苏州大学生物化学考研题库.docx

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苏州大学生物化学考研题库

第三章蛋白质

一、名词解释

#1、免疫球蛋白：

是一类具有抗体活性的动物糖蛋白。

主要存在于血浆中，也见于其它体液及组织分泌物中。

一般可分为五种。

2、超二级结构：

在蛋白质尤其是球蛋白中，存在着若干相邻的二级结构单位（α－螺旋、

β－折叠片段、β－转角等）组合在一起，彼此相互作用，形成有规则的、在空间能辨认的二级结构组合体，充当三级结构的构件，称为超二级结构

3、纤维状蛋白：

纤维状蛋白分子结构比较有规律，分子极不对称，呈极细的纤维状，溶解性能差，在生物体内具保护、支持、结缔的功能，如毛发中的角蛋白，血纤维蛋白等。

4、盐析作用：

向蛋白质溶液中加入大量中性盐，可以破坏蛋白质胶体周围的水膜，同时又中和了蛋白质分子的电荷，因此使蛋白质产生沉淀，这种加盐使蛋白质沉淀析出的现象，称盐析作用。

5、球状蛋白：

球状蛋白的空间结构远比纤维状蛋白复杂，分子呈球形或椭圆形，溶解性能好，如血红蛋白、清蛋白、激素蛋白等。

#6、疏水相互作用：

蛋白质分子某些疏水基团有自然避开水相的趋势而自相黏附，使蛋白质折叠趋於形成球状蛋白质结构时，总是倾向将非极性基团埋在分子内部，这一现象称为疏水相互作用。

7、简单蛋白与结合蛋白

简单蛋白：

完全由氨基酸组成的蛋白质称为简单蛋白。

结合蛋白：

除了蛋白质部分外，还有非蛋白成分，这种蛋白叫结合蛋白。

8、别构现象：

当有些蛋白质表现其生理功能时，其构象发生变化，从而改变了整个分子的性质，这种现象称别构现象。

9、分子病：

指某种蛋白质分子一级结构的氨基酸排列顺序与正常的有所不同的遗传病。

10、多肽链：

多个氨基酸以肽键相互连接形成多肽，多肽为链状结构，又叫多肽链。

11、桑格（Sanger）反应：

即2，4二硝基氟苯与α—氨基酸中氨基反应生成DNP-氨基酸，是黄色二硝基苯衍生物。

用此反应可以N-端氨基酸的种类。

是生化学家Sanger创用，故称桑格反应。

12、等电点：

当调节氨基酸溶液的pH值，使氨基酸分子上的－NH2和－COOH的解离度完全相等，即氨基酸所带净电荷为零，在电场中既不向正极移动，也不向负极移动，此时氨基酸所处溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。

13、氨基酸残基：

组成多肽链的氨基酸单位已不是完整的氨基酸分子，其中每一个

－NH－CH－CO－

│单位称为氨基酸残基。

R

14、别构现象：

当有些蛋白质分子表现其生物功能时，其构象发生改变，从而改变了整个分子的性质，这种现象称为别构现象。

15、肽键平面：

组成肽键（酰胺键）的六个原子（C,N,O,H,α-C,α-C）位于同一平面，呈刚性平面结构，其中C-N键具有偏双键性质，C=O,N-H为反式排布，这种平面称肽键平面又称酰胺平面。

16、结构域：

在超二级结构基础上，多肽链（40-400个氨基酸范围）再折叠成相对独立的三维实体，称为结构域。

一般由100-200个氨基酸残基组成，大蛋白质分子由2-3个结构域形成三级结构，较小蛋白质的三级结构即是单结构域。

17、蛋白质的变性作用：

天然蛋白质因受物理的或化学的因素影响，其分子内部原有的高度规律性结构发生变化，致使蛋白质的理化性质和生物学性质都有所改变，但并不导致蛋白质一级结构的破坏，这种现象叫蛋白质的变性作用

18、氨基酸残基：

组成多肽链的氨基酸单位已不是完整的氨基酸分子，因此每一个-NH-CH-CO-残基称为氨基酸残基。

#19、透析：

利用胶体对半透膜的不可渗透性，可将蛋白质溶液中低分子量的杂质与蛋白质分离开，因而得到较为纯净的蛋白质，这种以半透膜提纯蛋白质的方法称透析。

二、选择

1、每个蛋白质分子必定有（三级结构）

A.α-螺旋结构B.β-片层结构

C.三级结构D.四级结构E.辅基

2、关于肽键的下列描述,错误的是（E）

A.具有部分双键性质

B.可为蛋白酶所水解

C.是蛋白质分子中主要的共价键

D.是一种酰胺键，稳定性高

E.以上都不对

*3、下列氨基酸中具有亲水侧链的是（苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸）

A苏氨酸B亮氨酸C丝氨酸

D丙氨酸E谷氨酸

4、酰胺平面中具有部分双键性质的单键是：

（B）

AC-CαBC-N

CN-HDN-Cα

5、与氨基酸相似的蛋白质的性质是（两性性质）

A.高分子性质B.胶体性质

C.沉淀性质D.两性性质

E.变性性质

6、含有色氨酸的蛋白质所特有的显色反应是：

（乙醛酸反应）

A双缩脲反应B黄色反应C米伦氏反应

D乙醛酸反应E坂口反应F福林试剂反应

7、一种蛋白质的营养价值高低主要决定于（C）

A是否好吃可口

B来源是否丰富

C所含必需氨基酸的种类是否完全和相对数量的多少

D市场价格的贵贱

*8、肽键平面的结构特点是：

（ABD）

A4个原子处于一个平面

B肽键中的C-N键具有双键的性质

C肽键中的C-N键可以自由旋转

D只有α-碳原子形成的单键可以自由旋转

E肽键平面是蛋白质一级结构的基本单位

*9、分离纯化蛋白质主要根据蛋白质的哪些性质（形状大小、溶解度、电荷）

A分子的形状和大小B粘度不同

C溶解度不同D溶液的pH值

E电荷不同

*10、可用来鉴定蛋白质肽链N-末端氨基酸的试剂是：

（DE）

A茚三酮B亚硝酸C甲醛

D2，4二硝基氟苯E异硫氰酸苯酯

11、跨膜蛋白与膜脂在膜内结合部分的氨基酸残基（大部分是疏水性）

A大部分是酸性B大部分是碱性

C大部分疏水性D大部分是糖基化

*12、变性蛋白中未被破坏的化学键是：

（肽键、二硫键）

A氢键B盐键C疏水键

D肽键E二硫键F范得华力

*13、下列关于蛋白质的三级结构的叙述哪些是正确的（BD）

A．一条多肽链和一个辅基连成的紧密型结构。

B．蛋白质分子中含有α－螺旋、ß－片层折叠结构和ß－转角。

C．其辅基通过氨基酸残基与分子内部相连。

D．大部分非极性基团位於蛋白质分子内部。

14、含有精氨酸的蛋白质特有的呈色反应是：

（坂口反应）

A.双缩脲反应B.黄色反应C.米伦氏反应

D.乙醛酸反应E.坂口反应F.福林试剂反应

*16、含有酪氨酸的蛋白质能引起的呈色反应是：

（双缩尿反应、黄色反应、米伦氏反应、福林试剂反应）

A.双缩脲反应B.黄色反应C.米伦氏反应

D.乙醛酸反应E.坂口反应F.福林试剂反应

*17.下列关于蛋白质三级结构的叙述，哪些是正确的（B,D）

A.一条多肽链和一个辅基连成的紧密球形结构

B.蛋白质分子中含有α－螺旋，ß－片层折叠和ß－转角

C.其辅基通过氨基酸残基与分子内部相连

D.大部分非极性基团位於蛋白质分子内部

*18.在pH6-7的溶液中带负电荷的氨基酸有：

（asp、glu）

A）.AspB.ArgC.Glu

D.GlnE.HisF.Lys

*19、可用来判断蛋白质水解程度的反应是：

（BC）

A茚三酮反应

B亚硝酸反应

C甲醛反应

D2，4-二硝基氟苯反应

E异硫氰酸苯酯反应

20、胰岛素A链与B链的交联靠：

（二硫键）

A氢键

B盐键

C二硫键

D酯键

E范德华力

*21、在pH6-7范围内带正电荷的氨基酸有：

（arg、his、lys）

A、Asp

B、Arg

C、Glu

D、Gln

E、His

F、Lys

23、蛋白质一级结构与功能关系的特点是:

（B）

A相同氨基酸组成的蛋白质功能一定相同

B一级结构相近的蛋白质其功能类似性越大

C一级结构中任何氨基酸的改变,其生物活性就丧失

D不同生物来源的同种蛋白质.其一级结构完全相同

E一级结构中氨基酸残基任何改变,都不会影响其功能

24、在下列肽链主干原子排列中,符合肽链结构的是：

（E）

AC—N—N—C

BN—C—C—N

CN—C—N—C

DC—C—C—N

EC—C—N—C

FC—O—N—H

25、蛋白质平均含氮量为：

（16%）

A10%

B12%

C14%

D16%

*26、蛋白质胶体溶液的稳定因素是：

（BD）

A蛋白质颗粒在溶液中进行布朗运动，促使其扩散

B蛋白质分子表面有水膜

C蛋白质溶液粒度大

D蛋白质分子带有同性电荷

27、蛋白质空间构象的特征主要取决于:

（氨基酸的排列次序）

A.氨基酸的排列次序B.次级键的维持力

C.温度,pH,离子强度D.肽链内和肽链间的二硫键

28、蛋白质二级结构的主要维系力是（二硫键）

A、盐键B、疏水键C、氢键D、二硫键

*29、非蛋白质氨基酸是：

（　A、B）　

　Ａ、OrnB、CitC、AspD、ArgE、GluF、Lys

30、具有四级结构的蛋白质是（血红蛋白　）

　Ａ、α‐角蛋白　　　　　　　Ｂ、β‐角蛋白　　　　　　Ｃ、肌红蛋白

　Ｄ、细胞色素Ｃ　　　　　　　Ｅ、血红蛋白　　　　　　　

31、在酰胺平面中具有部分双键性质的单键是（　B　）

　Ａ、Ｃα－Ｃ　　　　Ｂ、Ｃ－Ｎ　　　　Ｃ、Ｎ－Ｈ　　　　Ｄ、Ｎ－Ｃα

*32、可用来判断蛋白质水解程度的反应是（BC）

A、茚三酮反应B、亚硝酸反应C、甲醛反应

D、2，4–二硝基氟苯反应E、异硫氰酸苯酯反应

#33、α–螺旋表示的通式是（B）

A、3.010B、3.613C、2.27D、4.616

三、判断

1、血红蛋白与肌红蛋白均为氧的载体,前者是一个典型的变构蛋白,而后者却不是。

（√）

2、蛋白质的变性是蛋白质分子空间结构的破坏,因此常涉及肽键的断裂。

（×）

3、芳香氨基酸均为必需氨基酸。

（×）

#4、凝胶过滤法测定蛋白质分子量是根据不同蛋白质带电荷多少进行的。

（×）

#5、用透析法可解开蛋白质中的二硫键。

（×）

#6、SDS-PAGE测定蛋白质分子量的方法是根据蛋白质分子所带电荷不同。

（×）

7、蛋白质分子中的肽键是单键,因此能够自由旋转.（×）

8、变性蛋白质溶解度降低是因为蛋白质分子的电荷被中和以及除去了蛋白质外面的水化层所引起的（×）

#9、一个蛋白质样品经酸水解后，能用氨基酸自动分析仪准确测定它的所有氨基酸（×）

10、双缩脲反应是肽和蛋白质特有的反应，所以二肽也有双缩脲反应。

（×）

#11、可用8M尿素拆开蛋白质分子中的二硫键（×）

12、维持蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键（×）

13、多数蛋白质的主要带电基团是它N-末端的氨基和C－末端的羧基组成。

（×）

14、在水溶液中，蛋白质溶解度最小时的pH值通常就是它的等电点。

（√）

15、天然氨基酸都具有一个不对称α－碳原子。

（×）

16、亮氨酸的疏水性比丙氨酸强。

（√）

17、自然界的蛋白质和多肽类物质均由L-型氨基酸组成。

（×）

18、蛋白质在pI（等电点）时，其溶解度最小。

（√）

19、蛋白质多肽链的骨架是CCNCCNCCN---。

（√）

20、一氨基一羧基氨基酸pI为中性，因为－COOH和NH3+解离度相同。

（×）

21、构型的改变必须有共价键的破坏。

（√）

#22、纸电泳分离氨基酸是基于它们的极性性质。

（×）

四、填空

1、蛋白质溶液在280nm波长处有吸收峰,这是由于蛋白质分子中存在着_________,___________和__________残基。

（苯丙氨酸酪氨酸色氨酸）

2、胰蛋白酶是一种________酶,专一性地水解肽链中_______和_________残基的羧基端形成的肽键。

（水解酶赖氨酸精氨酸）

3、一般说来,球状蛋白分子含有_____氨基酸残基在其分子内部,含________氨基酸残基在其分子的表面.（非极性极性）

4、血浆脂蛋白包括、、、、。

（乳糜微粒、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、极高密度脂蛋白）

5、蛋白质按分子形状分为和；按分子组成分为

和。

（纤维状蛋白球状蛋白简单蛋白结合蛋白）

6、蛋白质的变性作用最主要的特征是，变性作用是由于蛋白质分子发生改变所引起的。

（生物学性质的改变内部高度规律性结构）

7、β-折叠结构的特点是：

（1）肽段伸展呈；

（2）在片层中个肽段走向可以是；也可以是；（3）氢键是在之间形成；（4）R伸向锯齿的方。

（锯齿状平行反平行相邻肽链主链上的-C=O与—N—H前）

8、组成蛋白质的20中氨基酸中，除外，均为α-氨基酸；除外，氨基酸分子中的α-碳原子，都有旋光异构体；天然蛋白质分子中，只存在氨基酸。

（ProGlyL-）

9、能形成二硫键的氨基酸是___________。

（半胱氨酸）

10、蛋白质的二级结构有、、和等类型。

（α-螺旋β-折叠β转角自由回转）

11、根据组成蛋白质20种氨基酸侧链R基的化学结构，，可将蛋白质分为四大类：

（脂肪氨基酸，芳香氨基酸，杂环氨基酸，杂环亚氨基酸）

12、蛋白质多肽链主链形成的局部空间结构称为二级结构.这些二级结构进一步排列一些有规则的模块称之为___________或叫作____________.（超二级结构，折迭单元）

13、一个氨基酸的α－羧基与另一个氨基酸的α－氨基脱水缩合而成的化合物______

肽。

氨基酸脱水后形成的键叫_____键，又称______键。

（二肽肽酰胺键）

14、稳定蛋白质胶体系统的因素是________和___________.（水膜，电荷）

15、GSH由_________和____________，___________组成的。

（Glu，Cys，Gly，）

16、-螺旋是蛋白质二级结构的主要形式之一，其结构特点是：

（1）螺旋盘绕手性为；

（2）上升一圈为nm；（3）一圈中含氨基酸残基数为，每个残基沿轴上升nm；（4）螺旋圈与圈之间靠而稳定；（5）螺旋中R伸向。

（右手0.543.60.15氢键外侧）

17、α-螺旋是蛋白质级结构的主要形式之一，该模型每隔个氨基酸残基，螺旋上升一圈。

α-螺旋稳定的主要因素，是相邻螺圈三种形成。

β-折叠结构有以及两种形式，稳定β-折叠的主要因素是。

（二3.6氢键平行式反平行式氢键）

18、蛋白质具有各种各样的生物功能，例如有，，，，。

（催化运动结构基础防御营养）

19、多肽链的正链是由许多___平面组成.平面之间以原子相互隔开,并以该原子为顶点作运动。

（_酰胺C旋转）

#20、常用的拆开蛋白质分子中二硫键的方法有

（1）.________法,常用的试剂为_________.

（2）.___________法,常用的试剂为_________或_________。

（氧化过氧甲酸还原巯基乙醇巯基乙酸）

21、1、蛋白质变性作用最主要的特征是，变性作用是由于蛋白质分子中的被破坏，引起。

（生物学性质的改变，次级键，天然构象的解体）

22、蛋白质的一级结构是由共价键形成的，如和；而维持蛋白质空间构象的稳定性的是次级键，如、、和等。

（肽键，二硫键；氢键，盐键，疏水键，范德华力）

#23、最早提出蛋白质变性理论的是____________。

（吴宪）

24、蛋白质的二级结构有、、和等类型。

（α–螺旋，β–折叠，β–转角,自由回转）

25、破坏蛋白质的和中和了蛋白质的，则蛋白质胶体溶液就不稳定而出现沉淀现象，蛋白质可因加入、、和等类试剂而产生沉淀。

（水膜，电荷，高浓度盐类，有机溶剂，重金属盐，某些酸）

26、在下列空格中填入合适的氨基酸名称：

（1）________是带芳香族侧链的极性氨基酸。

（2）________和_________是带芳香族侧链的非极性氨基酸。

（3）________是含硫的极性氨基酸。

（4）在一些酶的活性中心中起重要作用并含羟基的极性较小的氨基酸是__________。

（1）Tyr

（2）Trp、Phe（3）Cys（4）Ser

五、计算

1、某一蛋白质的多肽链在一些区段为α螺旋构象,在另一些区段为β构象，该蛋白质的分子量为240000,多肽链外形的长度为5.06x10-5厘米,试计算：

α螺旋体占分子的百分比?

（假设β构象中重复单位为0.7nm,即0.35nm长/残基。

氨基酸残基平均分子量以120为计）

设：

α－螺旋体占分子的X％

该蛋白质应含有的氨基酸残基数为：

240,000/120=2,000个

根据多肽链的结构，建立以下方程式：

0.15nm*2000*X％＋0.35nm*2,000*（100-X）％＝5.06*10－5cm

则：

3X+700-7X=5.06x10-5x107

4X=194

X=48.5

2、测得一个蛋白质中色氨酸的残基占总量的0.29%，计算蛋白质的最低分子量。

（色氨酸残基的分子量为186）（2分）解：

M=186*100/0.29=64138

3、肌红蛋白含铁量为0.335%，其最小分子量是多少？

血红蛋白含铁量也是0.335%。

试求其分子量。

解：

肌红蛋白的分子量为：

100：

0.335=M：

56M=100*56/0.335=16716.4

血红蛋白的分子量为：

100：

0.335=M：

（4*56）M=66865.7

4、一个大肠杆菌的细胞中含106个蛋白质分子，假设每个蛋白质分子平均分子量约为40000，并且所有的分子都处于α-螺旋构象，计算每个大肠杆菌细胞中的蛋白质多肽链的总长度。

（假设氨基酸残基的平均分子量为118）解：

（106*40000/118）*0.15*10-7=5.08（cm）

5、测得一个蛋白质的样品的含氮量为10克，计算其蛋白质含量。

解：

1克氮=6.25克蛋白质10*6.25=62.5克

6、试计算油100个氨基酸残基组成的肽链的α.－螺旋的轴长长度。

（2.5分）

解：

0.15nmx100=15nm

7、下列氨基酸的混合物在pH3.9时进行电泳，指出哪些氨基酸朝正极移动？

哪些氨基酸朝负极移动？

（3分）

Ala（pI＝6.0）Leu（pI=6.02）Phe（pI=5.48）

Arg（pI=10.76）Asp（pI=2.77）His（pI=7.59）

解：

朝负极移动者：

Ala，Leu，Phe，Arg，His。

朝正极移动者：

Asp

8、计算100个氨基酸残基组成的肽链的α—螺旋的轴长度。

15nm

9、已知牛血清白蛋白含色氨酸0.58%（按重量算）,色氨酸分子量为204。

（1）计算最低分子量；

（2）用凝胶过滤测得牛血清白蛋白分子量大约为7万,问该分子中含有几个Trp残基。

解答：

（1）设：

当该牛血清白蛋白只含一个Trp时的最低分子量为M

则:

204/M=0.58%

M=0.58%/204=35172（约35000为计）

（2）该分子中应含Trp残基个数为：

70000/35000=2

六、问答

1、一个A肽：

经酸解分析得知由Lys,His,Asp,Glu2,Ala,以及Val,Tyr和两个NH3分子组成。

当A肽与FDNB试剂反应后,得DNP-Asp;当用羧肽酶处理后得游离缬氨酸。

如果我们在试验中将A肽用胰蛋白酶降解时,得到二肽,其中一种（Lys,Asp,Glu,Ala,Tyr）在pH6.4时,净电荷为零,另一种（His,Glu,以及Val）可给出DNP-His,在pH6.4时,带正电荷.此外,A肽用糜蛋白酶降解时,也得到二种肽,其中一种（Asp,Ala,Tyr）在pH6.4时呈中性,另一种（Lys,His,Glu2,以及Val）在pH6.4时,带正电荷，问A肽的氨基酸顺序如何?

（10分）

答：

由题意可知A肽为八肽，由Lys、His、Asp、Glu2、Ala、Val、Tyr组成。

且其中包括二个酰胺；

由FDNB及羧肽酶反应可知N端为Asp，C端为Val；

由胰蛋白酶解、pH＝6.4时电荷情况、生成DNP-His知所得二个肽段应为：

Asp－Glu、Ala、Tyr、Lys－（Glu、Asp其中有一个酰胺）

－His－Gln－Val

再由糜蛋白酶解、pH＝6.4时电荷情况知所得肽段应为：

Asn－Ala－Tyr－

－Glu－Lys－His－Gln－Val

所以整个八肽的氨基酸顺序应为：

Asn－Ala－Tyr－Glu－Lys－His－Gln－Val

2、将含有Asp（pI=2.98）,Gly（pI=5.97）,Thr（pI=6.53）,Leu（pI=5.98）和Lys（pI=9.74）的pH＝3.0的柠檬酸缓冲液,加到预先用同样缓冲液平衡过的Dowex-50阳离子交换树脂中,随后用该缓冲液洗脱此柱,并分部的收集洗出液,,这五种氨基酸将按什么次序洗脱下来?

（8分）

答：

氨基酸在离子交换层析中被洗脱下的次序取决于氨基酸在该条件下所带电荷的种类、大小以及分子本身的极性等。

因此以上五种氨基酸在pH＝3.0缓冲液洗脱，洗脱下来的次序是：

Asp－Thr－Glu－Leu－Lys先……………………后

3、有一个七肽,经分析它的氨基酸组成是:

Lys,Gly,Arg,Phe,Ala,Tyr,和Ser.此肽未经糜蛋白酶处理时,与FDNB反应不产生α-DNP-氨基酸.经糜蛋白酶作用后,此肽断裂成两个肽段,其氨基酸组成分别为Ala,Tyr,Ser,和Gly,Phe,Lys,Arg.这两个肽段分别与FDNB反应,可分别产生DNP-Ser和DNP-Lys.此肽与胰蛋白酶反应,同样能生成两个肽段,它们的氨基酸组成分别是Arg,Gly,和Phe,Tyr,Lys,Ser,Ala.试问此七肽的一级结构是怎样的?

答因为此肽未经糜蛋白酶处理时与FDNB反应不产生α-DNP-氨基酸可推断为：

环七肽

从经糜蛋白酶水解成的两个片段及它们与FDNB的反应产物可知该两片段可能为：

－Ser－Ala－Tyr－

（1）

－Lys－Gly、Arg、Phe－（20）

此肽与胰蛋白酶反应生成的两个片段应是：

－Gly－Arg－（3）

－Phe、Tyr、Ser、Ala、Lys－（40）

（20）肽段结合（3）肽段综合分析应为：

－Lys－Gly－Arg－Phe－

（2）

（40）与

（1）肽段综合分析应为－Phe－Ser－Ala－Tyr－Lys－（4）

综合

（2）与（4）肽段，此肽应为：

Gly－Arg－Phe－Ser－Ala

׀׀

Lys________________Tyr

4、下列氨基酸的混合物在pH3.9时进行电泳，指出哪些氨基酸朝正极移动？

哪些氨基酸朝负极移动？

Ala（pI＝6.0）Leu（pI=6.02）Phe（pI=5.48）

Arg（pI=10.76）Asp（pI=2.77）His（pI=7.59）

解：

向负极移动者：

Ala，Leu，Arg，Phe，His.

向正极移动者：

Asp

5、某多肽的氨基酸顺序如下:

Glu-Val-Lys-Asn-Cys-Phe-Arg-Trp-Asp-Leu-Gly-Ser-Leu-Glu-Ala-Thr-Cys-Arg-

-His-Met-Asp-Gln-Cys-Tyr-Pro-Gly-G