生化习题集第十一章分子生物学常用技术及其应用.docx

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生化习题集第十一章分子生物学常用技术及其应用

第十一章分子生物学常用技术及其应用

一、名词解释

1．DNA重组2．基因工程

3．限制性核酸内切酶4．基因组DNA文库

5．cDNA文库6．聚合酶链反应（PCR）

7．载体8．转化

9．感染10．核酸分子杂交

11．Southern印迹杂交12．Northern印迹杂交

13．斑点印迹14．原位杂交

15．DNA芯片16．基因诊断

17．基因治疗

二、选择题

A型题：

1.限制性核酸内切酶作用特点不包括：

A．在对称序列处切开DNAB．DNA两链的切点常不在同一位点

C．酶切后产生的DNA片段多半具有粘性互补末端D．DNA两链的切点常在同一位点

E．酶辨认的碱基一般为4～6个

2．限制性核酸内切酶：

A．可将单链DNA任意切断B．可将双链DNA序列特异切开

C．可将两个DNA分子连接起来D．不受DNA甲基化影响

E．由噬菌体提取而得

3．cDNA文库包括该种生物的：

A．某些蛋白质的结构基因B．所有基因组

C．结构基因与不表达的调控区D．内含子和调节区

E．内含子和外显子

4．下列关于建立cDNA文库的叙述哪项是错误的：

A．从特定组织或细胞中提取mRNA

B．将特定细胞的DNA用限制性核酸内切酶切割后，克隆到噬菌体或质粒中

C．用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNA

D．用DNA聚合酶，以单股DNA为模板合成双链DNA

E．加S-腺苷甲硫氨酸（SAM），以使新生的DNA双链甲基化

5．限制性核酸内切酶的通常识别序列是：

A．粘性末端B．RNA聚合酶附着点

C．回文对称序列D．聚腺苷酸

E．甲基化“帽”结构

6．pUC系列是指：

A．经人工改造的大肠杆菌质粒B．天然的大肠杆菌质粒

C．天然的酵母质粒D．经人工改造的大肠杆菌噬菌体

E．经人工改造的酵母质粒

7．用于转染哺乳类细胞的常用载体是：

A．质粒B．噬菌体

C．逆转录病毒RNAD．结构基因

E．乳糖操纵子

8．转化常指：

A．噬菌体感染B．基因的转位

C．摄取外来DNA，引起细胞生物学类型的改变D．产生点突变

E．产生移码突变

9．基因工程的操作程序可简单地概括为：

A．载体和目的基因的分离、提纯与鉴定B．分、切、接、转、筛

C．将重组体导入宿主细胞，筛选出含目的基因的菌株D．将载体和目的基因接合成重组体

E．限制性核酸内切酶的应用

10．用于基因治疗较为理想的载体是：

A．质粒B．噬菌体

C．经改造的逆转录病毒D．人类DNA

E．酵母质粒

11．常用质粒有以下特性：

A．是线形双链DNAB．插入片段的容量比λ噬菌体DNA大

C．含有抗生素抗性基因D．含有同一限制性核酸内切酶的多个切口

E．不随细菌繁殖而进行自我复制

12．在重组体中切出插入片段最常用的方法是：

A．以重组时所用限制性核酸内切酶将其切出B．用其它限制性酶将其切出

C．用S1核酸酶将其切出D．用DNA酶将切出

E．用多种限制性内切酶将其切出

13．利用PCR扩增特异DNA序列主要原理之一是：

A．反应体系内存在特异DNA片段B．反应体系内存在特异RNA片段

C．反应体系内存在特异DNA引物D．反应体系内存在特异RNA引物

E．反应体系内存在的TaqDNA聚合酶具有识别特异DNA序列的作用

14．表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是：

A．大肠杆菌表达体系B．原核表达体系

C．酵母表达体系D．昆虫表达体系

E．哺乳类细胞表达体系

15．限制性核酸内切酶切割DNA后产生：

A．3′-磷酸基末端和5′-羟基末端B．5′-磷酸基末端和3′-羟基末端

C．3′-磷酸基末端和5′-磷酸基末端D．5′-羟基末端和3′-羟基末端

E．3′-羟基末端和5′-羟基末端及磷酸

16．下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是：

A．小型环状双链DNA分子B．携带有某些抗生素抗性基因

C．在细胞分裂时恒定地传给子代细胞D．具有自我复制功能

E．获得目的基因

17．在分子生物学领域分子克隆主要是指：

A．DNA的大量复制B．DNA的大量转录

C．DNA的大量剪切D．RNA的大量剪切

E．RNA的大量反转录

18．在分子生物学领域重组DNA技术又称：

A．酶工程B．蛋白质工程

C．细胞工程D．发酵工程

E．分子克隆技术

19．在重组DNA技术中不涉及的酶是：

A．限制性核酸内切酶B．DNA聚合酶

C．DNA连接酶D．反转录酶

E．DNA解链酶

20．多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为：

A．平端末端B．3′突出末端

C．5′突出末端D．粘性末端

E．缺口末端

21．可识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶为：

A．限制性核酸外切酶B．限制性核酸内切酶

C．非限制性核酸外切酶D．非限制性核酸内切酶

E．DNA内切酶

22．cDNA是指：

A．在体外经反转录合成的与RNA互补的DNAB．在体外经反转录合成的与DNA互补的DNA

C．在体外经转录合成的与DNA互补的RNAD．在体外经反转录合成的与RNA互补的RNA

E．在体外经反转录合成的与DNA互补的RNA

23．基因组代表一个细胞或生物体的：

A．部分遗传信息B．整套遗传信息

C．可转录基因D．非转录基因

E．可表达基因

24．在基因工程中通常所用的质粒存在于：

A．细菌染色体B．酵母染色体

C．细菌染色体外D．酵母染色体外

E．病毒DNA外

25．就分子结构而论质粒是：

A．环状双链DNA分子B．环状单链DNA分子

C．环状双链RNA分子D．线状双链DNA分子

E．线状单链DNA分子

26．聚合酶链式反应可表示为：

A．PECB．PER

C．PDRD．BCR

E．PCR

27．在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是：

A．化学合成法B．基因组文库法

C．cDNA文库法D．PCR

E．差异显示法

28．重组DNA的基本构建过程是将：

A．任意两段DNA接在一起B．外源DNA接入人体DNA

C．外源基因插入宿主基因D．目的基因接入适当载体

E．目的基因接入哺乳类DNA

29．EcoRⅠ切割DNA双链产生：

A．平端B．5′突出粘端

C．3′突出粘端D．钝性末端

E．配伍末端

30．催化PCR的酶是：

A．DNA连接酶B．反转录酶

C．末端转移酶D．碱性磷酸酶

E．TaqDNA聚合酶

31．将PstⅠ内切酶切割后的目的基因与用相同内切酶切割后的载体DNA连接属：

A．同聚物加尾连接B．人工接头连接

C．平端连接D．粘性末端连接

E．非粘性末端连接

32．重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是：

A．DNA聚合酶B．RNA聚合酶

C．DNA连接酶D．RNA连接酶

E．限制性核酸内切酶

33．以质粒为载体，将外源基因导入受体菌的过程称：

A．转化B．转染

C．感染D．转导

E．转位

34．最常用的筛选转化细菌是否含重组质粒的方法是：

A．营养互补筛选B．抗药性筛选

C．免疫化学筛选D．PCR筛选

E．分子杂交筛选

35．α互补筛选法属于：

A．抗药性标志筛选B．酶联免疫筛选

C．标志补救筛选D．原位杂交筛选

E．免疫化学筛选

36．下列常用于原核表达体系的是：

A．酵母细胞B．昆虫细胞

C．哺乳类细胞D．真菌

E．大肠杆菌

37．在对目的基因和载体DNA进行同聚物加尾时，需采用：

A．反转录酶B．多聚核苷酸激酶

C．引物酶D．RNA聚合酶

E．末端转移酶

38．在分子生物学领域分子克隆专指：

A．细胞克隆B．RNA克隆

C．DNA克隆D．抗体克隆

E．mRNA克隆

39．用于重组DNA的限制性核酸内切酶，识别核苷酸序列的：

A．正超螺旋结构B．负超螺旋结构

C．α螺旋结构D．回文结构

E．锌指结构

40．在基因工程中通常所用的质粒是：

A．细菌染色体DNAB．细菌染色体以外的DNA

C．病毒染色体DNAD．病毒染色体以外DNA

E．噬菌体DNA

41．构建基因组DNA文库时，首先需要分离细胞的：

A．染色体DNAB．线粒体DNA

C．总mRNAD．tRNA

E．rRNA

42．DNA连接酶是从T4噬菌体感染大肠杆菌中分离的，这种连接酶：

A．只能催化平末端连接，而不能催化粘性末端连接

B．即能催化单链DNA连接又能催化粘性末端双链DNA连接

C．双链DNA中不需一条完整的单链

D．单链中的切口位点可缺少几个核苷酸

E．切口存在相邻的5′-磷酸和3′-羟基末端，使其以磷酸二酯键连接

43．末端转移酶是合成酶类：

A．作用时不需模板B．是从小牛胸腺中分离

C．能催化单链核苷酸转移到5′-磷酸上D．需要带有5′-端磷酸的末端的ssDNA

E．需要有延伸5′-端磷酸的末端dsDNA

44．在基因工程中可用碱性磷酸酶：

A．防止DNA的自身环化B．同多核苷酸激酶一起进行DNA3′-羟基末端标记

C．制备突出的3′-末端D．特异切除DNA或RNA的3′-末端羟基

E．水解特异的核苷酸片段

45．以下哪种酶作用时需要引物：

A．限制性核酸内切酶B．末端转移酶

C．反转录酶D．DNA连接酶

E．碱性磷酸酶

46．S1核酸酶的功能是：

A．切割双链的DNAB．切割单链的RNA

C．切割发夹环D．切割单链DNA

E．以上有两项是正确的

47．在cDNA技术中所形成的发夹环可用：

A．限制性核酸内切酶切除B．用3′外切酶切除

C．用S1核酸酶切除D．用5′外切酶切除

E．碱性磷酸酶切除

48．下面有关限制性内切酶的叙述正确的是：

A．限制酶是外切酶而不是内切酶

B．限制酶在特异序列（识别位点）对DNA进行切割

C．同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的

D．一些限制酶在识别位点稍有不同的点切割双链DNA，产生粘性末端

E．一些限制酶在识别位点相同的位置切割双链DNA，产生平末端

49．限制性核酸内切酶可以特异识别：

A．双链DNA的特定碱基对B．双链DNA的特定碱基序列

C．特定的三联码D．双链RNA的特定碱基序列

E．双链RNA的特定碱基对

50．DNA聚合酶的主要用途：

A．利用它的3′→5′聚合活性，合成ds-DNA第二条链

B．对DNA的5′-端进行填补或末端标记

C．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ用于缺口平移，制作DNA标志探针

D．DNA聚合酶Ⅱ可用于DNA测序

E．TaqDNA聚合酶用于PCR

51．反转录酶：

A．是依赖于DNA的RNA聚合酶B．用于真核DNA反转录生成mRNA

C．用于RNA探针的制备D．用于RNA序列测定

E．是依赖于RNA的DNA聚合酶

52．基因工程中作为载体应具备以下特点：

A．能在宿主细胞中复制繁殖B．容易进入宿主细胞

C．具有多克隆位点D．容易从宿主细胞中分离出来

E．以上均是

53．下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大：

A．质粒B．粘粒

C．酵母人工染色体D．λ噬菌体

E．cDNA表达载体

54．pUC是一种改造型质粒，含有：

A．乳糖操纵子调节基因、启动子B．多克隆位点

C．lacZ′基因D．氨苄青霉素抗性基因

E．以上均有

55．质粒具有以下特点：

A．是位于细菌染色体外的RNAB．不能自主复制

C．为单链环形DNAD．大小在2～300kb之间

E．以上都不对

56．粘粒是一种人工建造的载体不具有以下特点：

A．可借cos位点将多个粘粒串联成大环B．本身约4～6kb之间

C．进入受体细胞后可进行复制D．可克隆DNA大片段

E．以上都不是

57．下面关于多克隆位点的描述不正确的是：

A．仅位于质粒载体中B．具有多种限制性内切酶识别的位点

C．不同酶的识别序列可以重叠D．一般是人工合成后添加到载体中

E．可位于不同载体中

58．下列筛选重组体的方法中不属于遗传学方法的是：

A．限制性内切酶图谱法B．PCR

C．Northern印迹法D．Southern印迹法

E．抗药性标记基因

59．利用基因工程可以进行：

A．建立染色体基因文库B．分析基因的结构与功能

C．疾病的发生、发展及治疗的分子机制D．疾病的诊断和基因治疗

E．以上均可以

60．Southern印迹的DNA探针杂交：

A．只与序列完全相同的RNA片段B．可与任何含有相同序列的DNA片段

C．可与任何含有互补序列的DNA片段D．可与用某些限制性核酸内切酶切成的DNA片段

E．只与含有互补序列的RNA片段

61．下列哪个不是Southern印迹法的步骤：

A．用限制性核酸内切酶消化DNAB．DNA与载体连接

C．用凝胶电泳分离DNA片段D．DNA片段转移至硝酸纤维素膜上

E．用一个标记的探针与膜杂交

62．下列哪个不是Northern印迹法的步骤：

A．从细胞和组织中提取RNAB．用凝胶电泳分离RNA

C．将RNA转移到支持物上D．与核酸探针进行杂交

E．将RNA反转录合成DNA

63．原位杂交具有以下特点：

A．不需从组织或细胞中提取核酸B．对靶序列有很高的灵敏度

C．可完整保护组织与细胞的形态D．准确反映出组织细胞的相互关系及功能状态

E．以上均是

64．下列哪项不是探针的特点：

A．要加以标记B．应是双链DNA

C．只与靶核酸序列杂交D．探针长度可以是十几个碱基到几千个碱基不等

E．高灵敏度

65．探针的种类包括：

A．基因组DNA探针B．cDNA探针

C．寡核苷酸探针D．RNA探针

E．以上均是

66．下面哪一步不是获得基因组DNA探针的步骤：

A．从基因组文库筛选得到特定基因B．克隆、扩增

C．纯化D．连入表达载体

E．切取插入片段

67．RNA探针具有以下特点，但除外：

A.采用反转录方法可以得到B．单链、杂交效率高

C．杂交体系稳定D．不存在高度重复序列

E．特异性高

68．下面哪一步不是cDNA探针的步骤：

A．从相应组织细胞直接中分离特异的cDNAB．从相应组织细胞中分离特异的mRNA

C．反转录合成cDNAD．与载体连接

E．切割cDNA，分离纯化

69．常用的标记物有，但除外：

A．放射性核素B．生物素

C．荧光素D．地高辛

E．NTP

70．用于标记核酸探针的放射性核素主要有，但除外：

A．32PB．35S

C．3HD．125I

E．14C

71．放射性核素标记物具有，但除外：

A．检测时间短B．灵敏度和特异性高

C．可检出样品少于1000个分子的核酸量D．半衰期短，稳定性差

E．污染环境

72．非放射性核素标记物包括，但除外：

A．生物素B．地高辛

C．荧光素D．酶

E．核酸

73．非放射性核素标记物具有，但除外：

A．灵敏度高于放射性核素B．稳定

C．经济D．实验周期短

E．安全、无污染

74．PCR反应体系包括，但除外：

A．基因组DNA（模板）B．引物

C．dNTPD．TaqDNA聚合酶

E．T4DNA连接酶

75．PCR技术主要应用于：

A．目的基因的克隆B．基因表达与调控

C．DNA微量分析D．遗传病与传染性疾病的诊断

E．以上均可以

76．以DNA为模板的PCR反应，具备以下条件：

A．反应体系一般选用50-100μlB．引物、TaqDNA聚合酶

C．4种dNTP、模板DNAD．缓冲液

E．以上均是

77．以mRNA为模板的PCR反应，具备以下条件：

A．需将mRNA反转录生成cDNAB．反应体系一般选用20μl体积、4种dNTP、引物

C．需要RNA酶抑制剂、反转录酶D．TaqDNA聚合酶

E．以上均是

78．关于PCR停滞的原因，取决于很多因素，但除外：

A．样品模板的拷贝数B．PCR扩增效率

C．DNA酶种类及活性D．dNTP的大量消耗

E．非特异性的竞争因素

79．用于核酸分子杂交的探针可以是放射性核素标记的：

A．核糖体B．RNA

C．抗体D．抗原

E．以上都不是

80．Southern印迹是用DNA探针检测DNA片段，而Northern印迹则是：

A．用RNA探针检测DNA片段B．用RNA探针检测RNA片段

C．用DNA探针检测RNA片段D．用RNA探针检测蛋白片段

E．用DNA探针检测蛋白片段

81．用免疫化学筛选重组体的原理是：

A．根据外源基因的表达B．根据载体基因的表达

C．根据mRNA与DNA的杂交D．根据DNA与DNA的杂交

E．根据RNA与RNA的杂交

82．原位杂交包括：

A．转膜杂交B．斑点杂交

C．菌落杂交或噬菌斑杂交D．直接对染色体或组织的杂交

E．以上均有

83．外源性DNA进入菌体的方式是：

A．转化B．转录

C．翻译D．半保留复制

E．以上都不是

84．要将无粘性末端的两种平端DNA片段结合在一起，可在：

A．两种片段上都接上聚（dT）尾部B．一种片段接聚（dT）尾部，另一种接聚（dA）尾部

C．两种片段都接上聚（dA）尾部D．反应液中加以T4DNA连接酶

E．有两项是对的

85．用原核生物表达真核生物的基因存在的问题是：

A．大肠细菌只能表达克隆的cDNAB．细菌不能切除原始转录物中相当于内含子的核苷酸序列

C．缺乏翻译后加工机制D．表达的蛋白质常形成不溶性包涵体

E．以上都正确

86．常用载体有：

A．质粒B．噬菌体

C．病毒DNAD．大肠杆菌基因组DNA

E．有3项是正确的

87．构建cDNA文库时，首先需分离细胞的：

A．染色体DNAB．线粒体DNA

C．总mRNAD．tRNA

E．rRNA

88．构建DNA文库时，首先需分离细胞的：

A．染色体DNAB．线粒体DNA

C．总mRNAD．tRNA

E．rRNA

89．设计PCR的引物时，应考虑引物与模板的：

A．5ˊ端特定序列互补B．5ˊ端任意序列互补

C．3ˊ端特定序列互补D．3ˊ端任意序列互补

E．中间序列互补

90．用于鉴定转化子细胞是否含重组DNA的最常用方法是：

A．抗药性选择B．分子杂交选择

C．RNA反转录D．免疫学方法

E．体外翻译

91．下列哪一步是DNA芯片技术的最关键的环节：

A．样品的准备与标记B．芯片的制备

C．信号的检测D．数据分析处理

E．杂交

92．基因诊断常用的技术方法有：

A．核酸分子杂交B．单链构象多态性分析

C．DNA序列测定D．DNA芯片技术

E．以上均是

B型题：

A．基因从原来位置转到基因组的另一位置B．噬菌体或病毒DNA进入细胞中繁殖

C．外来DNA引起细胞生物学特性的改变D．移码突变E．非移码突变

1．感染是指：

2．转化是指：

3．转位是指：

4．结构基因中3个核苷酸的插入或丢失是指：

5．结构基因中1个核苷酸的插入或丢失是指：

A．抗药性选择B．分子杂交选择C．RNA转录D．免疫学方法E．体外翻译

6．用于鉴定是否有质粒转入受体菌的一般方法是：

7．用于鉴定转化子细胞是否含目的基因的常用方法：

8．利用目的基因表达产物的特异抗体来筛选含目的基因的转化子细胞的方法是：

A．限制性核酸内切酶B．DNA连接酶C．反转录酶D．TaqDNA聚合酶E．碱性磷酸酶

9．识别DNA回文结构并对其双链进行切割的是：

10．用于聚合酶链式反应的是：

11．将目的基因与载体DNA进行连接的酶是：

12．特异切除DNA或RNA5ˊ端磷酸的酶是：

13．mRNA转录合成cDNA的酶是：

A．支原体B．衣原体C．噬菌体D．细菌E．酵母

14．常用作原核表达体系的是：

15．常用作真核表达体系的是：

A．基因组文库B．cDNA文库C．mRNA文库D．tRNA文库E．rRNA文库

16．分离细胞染色体可制备：

17．分离细胞总mRNA可制备：

A．抗药性选择B．RNA反转录C．免疫化学方法D．体外翻译E．PCR

18．对重组体内基因进行直接选择的方法是：

19．通过鉴定基因表达产物筛选重组体的方法是：

A．RNA聚合酶B．末端转移酶C．碱性磷酸酶D．反转录酶E．核苷酸酶

20．切除DNA末端磷酸基需要用：

21．在DNA3′羟基末端进行同聚物加尾需要用：

22．合成cDNA需要用：

A．同聚物加尾连接B．人工接头C．粘性末端连接D．缺口末端连接E．平端连接

23．外源基因和载体DNA经限制性酶切后的连接属于：

24．在外源基因和载体DNA末端添加同聚物序列后再进行连接属于：

25．在外源基因和载体DNA末端添加短核苷酸序列，人为制造粘性末端再进行连接属于：

26．需用适当的酶将DNA突出末端削平或补齐的连接属于：

A．将单链DNA任意切断B．将双链DNA序列特异切开C．将两个DNA分子连接起来

D．将缺口末端连接E．切除DNA末端磷酸基团

27．限制性内切酶的作用是：

28．DNA连接酶作用是：

29．碱性磷酸酶作用是：

A．某些蛋白质的结构基因B．所有基因结构C．不表达的调控区

D．内含子和调节区E．外显子和调节区

30．cDNA文库包括：

31．DNA文库包括：

32．真核mRNA包括：

A．DNA聚合酶B．RNA聚合酶C．DNA连接酶

D．RNA连接酶E．限制性核酸内切酶

33．切除特异DNA片段：

34．连接两个DNA片段：

35．大量扩增DNA片段：

A．反转录酶B．多聚核苷酸激酶C．引物酶D．RNA聚合酶E．末端转移酶

36．催化ATP的磷酸转移到DNA或RNA的5ˊ端羟基上：

37．催化单核苷酸转移到DNA的3ˊ端羟基上：

38．合成cDNA：

C型题：

A．将含有目的基因的噬菌体感染细菌B．将含有目的基因的质粒导入细菌进行表达

C．两者都是D．两者都不是

1．转化：

2．感染：

A．cDNA文库B．基因组文库C．两者都是D．两者都不是

3．含内含子：

4．含结构基因：

A．将含有目的基因的噬菌体感染细菌B．将含有目的基因的质粒导入细菌进行表达

C．两者都是D．两者都不是

5．转化：

6．转位：

A．cDNA文库B．基因组文库C．两者都是D．两者都不是

7．含转录调控区：

8．较易表达：

A．cDNA文库B．基因组文库C．两者都是D．两者都不是

9．制备目的基因可在真核生物体系中表达：

10．几乎含有人的全部基因：

A．cDNA文库B．基因组文库C．两者都是D．两者都不是

11．具有组织特异性：

12．可在原核生物体系中表达：

A．光介导原位合成B．压电打印合成C．两者都是D．两者都不是

13．原位合成芯片：

14．DNA微集阵列：