第九章 甾体类化合物2.docx

第九章 甾体类化合物2.docx

《第九章 甾体类化合物2.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《第九章 甾体类化合物2.docx（32页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。

第九章甾体类化合物2

第三节甾体皂苷

一、概述

甾体皂苷（steroidalsaponins）是一类由螺甾烷（spirostane）类化合物与糖结合而成的甾体苷类，其水溶液经振摇后多能产生大量肥皂水溶液样的泡沫，故称为甾体皂苷。

甾体皂苷类在植物中分布广泛，但在双子叶植物中较少，主要分布在单子叶植物中，大多存在于百合科、薯蓣科、石蒜科和龙舌兰科，菠萝科、棕榈科、茄科、玄参科、菝葜科、豆科、姜科、延龄草科等植物中也有存在。

中药麦冬、薤白、重楼、百合、玉竹、知母、白毛藤等富含甾体皂苷。

此外，由多种海洋生物和动物体内亦分离到一系列结构特殊的甾体皂苷。

由于甾体皂苷元是合成甾体避孕药和激素类药物的原料，国内外学者于20世纪60年代在寻找该类药物资源和改进工艺等方面做了大量工作。

进入80年代后，随着分离技术、结构研究手段的飞速发展，促使极性较大、糖链较长的皂苷研究有了突破性进展。

进入20世纪90年代，随着甾体皂苷化学的发展，许多新的生物活性物质逐渐被发现，特别是防治心脑血管疾病、抗肿瘤、降血糖和免疫调节等作用引起了国际上的广泛关注，一些新的皂苷类药物开始进入临床使用，并取得满意的结果。

如从黄山药（Dioscoreapanthaica）植物中提取的甾体皂苷制成的地奥心血康胶囊，对冠心病心绞痛发作疗效很好。

心脑舒通为蒺藜（Tribulusterrestris）果实中提取的总皂苷制剂，临床用于心脑血管疾病的防治，具有扩冠、改善冠脉循环作用，对缓解心绞痛、改善心肌缺血有较好疗效。

甾体皂苷还具有降血糖、降胆固醇、抗菌、杀灭钉螺及细胞毒等活性。

如欧铃兰次皂苷有显著的抗霉菌作用，对细菌也有抑制作用；蜘蛛抱蛋皂苷具有较强的杀螺活性；由作为云南白药原料的重楼（Parispolyphylla）中分得两个有细胞毒活性的化合物，称皂苷Ⅰ和皂苷Ⅳ，对P388、L-1210、KB细胞均有抑制作用。

还有研究表明，大蒜中的甾体皂苷是其降血脂和抗血栓作用的活性成分。

甾体皂苷具有的表面活性和溶血作用与三萜皂苷相似，但F环开裂的皂苷不具溶血性，也无抗菌活性。

二、甾体皂苷的结构与分类

1．甾体皂苷的结构特征甾体皂苷由甾体

皂苷元与糖缩合而成。

甾体皂苷元由27个

碳原子组成，其基本碳架是螺甾烷的衍生物。

（1）甾体皂苷元结构中含有六个环，除甾体母核A、B、C和D四个环外，E环和F环以螺缩酮（spiroketal）形式相连接，构成螺旋甾烷结构。

（2）一般A/B环有顺、反两种稠合方式，B/C和C/D环均为反式稠合。

（3）E环和F环中有C20、C22和C25三个手性碳原子。

其中，20位上的甲基均处于E环的平面后，属于α型（20αE或20βF），故C20的绝对构型为S型。

22位上的含氧侧链处于F环的后面，亦属α型（22αF），所以C22的绝对构型为R型。

C25的绝对构型依其上的甲基取向的不同可能有两种构型，当25位上的甲基位于F环平面上处于直立键时，为β取向（25βF），其C25的绝对构型为S型，又称L型或neo型，为螺旋甾烷；当25位上的甲基位于F环平面下处于平伏键时，为α取向（25αF），所以其C25的绝对构型为R型，又称D型或iso型，为异螺旋甾烷。

螺旋甾烷和异螺旋甾烷互为异构体，它们的衍生物常共存于植物体中，由于25R型较25S型稳定，因此，25S型易转化成为25R型。

（4）皂苷元分子中常多含有羟基，大多在C3位上连有羟基，且多为β取向。

除C9和季碳外，其它位置上也可能有羟基取代，有β取向，也有α取向。

一些甾体皂苷分子中还含有羰基和双键，羰基大多在C12位，是合成肾上腺皮质激素所需的结构条件；双键多在Δ5和Δ9（11）位，少数在Δ25（27）位。

（5）组成甾体皂苷的糖以D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖、L-鼠李糖和L-阿拉伯糖较

为常见，此外，也可见到夫糖和加拿大麻糖。

在海星皂苷中还可见到6-去氧葡萄糖和6-去氧半乳糖。

糖基多与苷元的C3-OH成苷，也有在其它位如C1、C26位置上成苷。

寡糖链可能为直链或分枝链。

皂苷元与糖可能形成单糖链皂苷或双糖链皂苷。

（6）甾体皂苷分子结构中不含羧基，呈中性，故又称中性皂苷。

2．甾体皂苷的结构类型按螺甾烷结构中C25的构型和F环的环合状态，将其分为四种类型。

（1）螺甾烷醇（spirostanol）型由螺甾烷衍生的皂苷为螺甾烷醇型皂苷。

如从中药知母（Anemarrhenaasphodeloides）中分得的知母皂苷A-Ⅲ（timosaponinA-Ⅲ），其皂苷元是菝葜皂苷元（sarsasapogenin），化学名为5β,20βF,22αF,25βF螺旋甾-3β-醇，简称螺旋甾-3β-醇。

螺甾烷醇异螺甾烷醇

呋甾烷醇变形螺甾烷醇

（2）异螺甾烷醇（isospirostanol）型由异螺甾烷衍生的皂苷为异螺甾烷醇型皂苷。

如从薯蓣科薯蓣属植物根茎中分得的薯蓣皂苷（dioscin），其水解产物为薯蓣皂苷元（diosgenin），化学名为△5-20βF,22αF,25αF螺旋甾烯-3β-醇，简称△5-异螺旋甾烯-3β-醇，是合成甾体激素类药物和甾体避孕药的重要原料。

（3）呋甾烷醇（furostanol）型由F环裂环而衍生的皂苷称为呋甾烷醇型皂苷。

呋甾烷醇型皂苷中除C3位或其它位可以成苷外，C26-OH上多与葡萄糖成苷，但其苷键易被酶解。

在C26位上的糖链被水解下来的同时F环也随之环合，成为具有相应螺甾烷或异螺甾烷侧链的单糖链皂苷。

例如菝葜（Smilaxaristolochiaefolia）根中的菝葜皂苷（parillin），属于螺甾烷醇型的单糖链皂苷。

与菝葜皂苷伴存的原菝葜皂苷（sarsaparilloside），是F环开裂的呋甾烷醇型双糖链皂苷，易被β-葡萄糖苷酶酶解，失去C26位上的葡萄糖，同时F环重新环合，转为具有螺甾烷侧链的菝葜皂苷。

知母皂苷A-Ⅲ薯蓣皂苷

β-葡萄糖苷酶

原菝葜皂苷菝葜皂苷

（4）变形螺甾烷醇（pseudo-spirostanol）型由F环为呋喃环的螺甾烷衍生的皂苷为变形螺甾烷醇型皂苷。

天然产物中这类皂苷较少。

其C26-OH为伯醇基，均与葡萄糖成苷。

在酸水解除去此葡萄糖的同时，F环迅速重排为六元吡喃环，转为具有相应螺甾烷或异螺甾烷侧链的化合物。

如从新鲜茄属植物Solanumaculeatissimum中分得的aculeatisideA，是纽替皂苷元（nuatigenin）的双糖链皂苷，当用酸水解时，可得到纽替皂苷元和异纽替皂苷元。

纽替皂苷元

H＋＋

Aculeatiside

异纽替皂苷元

近10年来，随着甾体类化学研究的不断发展，

发现了一批结构新颖的甾体皂苷，其苷元的结构骨

架也已超出了传统的概念，例如1-dehydrotrilleno-

genin，为18-去甲异螺甾烷醇的衍生物。

1-dehydrotrillenogenin

三、甾体皂苷的理化性质

1．性状甾体皂苷大多为无色或白色无定形粉末，不易结晶，而甾体皂苷元多有较好的结晶形状。

它们的熔点都较高，苷元的熔点常随羟基数目增加而升高。

甾体皂苷和苷元均具有旋光性，且多为左旋。

2.溶解性甾体皂苷一般可溶于水，易溶于热水、稀醇，难溶于丙酮，几不溶于或难溶于石油醚、苯、乙醚等亲脂性溶剂。

甾体皂苷元则难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、氯仿、乙醚等有机溶剂。

3．沉淀反应甾体皂苷的乙醇溶液可与甾醇（常用胆甾醇）形成难溶的分子复合物而沉淀。

生成的分子复合物用乙醚回流提取时，胆甾醇可溶于醚，而皂苷不溶。

故可利用此性质进行分离精制和定性检查。

除胆甾醇外，皂苷可与其它含有C3位β-OH的甾醇结合生成难溶性分子复合物，而C3-OH为α构型，或者是当C3-OH被酰化或者生成苷键时，皂苷则不能与其生成难溶性的分子复合物。

而且，与A/B环为反式相连或具有Δ5结构的甾醇形成的分子复合物溶度积最小。

因此，此沉淀反应还可用于判断、分离甾体化合物中的C3差相异构体和A/B环顺反异构体。

甾体皂苷还可与碱式醋酸铅或氢氧化钡等碱性盐类生成沉淀。

4．颜色反应甾体皂苷在无水条件下，遇某些酸类亦可产生与三萜皂苷相似的显色反应。

只是甾体皂苷在进行Liebermann-Burchard反应时，其颜色变化最后出现绿色，三萜皂苷最后出现红色；在进行Rosen-Heimer反应时，三萜皂苷加热到100℃才能显色，而甾体皂苷加热至60℃即发生颜色变化。

由此可区别三萜皂苷和甾体皂苷。

在甾体皂苷中，F环裂解的双糖链皂苷与盐酸二甲氨基苯甲醛试剂（Ehrlich试剂，简称E试剂）能显红色，对茴香醛（Anisaldehyde）试剂（简称A试剂）则显黄色，而F环闭环的单糖链皂苷只对A试剂显黄色，对E试剂不显色。

以此可区别两类甾体皂苷。

四、甾体皂苷的提取与分离

甾体皂苷的提取分离方法基本与三萜皂苷相似，只是甾体皂苷一般不含羧基，呈中性，亲水性相对较弱，在提取分离时应加以注意。

1．甾体皂苷的提取提取皂苷多利用皂苷的溶解性，采用溶剂法提取。

主要使用甲醇或稀乙醇作溶剂，提取液回收溶剂后，用丙酮、乙醚沉淀或加水后用水饱和正丁醇萃取，或用大孔树脂处理等方法，得到粗皂苷。

提取皂苷元可根据其难溶或不溶于水，易溶于有机溶剂的性质，以有机溶剂进行萃取。

此外，实验室中常自原料中先提取粗皂苷，将粗皂苷加酸加热水解，然后用苯、氯仿等有机溶剂自水解液中提取皂苷元。

工业生产常将植物原料直接在酸性溶液中加热水解，水解物水洗干燥后，再用有机溶剂提取。

例如由盾叶薯蓣（Dioscoreazingiberensis）或穿龙薯蓣（Dioscoreahipponica）干燥根茎中提取薯蓣皂苷元：

穿龙薯蓣饮片或干燥根

加水浸透后，再加入3.5倍量水，加入浓硫酸

使达3％浓度，通蒸汽加压进行水解8小时

水解物

用水洗去酸液，干燥后粉碎，使含水量不超过6％

干燥粉

加活性碳，然后加6倍量汽油（或甲苯），

连续回流20小时

提取物

回收汽油，浓缩到约1：

40，室温放置，

使结晶完全析出，离心

粗制薯蓣皂苷元

乙醇或丙酮重结晶

薯蓣皂苷元（mp204℃～207℃）

2．甾体皂苷的分离分离混合甾体皂苷的方法与三萜皂苷相似，常采用溶剂沉淀法（乙醚、丙酮）、胆甾醇沉淀法、吉拉尔试剂法（含羰基的甾体皂苷元）、硅胶柱色谱法（洗脱剂多采用CHCl3-MeOH-H2O系统）、大孔吸附树脂柱色谱、葡聚糖凝胶SephadexLH-20柱色谱及液滴逆流色谱（DCCC）等方法进行分离。

有时对正丁醇部位极性较大的皂苷成分在上述分离的基础上，尚需用反相中低压Lobar柱色谱、反相制备HPLC或制备TLC等手段分离。

例如，从新鲜大蒜（Alliumsatyvum）鳞茎的水溶性部位中分得的呋甾皂苷protoisoeruboside-B（Ⅰ）和螺甾皂苷eruboside-B（Ⅱ）、isoeruboside-B（Ⅲ）3个甾体皂苷。

其中protoisoeruboside-B有显著的提高纤溶活性，isoeruboside-B有明显的延长血液凝固时间和提高纤溶活性。

大蒜新鲜鳞茎

80％乙醇浸渍48小时，加热提取，滤过

提取液

回收溶剂，乙醚萃取

乙醚液水液

大孔树脂柱色谱

依次用水、77％乙醇洗脱

乙醇洗脱液

减压回收醇后冻干

总皂苷

硅胶柱色谱，

CHCl3-MeOH-H2O（下层）梯度洗脱

组分1组分2组分3组分4组分5组分6

大孔树脂柱色谱，放置，析出结晶

水和60％乙醇洗脱

乙醇洗脱液白色结晶

制备HPLC（ODS柱）制备HPLC（ODS柱）

MeOH-H2O（8：

2）MeOH-H2O（7：

3）

化合物Ⅱ、Ⅲ化合物Ⅰ

proto-iso-eruboside-B（Ⅰ）25R：

eruboside-B（Ⅱ）

25S：

iso-eruboside-B（Ⅲ）

五、甾体皂苷的检识

1．理化检识甾体皂苷的理化检识方法与三萜皂苷相似，主要是利用皂苷的理化性质，如显色反应、泡沫试验、溶血试验等。

常用的显色反应有Liebermann-Burchard反应、Salkowski反应、Rosenheimer反应、五氯化锑反应、茴香醛-硫酸和盐酸-对二甲胺基苯甲醛反应。

其中Liebermann-Burchard反应和Rosenheimer反应可用于区别三萜皂苷和甾体皂苷；茴香醛-硫酸和盐酸-对二甲胺基苯甲醛反应可用于区别螺甾烷类和F环开环的呋甾烷类甾体皂苷。

2．色谱检识甾体皂苷的色谱检识可采用吸附薄层色谱和分配薄层色谱。

常用硅胶作吸附剂或支持剂，用中性溶剂系统展开。

亲水性强的皂苷，用分配色谱效果较好。

若采用吸附薄层色谱，常用的展开剂有氯仿-甲醇-水（65：

35：

10，下层）、正丁醇-醋酸-水（4：

1：

5，上层）等；亲脂性皂苷和皂苷元，用苯-甲醇、氯仿-甲醇、氯仿-苯等。

薄层色谱常用的显色剂有三氯醋酸、10％浓硫酸乙醇液、磷钼酸和五氯化锑等，喷雾后加热，不同的皂苷和皂苷元显不同的颜色。

六、甾体皂苷的结构研究

甾体皂苷的结构研究，除各种化学法（包括各种水解反应）外，随着结构测定技术的不断完善和发展，波谱分析是确定甾体皂苷化学结构的重要手段。

甾体皂苷中糖部分的研究，包括水解、糖的种类、糖与糖之间的连接顺序、连接位置、苷键的构型等，均与其它苷类相似（详见第三章），这里重点介绍甾体皂苷元的结构研究。

1．UV光谱甾体皂苷元多数无共轭系统，因此在近紫外区无明显吸收峰。

如果结构中引入孤立双键、羰基、α，β-不饱和酮基或共轭双键，则可产生吸收。

但不含共轭体系的甾体皂苷元，如先用化学方法，制备成具有共轭体系的反应产物，然后测定产物的紫外光谱，可以为结构鉴定提供线索。

当甾体皂苷元与浓硫酸作用后，则在220～260nm间出现吸收峰，甾体皂苷元中的E环和F环可能引起在270～275nm处的吸收。

测定其吸收值并与对照品的光谱对照，可以检识不同的甾体皂苷元。

此外，此法也可用于定量测定。

2.IR光谱螺甾皂苷及其苷元，由于分子中含有螺缩酮结构，在红外光谱中均能显示出980cm-１（A），920cm-１（B），900cm-１（C）和860cm－１（D）附近的4个特征吸收谱带，其中A带最强。

B带与C带的相对强度与F环上C25位的构型有关，若B带＞C带，则C25为S构型，相反则为R构型。

因此可藉以区别C25位二种立体异构体。

当F环上存在C25-CH2OH或C26-OH时，IR吸收情况与上不同，其特征是C25为S型时，在995cm-1处出现强吸收；C25为R型时，在1010cm－1附近呈强吸收。

F环开裂后，无这种螺缩酮的特征吸收。

3．NMR谱甾体皂苷元的氢谱和碳谱具有较明显的谱带特征，因而核磁共振谱是甾体皂苷结构研究的重要方法。

（1）1H-NMR谱　甾体皂苷元在高场区亦出现因环上亚甲基和次甲基质子信号相互重叠堆积而成的复杂峰图。

但是，在其中可明显地见有4个归属于甲基（18、19、21和27位甲基）的特征峰，其中18-CH3和19-CH3均为单峰，前者处于较高场，后者处于较低场；21-CH3和27-CH3均为双峰，且27-CH3常处于18-CH3的高场，21-CH3则常位于19–CH3的低场；如果C25位有羟基取代，则27-CH3为单峰，并向低场移动。

C16位和C26位上的氢是与氧同碳的质子，处于较低场，易于辨认。

需要特别指出的是，根据27-CH3的化学位移值还可鉴别甾体皂苷元的两种C25异构体，即C25上的甲基为α-取向（25R型）时，其CH3质子信号（δ约0.70）要比β-取向（25S型）的CH3质子信号（δ约1.10）处于较高场。

此外，C26上2个氢质子的信号，在25R异构体中化学位移值相近，而在25S异构体则中差别较大，故也可用于区别25R和25S二种异构体。

（2）13C-NMR谱一般甾体皂苷元碳原子上如有羟基取代，化学位移向低场位移40～45。

如羟基与糖结合成苷，则与糖基以苷键相连的碳原子（α碳）信号发生苷化位移，再向低场位移6～10；双键碳的化学位移在δ115～150范围内；羰基碳信号出现在δ200左右。

16位和20位连氧碳，其化学位移分别在δ80和δ109左右，这两个碳信号极具特征性，易于辨别。

特别是后者，在螺旋甾烷型甾体皂苷中，其化学位移与C5、C22和C25构型无关。

18、19、21和27位的4个甲基的化学位移一般均低于δ20。

此外，13C-NMR谱对于鉴别甾体皂苷元A／B环的稠合方式及C25异构体可提供极为重要的信息。

甾体皂苷元C5构型是5α（A/B反式）还是5β（A/B顺式），可根据其C5、C9和C19信号的化学位移值予以区别。

C5构型如为5α，其C5、C9和C19信号的化学位移值分别为δ44.9、54.4和12.3左右；如为5β，则其C5、C9和C19信号的化学位移值分别为δ36.5、42.2和23.9左右。

在螺旋甾烷型甾体皂苷中，27-CH3信号的化学位移值虽与C5构型无关，但它却与C25的构型有关，且因取向不同，还将显著影响F环上其它各碳信号的化学位移。

在22α-O、25R-系列中，27-CH3信号位于δ17.1+0.1处，而F环上的C23、C24、C25和C26信号，一般分别出现在δ31.3+0.3、28.8+0.3、30.3+0.3和66.9+0.2处。

在22α-O、25S-系列中，27-CH3信号位于δ16.2+0.2处，而F环上的C23、C24、C25和C26信号，大多分别出现在δ27.3+0.3、25.8+0.3、26.1+0.3和65.1+0.1ppm处。

呋甾烷型甾体皂苷元，其E环和F环碳原子的化学位移与螺甾烷骨架显著不同，其22位碳信号出现在δ90.3；当C22位连有羟基时，22位碳信号出现在δ110.8处；当C22位连有甲氧基时，22位的碳信号出现在δ113.5处（其甲氧基碳在较高场，一般为δ47.2+0.2）。

变型螺甾烷类，F环为5元呋喃环，22位碳信号出现在δ120.9，25位信号出现在δ85.6，可明显区别于其它类型。

4．MS甾体皂苷元的质谱裂解方式很有特征，由于分子中具有螺缩酮结构，EI-MS中均出现很强的m/z139基峰，中等强度的m/z115碎片离子峰及一个弱的m/z126碎片离子峰。

其裂解途径如下。

a．

m/z139

b

或

．

m/z126

麦氏重排+

m/z115

cdefgh

如果F环有不同取代，则上述三个碎片峰可发生相应质量位移或峰强度变化，因而对于鉴定皂苷元尤其是F环上的取代情况十分有用。

此外，甾体皂苷的EI-MS中同时伴有甾体母核或甾核加E环的c～h系列碎片。

这些离子的质荷比可因取代基的性质和数目发生相应的质量位移，根据这些特征碎片峰可以鉴别是否为甾体皂苷元，并可推测母核上取代基的性质、数目及取代位置等。

FD-MS适用于甾体皂苷分子量和糖连接顺序的测定。

在甾体皂苷的FD-MS中可见到[M+Na]+，[M+Na-糖基]+及糖基碎片，同时还存在一些特征碎片如[ M+2H-糖基]+及双电荷离子如[M+2Na]2+等。

因此，可确定甾体皂苷的分子量，根据其分子量，又可确定糖的数目，继之，通过解析逐渐失去糖基的系列碎片峰，可推测糖的连接顺序。

如化合物balanitin-1的FD-MS谱提供了以下资料：

m/z1053（基峰）、1031、907、885、745、723、601、538和415。

从m/e1053[M+Na]+和1031[M+H]+得知分子量为1030，在m/z538处的双离子峰[M+2Na]2+进一步印证了以上推断；在m/z907[M+Na-146]+、885[M+H-146]+处的离子峰对应于丢失一个去氧己糖（rha）；745[M+Na-146-162]+、723[M+H-146-162]+峰则分别归属于上述碎片进一步丢失一个己糖（glc）的结构部分；而m/z601[M+Na-452]+则来自丢失两分子去氧己糖和一分子己糖；m/z415[苷元+H]+峰则归于苷元。

场解吸质谱（FD-MS）在高质量区提供的信息比较详尽，但却不能提供有关苷元部分的结构碎片信息。

而快速原子轰击质谱（FAB-MS）除了能给出分子量、糖碎片信息外，尤其在低质量区可给出苷元的结构碎片，同时还可给出相应的负离子质谱。

因此，除可确定分子量、推测糖的数目和连接顺序外，还可通过苷元的碎片推测苷元的种类，是甾体皂苷结构测定的有效方法。

glc（162）

（glc（162）

rha（146）rha（146）balanitin-1（MW1030）

5．结构研究举例薤白苷戊的结构研究

薤白苷戊（macrostemonosideE）是从中药薤白中分得的一种化合物（Ⅰ），为白色无定形粉末，mp227.5℃～230℃，Liebermann-Burchard反应和Molish反应均为阳性，Ehrlich试剂反应呈红色。

元素分析C57H94O28·4H2O。

计算值％：

C52.69，H7.94；实验值％：

C52.65，H8.19。

IR光谱（KBr）cm-１：

3400（OH），2900，2850，1725（Δ20（22）），1090，1070，1020（苷键Ｃ-Ｏ）。

FAB-MS（Neg.）m/z：

1225[M-H]―，1065[M-glc-H]―，901[M-H-Glc×2]―，577[M-H-glc×4]―。

1H-NMR谱（400MHz）δ：

0.67（3H，s，18-CH３），0.72（3H，s，19-CH３），1.02（3H，d，J=6.6Hz，27-CH３），1.64（3H，s，21-CH３），4.81（1H，d，J=7.8Hz，glcH-1），4.85（1H，d，J=7.6Hz，galH-1），5.12（1H，d，J=8.0Hz，glcH-1），5.26（1H，d，J=7.8Hz，glcH-1），5.54（1H，d，J=7.6Hz，glcH-1）。

13C-NMR谱数据及归属见表9-9。

结合元素分析和FAB-MS中的m/z1225（M-H）－准分子离子峰确定Ⅰ的分子式为C57H94O28分子量为1226。

UV光谱（221nm）和IR光谱（1725cm-１）示无螺甾烷的特征吸收，且分子中存在联氧双键的结构；根据13C-NMR谱中C-5（44.8）、C-9（54.8）和C-19（12.3）的化学位移，推测该化合物为5α-呋甾皂苷；负性FAB-MS还出现逐渐脱去糖基的系列离子峰。

13C-NMR谱可见5个糖的端基碳原子信号，1H-NMR谱显示５个糖的端基质子信号，说明分子中含5个糖，且根据其偶合常数，推测糖均为β构型。

酸水解得皂苷元，与对照品的mp、TLC、IR和13C-NMR谱（见表９-8）对照，证明为替告皂苷元（Ⅱ）。

水解液经GC分析，检出半乳糖和葡萄糖，其比例为１∶４，经全甲基化，并制备成部分甲基糖醇乙酰化物给出3个部分甲基化的糖醇乙酸酯，经与文献标准谱对照，确定为1，5-二-Ｏ-乙酰基-2，3，5，6-四-Ｏ-甲基葡萄糖醇，1，４，5-三-Ｏ-乙酰基-2，3，6-三-Ｏ-甲基半乳糖醇及1，２，３，5-四-Ｏ-乙酰基-４，6-二-Ｏ-甲基葡萄糖醇，组成比为３∶１∶１。

表明分子中的5个糖分子，有3个葡萄糖为末端糖，1个葡萄糖的C2和C3与其它糖相连接，另一个半乳糖的C4与其它糖相连接

将Ⅰ进行酶水解得到葡萄糖和一次生苷（Ⅲ）：

白色块晶，mp277.5℃～280℃。

IR（