微生物学习题集14章答案讲解.docx

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微生物学习题集14章答案讲解

【第一章原核微生物】

一、填空题

1.革兰氏阳性细菌的细胞壁成分为----------和-----------；革兰氏阴性细菌细胞壁分内外两层，内层成分是----------，外层称外膜，成分为----------、----------和----------。

革兰氏阳性细菌的细胞壁成分为肽聚糖和磷壁酸；革兰氏阴性细菌细胞壁分内外两层，内层成分是肽聚糖，外层称外膜，成分为脂多糖、磷脂和脂蛋白。

2.在革兰氏阳性细菌细胞壁的肽聚糖成分中，肽包括----------和----------两种，聚糖则包括----------和----------两种糖。

在革兰氏阳性细菌细胞壁的肽聚糖成分中，肽包括四肽尾和肽桥两种，聚糖则包括N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸两种糖。

3.肽聚糖中的双糖是由----------连接的，它可被----------水解，从而形成无细胞壁的原生质体。

肽聚糖中的双糖是由β-1,4-糖苷键连接的，它可被溶菌酶水解，从而形成无细胞壁的原生质体

4.E.coli的肽聚糖单体结构与Staphylococcusaureus的基本相同，所不同的是①----------，②----------。

E.coli的肽聚糖单体结构与Staphylococcusaureus的基本相同，所不同的是前者①四肽尾第3个氨基酸是m-DAP，②无五肽桥

5.G+细菌细胞壁的特有成分是----------，G－细菌的则是----------。

G+细菌细胞壁的特有成分是磷壁酸，G－细菌的则是脂多糖

6.脂多糖（LPS）是革兰氏阴性细菌细胞壁外膜的主要成分，由----------------、----------------和----------------三部分构成，在LPS上镶嵌着多种外膜蛋白，例如----------------等。

脂多糖（LPS）是革兰氏阴性细菌细胞壁外膜的主要成分，由脂质A、核心多糖和O-特异侧链三部分构成，在LPS上镶嵌着多种外膜蛋白，例如孔蛋白等

7.在G－细菌细胞壁的外膜与细胞膜间有一狭窄空间，称为----------------。

其中含有多种周质蛋白，如----------------、----------------和----------------等。

在G－细菌细胞壁的外膜与细胞膜间有一狭窄空间，称为周质空间。

其中含有多种周质蛋白，如水解酶类、合成酶类和运输蛋白等

8.人为去尽细胞壁的细菌称为-----------，未除尽壁的细菌常称为-----------，在实验室中发生自发缺壁突变的细菌被称为-----------，而自然界中存在的稳定型无壁原核微生物则是-----------。

人为去尽细胞壁的细菌称为原生质体，未除尽壁的细菌常称为球状体，在实验室中发生自发缺壁突变的细菌被称为L型细菌，而自然界中存在的稳定型无壁原核微生物则是支原体

9.解释细菌细胞膜结构和功能的学说称为-----------系1972年由Singer等提出。

解释细菌细胞膜结构和功能的学说称为液态镶嵌模型系1972年由Singer等提出

10.耐高温微生物细胞膜中含有较多-----------脂肪酸，耐低温微生物细胞膜中则含有较多的-----------脂肪酸。

耐高温微生物细胞膜中含有较多饱和脂肪酸，耐低温微生物细胞膜中则含有较多的不饱和脂肪酸。

11.古生菌与真细菌在细胞膜成分上的主要不同如：

①磷脂的疏水尾由-----------组成，②亲水头（甘油）与疏水尾间通过-----------连接，③存在特殊的-----------层膜或-----------层膜等。

古生菌与真细菌在细胞膜成分上的主要不同如：

①磷脂的疏水尾由植烷醇组成，②亲水头（甘油）与疏水尾间通过醚键连接，③存在特殊的单分子层膜或单、双分子层膜等

12.细菌细胞内的贮藏物分三类：

①碳源或能源类贮藏物如-----------；②氮源类贮藏物如-----------；③磷源类贮藏物称-----------，常见于迂回螺菌、白喉棒杆菌和结核分枝杆菌三类细菌中。

细菌细胞内的贮藏物分三类：

①碳源或能源类贮藏物如淀粉、糖原、PHB和硫粒；②氮源类贮藏物如藻青素和藻青蛋白；③磷源类贮藏物称异染粒，常见于迂回螺菌、白喉棒杆菌和结核分枝杆菌三类细菌中

13.细菌的鞭毛具有-----------功能，菌毛具有-----------功能，性菌毛具有-----------功能。

细菌的鞭毛具有运动功能，菌毛具有附着功能，性菌毛具有传递遗传物质功能。

14.细菌的鞭毛是由-----------、-----------和-----------三部分组成；G+细菌和G－细菌在鞭毛构造上的差别在于G－细菌的鞭毛基体上具有-----、------、------、----四个环，而G+细菌却只有-----、------两个环。

细菌的鞭毛是由鞭毛丝、钩形鞘和基体三部分组成；G+细菌和G－细菌在鞭毛构造上的差别在于G－细菌的鞭毛基体上具有L环、P环、S环和M环四个环，而G+细菌却只有S环和M环两个环

15.在棕色固氮菌中，存在一种与芽胞相类似的休眠构造，称为-----------，它的特点是抗-----------能力强。

在棕色固氮菌中，存在一种与芽胞相类似的休眠构造，称为孢囊，它的特点是抗干旱能力强

16.伴胞晶体可在-----------菌中找到，它的化学成分是-----------，因对200多种昆虫有毒杀作用，故又称δ内毒素。

在农、林业生产中可被制成细菌杀虫剂（生物农药）。

伴胞晶体可在苏云金芽胞杆菌中找到，它的化学成分是碱溶性蛋白质，因对200多种昆虫有毒杀作用，故又称δ内毒素。

在农、林业生产中可被制成细菌杀虫剂（生物农药）

17.链霉菌属的菌丝体有两种类型：

一是-----------，具有吸收营养功能；二是-----------，可成熟后分化为孢子丝，其上产生的-----------具有繁殖功能。

链霉菌属的菌丝体有两种类型：

一是基内菌丝，具有吸收营养功能；二是气生菌丝，可成熟后分化为孢子丝，其上产生的分生孢子具有繁殖功能

18.蓝细菌细胞有多种特化形式以执行不同的生理功能，如执行固氮功能的-----------，执行抵御不良环境功能的-----------，执行繁殖功能功能的-----------，以及执行繁殖功能的-----------等。

蓝细菌细胞有多种特化形式以执行不同的生理功能，如执行固氮功能的异形胞，执行抵御不良环境功能的静息胞子，执行繁殖功能功能的链丝段，以及执行繁殖功能的内孢子等

二、问答题

1.细菌细胞壁的主要生理功能

a）具有保护作用，能够提高细胞的机械强度，因而可以保护细胞免受机械损伤和渗透压等外力的破坏；

b）为细胞的生长、分裂和鞭毛运动所必需；

c）与物质运输有关，作为细胞内、外物质运输的第一屏障，细胞壁对大分子物质有阻碍作用，但并不妨碍小分子物质的自由进出；

d）决定细菌具有特定的抗原性、致病力以及对抗生素和噬菌体的敏感性。

2.比较G+、G－和古生菌的假肽聚糖的结构差异

1）、G+肽聚糖单体是由:

N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸两种糖通过β-1,4-糖苷键组成的聚糖。

四肽尾L-Ala+D-Glu+L-Lys+D-Ala；

肽桥5个Gly相连。

2）、G－和G+肽聚糖单体基本相同，区别在于G－的四肽尾第3个氨基酸是m-DAP而不是L-Lys，且没有特殊的肽桥，只形成较为疏稀、机械强度较差的肽聚糖网套。

3）、古生菌的假肽聚糖单体为：

N-乙酰葡糖胺和N-乙酰塔罗糖醛酸交替连接而成的聚糖，肽尾由L-glu、L-ala和L-lys三个L型氨基酸组成，肽桥则由L-glu一个氨基酸组成。

3.试述革兰氏染色的步骤、G+和G－细菌染色结果不同的原因是。

1）革兰氏染色的步骤

i.结晶紫对菌液涂片进行初染;（紫色）

ii.用碘溶液进行媒染（固定），染料和细胞间的结合得更牢。

（紫色）

iii.用乙醇或丙酮进行冲洗脱色。

（＋紫色，-无色）

iv.用与结晶紫具有不同颜色的碱性染料复染。

例如沙黄或番红。

（＋紫色，－红色）

2）G+和G－细菌染色结果不同的原因是

革兰氏染色过程中,细菌用结晶紫染色后,再经碘液媒染可以提高染料的滞留性。

当用乙醇对G+细菌进行脱色处理时，由于乙醇会使厚肽聚糖层的孔隙收缩，因此在短时间的脱色过程中，结晶紫/碘的复合物被滞留，细菌仍为紫色。

相反，革兰氏阴性菌的肽聚糖层很薄，相互间的交联度低，有较大的孔隙，而乙醇处理还可以使G－细菌细胞壁中的脂质被溶解，进一步加大孔隙度。

因此，G－细菌经酒精处理后更容易将结晶紫-碘的复合物从细胞中抽提出来，经复染剂番红染色后呈现红色。

4.磷壁酸的主要生理功能是什么？

1）通过分子上大量的负电荷浓缩细胞周围的Mg2+，提高细胞膜上需Mg2+的合成酶的活性；

2）贮藏磷元素；

3）能调节细胞内自溶素（autolysin）的活力，防止细胞因自溶而死亡。

4）噬菌体的特异性吸附受体；

5）革兰氏阳性细菌特异表面抗原的物质基础；

6）增强某些致病菌对宿主细胞的粘连、避免被白细胞吞噬以及抗补体的作用；

5.脂多糖主要功能是什么？

1）LPSO-特异侧链由重复分支的糖分子组成，含有己糖和二脱氧己糖。

O-特异侧链结构的多变，决定了G-细菌细胞表面抗原决定簇的多样性；

2）LPS的核心多糖主要组份是酮脱氧辛糖酸（KDO），负电荷较强，与磷壁酸相似，也有吸附Mg2+、Ca2+等阳离子以提高其在细胞表面浓度的作用，对细胞膜结构起稳定作用。

3）LPS（类脂A）是G-细菌致病物质——内毒素的物质基础

4）LPS具有控制某些物质进出细胞的选择性屏障功能；

5）LPS是许多噬菌体在细胞表面的吸附受体；

6.细胞膜的主要生理功能是什么？

1.选择性地控制细胞内、外的营养物质和代谢产物的运送;

2.维持细胞内正常渗透压的结构屏障，

3.传递信息，接受光、电等刺激信号；

4.是合成细胞壁和糖被成分的重要场所；

5.膜上含有与能量代谢有关的酶系，是细胞的产能基地；

6.是鞭毛基体的着生部位。

7.内膜系统包括哪些，各有什么功能？

间体：

在细胞分裂时常位于细胞的中部，因此认为它在横隔膜和壁的形成及细胞分裂中起到一定的作用；DNA的复制时的结合位点；作为细胞呼吸时的氧化磷酸化中心，类似于线粒体作用；参与细胞内物质和能量的传递及芽孢的形成；分泌胞外酶的地方。

类囊体：

主要存在于蓝细菌中，是由细胞质膜内陷而形成的片层状结构，内含叶绿素和藻胆色素等光合色素及光合作用酶系，是蓝细菌进行光合作用的场所。

载色体：

是由光合细菌的细胞质膜内陷并折叠而形成的层状、囊状或管状结构。

载色体上含有细菌叶绿素、类胡萝卜素等光合色素，光合磷酸化所需要的酶类及电子传递体，因而是光合细菌进行光合作用的场所，相当于植物的叶绿体。

羧酶体：

是存在于自养细菌中的一种多角体结构，由一层厚约3.5nm的蛋白膜包围，内含固定二氧化碳所需的1,5-二磷酸核酮糖羧化酶和5-磷酸核酮糖激酶，是细菌固定二氧化碳的场所。

8.细菌主要贮藏物包括哪些、生理功能是什么？

细菌的贮藏物：

1）碳源及能源类主要有：

糖原/淀粉，聚β-羟基丁酸（PHB），硫粒、硫滴。

2）氮源类：

藻青素，藻青蛋白。

3）磷源：

异染粒。

贮藏物的特点及生理功能是：

a.不同微生物其储藏性内含物不同（例如厌气性梭状芽胞杆菌只含PHB，大肠杆菌只储藏糖原，但有些光和细菌二者兼有）b.微生物合理利用营养物质的一种调节方式当环境中缺乏能源而碳源丰富时，细胞内就储藏较多的碳源类内含物，甚至达到细胞干重的50%，如果把这样的细胞移入有氮的培养基时，这些储藏物将被作为碳源和能源而用于合成反应。

C.储藏物以多聚体的形式存在，有利于维持细胞内环境的平衡，避免不适合的pH，渗透压等的危害。

（例如羟基丁酸分子呈酸性，而当其聚合成聚-β-羟丁酸（PHB）就成为中性脂肪酸了，这样便能维持细胞内中性环境，避免菌体内酸性增高。

）

9.细菌糖被的功能。

能提高细菌对干燥的抵抗力；作为细胞外的贮藏碳源和能源以备急需；可增强某些病原菌的毒力；作为透性屏障和离子交换系统，以保护细菌免受重金属离子的毒害；增强细菌的附着能力。

10.芽孢的结构、形成过程及其耐热机制。

1）芽胞有许多结构层次，自外至内为孢外壁、芽孢衣、皮层、芽孢壁、芽孢膜、芽孢质和芽孢核。

2）芽孢的形成过程a．轴丝形成b．隔膜形成c．前芽孢形成d．皮层形成e．芽孢衣形成f．芽孢成熟g．芽孢的释放。

3）耐热原因：

a）多层次厚而致密的壁；包括孢外壁、芽孢衣、皮层、芽孢壁

b）芽孢核心含水量极低；含水量仅为10-15%。

c）芽孢质和皮层中富含DPA-Ca；

d）芽孢衣中含硫氨基酸高；

e）芽孢质含有十分耐热的酶类。

11.支原体、衣原体和立克次氏体具有什么特征？

课件原核微生物（下）P111

12.蓝细菌的特点？

蓝细菌为革兰氏染色阴性、无鞭毛、含叶绿素a（但不形成叶绿体）、能进行产氧性光合作用的大型原核生物。

a.分布极广b.形态差异极大，有球状、杆状和丝状等形态；C.细胞中含有叶绿素a，进行产氧型光合作用；d.具有原核生物的典型细胞结构；e.营养极为简单，不需要维生素，以硝酸盐或氨作为氮源，多数能固氮，其异形细胞（heterocyst）是进行固氮的场所；f.分泌粘液层、荚膜或形成鞘衣，因此具有强的抗干旱能力；g.无鞭毛，但能在固体表面滑行，进行光趋避运动；h.许多种类细胞质中有气泡，使菌体漂浮，保持在光线最充足的地方，以利光合作用。

13.简述古细菌与真细菌的区别。

参考课件原核微生物（下）P55表格

【第二章真核微生物】

一、填空题

1.酿酒酵母的细胞壁呈三明治状，外层为----------，内层为葡聚糖，中间层为蛋白质；细胞壁经-----------水解后可制成酵母原生质体。

酿酒酵母的细胞壁呈三明治状，外层为甘露聚糖，内层为葡聚糖，中间层为蛋白质；细胞壁经蜗牛消化酶水解后可制成酵母原生质体

2.酵母菌的繁殖方式多样，包括-----------和-----------为主的无性繁殖方式和产----------为主的有性繁殖方式。

酵母菌的繁殖方式多样，包括芽殖和裂殖为主的无性繁殖方式和产子囊孢子为主的有性繁殖

3.不同的酵母菌存在三类生活史：

①----------，例如---------；②----------，例如---------；③----------例如---------。

不同的酵母菌存在三类生活史：

①单倍体，例如八孢裂殖酵母；②双倍体，例如路德酵母；③单双倍体例如酿酒酵母。

4.曲霉分生孢子头的构造为：

分生孢子梗的基部有一特征性的---------；，向上则分化出--------，初生小梗、次生小梗和分生孢子，这四种总称为分生孢子头。

曲霉分生孢子头的构造为：

分生孢子梗的基部有一特征性的足细胞，向上则分化出顶囊，初生小梗、次生小梗和分生孢子，这四种总称为分生孢子头

5.青霉分生孢子头的构造为分生孢子梗、梗基、小梗和分生孢子四部分。

为典型的---------状。

青霉分生孢子头的构造为分生孢子梗、梗基、小梗和分生孢子四部分。

为典型的扫帚状

6.霉菌的无性孢子有----------、----------、厚垣孢子、节孢子和游动孢子，有性孢子有卵孢子、接合孢子和----------，-----------。

其有性繁殖过程为----------、----------和----------。

霉菌的无性孢子有分生孢子、孢囊孢子、厚垣孢子、节孢子和游动孢子，有性孢子有卵孢子、接合孢子和子囊孢子和担孢子，其有性繁殖过程为质配、核配和减数分裂。

7.酵母菌的营养体既可以单倍体（n）也可以二倍体（2n）形式存在，---------是这类生活史的代表，其特点为无性繁殖为----------繁殖、营养体既能以单倍体形式存在，也能以二倍体形式存在和在特定的条件下进行有性生殖。

酵母菌的营养体既可以单倍体（n）也可以二倍体（2n）形式存在，酿酒酵母是这类生活史的代表，其特点为无性繁殖为出芽繁殖、营养体既能以单倍体形式存在，也能以二倍体形式存在和在特定的条件下进行有性生殖

二、问答题

1.试总结酵母菌的特点。

（1）个体一般以单细胞状态存在

（2）多数营出芽繁殖

（3）能发酵糖类产能

（4）细胞壁常含甘露聚糖

（5）常生活在含糖量较高、酸度较大的环境中

2.什么是酵母的假菌丝。

成熟的母细胞在其形成芽体的部位长出芽细胞，芽细胞脱离母体，成为新的个体细胞。

如果不脱离母细胞，又长出新芽，子细胞就和母细胞连接在一起，形成藕节状或竹节状的细胞串，称为假菌丝。

3.试介绍霉菌的营养菌丝和气生菌丝各可分化成哪些特化构造，并简要说明它们的功能。

参考教材P92-94

4.试列出真菌有性孢子的类型及其形成过程。

参考课件第二章真核微生物73-82

5.介绍毛霉、根霉、曲霉、青霉的主要特征及有性孢子和无性孢子的类型。

1）毛霉以孢囊孢子的形式进行无性繁殖，孢子梗直接由菌丝体生出，顶端有一个球形的孢子囊，囊内有囊轴，囊轴与孢子囊梗直接相连，孢子囊成熟后，囊壁易消失或破裂。

毛霉有性繁殖是异宗配合，产生接合孢子。

2）根霉和毛霉很相似，不同的是根霉有假根和匍匐菌丝。

匍匐菌丝呈弧形，在培养基表面水平生长。

分枝状的假根伸入培养基内，与假根相对处向上生出孢子梗，顶端形成孢子囊，内生孢囊孢子。

孢子囊内具囊轴，囊轴茎部与孢子囊梗相连处有囊托。

根霉在有性繁殖中，由菌丝体或匍匐菌丝形成配子，以同宗配合形成接合孢子。

3）曲霉菌丝体发达，菌丝分隔，菌丝体产生大量的分生孢子梗，分生孢子梗顶端膨大成为顶囊，顶囊一般是球形的，顶囊表面长满一至二层辐射状的小梗称分生孢子小梗，小梗顶端着生成串的球形分生孢子，分生孢子梗生在足细胞上，并通过足细胞与营养菌丝相连，足细胞是一个特化了的细胞，壁很厚。

曲霉属中大多数种只进行无性繁殖，也有极少数中能产生子囊孢子。

4）青霉在自然界中分布很广，是水果腐烂、粮食等工农业产品霉变的主要菌。

青霉的菌落是绿色的，菌丝有横隔，气生菌丝发达，分生孢子梗顶端不膨大，有扫帚状的分枝，称帚状枝。

帚状枝是由单轮、双轮或多论分支构成。

最后一级称小梗，着生小梗的细胞称梗基，小梗上产生分生孢子。

青霉中绝大多数未发现有性过程。

6.什么是锁状联合?

试图示其形成过程。

参考课件第二章真核微生物81

【第三章病毒】

一、填空题

1.病毒可分真病毒与亚病毒两大类。

从组成的化学本质来划分，真病毒至少含有------和------两种成分，亚病毒中的类病毒只含------，而朊病毒则只含------。

病毒可分真病毒与亚病毒两大类。

从组成的化学本质来划分，真病毒至少含有核酸和蛋白质两种成分，亚病毒中的类病毒只含RNA，而朊病毒则只含蛋白质

2.单个病毒粒子称为病毒粒，它由------和------构成，有些较复杂病毒还有一层------，其上长有刺突等附属物。

单个病毒粒子称为病毒粒，它由核心和衣壳构成，有些较复杂病毒还有一层包膜，其上长有刺突等附属物

3.不同病毒在不同的宿主细胞上可形成不同特征的聚集体，如在动物细胞内的------，细菌菌苔上的------，植物叶片上的------。

不同病毒在不同的宿主细胞上可形成不同特征的聚集体，如在动物细胞内的包含体，细菌菌苔上的噬菌斑，植物叶片上的枯斑

4.病毒的对称体制有：

①------，如------等；②------，如------等；③------，如------等。

病毒的对称体制有：

①螺旋对称对称，如TMV和狂犬病毒等；②二十面体对称，如腺病毒和φX174等；③复合对称，如T4噬菌体和痘苗病毒等。

5.1935年，美国学者Stanley首次提纯并结晶的植物病毒是------，它属于------对称；核酸类型是------。

1935年，美国学者Stanley首次提纯并结晶的植物病毒是烟草花叶病毒，它属于螺旋对称；核酸类型是ssRNA

6.腺病毒的形状为------状，呈------对称；它有12个角、20个面和30条棱；存在两种衣壳粒，分别称为------和------；其核心部分为------。

腺病毒的形状为球状，呈二十面体对称；它有12个角、20个面和30条棱；存在两种衣壳粒，分别称为五邻体和六邻体；其核心部分为线状双链DNA

7.双层平板法是测定噬菌体效价的最常用方法，其底层平板含2%琼脂，上层平板中的三种成分分别为------、------和------。

双层平板法是测定噬菌体效价的最常用方法，其底层平板含2%琼脂，上层平板中的三种成分分别为上层培养基、宿主菌悬液和噬菌体

8.病毒一步生长曲线有三个最重要的特征参数，即---------和---------以及---------。

病毒一步生长曲线有三个最重要的特征参数，即潜伏期和裂解期以及裂解量

9.大肠杆菌的λ噬菌体是一种常见的温和噬菌体，其头部呈球状，尾部特点为长而中空、非收缩性，核心成分为线状dsDNA，其两端各有------。

大肠杆菌的λ噬菌体是一种常见的温和噬菌体，其头部呈球状，尾部特点为长而中空、非收缩性，核心成分为线状dsDNA，其两端各有粘性末端

10.典型的类病毒是由美国学者Diener于1971年发现的---------，它的成分是一种---------分子。

典型的类病毒是由美国学者Diener于1971年发现的马铃薯纺锤形块茎病类病毒，它的成分是一种单链环状ssRNA分子

11.毒粒的基本化学组成是核酸和蛋白质，有包膜的病毒还含有脂类和糖类，病毒对大多数抗生素不敏感，但对---------敏感。

毒粒的基本化学组成是核酸和蛋白质，有包膜的病毒还含有脂类和糖类，病毒对大多数抗生素不敏感，但对干扰素敏感

二、问答题

1.病毒的特点?

参考课件第三章病毒P7

2.试以E.coliT偶数噬菌体为例，图示并简述复合对称型病毒的典型构造。

参考教材P127复合对称部分。

3.病毒的核酸有哪些类型?

试举例并列表比较之。

参考教材P129表3-1病毒核酸的类型。

4.什么是烈性噬菌体?

试简述其裂解性生活史。

能在宿主细菌细胞内增殖，产生大量子代噬菌体并引起宿主菌裂解的噬菌体被称为烈性噬菌体。

噬菌体的繁殖一般分为5个阶段，即①吸附②侵入③增殖（复制与生物合成）④成熟（装配）⑤裂解（释放）

5.什么是效价?

测定噬菌体效价有哪些方法?

简述双层平板法的原理与主要操作。

1）每毫升试样中所含有的具侵染性的噬菌体粒子数称为效价。

2）测定噬菌体效价方法有单层平板法和双层平板法,其中双层平板法是最常用的。

3）操作步骤：

先向平皿中倒入底层平板（2％琼脂培养基10mL），待凝固后倒入上层培养基（1％琼脂培养基5mL）、宿主菌悬液（对数期菌液0.2mL）和噬菌体试样（合适稀释液0.1mL）的混合溶液，凝固后放入37培养10h，计数噬菌斑并计算效价。

4）原理：

a）在上层培养基中宿主细胞与相应噬菌体混合后，在菌苔上形成一个具有一定形状、大小、边缘和透明度噬菌斑。

噬菌斑数量代表了病毒粒子数。

b）加了底层培养基后，可使原来底面不平的玻璃皿的缺陷得到了弥补；

c）所形成全部噬菌体斑都接近处于同一平面上，因此不仅每一噬菌斑的大小接近、边缘清晰，而且不致发生上下噬菌斑的重叠现象；

d）因上层培养基中琼脂较稀，故形成的噬菌斑较大，更有利于计数。

6.何谓