基因芯片PGDPGS技术的临床应用课件.pptx

基因芯片PGDPGS技术的临床应用课件.pptx

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将已知序列的基因探针集成在平面基质载体上，形成密集、有序的DNA分子微阵列样本DNA荧光标记与芯片上所含的基因序列进行杂交通过扫描荧光信号的强度，检测样本基因表达情况。

荧光信号强度与基因拷贝数正相关GBandFISHaCGH、aSNPFisheletal.FertilSteril20101MakeamplifiedDNAGENOMICDNA（200-400ng）2IncubateamplifiedDNA3FragmentamplifiedDNA4Precipitate&resuspend5PrepareBeadChip6HybridizesamplesonBeadChipGenotypeandLOH/CNanalysis98ImageBeadChipDAY1DAY2DAY3ThefirstthreebabiesbornintheworldfromtheSNPtechnologywerefromLaJollaIVF.CA.USA遗传病筛查和诊断23对染色体非整倍体拷贝数变异（CNVs）aCGH是是aSNP是是FISH最多10-12对否染色体结构不平衡0.5Mb0.05Mb有限的单基因病否否否线粒体突变否是否单亲二倍体否是否PCR聚合酶链式反应FISH荧光原位杂交aCGH微阵列比较基因组杂交aSNP微阵列单核苷酸多态性NGS二代测序JoyceC.etal.HumGenet（2012）131:

175186PGDPGS目的诊断出遗传学正常的胚胎，从而使遗传学正常的胎儿妊娠/出生染色体正常的胎儿妊娠/出生适应症单基因病、X连锁遗传、亲代染色体异常高龄、反复妊娠失败、复发性流产、严重男性不育生育力可生育不育、低生育力常用诊断技术FISH、PCR、arrayFISH、array未确诊结果的处理不移植可移植产前诊断建议与自然妊娠标准相同单基因疾病：

常显、常隐、X连锁染色体异常：

结构、数目异常女方年龄35岁、复发性流产反复胚胎植入失败、不良孕产史严重男性不育症单基因疾病：

常显、常隐、X连锁染色体异常：

结构、数目异常K.HaapaniemiKouruetal.HumanReproduction,Vol.27,No.9pp.28432849,2012瑞典斯德哥尔摩PGD中心1996年2009年256对夫妇569个促排卵周期我国普通人群染色体异常：

0.47%不孕不育患者染色体异常：

3%10%，显著增高时间检查总例数数目异常结构异常异常占比参考值2009.12-2014.028026对186对313对6.22%3%10%备注：

数目异常包括：

Turner、Klinefelter、XYY、XXX、及其嵌合体结构异常包括：

易位，倒位，缺失、重复，其中易位占结构异常的44.4%Turner45,XOKlinefelter47,XXY平衡易位46,XYt（1,6）（qter;q12）罗氏易位45,XYt（13,14）（q10;q10）染色体结构正常配子携带者异常配子异常类型平衡易位1/181/1816/18罗氏易位1/61/64/6倒位1/41/42/4缺失、重复1/201/2夫妇一方或双方染色体异常复发性流产不明原因复发性流产HelenFlynnetal。

J.Obstet.Gynaecol.Res.Vol.40,No.1:

109116,January20141992.01-2011.03HelenFlynnetal。

J.Obstet.Gynaecol.Res.Vol.40,No.1:

109116,January2014总流产率55.6%F.Fiorentinoetal.HumanReproduction,Vol.26,No.7pp.19251935,2011F.Fiorentinoetal.HumanReproduction,Vol.26,No.7pp.19251935,2011NathanR.Treff,etal.FertilityandSterilityVol.95,No.5,April2011女方年龄35岁、复发性流产反复胚胎植入失败、不良孕产史严重男性不育症AMA：

高龄RM：

复发性流产RIF：

反复种植失败SMF：

严重男性因素HumanReproductionUpdate,Vol.18,No.3pp.234-247,2012欧洲人类生殖与胚胎学协会PGD联盟19972007年57家中心超过27000个周期FrancoCausioetal,2002,Chromosomeanalysisofspontaneousabortionsafterinvitrofertilization（IVF）andintracytoplasmicsperminjection（ICSI）,EuropeanJournalofObstetrics&GynecologyandReproductiveBiology635abortedproducts：

normalkaryotypeswere44.9%（n=285;euploid280,translocation5）abnormalkaryotypeswere55.1%（n=350;trisomy199,doubletrisomy22,monosomy25,polyploidy38,tetraploidy9,derivativeoftranslocation34,others23）PereMiretal.JAssistReprodGenet（2013）30:

143149患者指征筛查周期芯片检测卵裂球数正常胚胎异常胚胎筛查失败移植周期临床妊娠临床妊娠率早期流产率复发性流产31个202个53个（26.24%）145个（71.78%）4个（1.98%）24个16例66.67%（16/24）6.25%（1/16）截止2014.02.2823-chromosomesinglenucleotidepolymorphism（SNP）microarraypreimplantationgeneticscreening（PGS）forrecurrentpregnancyloss（RPL）in687invitrofertilization（IVF）cyclesand5871embryosMATERIALSANDMETHODS:

AretrospectivereviewwasconductedofallembryosthatunderwentPGSby23chromosomeSNPmicroarraysfromJanuary2010toApril2012.PatientsunderwentstandardIVFandPGSprimarilyduetoahistoryof2spontaneousmiscarriages.CONCLUSION:

PGSusing23chromosomeSNPmicroarraysinwomenwithRPLwassuperiortoFISHPGS.Furthermore,performingthebiopsyattheblastocyststagewassuperiortocleavagestagebiopsy.Theapplicationofdensemicroarray23chromosomePGSattheblastocyststagemaysubstantiallyimprovepregnancyoutcomesincouplessufferingfromRPL.E.Grecoetal.AdvancesinReproductiveSciences1（2013）7-14