3、生理条件下（pH7、0左右），蛋白质分子中得Arg侧链与Lys侧链几乎完全带正电荷，但His侧链带部分正电荷。
4、测定蛋白质紫外吸收得波长，一般在280nm，主要由于蛋白质中存在着Phe、Trp、Tyr氨基酸残基侧链基团。
5、皮肤遇茚三酮试剂变成蓝紫色，就是因为皮肤中含有蛋白质（氨基酸）所致。
6、Lys得pk1（
—COOH）=2、18，pk2（
—
）=8、95，pk3（
—
）=10、53，其pI为9、74。
在pH=5、0得溶液中电泳，Lys向负极移动。
7、Henderson—Hasselbalch方程为pH=pKa+lg[质子受体]/[质子受体]。
8、实验室常用得甲醛滴定就是利用氨基酸得氨基与中性甲醛反应，然后用碱（NaOH）来滴定上放出得NH3+/氨基。
9、一个带负电荷得氨基酸可牢固地结合到阴离子交换树脂上，因此需要一种比原来缓冲液pH值小与离子强度高得缓冲液，才能将此氨基酸洗脱下来。
10、用N-溴代琥珀酰亚胺试剂可区分丙氨酸与色氨酸。
二、选择题
1、区分极性氨基酸与非极性氨基酸就是根据（C）
A、所含得羧基与氨基得极性B、所含氨基与羧基得数目
C、所含得R基团为极性或非极性D、脂肪族氨基酸为极性氨基
2、下列哪一种氨基酸不属于人体必需氨基酸（D）
A、亮氨酸B、异亮氨酸C、苯丙氨酸D、酪氨酸
3、下列哪一组氨基酸为酸性氨基酸：
（D）
A、精氨酸，赖氨酸B、谷氨酸，谷氨酰胺
C、组氨酸，精氨酸D、谷氨酸，天冬氨酸
4、含硫得必需氨基酸就是（B）
A、半胱氨酸B、蛋氨酸C、苏氨酸D、亮氨酸
5、芳香族必需氨基酸包括（D）
A、蛋氨酸B、酪氨酸C、亮氨酸D、苯丙氨酸
6、含四个氮原子得氨基酸就是（B）
A、赖氨酸B、精氨酸C、酪氨酸D、色氨酸
7、蛋白质中不存在得氨基酸就是下列中得哪一种？
（D）
A、赖氨酸B、羟赖氨酸C、酪氨酸D、鸟氨酸
8、在蛋白质中不就是L-氨基酸得就是（B）
A、苏氨酸B、甘氨酸C、半胱氨酸D、谷氨酰胺
9、谷氨酸得PK值为2、19,4、25,9、76;赖氨酸得PK值为2、18,8、95,10、53;则它们得PI值分别为（B）
A、2、19与10、53B、3、22与9、74C、6、96与5、56D、5、93与6、36
10、从赖氨酸中分离出谷氨酸得可能性最小得方法就是（D）
A、纸层析B、阳离子交换层析C、电泳D、葡萄糖凝胶过滤
11、用于确定多肽中N-末端氨基酸得就是（C）
A、Sanger试剂B、Edman试剂C、两者均可D、两者均不可
12、有一蛋白质水解物,在PH6时,用阳离子交换柱层析,第一个被洗脱得氨基酸就是（C）
A、Val（PI5、96）B、Lys（PI9、74）C、Asp（PI2、77）D、Arg（PI10、76）
13、下列那种氨基酸属于非编码氨基酸？
（D）
A、脯氨酸B、精氨酸C、酪氨酸D、羟赖氨酸
14、可使二硫键氧化断裂得试剂就是（C）
A、尿素B、巯基乙醇C、过甲酸D、SDS
15、没有旋光性得氨基酸就是（C）
A、AlaB、ProC、GlyD、Glu
16、Sanger试剂就是（B）
A、苯异硫氰酸酯B、2,4—二硝基氟苯C、丹磺酰氯D、β-巯基乙醇
17、酶分子可逆共价修饰进行得磷酸化作用主要发生在哪一个氨基酸上（B）
A、AlaB、SerC、GluD、Lys
18、当含有Ala,Asp,Leu,Arg得混合物在pH3、9条件下进行电泳时，哪一种氨基酸移向正极（+）（B）
A、AlaB、AspC、LeuD、Arg
19、下列哪种氨基酸溶液不使平面偏振光发生偏转（B）
A、ProB、GlyC、LeuD、Lys
20、对哺乳动物来说，下列哪种氨基酸就是非必需氨基酸（C）
A、PheB、LysC、TyrD、Met
21、一个谷氨酸溶液，用5ml得1M得NaOH来滴定，溶液中得PH从1、0上升到7、0，下列数据中哪一个接近于该溶液中所含谷氨酸得毫摩尔数为（B）
A、1、5B、3、0C、6、0D、12
22、下列AA中含氮量最高得就是（A）
A、ArgB、HisC、GlnD、Lys
23、下列在280nm具有最大光吸收得基团就是（A）
A、色氨酸得吲哚环B、酪氨酸得酚环C、苯丙氨酸得苯环D、半胱氨酸得硫原子
24、在生理pH值条件下，具有缓冲作用得氨基酸残基就是（C）
A、TyrB、TrpC、HisD、Lys
25、下列关于离子交换树脂得叙述哪一个就是不正确得？
（D）
A、就是人工合成得不溶于水得高分子聚合物B、阴离子交换树脂可交换得离子就是阴离子C、有阳离子交换树脂与阴离子交换树脂两类D、阳离子交换树脂可交换得离子就是阴离子
26、下列哪种氨基酸可使肽链之间形成共价交联结构（D）
A、MetB、SerC、GluD、Cys
27、下列氨基酸中哪个含有吲哚环？
（C）
A、MetB、TyrC、TrpD、His
三、名词解释
1、α-氨基酸：
就是含有氨基得羧酸，氨基连接在α-碳上。
α-氨基酸就是蛋白质得构件分子。
2、必需氨基酸：
机体自身不能合成、必须从外界摄入得氨基酸种类。
3、层析：
层析技术又称色谱技术，就是一种根据被分离物质得物理、化学及生物学特性得差异，使它们在某种基质中移动速度不同而进行分离与分析得方法。
4、纸层析：
利用滤纸作为层析载体，按照混合物在移动相与固定相之间分配比例得不同，将混合成分分开得技术。
5、离子交换层析：
就是以离子交换剂为固定相，根据物质得带电性质不同而进行分离得一种层析技术。
6、氨基酸得等电点：
在某一pH得溶液中，氨基酸解离成阳离子与阴离子得趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性，在电场中既不向阳极也不向阴极移动。
此时溶液得pH值称为该氨基酸得等电点。
四、问答题（课后题6，7，14，15）
生化测试二蛋白质
一、填空题
1、决定多肽或蛋白质分子空间构像能否稳定存在，以及以什么形式存在得主要因素就是由一级结构决定得。
2、用于测定蛋白质溶液构象得各种方法中，测定主链构象得方法有圆二色性与拉曼光谱,测定侧链构象得方法有紫外差光谱与荧光与荧光偏振，能测定主链与侧链构象得有核磁共振。
3、测定蛋白质中二硫键位置得经典方法就是对角线电泳。
4、从混合蛋白质中分离特定组分蛋白质得主要原理就是根据它们之间得溶解度、分子量/分子大小、带电性质、吸附性质、生物亲与力。
5、血红蛋白与氧结合就是通过变构效应实现得、由组织产生得CO2扩散到细胞,从而影响Hb与O2得亲合力,这称为波尔效应。
6、蛋白质二级结构与三级结构之间还存在超二级结构与结构域两种组合体。
7、蛋白质多肽链主链构象得结构单元包括α-螺旋、β-折叠、β-转角,，维系蛋白质二级结构得主要作用力就是氢键。
8、三肽val-tyr-ser得合适名字就是缬氨酰酪氨酰丝氨酸。
9、蛋白质得
-螺旋结构中，3、6个氨基酸残基旋转一周，每个氨基酸沿纵轴上升得高度为0、15nm，旋转100度。
10、凡能破坏蛋白质水化层与电荷层得因素，均可使蛋白从溶液中沉淀出来。
11、变性蛋白质同天然蛋白质得区别就是生物活性丧失，紫外吸收增加，溶解度降低，易被酶消化。
12、聚丙烯酰胺凝胶电泳得分辨力之所以很高,就是因为它具有电荷效应、分子筛效应、浓缩效应三种效应。
13、交换层析分离蛋白质就是利用了蛋白质得带电/解离性质。
阴离子交换层析在层析柱内填充得交换剂上带正电荷，可吸引带负电荷得蛋白质，然后用带负电荷得溶液洗柱将蛋白质洗脱下来。
14、当蛋白质分子中得一个亚基与其配体结合后，能影响此寡聚体中另一个亚基与配体得结合能力，此效应称为协同效应。
当Hb得第一个亚基与O2结合后，对其她三个亚基与O2得结合具有促进作用，这种效应称为正协同效应。
其氧解离曲线呈S型。
15、胰岛素原由1条肽链组成。
二、选择题
1、下列描述中哪些叙述对一直链多肽Met-Phe-Leu-Thr-Val-Ile-Lys就是正确得（AC）
A、能与双缩脲试剂形成紫红色化合物B、由七个肽键连接而成
C、胰凝乳蛋白酶水解D、含有-SH
2、_D__就是一种去垢剂,常用在凝胶电泳中,以测定蛋白质得分子量（）
A、β-巯基乙醇B、盐酸胍C、碘乙酸D、十二烷基硫酸钠
3、以下氨基酸中哪一种可能会改变多肽链得方向与阻断a－螺旋（D）
A、PheB、CysC、TrpD、Pro
4、免疫球蛋白分子中二重链之间，以及重链与轻链之间，均以如下一种键得形式相连（C）
A、氢键B、疏水相互作用C、二硫键D、离子键
5、蛋白质分子中α螺旋得特点就是（C）
A、肽键平面完全伸展B、靠盐键维持稳定C、多为右手螺旋D、螺旋方向与长轴垂
6、为从组织提取液中沉淀出活性蛋白最有可能得方法就是加入（A）
A、硫酸铵B、三氯乙酸C、对氯汞苯甲酸D、氯化汞E、NH4Cl
7、下述哪种分离方法可得到不变性得蛋白质制剂（D）
A、苦味酸沉淀B、硫酸铜沉淀C、常温下乙醇沉淀D、硫酸钠沉淀E、加热
8、有一个肽用胰蛋白酶水解得：
①H-Met-Glu-Leu-Lys-OH②H-Ser-Ala-Arg-OH③H-Gly-Tyr-OH三组片段，用BrCN处理得：
④H-Ser-Ala-Arg-Met-OH⑤H-Glu-Leu-Lys-Gly-Tyr-OH两组片段，按肽谱重叠法推导出该九肽得序列应为（C）
A、3+2+1B、5+4C、2+1+3D、2+3+1E、1+2+3
9、蛋白质变性后，不发生下列哪种改变（C）
A、生物活性丧失 B、易被降解 C、一级结构改变 D、空间结构改变E、次级键断裂
10、两个不同蛋白质中有部分得一级结构相同（B）
A、这部分得二级结构一定相同B、这部分得二级结构可能不同C、它们得功能一定相同
D、它们得功能一定不同E、这部分得二级结构一定不同
11、带电颗粒在电场中得泳动度首先取决于下列哪项因素（C）
A、电场强度B、支持物得电渗作用C、颗粒所带净电荷数及其大小，形状
D、溶液得pH值E、溶液得离子强度
12、关于离子交换色谱得描述下列哪一项不正确（CD）
A、离子交换剂通常不溶于水B、阳离子交换剂常中离解出带正电得基团
C、阴离子交换剂常可离解出带正电得基团D、阳离子交换剂常可离解出带负电得基团
E、可用于分离纯化等电点等于7得蛋白质
13、对于蛋白质得溶解度，下列叙述中哪一条就是错误得（B）
A、可因加入中性盐而增高B、在等电点时最大C、可因加入中性盐降低
D、可因向水溶液中加入酒精而降低E、可因向水溶液中加入丙酮降低
14、向血清中加入等容积得饱与硫酸铵溶液，可使（E）
A、白蛋白沉淀B、白蛋白与球蛋白都沉淀C、球蛋白原沉淀
D、纤维蛋白原沉淀E、只有球蛋白沉淀
15、下列蛋白质中，具有四级结构得就是（D）
A、胰岛素B、细胞色素CC、RNA酶D、血红蛋白E、肌红蛋白
16、下列哪种蛋白质不含铁原子（E）
A、肌红蛋白B、细胞色素CC、过氧化氢酶D、过氧化物酶E、胰蛋白酶
17、下列各项不符合纤维状蛋白理化性质得就是（B）
A、长轴与短轴在比值大于10B、易溶于水C、不易受蛋白酶水解
D、不适合用分子筛得方法测其相对分子质量E、其水溶液黏度高
18、血红蛋白得氧合曲线向右移动就是由于（AC）
A、O2分压得减少B、CO2分压得减少C、CO2分压得增加
D、N2分压得增加E、pH得增加
19、关于蛋白质三级结构得描述，下列哪项就是正确得（A）
A、疏水基团位于分子内部B、亲水基团位于分子内部
C、羧基多位于分子内部D、二硫键位于分子表面
20、镰刀型贫血病患者，Hb分子中氨基酸得替换及位置就是（D）
A、α链第六位Val换成GluB、β链第六位Val换成Glu
C、α链第六位Glu换成ValD、β链第六位Glu换成Val
21、下列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时，最先被洗脱得就是（D）
A、牛胰岛素（分子量5700）B、肌红蛋白（分子量16900）
C、牛β乳球蛋白（分子量35000）D、马肝过氧化物酶（分子量247500）
22、每分子血红蛋白可结合氧得分子数就是（D）
A．1B．2C．3D．4
23、免疫球蛋白就是一种什么蛋白（A）
A．糖蛋白B．脂蛋白C．铁蛋白D．核蛋白
24、特殊得羟-Pro与羟-Lys存在于下列哪种蛋白质中（A）
A、胶原B、角蛋白C、肌球蛋白D、微管蛋白
三、就是非题
1、蛋白质分子得一级结构决定其高级结构，最早得实验证据就是蛋白质得可逆变性（√）。
2、原胶原纤维中参与产生共价交联得就是羟脯氨酸残基。
（×）
3、a-螺旋中Glu出现得概率最高,因此poly（Glu）可以形成最稳定得a-螺旋。
（×）
4、用重金属盐沉淀蛋白质时，溶液得PH值应稍大于蛋白质得等电点。
（√）
5、phe-leu-ala-val-phe-leu-lys就是一个含有7个肽键得碱性七肽。
（×）
6、pH8条件下,蛋白质与SDS充分结合后平均每个氨基酸所带电荷约为0、5个负电荷。
（√）
7、在Hb分子中，其F8His与E7His都分别以第五与第六位与血红素中得Fe配位相结合。
（×）
8、在蛋白质分子进化过程中，其空间结构得变化要比序列得变化更为保守。
（√）
9、使亚基间缔合成一个蛋白质得主要作用力就是次级键，而其中又以疏水基团之间得作用力最为普遍。
（√）
10、二硫键与蛋白质得三级结构密切有关，因此没有二硫键得蛋白质就只有一级与二级结构。
（×）
11、任何一个蛋白质得紫外吸收得峰值都在280nm附近。
（×）
四、名词解释
1、蛋白质变性：
蛋白质在某些物理与化学因素作用下，其特定得空间构象被破坏，也即有序得空间结构变成无序得空间结构，从而导致其理化性质改变与生物活性得丧失。
2、结构域：
指多肽链在二级结构或超二级结构得基础上形成三级结构得局部折叠区，它就是相对独立得紧密球状实体，称为结构域。
3、同源蛋白质:
来自不同种类生物得序列与功能类似得蛋白质。
4、Edman降解：
就是一种用来测定多肽与蛋白质氨基酸序列得方法。
用苯异硫氰酸酯与多肽得N末端得氨基酸反应，从多肽链得N末端切下第一个氨基酸残基，用层析法可以测定在与这个被切下得氨基酸残基。
余下得多肽链（少了一个氨基酸残基），再进行下一轮Edman降解循环，切下N末端得第二个氨基酸残基，并测定。
重复循环过程，直到测出整个多肽得氨基酸序列。
5、β-转角：
多肽链中常见得二级结构，连接蛋白质分子中得二级结构（α-螺旋与β-折叠），使肽链走向改变得一种非重复多肽区。
常见得β-转角含有四个氨基酸残基，第一个残基得C=O与第四个残基得N-H氢键键合形成一个紧密得环，第二个残基大都就是脯氨酸。
此结构多处在蛋白质分子得表面。
6、蛋白质得超二级结构：
也称之模序（motif），在蛋白质中由若干相邻得二级结构单元组合在一起，彼此相互作用，形成得有规则、在空间上能辨认得二级结构组合体。
7、肽平面：
肽键具有一定程度得双键性质，参与肽键得六个原子C、H、O、N、Cα1、Cα2不能自由转动，位于同一平面，此平面就就是肽平面。
四、问答题
1、某八肽得氨基酸组成就是2Lys,Asp,Tyr,Phe,Gly,Ser与Ala。
此八肽与FDNB反应、酸水解后释放出DNP—Ala。
用胰蛋白酶水解该八肽，得到两个三肽及一个二肽，其三肽得氨基酸组成分别为Lys,Ala,Ser与Gly,Phe,Lys。
用胰凝乳蛋白酶（糜蛋白酶）水解该八肽，释放出游离得Asp及一个四肽与一个三肽，四肽得氨基酸组成就是Lys,Ser,Phe,Ala,三肽与FDNB反应后，经酸水解释放出DNP—Gly。
根据上述结果分析，写出该八肽得氨基酸排列顺序，并简述分析过程。
（分析过程写在反面）
Ala-Ser-Lys-Phe-Gly-Lys-Tyr-Asp
题1,胰蛋白酶、糜蛋白酶水解后氨基酸后“分别为”给人得感觉有歧义,好像就是构成一个顺序一样、仔细分析一下题,显然从题意来瞧水解得片段组成没顺序、
DNS-Ala不用说N端第一个氨基酸Ala确定了、胰蛋白酶切割左边精、赖氨酸位点,糜蛋白酶切割左边phe、trp、tyr位点、
糜蛋白酶水解产生游离得ASP不用说八肽C端-phe-ASP顺序确定了、产物四肽含有phe,phe一定在四肽得C末端确定了、
胰蛋白酶水解产物Lys,Ala,Ser,显然Lys一定在C末端,这三肽顺序就确定ala-ser-Lys、又由于四肽包含了三肽Lys,Ala,Ser、显然四肽顺序为Ala-ser-Lys-Phe
现在只剩下2个氨基酸顺序没确定,又胰蛋白酶另一个水解三肽为Gly,Phe,Lys,而这个三肽中得phe又就是必定与ASP相连,Gly与Lys被两个phe夹着,要保证胰蛋白酶水解3,3,2得结果,故八肽顺序为：
Ala-ser-Lys-Phe-Gly-Lys-Phe-Asp
2、试考虑一个由ala,arg2,glu2,asp2,gly,lys,ser,thr组成得十一肽，用Sanger试剂DNFB处理确定其N-末端为谷氨酸，经部分酸水解后得到下列各肽段：
（asp,glu）、（glu,gly）、（asp,glu,gly）、（ala,asp）、（ala,asp,ser）、（asp,glu,lys）、（ser,thr）、（asp,lys）、（arg,thr）、（arg2,thr）、（ala,asp,gly）、（arg,lys），请直接写出此十一肽得氨基酸全顺序。
（注：
给出得12个小肽段只表示氨基酸组成，而非顺序）
glu-gly-asp-ala-ser-thr-arg-arg-lys–asp-glu或反向序列
N末端为Glu而十一肽、Lys只有1个,其为突破口（asp,lys）（arg,lys）可知Lys必然被夹着,又（asp,glu,lys）故glu-ASP-Lys-Arg,当然NC末端还无法确定
由（ser,thr）（arg,thr）可知Thr只有一个也必然被夹着又由于（arg2,thr）可知为Ser-Thr-Arg-Arg、2个Arg已确定故：
glu-Asp-Lys-Arg-Arg-Thr-Ser、又（ala,asp,ser）（ala,asp,gly）可知Ser连接（ala,asp）然后与Gly相连,又（asp,glu,gly）可以确定gly与Asp相连故Ser-Ala-Asp-Gly、又（asp,glu,gly）
可以确定整个顺序Glu-Asp-Lys-Arg-Arg-Thr-Ser-Ala-Asp-Gly-Glu
推到出来两头都有Glu,此题似乎信息无法确定哪端就是N端哪端就是C端?
生化测试三酶
一、填空题
1、酶得活性中心有结合部位与催化部位两个功能部位，其中结合部位直接与底物结合，决定酶得专一性，催化部位就是发生化学变化得部位，决定催化反应得性质。
2、温度对酶活性得影响有以下两个方面，一方面随着温度得升高酶活性增加，另一方面过高得温度会使酶蛋白变性。
3、酶活力就是指酶催化一定化学反应得能力，一般用单位时间内酶催化反应产物得增加量表示。
4、磺胺类药物可以抑制二氢叶酸合成酶，从而抑制细菌生长繁殖。
5、全酶有酶蛋白与辅助因子组成，在催化反应时，二者所起得作用不同，其中酶蛋白决定专一性与效率，辅助因子起传递电子、原子或化学基团得作用。
6、酶活性得快速调节方式包括变构调节与可逆修饰。
7、酶促反应得特点为专一性、高效性、催化条件温与活性可调节。
二、选择题
1、竞争性可逆抑制剂得抑制程度与下列哪种因素无关（A）
A、作用时间B、抑制剂浓度C、底物浓度D、酶与抑制剂亲与力得大小
E、酶与底物亲与力得大小
2、哪种情况可用增加[S]得方法减轻抑制程度（B）
A、不可逆抑制作用B、竞争性可逆抑制作用C、非竞争性可逆抑制作用
D、反竞争性可逆抑制作用E、无法确定
3、酶得竞争性可逆抑制剂可以使（C）
A、Vmax减小，Km减小B、Vmax增加，Km增加C、Vmax不变，Km增加
D、Vmax不变，Km减小E、Vmax减小，Km增加
4、下列常见抑制剂中，除哪个外都就是不可逆抑制剂（E）
A、有机磷化物B、有机汞化物C、有机砷化物D、氰化物E、磺胺类药物
5、溶菌酶在催化反应时，下列因素中除哪个外，均与酶得高效率有关（D）
A、底物形变B、广义得酸碱催化C、邻近效应与轨道定向D、共价催化E、无法确定
6、在一酶反应体系中，若有抑制剂I存在时，最大反应速度为V’max，没有抑制剂时得最大反应速度为Vmax，若V’max=Vmax（E0-I0）/E0，则I为（D）
A、竞争性可逆抑制剂B、非竞争性可逆抑制剂C、反竞争性可逆抑制剂
D、不可逆抑制剂E、不确定
7、关于变构酶下列哪一种说法就是错得（C）
A、变构效应剂多为酶得底物或产物B、存在催化与调节两个活性部位
C、反应符合米-曼氏方程式D、反应曲线呈S形E、一般由多个亚基组成
8、酶得活化与去活化过程中，酶得磷酸化与去磷酸化得位点通常在酶得哪一种氨基酸残基上（D）
A、天冬氨酸B、脯氨酸C、赖氨酸D、丝氨酸E甘氨酸
9、以Hill系数判断，具有负协同效应得别构酶（C）
A．n>1B、n=1C、n<1D、n大于等于1E、n小于等于1
10．酶得抑制剂（B）
A、由于引起酶蛋白变性而使酶活性下降B、使酶活性下降而不引起酶蛋白变性
C、只引起酶蛋白变性而可能对酶活性无影响D、一般为强酸，强碱E、都与底物结构相似
11．关于变构调节，正确得就是（B）
A、所有变构酶都有一个调节亚基，一个催化亚基
B、变构酶得动力学特点就是酶促反应与底物浓度得关系呈s形而不呈双曲线形
C、变构激活与酶被激活剂激活得机制相同D、变构抑制与非竞争抑制相同
12．同工酶得叙述，正确得就是（C）
A、结构相同来源不同
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