遗传育种学实验指导.docx
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遗传育种学实验指导
园林植物遗传育种学
实验指导
河南农大园艺系
二00七年三月
目录
实验室工作规程………………………………………………………
（1）
实验一有丝分裂……………………………………………………（）
实验二减数分裂……………………………………………………（）
实验三染色体核型分析……………………………………………（）
实验四分离规律……………………………………………………（）
实验五独立分配规律与基因互作…………………………………（）
实验六交换值的测定………………………………………………（）
实验七染色体结构变异和数目变异的观察鉴定…………………（）
实验八园林植物开花习性的观察…………………………………（）
实验九花粉的采集…………………………………………………（）
实验十花粉生活力的测定…………………………………………（）
实验十一有性杂交技术……………………………………………（）
实验室工作规程
一、守则
为了获得准确的实验结果，避免在工作中发生差错和意外事故，实验者必须遵守下列规则。
（1）实验前必须制订周密的工作计划，预习实习内容。
进入实验室后要按照计划或指导教师的规定进行操作，并随时把实验中出现的情况和最后结果详细地记录下来。
（2）遗传育种学实验中大多数是借助于光学显微镜，在细胞学水平上研究生物的遗传特性，所以实验室、工作台、各种仪器、用具、玻璃皿以及实验者的双手都必须保持洁净，做到无灰尘、无脏物，以免干扰镜下观察结果。
（3）盛有化学药品、试剂、溶液的瓶上，必须贴有标签，注明名称、成分、配制日期，并分门别类，安放在一定位置上，排列整齐，便于取用。
（4）挥发性药品、有毒药品、强酸、强碱等，使用时切勿靠近眼、鼻、口、衣服。
酸类稀释时，只能将酸徐徐倒入水中，绝对不可将水倒入酸中。
（5）取用液体药品时，所用各类量具必须分开，不可混用，用后必须马上冲洗干净；称量固体药品时，先在称盘上放清洁蜡光纸或白纸，调试平衡后再称，保护称具不受腐蚀和防止药品相混。
（6）进行显微镜检查时，切勿使染料或药剂沾污镜头和镜台，如有沾污必须随时擦干净；并注意各种试剂不要洒在工作台上，以免腐蚀。
（7）一切药品和化学试剂都必须按最低使用量配用，切勿浪费。
用过的固体废物、酸类、碱类、染料等应倒入废缸内，不可直接倒入水槽中，废酒精、二甲苯、固定液等分别倒入一定的瓶中，以便回收再用。
（8）实验中如有丢失、损失仪器设备及用具，应及时报告并填写报告单，凡不遵从教师指导违反操作规程以致造成不应有的损失者，按其情节轻重，态度好坏，给予处理，赔偿全部或一部分。
（9）实验室必须保持安静整洁，不准高场喧闹、随地吐痰、乱扔纸屑和脏物。
（10）离开实验室前，将所用过的仪器用具擦洗干净，并放回原处；关闭电源、水源，并指派人员打扫清洁。
二、显微镜的清洁与保养
显微镜是遗传育种学实验中最重要的工具，必须注意防尘、防湿、防高温、防药品侵蚀。
（1）提取镜箱时，必须右手提着镜箱，左手托着箱底，镜箱门朝着胸前一面；取显微镜时，必须右手紧握镜臂，左手托着镜底，防止显微镜滑落损坏。
（2）显微镜取出后，先用软毛刷、纱布拂擦镜身的灰尘污物，各处缝隙及镜头上的灰尘，纤维等用洗耳球吹去，然后用擦镜纸试擦物镜和目镜头。
擦时只能顺着一个方向多次抹擦，不能旋转抹擦，最后用细白绸把镜头再擦一次。
（3）镜检时，低倍物镜只能作粗调旋调焦距，转换高倍物镜时，只能用细调螺旋焦距，切勿损坏镜头。
（4）如果发现镜头被药物或者脏物沾污，应立即用擦镜纸浸沾少许二甲苯（以刚湿润擦镜纸为度）擦掉脏物或药液，并随即用擦镜纸擦干。
（5）使用完毕后，同
（2）进行清洁工作；转动物镜不要对着聚光镜，并降至最低点，放回镜箱，归还原处。
（6）镜箱内干燥硅胶，必须定期更换。
（7）显微镜必须与化学药物分开放置，严禁混藏。
三、玻璃器皿的清洁
1、器皿的清洁
（1）将玻璃器皿放在搪瓷盆内加入适量的洗衣粉煮沸80分钟；
（2）冷却后用清水洗干净，滤干水分；
（3）放在洗涤液中泡30分钟；
（4）再用清水冲洗干净，蒸馏水荡涤一下，晾干。
2、新载玻片与盖玻片的清洁
将新载玻片与盖彼片分别放在盐酸酒精中（95％酒精100份＋浓盐酸2份）浸泡4小时，再用流水冲洗干净，蒸馏水荡涤一下，滤干水分，放入95％酒精中备用。
3、陈旧载玻片与盖玻片的清洁
用过的陈旧载片与盖片、不适用的石蜡切片，清洁方法如下：
（1）将以上各种玻片放在洗衣粉水中煮15分钟。
（2）在热水中洗去残留的树胶和脏物，把载片和盖片分开，按下列步骤分别清洗。
（3）清水冲洗。
（4）洗涤液中浸泡30分钟。
（5）清水冲洗，蒸馏水荡涤一下。
（6）95％酒精浸泡备用。
擦试盖片时要小心，一只手夹住盖片两个边缘，另一只手持清洁纱布同时擦试两面，两指着力要均匀一致。
实验一有丝分裂（复习内容）
一、实验目的
了解有丝分裂过程中染色体的形态变化。
二、原理
植物根尖是细胞分裂的旺盛区，其细胞核内的染色体在8－羟基喹啉（或
对二氯苯）作用下，刺激染色体收缩、变粗，且避免染色体在细胞中凝聚一团，再经过盐酸等物质处理，使细胞之间的壁溶解，固定杀死细胞，染色体经碱性染料染色后，即可制做永久片，观察有丝分裂各期的形象。
有丝分裂是植物细胞增殖的主要方式，有丝分裂期间，细胞核内每一染色体均进行自我复制，分裂期间，染色体变化不同可分成紧密衔接的四个时期。
前期：
细胞核中出现染色体，细长缠绕成团，随后逐渐粗短。
每条染色体是由两条共着丝点的染色单体组成，随着核仁核膜的消失而进入中期。
中期：
染色体逐渐集中于细胞中部，成一排于赤道面上。
这时纺锤丝的一端连接染色体着丝点，另一端集中于细胞的极处构成纺锤体。
由于染色体收缩，而形成明显的一定数目和形态的物质，因此，这个时期是染色体计数和形态观察的最适期。
后期：
每条染色体上的两染色单体，随着丝点的分离而分离。
在纺锤丝牵引下，每条染色单体分向两极，成为独立的染色体，在两极方向上出现了数目与母细胞相同的染色体群。
末期：
染色体到达两极，染色体又伸长变细，恢复到间期的状态，核膜、核仁重新出现，随纺锤体解体，在细胞赤道板上形成细胞壁，成为两个细胞，完成有丝分裂过程。
有丝分裂是均等的分裂过程，染色体一分为二，均匀分配到每个子细胞中，其结果，母细胞与子细胞，子细胞之间，染色体数目和组成完全相同，由此推断，生物细胞遗传物质的正确传递，与染色体准确复制和均等分配有关，支配生物性状表现的物质，主要存在于细胞核中的染色体上。
三、仪器药品
显微镜24台酒精灯6盏沙布15×15ml16块
12×12ml12块
擦镜纸1本石棉网6个温度计6支
培养皿大6个火柴6盒标签纸大60张
小40张
解剖针32个烧杯500ml16个毛笔6个
载玻瓶200三角瓶（大）6镊子32
盖玻片200吸水纸（大）3张瓷盘6个
恒温箱1个漏斗2个小天平2台
刀片12滤纸1盒标本盒6个
量筒100ml6个剪刀1把针剂瓶40个
10ml6个
容量瓶50ml1个浆糊1瓶标色试剂瓶40个
500ml1个
液管1ml玻璃棒6个小吸管12个
曲回针32个玻璃6只
酸酸详细8－羟基喹啉（或对二氯苯）乙醇（100％95％）3瓶
（铁钒——醋酸——洋红）
灯用酒精3瓶卡诺试剂蒸馏水二甲苯INHCI
封蜡封胶洗衣粉
附：
1、醋酸洋红（及固定液）配方见压片技术部分
2、8－羟基喹啉（0.OO2M）
取0.29克8－羟基喹啉先溶于少量乙醇溶液中，待完全溶解后浴于100ml蒸馏水中。
3、对二氯苯饱和溶液
对二氯苯溶于水中，60℃水溶条件下4小时后，使保留少量末溶物为度即可。
四、材料：
西瓜或蚕豆，或洋葱根尖细胞。
五、实验步骤：
1、种子萌发：
使萌发势较好的西瓜种子，在25℃一30℃条件下发根。
一般事前要用碱洗去表面粘膜，以免发霉，温水浸种24小时，然后播于培养皿中，上下均用沙布垫着，每天自来水冲洗一次，水分以饱和沙布为度，3-4天后萌发。
2、预处理：
待根尖长到0.5-1.5cm长时，一般在上午8:
00-10:
00，用刀片切下根尖置于O.002M8-羟基喹啉中（或饱和对二氯苯溶液中）,1-1.5小时保证16℃-20℃，否则失败，蒸馏水洗2-3次。
3、固定：
把预处理，水洗后的根尖换上卡诺试剂固定，（无水乙醇：
冰醋＝3:
1）,2-6小时，蒸馏水洗2-3次。
4、离析：
换上工INHCI在60℃水溶液中，离析5-6分钟，立即水洗2-3次，处理时间不能过长，也不宜过短。
过长影响染色，过短细胞则不易分离分散。
离析的目的是为了使细胞中间层被酸水解，使细胞易于分离，除上种方法外，还有其它几种：
（1）固定后放入等量的95％酒精和浓盐酸混合液中2-10分钟，时间长短因材料不同而异。
（2）固定后用浓HCL离析1-2分钟，但禾本科植物用此法，其它不行。
盐酸处理后，必须用50％酒精洗一、二次。
如果残留盐酸太多，则会影响染色体的染色，这是造成不易染色的原因之一。
5、染色
镊取根尖，取下1-2mm长的分裂区组织于载片上，用吸水纸吸去过多液体，滴上一滴醋酸洋红，3-4分钟后压片。
材料不能太多，否则堆积后压片效果不佳，观察困难。
染色时间可根据室温和具体制片效果而定，室温高，时间短些，室温低则相应长一些。
轻轻盖上盖玻片（用沙布擦，将周围擦干净），用左手大拇指压紧盖片左下角，用铅笔的橡皮头弹击压有材料的盖片部位，直到中部的材料分散成雾状为最好。
离析的成败，直接关系到压片的效果，离析不完全时，往往会使材料聚积不散。
此后用吸水纸吸去过多染液，于显微镜下观察。
有保存价值的片子可暂用封蜡封好，以作永久性制片保留来用。
最好能贴上标签，避免混淆，在标签上注明材料、分裂期、姓名、时间。
作业：
1、每人交有丝分裂封蜡片1-2张。
2、画有丝分裂中期和后期细胞图1-2个。
附近：
酶解法
一、原理
纤维素酶和果酸酶作用下，分解细胞壁，使细胞中染色体分散开来，利于观察。
二、方法步骤
1、种子萌发：
（目前）
2、预处理：
（……）
3、前低渗
移入O.075MKCI中，18-28℃处理20分钟，蒸馏水冲洗2-3次。
4、酶解去壁：
移入2.5％果胶酶与2.5％纤液素酶等量混合液中，调PH-5.5,18-28℃酶解，1小时，蒸馏水冲洗2-3次。
5、后低渗：
移入18-28℃蒸馏水中低渗处理20分钟。
6、火焰制片：
截取lmm根尖分生组织置干清净载玻片上，加一滴新鲜卡诺试剂，用锤柄充分捣碎后，再滴入少量固定液在酒精灯上火焰干燥，使细胞分散，平展。
7、染色
用吉姆撤磷酸缓冲液调整PH至6.8，配制10:
1（或9:
1）吉姆撒染液，根据不同植物分别染色15分钟，蒸馏水冲净。
8、封片：
经二甲苯浸泡1小时后，晾干，用达马胶封片。
9、镜检：
观察细胞有丝分裂中期，分散较好时给予保存。
此方法使用于中期染色体数目及形态的观察。
实验二减数分裂（复习内容）
一、实验目的：
1、了解植物花粉母细胞减数分裂时相关形态特征，掌握取材标准，固定、染色和制片方法。
2、了解分裂的全程及各个时期染色体的形态变化。
二、实验原理：
减数分裂是染色体数目减半的有丝分裂，也叫做成熟分裂。
生物体在整个发育过程中，生长发育到一定阶段进入性成熟。
先分化出大小孢子母细胞，进行减数分裂，然后产生雌雄配子或性细胞，雌雄配子结合（即受精）后，成为受精卵。
减数分裂包括连续两次的细胞分裂过程，每个母细胞共形成四个子细胞，在高等植物中减数分裂开始的细胞是花粉母细胞及胚囊母细胞，减数分裂的直接产物是小孢子和大孢子，由于染色体只是在第一次分裂前的同期复制过一次，而细胞却分裂了两次，结果每个子细胞中的染色体就比原来细胞减少一半。
这两次连续的分裂都可分为紧密衔接着的前期、中期、后期和末期。
第一次分裂的前期变化最为复杂，又可分为细线期、偶线期、粗线期、双线期、终变期。
前期I
细线期：
核内出现明亮空腔，染色体呈细长丝状，首尾难分，互相缠绕，靠近核的一边，部分细丝则向核的另一边发散，如花束状，在电子显微镜下可以看到染色体成双的状态。
偶线期：
此期开始时，同型（同源）染色体上相对应的位点都非常准确地靠在一起，好象“拉练”一样，同型染色体这种相互吸引和纵向靠拢称为联会。
这是减数分裂和有丝分裂中染色体行为的主要区别之一。
由一对同源染色体联会在一起的单位叫做二价体，每个二价体包含着4根染色单体，故称为四合体，其中来自同一染色体的两根染色单体，叫做姐妹染色体，来自不同成员的染色单体，互称为非姐妹染色体。
粗线期：
配对的染色体随着螺旋化的加强而逐渐缩短变粗，染色体的个体性也逐渐明显。
在这个时期姐妹染色体之间可能发生片段交换，四合体中的四个染色单体，某一相对位置同时发生断裂而后差错地“愈合”，彼此交换了片段，染色体交换是生物变异的重要来源之一。
双线期：
同型染色体的两个成员之间开始互相排斥而彼此分开，但发生过交换的部位仍粘连在一起，形成交叉结。
交叉结的数目多少不定，一般在1一3个之间，所以双线期联合起来的染色体好象“麻花”一样。
终变期：
配对染色体的两个成员之间彼此排斥分离，使交叉结逐渐向两端移动，这种现象称为交叉移端，随着移端过程的进行，交叉结数目减少，最后只在末端相连，这时染色体高度浓缩，各二价体向核的四周扩散，因此是染色体计数的良好时期。
终变期末，核仁、核膜逐渐消失，乃进入中期。
中期I：
核仁、核膜完全消失，所有的二价体都排列在赤道板上，每对同型染色体的两个着丝点分别向着相对的一极，这个时期如果从极处向赤道面上观察，染色体的数目是比较容易计数的。
后期I：
二价体的两个成员开始分开，在纺锤丝的作用下，分别向两极移动，使得两端子细胞中的染色体数目减少了一半，注意这时每根染色体包括两根染色单体，其着丝点尚未分开，此时每对同型染色体中的两个成员必然分离，而非同型染色体之间则以同等机会随机结合，进入不同子细胞中，这是后代变异的重要来源。
末期I：
分向两极的染色体又聚合起来，核仁、核膜开始形成，于是一个母细胞分成了两个细胞，叫做二分体。
间期：
每个子细胞中核膜、核仁完全形成，但染色体螺旋并不消失，这个时期很短促，紧接着进入下一次分裂。
前期II：
染色体又重新出现，可见到每一染色体的两个姐妹染色单体互相排斥。
而着丝点处仍相连，形成“X”状。
中期II：
染色体显著缩短变粗，排列在两个子细胞的赤道板上。
后期II：
每个染色体的着丝点分裂，每根姐妹染色单体各得一个着丝点，成为独立的染色体，借助于纺锤丝，分别移向两极。
末期II：
分向两极的染色体聚集起来，组成新核，在赤道面出现膜体，植物中形成细胞壁，于是由一个母细胞共分裂为四个子细胞，植物花粉母细胞减数分裂刚结束时，这四个细胞仍联合在一起，叫做四分体。
减数分裂中染色体的行为变化与植物的遗传变异密切相关，遗传学的三个基本原则的共同的细胞学基础就是减数分裂，因此，应熟悉减数分裂各时期的特点。
三、实验材料：
蚕豆、大葱、洋葱、苹果、葡萄、枣、玉米等。
四、试验用品：
1、显微镜、温箱、1/1000天平。
2、盖玻片、载玻片、培养皿、量筒、三角烧瓶、皮头玻璃棒、酒精灯、小瓶、滴瓶、石棉网。
3、无水酒精、冰醋酸、蒸馏水、洋红。
4、小镊子、解剖针、吸水纸。
五、试验方法：
1、配置药品：
（1）、卡诺液：
纯酒精3份，冰醋酸1份。
（2）、醋酸洋红：
取45毫升冰醋酸加入55毫升蒸馏水中，至于酒精灯上加热至沸，移去火源，徐徐加入2克洋红粉末。
再加热1-2分钟冷却后加入几滴2％铁明矾（硫酸铁铵），过滤后至于棕色瓶中备用。
2、取材固定：
取材的时间及大小必须十分恰当，才能获得更多的花粉母细胞分裂相，各类作物减数分裂时相关的形态特征表现不一，现列表简述，供参考。
附表：
各类作物花粉母细胞减数分裂时期的相关形态特征
作物名称相关形态特征
猕猴桃幼蕾横径4～5mm为宜。
蚕豆幼小花蕾长约3～4mm为宜。
豌豆同
大葱从总苞刚刚散开的上端花蕾
洋葱同
西瓜花蕾约长1mm左右。
杏花芽顶端微型小口7×3mm
桃花芽顶部有裂口，裂缝线露白，大小在6×3mm。
白梨花芽基部露绿或褐色，花蕾大小3×2.5mm为宜。
苹果花芽定形后，露叶1-2片，花蕾大小7.5×3mm。
葡萄展叶4-5或4-8片，花蕾横径1.4-1.5mm。
枣花蕾横径1.5mm左右。
在花序的分枝上，以上中部小穗发育早，无柄小穗发育早。
在一天内减数分裂旺盛的时间，因作物不同，时间不一，西瓜在早晨4-5时，蚕豆、豌豆在8-10时，洋葱在3-11时，玉米7-8:
30，果树以6-11时为好。
按标准取来之材料，投入卡诺氏液中，固定1-2小时，用95％的酒精洗两次，转入70％酒精中保存。
3、染色制片
用镊子取出经过固定的大小合适的花苞，先置于吸水纸上，吸去保存液或固定液，移至载玻片上，剖出花药，滴一小滴染色液，（醋酸洋红、醋酸地衣红、或醋酸-铁矾-苏木精I或III）注意切勿多加，用弯头解剖针截断花粉，并轻轻挤压，使花粉母细胞从切口散出。
而后用镊子把所有药壁残渣检除干净，这很重要，否则材料不易分散压平，片面不清洁，有碍观察，而且制作固定片时会引起材料的大量脱落。
置镜下初步检查，如花粉母细胞正处于分裂期即加上盖片，在其四周稍加染色液，将载片在酒精灯焰上来回烘烤几次，注意勿使药液沸腾，接着压片，如果染色太浅，可在盖片四周稍加染色液，待其渗透，再烘、再压，直至染色体着色明显清晰为止。
4、镜检
观察时首先要识别几种细胞：
体细胞、花粉母细胞、四分体脱开后刚发育的幼小花粉粒以及成熟的花粉粒等。
一般在镜下可以看到一些形态较小而且整齐均一的细胞，那是花药壁体细胞，同时可看到一些形态显著较大，比前面那种细胞大上十倍、圆形或扁圆形，不很规则，其细胞核较大，那就是花粉母细胞，如有形状比体细胞大但比花粉母细胞小，略呈扇形的细胞，那就是从四分体脱开后的幼小的花粉，如有形状较大，椭圆形，似有明显的外壳，内部较透明的细胞，则是长大的花粉粒。
减数分裂是从花粉母细胞开始的，凡形状大小同花粉母细胞相近而核范围内似有空腔出现丝状、条状、棒状物者，即正在进行减分裂，注意对这类细胞进行观察检查。
六、作业
1、每人作出二张良好的监时片。
2、绘制减数分裂图二个（分裂期不限），并简述其特征。
实验三染色体核型分析
一、实验目的及意义
把生物核内全部染色体按其形态特征所进行的综合分析，称为染色体核型分
析。
染色体数目的多少和组成是生物性状稳定的前提，对生物染色体的核型分析，对于鉴定和确定染色体变异具有重要意义。
通过本实验，要求学生理解核型分析的原理及目的，掌握染色体核型分析的一般方法。
二、原理：
各种生物的染色体数目都是恒定的，而且它们在体细胞中常常是成对存在的
的。
可以根据同源染色体的形态特征如长度、臂比、着丝点的类型、随体的有无等进行配对、鉴别和命名，为研究染色体变异提供参考。
三、用品：
剪刀、尺子、胶水、染色体照片
四、材料和方法
1、材料：
黑麦2n=2x=14
2、方法：
（1）测定染色体的长度：
染色体长度可分为绝对长度和相对长度。
绝对长度是在显微镜下测量的长度（u）。
一般采用相对长度，相对长度（%）是指一条染色体的实测长度占整个染色体组的总长的百分率。
（2）臂比＝长臂长度／短臂长度
（3）着丝点类型：
臂比为1.00时，为正中着丝点（T），臂比为1.01一1.70时，为中部着丝点（m），臂比为1.71一3.00时，为近中着丝点（sm），臂比为3.01一7.00时为近端着丝点（st），臂比为7.00以上时，为端部着丝点（t）。
（4）根据所测数据，对各对染色体进行配对，并剪下粘贴，给予序号命名。
五、作业
对黑麦的染色体进行核型分析。
暂编号
相对长度（%）
臂比
着丝点类型
备注
1′
2′
3′
4′
5′
6′
7′
8′
9′
10′
11′
12′
13′
14′
实验四分离规律
一、实验目的：
通过对杂种二代（F2）一对性状的分离现象的观察，加深对孟德尔分离规律的理解。
二、实验材料
1、玉米杂种F2分离果穗和固定的杂种Fl雄蕊。
2、番茄杂种F2分离植株。
三、实验用品
培养皿、镊子、吸水纸、显微镜、载玻片、盖玻片、解剖刀、铅笔、橡皮、报告计载表、计算器、I2一KI溶液。
四、实验原理
分离规律指出，相对性状由相对的两个遗传因子控制，一个来自交方，另一个来自母方，两个遗传因子在体细胞内成对存在。
当杂种形成配子时，成对因子彼此分离，因此，每个配子内只含有相对因子的一个，配子数目相等，并且各种异性配子相互结合的机会均能等，从而使杂种植株在自交或测交的情况下，表现出一定的比例（3:
1或1:
1）。
现以玉米性状分离和配子分离来证实。
（一）玉米：
1、性状分离：
玉米中，紫色籽粒玉米和红色籽粒表现为一对基因的差别，以隐性红色籽粒玉米为母体，与纯合显性紫色籽粒玉米杂交，子代为紫色籽粒。
F1植株在减数分裂时，等位基因要发生分离，F1自交产生显隐性为3:
1的分离比例，F1与隐性亲本测交后，得到显隐性为1:
1的分离比例。
2、配子分离：
杂合非糯玉米在花粉粒上的分离，直接证明配子发生分离，也直接说明了相对基因的分离，纯合糯玉米（wxwx）产生的花粉粒含枝链淀粉，与碘作用呈红棕色，纯合非糯玉米｛WxWx｝产生的花粉粒含枝链淀粉，与碘作用呈红棕色，杂合非糯玉米（Wxwx）则产生上述两种数目相等的花粉粒，用碘染色后后，半数花粉粒呈兰黑色，半数花粉粒呈红棕色，由此证明，基因的分离是在形成配子的减数分裂过程中进行的。
如果F1植株上形成的花粉1：
1的，在其自交所形成的F2代果穗上将含有3/4种子为非糯，1/4种子为糯质。
F2F1花粉
F1卵细胞
Wx
wx
Wx
WxWx（非糯）
Wxwx
wx
Wxwx（非糯）
wxwx（糯）
非糯：
糯＝3:
1
用I2一KI对F2的种子逐粒染色可以看出结果，假如是3:
1，则说明F1的花粉定是1:
1。
（二）番茄
紫茎A对绿茎a为完全显性，那么AA×aa的F1代自交后代应为3:
1比例。
五、实验步骤：
1、每人数杂合紫玉米（Prpr）的自交和测交果穗各一穗，将统计数字填入
下表，进行适合性测定，检查是否符合一对基因自交3:
l的分离结果。
籽粒性状
显性
隐性
总数
观察数（o）
理论数（e）
偏差a=o-e
a2/e
X2=
适合性测定：
用卡方法（X2-test）测验实际分离比例是否与预期理论值相符。
卡方
e
（o-e）2
公式如下：
X2＝∑自由度（d·f）＝2－1
查X2表，如P<0.05表示不符合，即实际所得的结果，不符合某种分离比例；如果P>0.05
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