生化检验2.docx
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生化检验2
4、适应现代临床医学需要:
如血气分析仪一次可以分析三个参数,即氧分压(PaO2)、二氧化碳分压(PaCO2)和pH,再由此计算出其它气体及酸碱平衡诊断指标。
急诊检验:
实验室为了配合临床危急、重症患者的诊断和抢救而实施的一种特需检验。
检验者在接到“急诊检验”标本后必须快速、准确地发出报告,一般要求从接受标本开始至检验结果发出最长不得超过2h。
临床生物化学检验质量控制的主要内容
一、实验室外:
医生申请、患者准备、标本采集、标本运送和收检
二、实验室内:
设施与环境、仪器和设备、外部供应品、实验室检测系统、标本验收、室内质量控制
仪器和设备的标识1、绿色”标识:
经过校准、检定、厂家验收合格或检查功能正常的仪器,表明该仪器设备为合格状态或正常状态。
2、“黄色”标识:
有部分缺陷,但不影响检测所需的某项功能,经过校准、检定或质控仍然合格,表明该仪器设备为准用或降级使用。
3、“红色”标识:
仪器设备处于维修状态或损坏、性能无法确定或经检定/校准不合格,表明该仪器设备为停用状态。
保证检测系统的完整性和有效性
1、核实检测系统性能:
如果实验室的检测系统具有溯源性,并已被许多实验室广泛应用,实验室只需核实该系统已被认可的性能。
——精密度和准确度。
2、确认检测系统性能:
如果实验室购置的检测系统在国内刚刚推出,但产品的分析性能已经由厂商进行了详细的评价,所有的分析性能资料已被生产厂商所在国的有关监督机构认可,且获得了生产许可证,实验室在使用该检测系统检测患者标本前应对该检测系统的基本性能进行评估。
确认实验应做精密度、准确度和结果可报告范围。
3、评价检测系统性能:
一个新的检测系统或对原有检测系统的任何改变都必须对该系统的性能进行全面评估,内容有精密度、准确度、可报告范围、分析灵敏度、分析特异性和参考区间。
标准物质(参考物质)包括校准物质和正确性质控物质。
1、校准物:
主要用于实验室的校准、标准曲线的绘制。
2、质控物:
主要用于室内质量控制、室间质量评价。
一、基质/基体(matrix):
反应溶液中或样品中除分析物以外的所有组分。
二、基质效应:
1、美国临床标准化委员会(NCCLS)文件中从两个角度定义:
①样品中除分析物以外的其它成份对分析物测定值的影响;②基质对分析方法准确测定分析物的能力的干扰。
2、对于临床实验室:
不同于新鲜标本的反应特性使测定结果产生的偏差
三、基质偏差:
基质效应所致分析结果的偏差。
【评价】1、首先明确基质效应评价的前提:
①通常认为新鲜(或冰冻)血清无基质效应;②决定性方法或参考方法无基质效应。
2、选定制备物,如胆固醇定标物或质控物。
3、按照一定程序,选择比较方法与被评价方法进行制备物胆固醇的基质效应检测。
4、通过检测,发现存在基质效应,则需进一步评估基质偏差的大小。
LIS在实验室的应用,有助于提高实验室的整体管理水平,提高工作效率,减少漏洞,提高检验质量。
【组成】
1、临床检验信息:
实验室日常工作所产生的信息,如检测结果、质控数据、工作记录等信息。
2、实验室管理信息:
实验室的各种文件、技术资料、行政管理、检验收费、后勤供应、仪器维修保养等与实验室管理有关的信息。
1、如何确定参考范围:
标准:
参考个体(按预定标准选择的个体) → 组成:
参考人群(包括尽可能多的参考个体) → 选出:
参考组 → 测定:
参考值 → 分析:
分布特征(正态、偏态)→ 统计:
参考值限度 → 指定:
参考范围(参考值区间)
2、应用参考凡事应注意哪些问题?
①正确选择受检对象——具有代表性。
②合理规定参考人群的条件,如年龄、性别、民族,以及标本采集的时间和地区因素等。
③保证一定数量的受检人数,一般应有100例以上,若分布呈偏态时应在120例以上,特殊情况至少也应30例以上。
④测定方法标准化,保证结果的可靠性和可比性。
⑤根据专业知识确定单、双侧位界,严格按照统计要求进行测定结果的处理。
临界值:
划分诊断试验结果正常与异常的界值。
又称阈值、分界值、鉴别值、指定值、诊断界值、截断点等。
代谢物酶法分析的优点
①酶作用的特异性高,血清等体液样品不需预处理就能测定,简化了实验程序;②试剂酶大多是蛋白质,没有毒性,避免了化学品对环境的污染;③酶促反应温和,制成试剂盒可适用于自动分析。
代谢物酶法分析在准确性、精密度、灵敏度和线性测定范围等方面都优于传统的化学法。
代谢物酶法分析根据设计原理的不同可分为:
1、单酶反应直接法,可用于尿酸、胆红素(单底物),乳酸、丙酮酸、酮体、乙醇、碳酸氢根(双底物)的测定2、酶偶联法,可用于体液葡萄糖、尿素、肌酐、甘油三酯、胆汁酸、乳酸、丙酮酸、酮体、乙醇、唾液酸以及氨、钾、镁离子的酶法测定。
3、酶循环法,应用见下4、酶活性恢复法,应用见下5、激活剂和抑制剂测定法:
可用于有机磷的酶法测定、抑制性ALP法测定茶碱,激活HK法测定镁离子
酶循环法:
利用底物和辅酶的反复反应,使待测物的酶促反应产物不断扩增。
当待测物浓度很低时,指示反应可检测信号很小。
利用酶促反应,使待测物和终产物之间的部分反应能循环进行,使检测信号不断增加。
【临床应用】1、产物循环----氧化酶-脱氢酶系统,可用于甘油浓度的测定
2、底物循环----脱氢酶-辅酶系统,可用于胆汁酸、肉毒碱、同型半胱氨酸、高密度/低密度脂蛋白胆固醇的测定。
3、氨循环----合成酶-脱氢酶系统:
可用于氨的测定
试剂酶:
作为诊断试剂来测定化合物浓度或酶活性的一类酶。
衡量其纯度的主要指标:
①酶的比活性,酶的比活性越高,酶的纯度越高。
②杂酶含量。
酶活性恢复法:
很多酶必需某些无机离子、微量元素或辅酶存在才发挥其催化活性。
脱去酶中关键的无机离子、微量元素或辅酶之后,酶即失去或降低其催化活性。
将无活性或低活性的酶与标本混合,标本中的无机离子、微量元素或辅酶使该酶复活或激活,复活或激活的比例可反映这些无机离子、微量元素或辅酶的含量。
【临床应用】无机离子测定:
丙酮酸激酶法测定钾离子、β-半乳糖苷酶法测定钠离子、淀粉酶法测定氯离子、异柠檬酸脱氢酶法测定镁离子。
微量元素测定:
超氧化物歧化酶法测定铜离子、碳酸酐酶法测定锌离子
酶法分析的设计要求
(一)共性要求
1、所用试剂酶的特异性:
指示酶要有更高特异性;
2、消除干扰因素:
加消除剂、抑制剂和用双试剂法;
3、试剂中的附加剂:
应不抑制酶的活性,不影响试剂的稳定性,不与底物和体液中的物质作用;
4、如何提高灵敏度:
①酶循环法;②荧光法。
(二)平衡法设计的要求
1、酶的用量要足够大,能使反应1min~3min达到平衡,以保证较快完成测定。
2、反应要朝正反应方向进行,如果反应的平衡常数太低,可用增加底物浓度、偶联反应移去生成物、改变反应pH等方法,并设标准管一起到达平衡以后测定。
3、Km在保证测定线性的前提下要尽量小。
(三)速率法设计的要求
1、所用酶的Km应足够大,以保证测定线性和较长的反应动态期。
Km太小,可加入竞争性抑制剂加大Km。
2、酶用量要合适,用多了可能导致线性期缩短,甚至一级反应丧失。
一般酶用量比平衡法小。
3、速率法酶促反应受很多因素影响,只有很好控制反应速度(v)才与代测物的浓度成正比例。
分级:
1、一级标准品(原级参考物):
它是已经确定的稳定而均一的物质,其数值已由决定性方法确定,所含杂质已经定量。
属于有证参考物质(CRM)。
用于校正决定性方法,评价和校正参考方法以及为“二级标准品”定值。
2、二级标准品(次级参考物):
可以是纯溶液(水或有机溶剂的溶液),也可以存在于相似基质中。
可由实验室自己配制或为商品,示值必须用一级标准品和参考方法并由训练有素的,能熟练掌握参考方法的操作者确定。
主要用于常规方法的标化和控制物的定值。
方法评价的基本内容:
通过实验途径,测定并评价方法的精密度和准确度。
评价实验的过程就是对误差的测定。
1、回收:
分析方法正确测定加入常规分析样品中的纯分析物的能力。
2、回收率:
Tt:
分析样品的测定结果 Tb:
基础样品的测定结果 Tt–Tb:
回收量 C:
分析样品中加入的纯分析物的浓度(加入后浓度)
1、干扰:
在测定某分析物时,受另一非分析物影响而导致测定结果增高(正干扰)或降低(负干扰)。
2、干扰物质:
分为内源性(样品中存在的)和外源性(外界污染的)两类。
①内源性的干扰物:
血清中固有的代谢产物,如血清中的甘油、胆红素、脂类、蛋白质、血红蛋白等;治疗药物,肠道营养等。
②外源性干扰物:
样品收集中的添加物如抗凝剂、防腐剂、稳定剂,容器和塞子的污染等;试剂中的杂质和杂酶等。
如何用单值指标判断评价试验结果:
1、精密度允许分析误差:
95%样品的允许误差限度。
试剂盒(reagentkit,kit):
用于检验项目测定的含有使用说明书的所有配套试剂的组合。
【分类】1、固体试剂和液体试剂①固体试剂:
冻干试剂、粉状试剂、干片试剂等。
优点:
运输方便、保存期长;
缺点:
组份均一性较差,瓶间差较大(分装过程中的称量误差和复溶时加入水量的误差都导致瓶间的不均一性)。
水质的优劣对试剂的稳定性和测定结果的可靠性有相当大的影响。
②液体试剂:
优点:
稳定性高,组份高度均一,瓶间差小,测定重复性好,使用方便。
无需加入任何辅助试剂及蒸馏水,避免了外源性水质对试剂的影响,性能较稳定,测定结果较为准确。
缺点:
保存时间较短,不便于运输。
2、试剂盒在使用时,除标准品外,只有一个试剂的,称为单一试剂;如果有两个试剂,则称为双试剂。
①单一试剂,优点:
操作简单;缺点:
稳定性较差,抗干扰能力差。
②双试剂是目前的主要试剂形式,提高了抗干扰能力、试剂的稳定性和均一性。
1、量值:
样品或标准物测量值(value)的简称。
2、溯源性(traceability):
通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链,使测量结果或测量标准的值(量值)能够与规定的参考标准(通常是与国家或国际测量标准)相联系起来的特性。
①标准物质量值溯源:
在实际测量中,使用不同等级的标准物质,按照由低到高,逐渐进行量值的追溯,直到国际单位的过程。
②标准物质量值传递:
从国际基本单位用不同等级的标准物质由高到低进行量值传递,最终到实际测量现场的过程。
1、验证的检测系统:
经生产厂家充分验证精密度和准确度的检测系统。
2、自建检测系统:
自己选择仪器、试剂、校准品进行组合,通过连续的比较链与某测定基准联系起来的检测系统称为自建检测系统。
全实验室自动化(TLA):
实验室的各种操作过程均实现自动化,将各种相关的自动化分析仪器串联起来,组合成流水线式的作业,把样品输送到不同的检测单元,并将各个仪器的检测结果合并输出。
组成:
样品前处理系统、样品输送系统、样品检测单元
分光方式:
1、前分光:
光源→分光元件→单色光→反应液→检测器
2、后分光:
光源→反应液→分光元件→单色光→检测器
是指分光后取多个固定单色光同时通过各自的信号传送通路(如光导纤维)传输到对应的信号检测器
优点:
单色器中没有转动部分,提高了检测精度和速度
干化学分析仪的检测原理
一、反射光度法:
5层膜结构
①渗透扩散层:
样品迅速均匀渗透,阻止颗粒成分和蛋白质等大分子向下渗透
②反射层:
白色不透明层,下侧涂布反射系数>95%的物质如BaSO4,能隔离渗透扩散层中有色物质
③辅助试剂层:
去除血清中的内源性干扰物,如固定维生素C氧化酶以消除血清中维生素C对H2O2的还原作用④试剂层:
即反应层,固定了该检测项目所需的试剂
⑤支持层:
透明塑料基片,允许反射光完全透过,而样品浓度与反射光强度成反比
试剂层和支持层之间可加一吸水层加快样品和试剂的渗透速度。
二、差示电位法:
常用于无机离子K+、Na+、Cl-等的检测
也是5层结构:
离子选择敏感膜、参比层、氯化银层、银层和支持层
电极:
样品电极、参比电极
测定方式:
取一定量血清加到样品电极的加样槽中,再取等量参比液加入参比电极的加样槽中,通过电位计来测定这两个电极的差示电位。
1、理论K值:
若某酶活性测定没有可用的校准品,则酶活性计算公式由酶活性的国际单位定义推算得出:
2、实测K值(实际K值):
理论K值受样品和试剂的加量准确度、比色杯光径准确度,尤其是ε的影响。
ε在波长和温度等不同时有所不同。
试剂说明书的ε可能与实际所用分析仪所测不同。
因而有必要获得用户所用分析仪的实际ε,再计算K值此为实测K值。
3、校准K值:
酶校准液在分析仪中测定后可自动计算得出校准K值,校准K值=(酶活性U/L)s/(ΔA/min)s
次波长【使用目的】:
①消除噪音干扰。
噪音:
从光源到比色杯、单色器、检测器整个光路均可产生,因双波长同时检测,两种波长检测产生的噪音基本上相同;②减少杂散光影响;③减少样品本身光吸收的干扰。
如溶血、黄疸和脂浊等干扰可部分消除
【常用方法】1、根据待测溶液对吸光谱的吸收曲线,选择最大吸收峰对应的波长为主波长,吸收曲线下端较为平坦的某一波长为次波长。
2、选待测溶液最大吸收峰对应的波长为主波长,选等吸收点的对应的波长为次波长。
3、选溶液最大吸收峰的波长为主波长,选显色剂的最大吸收峰对应的波长为次波长。
【设置原则】:
①使干扰物在主、次波长处有尽可能相同的光吸收值。
②被测物在主、次波长处的光吸收值有较大差异。
③次波长一般大于主波长100nm,主要考虑脂浊问题。
④免疫比浊法测定时次波长的选择,则是距离主波长越远越好,以得到较高的灵敏度
1、弹性速率:
酶活性测定中,当酶活性太高,在读数时间内已不呈线性反应。
有些仪器具弹性速率功能,能选择读数时间前段仍呈线性的吸光度值计算结果,使酶活性测定的线性范围得以扩大。
2、弹性速率法:
具备了弹性速率法的仪器,可以提前并弹性地确定检测读数窗口期,检测出高酶活力的样品,使得可报告范围上限延伸,一般可延伸5倍左右。
对于低酶活力或低浓度分析物,可以延长检测的读数窗口时间,使结果具有更多的检测数据,增加最后检测结果的可靠性。
【优点】:
①显著减少了重新检测的频率。
②避免了高酶活力样品的错误数据,得到准确的病人结果。
③减少了试剂的消耗,并缩短了发报告的时间,消除了稀释样品的重做引入的误差。
自动生化分析仪性能评价一、准确度和精密度二、分析速度:
主要由取样周期决定
1、取样周期:
从样品针采集前一个样品开始到采集下一个样品开始所需的时间
取样周期决定了分析仪的工作速度;加试剂周期与取样周期相应
2、反应盘圈数和取样针数
三、实用性1、通道(channel)数量:
与分析仪所能容纳的试剂瓶数有关2、反应杯数量:
反应杯数量多,容许同时处于取样、反应检测和清洗状态的反应杯数量便多,分析效率可提高3、一次能容纳的样品数量 ——样品盘模式:
即批处理样品量,分析仪对每批样品进行测定的前后均有一个启动过程和停止过程4、试剂瓶容量:
检测频率高的项目等需总试剂量大5、总反应时间:
目前主流分析仪的总反应时间为8.5~10min,个别15~22min6、吸光度检测范围:
对微弱光线的检测能力,即能检测吸光度的最高值及其准确度决定检测上限。
检测灵敏度:
能辨别待测物最小浓度差的能力7、检测成本:
反应杯类型和寿命决定其耗费;最小取样量影响试剂用量;最小反应杯液量可决定样品和试剂用量8、通道开放程度:
开放通道指用户可自由修改的测定分析程序,可使用户方便地选择试剂品牌。
某些品牌的分析仪开放通道数仅10个,目的是要求用户使用配套试剂,因此用户选用试剂明显受到限制
9、检测原理:
除可见紫外吸收光谱分析外,是否具有电化学、荧光等监测器,可决定该分析仪能开展检测项目的类型和数量
10、软件功能:
灵活性、方便性和数据存储能力等
11、其他:
用水量、消耗品、样品管要求、保养要求、急诊检验能力、复查功能等。
售后服务和维修
固定时间法:
在时间-吸光度曲线上选择的两个读数点,既非反应初始吸光度亦非终点吸光度,其差值用于结果计算。
固定时间法可解决某些化学反应的非特异性问题
【项目】:
1、苦味酸法测定肌酐
①反应最初30s,血清中快反应干扰物(如维生素C、丙酮酸、乙酰乙酸等)能与碱性苦味酸反应。
②在第二个30s,碱性苦味酸主要与肌酐反应,且此段时间-吸光度曲线的线性较好(故也可用连续监测法测定肌酐)。
③在80s~120s及其以后,碱性苦味酸可与蛋白质以及其它慢反应干扰物反应。
故选用30s~80s这段固定时间为测定时间
2、溴甲酚绿法测定血清清蛋白
溴甲酚绿(BCG)在pH4.20的环境中,在有非离子去垢剂(Brij-35)存在时,可与清蛋白(albumin,Alb)结合形成蓝绿色复合物,在波长630nm处有吸收峰,其颜色的深浅在一定范围内与清蛋白含量成正比。
BCG与蛋白结合的特异性较低。
实验证明,BCG不但与清蛋白呈色,而且还可与其他蛋白质呈色,其中α1-球蛋白、TRF、Hp最明显,但反应速度不同,清蛋白可立即反应(快反应),其他蛋白质反应慢(慢反应)。
由于血清与BCG试剂一经混合“慢反应”即可发生,约持续1h完成,故要求在1min内测定吸光度,排除“慢反应”干扰。
血药浓度与药理作用的关系
1、药物的治疗作用或不良反应,都是通过药物和靶位受体间的相互作用而产生的。
2、对大多药物而言,药理作用的强弱和持续时间,与药物的受体部位的浓度呈正比。
3、血液中的药物浓度与细胞外液及细胞内液的药物浓度形成一个可逆的平衡。
此平衡遵守质量作用定律。
因此,血液中的药物浓度间接反映了药物在受体部位的浓度。
4、药理作用与血药浓度相关性强于与每日总剂量的相关性
5、常规剂量给药时,对有些人而言可能过低,导致治疗失败;而对另一些人而言,则可能引起毒性反应。
6、当药物在体内达到分布平衡后,虽然血液和靶位的药物浓度往往并不相等,但血药浓度与药物效应间存在相关性。
故检测相对易采集的血药浓度,替代心、脑、肾等难以取样的靶位药物浓度。
有效血药浓度范围:
最低有效浓度(MEC)与最低中毒浓度(MTC)之间的血药浓度范围。
治疗药物监测依据一、药效学原因1、安全范围窄,治疗指数低:
治疗浓度和最小中毒浓度接近甚至重叠,极易中毒,如强心甙、抗癫痫药等。
2、以控制疾病发作或复发为目的的用药:
多需数月或数年的长期用药,如抗癫痫治疗等。
3、不同治疗目的需不同的血药浓度4、药物过量中毒 5、药物治疗无效原因查找诊断明确用药恰当,但病人未获预期疗效时,进行TDM可排除是否病人未按医嘱用药、或因药品质量、病人个体差异等,导致未达治疗浓度。
二、药动学原因1、已知治疗浓度范围内存在消除动力学方式转换的药物 2、首过消除强及生物利用度差异大的药物 3、存在影响药物体内过程的病理情况:
①腹泻、呕吐可减少口服药物吸收;②肝功能减退——生物转化能力降低/改变血浆蛋白浓度及比例,影响药物血浆蛋白结合率;③心衰、休克时血流动力学的改变;④肾功能减退:
对药物的排泄,尤其是主要以原型药从肾排泄的药物产生明显影响。
4、长期用药及可能产生药动学相互作用的联合用药
治疗药物监测常用方测定方法一、色谱法
色谱法根据两相状态可分为气相层析和液相层析。
以气体作为流动相的色谱称为气相色谱(GC),以液体作为流动相的色谱称为液相色谱(LC)。
液相色谱中效果较好的一种是高效液相色谱法(HPLC)。
二、免疫化学方法分为:
放射免疫、酶免疫、发光免疫等。
化学发光免疫分析(CLIA)是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,可用于半抗原药物检测。
尤其是荧光偏振技术和时间分辨荧光技术在TDM中广泛应用。
二、其他技术:
光谱法;毛细管电泳技术;抑菌试验
第七章 临床专用生化分析仪分析技术
浊度:
溶液中悬浮液或胶体物对光线透过时产生阻碍的程度被称为浊度。
通过检测浊度的大小,对溶液中某种物质的含量进行分析的方法称为浊度分析。
特定蛋白:
在机体内具有某种生理功能,疾病状态时又有着特定的病理生理意义的蛋白质,临床上常被称为特定蛋白(specialprotein)。
附上学期的有关内容
血清中的蛋白质因为都是由氨基酸组成,性质相似,除清蛋白等少数蛋白质有某种特性可利用染料结合法等方法测定外,其他都需制备特异的抗血清,采用免疫比浊法、免疫扩散法、化学发光免疫法、放射免疫法等方法测定。
临床所指的特定蛋白质主要有:
Alb、PA、AAT、AAG、Hp、AMG、CER、TRF、CRP,以及免疫球蛋白IgG、IgM、IgA和补体C3、C4,这14种蛋白质,目前已有国际公认的标准参考物质。
浊度分析的基础理论
1、光透射理论朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律:
A=KLC
2、光散射理论影响光散射的因素:
入射光的波长,偏振,微粒的大小,浓度,质量等
可见,散射光强度与颗粒的浓度和分子量有关。
3、免疫浊度分析:
在一定条件下,可溶性抗原与抗体在液相中特异结合,形成有一定大小的抗原-抗体免疫复合物颗粒,使反应液出现浊度;当光线通过介质中的复合物颗粒时,可形成光的吸收、透射、散射和折射;通过测量透射光或散射光信号强弱,从而推算出被测物的量。
浊度分析方法的分类
根据检测器的位置及其接收光信号的性质分:
透射免疫浊度法、散射免疫浊度法
透射免疫浊度发可分为:
沉淀免疫浊度法、粒子强化免疫浊度法
散射免疫浊度法根据复合物形成速度和测定方式分:
终点浊度法、速率浊度法
1、透射免疫浊度法:
指在光源的光路0°角方向上测量透射光强度,并研究其与被检测溶液微粒浓度关系的方法。
该方法简单快速,可用自动生化分析仪或分光光度计进行检测。
2、散射免疫浊度法:
指在光路的5~90°角的方向上测量散射光强度,并研究其与被测溶液中微粒浓度关系的方法。
该方法需要在专用的浊度分析仪上进行。
浊度分析的质量控制一、抗原过剩校正
免疫浊度分析的基本要求:
始终保持反应体系中抗体适量过剩。
抗原过剩的检测方法:
①连续监测抗原抗体反应曲线,当抗原过剩时,反应曲线呈现异常。
②反应体系中追加抗体,如果浊度继续增大则提示抗原过剩。
③待测标本用两种稀释度测定,浓度高的样本浊度反而降低则提示抗原过剩。
二、减少伪浊度减少产生伪浊度的方法:
①标本:
采用新鲜、合格标本。
避免脂血、溶血、黄疸、浑浊以及冻溶的标本。
②检测体系:
保持比色杯和稀释杯清洁。
尽量一次性。
③试剂:
使用合格的抗体试剂。
避免抗体效价低,含交叉反应的抗体,避免过期变质,落入灰尘的试剂。
电解质自动化分析技术离子选择性电极(ISE):
是一类用特殊敏感膜制成,对溶液中某种特定离子具有选择性响应的电化学传感器。
在临床实验室,常用于测量离子的活度或浓度。
通常由电极管、内电极、电极内充溶液和电极膜(或称敏感膜)四个部分组成。
离子选择电极电位分析理论
1、电极电位产生
ISE的电位与溶液中特定离子活度的对数呈线性关系。
Nernst方程式:
K为常数,R为气体常数,T为绝对温度,n为离子电荷数,F为法拉第常数。
ai=fi*Ci
2、电极电位测量
ISE的E(ISE)值不能直接测定,必须将ISE与参比电极共同浸入待测样品中组成一个原电池,通过测量E电池(原电池的电动势)便可求得离子的活度或浓度。
电池的电动势:
在一定条件下,原电池的电动势与被测离子活度的对数呈线性关系。
钠、钾、氯电极
1、钠电极是一种含铅硅酸钠的玻璃膜电极;
2、钾电极为由缬氨霉素和聚氯乙烯(PVC)等组成的膜电极;
3、氯电极由一个银/氯化银电极组成。
血气分析仪:
应用电化学分析技术和原理,采用电极对血液中的pH值、PCO2和PO2进行测定的临床分析仪器。
现代血气分析仪又称为全自动血气/电解质/代谢物/血氧分析仪。
工作原理:
1、pH电极:
属玻璃膜电极,通常需与参比电极构成一个电化学电池,通过测量该电池的电动势E而获得相应溶液的pH。
在一定温度下,玻璃电极的电极电位E玻与待测溶液的pH有线性关系:
2、PaCO