8．能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为（）

A．普通PCR仪

B．梯度PCR仪

C．原位PCR仪

D．荧光PCR仪

E．实时PCR仪

9．SteadySlope技术是下列哪一家公司的专利技术（）

！

A．eppendorf公司

B．MJ公司

C．Cepheid公司

D．Roche公司

E．ABI公司

10．应用SteadySlope技术的是哪种PCR仪（）

A．普通PCR仪

B．梯度PCR仪

C．原位PCR仪

D．荧光PCR仪

—

E．实时PCR仪

11．在下列哪种PCR仪扩增样品可以了解样品中DNA原始拷贝数（）

A．普通PCR仪

B．梯度PCR仪

C．原位PCR仪

D．荧光实时PCR仪

E．定性PCR仪

12．以下是经过PCR扩增后得到的Ct值，哪个样品的DNA原始拷贝数最多（）

A．样品A，Ct=20

B．样品A，Ct=22

：

C．样品A，Ct=24

D．样品A，Ct=26

E．样品A，Ct=28

13．以空气为加热介质的PCR仪是（）

A．金属板式实时定量PCR仪

B．96孔板式实时定量PCR仪

C．离心式实时定量PCR仪

D．各孔独立控温的定量PCR仪

E．荧光实时定量PCR仪

14．以下哪个PCR扩增仪的PCR扩增样品槽被设计为离心转子（）

—

A．ABI7500

B．ABI7900

C．LightCycleTM

D．SmartCyclerⅡ

E．RG3000

15．以下哪个PCR扩增仪使用的是同一个激发光源和检测器（）

A．ABI7500

B．ABI7900

C．LightCycleTM

D．SmartCyclerⅡ

—

E．RG3000

16．可以在同一台定量PCR仪上分别进行不同条件定量PCR反应的是（）

A．ABI7500

B．ABI7900

C．LightCycleTM

D．SmartCyclerⅡ

E．RG3000

17．拥有独立智能升降温模块的是（）

A．ABI7500

B．ABI7900

|

C．LightCycleTM

D．SmartCyclerⅡ

E．RG3000

18．容纳样品量大，无需特殊耗材的是（）

A．ABI7500

B．ABI7900

C．LightCycleTM

D．SmartCyclerⅡ

E．RG3000

19．PCR基因扩增仪最关键的部分是（）

A．温度控制系统

B．荧光检测系统

C．软件系统

D．热盖

E．样品基座

20．“位置的边缘效应”是指（）

A．温度的准确性欠佳

B．温度的均一性欠佳

C．边缘升降温速度快

D．边缘升降温速度慢

[

E．梯度模式和标准模式温度不一致

21．PCR扩增仪升降温速度快有很多优点，以下哪一项应除外（）

A．缩短反应时间

B．提高工作效率

C．消除位置的边缘效应

D．缩短非特异性反应时间

E．提高反应特异性

22．在梯度模式下得出最佳反应条件，并以此条件在标准模式下单独做，但结果却不如人意，最有可能的原因是（）

A．样品孔温度与设定温度不一致

B．样品孔间的温度有差异

.

C．样品孔位置的边缘效应较高

D．升降温速度不够快

E．不同模式温度特性有差异

23．定量PCR扩增仪的关机次序一般为（）

A．关软件→关PCR仪→关电脑

B．关软件→关电脑→关PCR仪

C．关PCR仪→关软件→关电脑

D．关PCR仪→关电脑→关软件

E．关电脑→关PCR仪→关软件

>

24、PCR技术扩增DNA,需要的条件是（）

①目的基因　　②引物　　③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等　⑤mRNA　⑥核糖体

A、①②③④　　　　

B、②③④⑤　　　

C、①③④⑤　

D、①②③⑥

25、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为（）

A、L　　　

B、L　　

C、L　　

《

D、L

26、多重PCR需要的引物对为（）

A、一对引物　　　

B、半对引物

C、两对引物

D、多对引物

27、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应，其特异性决定因素为（）

A、模板　　　

B、引物

C、dNTP

;

D、镁离子

28、在PCR反应中，下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增（）

A、TaqDNA聚合酶加量过多　　　

B、引物加量过多

C、A、B都可

D、缓冲液中镁离子含量过高

29、PCR技术是一种DNA的扩增技术。

在一定条件下，加入模板DNA、DNA聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP可以实现DNA的扩增。

据此判断不合理的是

A．dATP在DNA扩增中可以提供能量，同时作DNA合成的原料

B．dTTP完全水解后产物有胸腺嘧啶、磷酸、核糖

、

C．DNA扩增过程未加解旋酶，可以通过先适当加温的方法破坏氢键，使模板DNA解旋

D．CTP水解脱去两个磷酸基后是组成RNA的基本单位之一

30、多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。

PCR过程一般经历下述三十多次循环：

95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。

下列有关PCR过程的叙述中不正确的是：

（）

A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现

B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成

C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸

D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高

31、下列有关PCR技术的叙述，不正确的是：

（）

A．PCR技术经过变形、复性、延伸三个阶段

B．PCR技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等

）

C．PCR技术需在体内进行D．PCR技术是利用碱基互补配对的原则

32、PCR技术扩增DNA,需要的条件是（）

①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等　⑤mRNA　⑥核糖体

A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥

33、在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个）放入PCR仪中扩增4代，那么，在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应是

A．640B．8100C．600D．8640

34、对禽流感的确诊，先用PCR技术将标本基因大量扩增，然后利用基因探针，测知待测标本与探针核酸的碱基异同。

下图P表示禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置，M、N、Q、W是四份送检样品在测定后的电泳标记位置，哪份标本最有可能确诊为禽流感（）

A．MB．NC．QD．W

35、某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中，发现了一种冰冻的已灭绝的巨大动物的肌肉。

他想了解该巨型动物的DNA与现今印度大象的DNA的相似性，于是做了如下检测工作，其中正确的操作步骤及顺序是

￥

①降低温度，检测处理后形成的杂合DNA双链区段

②通过PCR技术扩增巨型动物和大象的DNA

③把巨型动物的DNA导入大象的细胞中

④在一定的温度条件下，将巨型动物和大象的DNA水浴共热

A.②④③B.②④③①C.③④①D.②④①

36、PCR的发明人是

A.MullisB.牛顿D.James

37、退火温度一般比引物的熔解温度（Tm）低多少合适

A.7℃B.10℃C.5℃D.2℃E.20℃

38、引物的最佳浓度为

A.μMB.1-2μMC.5-10μMD.100μME.200μM

39、专门用于制备单链DNA的PCR技术是

A、对称PCR

B、反向PCR

C、RT－PCR

D、不对称PCR

E、嵌套PCR

40、PCR变性温度一般为

A．96℃B.85℃C.72℃D.55℃E.100℃

41、pre-mRNA内含子的5'-末端一般为（）

@

A、AU

B、GU

C、AG

D、CG

E、AC

42、在大肠杆菌的DNA损伤修复时，对于填补缺口可能最重要的酶是

A、DNA聚合酶Ⅰ

B、DNA聚合酶Ⅱ

C、DNA聚合酶Ⅲ

D、RNA聚合梅

@

E、以上都不是

43、可用于扩增未知序列的PCR方法是（）

A、对称PCR

B、反向PCR

C、RT-PCR

D、不对称PCR

E、嵌套PCR

44、在聚合酶链反应（PCR）中最常用的DNA聚合酶是

A．T4DNA连接酶

B．T7DNA聚合酶

C．TaqDNA聚合酶

D．E.coliDNA聚合酶I

E．E.coliDNA聚合酶II

45、下列关于PCR引物设计的说法错误的是（）

—

A．设计引物时应考虑使3’端引物和5’端引物具有相似的Tm值

B．每条引物自身不应有稳定的发夹结构

C．上下游引物之间不宜形成稳定的二聚体结构

D．引物的5’和3’端必须和模板严格配对结合

E．引物与非特异扩增区的序列无同源性

46、TaqDNA聚合酶可以不依赖模板在dsDNA的3’末端加上一个碱基为（）

A.GB.AC.TD.CE.I

【X型题】每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案。

1．PCR技术每一个循环均包含以下哪些环节（）

…

A．酶切

B．变性

C．退火

D．延伸

E．连接

2．以下哪些酶可用于PCR反应（）

A．Klenow

B．HindⅢ

C．TaqDNA聚合酶

D．RNase

}

E．DNase

3．目前常用的PCR基因扩增仪控温方式有（）

A．水浴锅控温

B．压缩机控温

C．半导体控温

D．离心式空气控温

E．金属控温

4．普通PCR基因扩增仪除通常的定性PCR仪外，还包括（）

A．水浴式PCR仪

B．梯度PCR仪

`

C．原位PCR仪

D．变温金属块式PCR仪

E．变温气流式PCR仪

5．按变温方式不同，PCR基因扩增仪可分为（）

A