《基础分子生物学》复习题及参考答案.docx

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《基础分子生物学》复习题及参考答案

《基础分子生物学》复习题及参考答案

一、填空题

1.核酸分子中糖环与碱基之间为β型的糖苷键，核苷与核苷之间通过磷酸二酯键连接成多聚体。

2.DNA变性后，紫外吸收增加，粘度下降，浮力密度升高，生物活性丧失。

3.DNA双螺旋直径为2nm，每隔3.4nm上升一圈，相当于10个碱基对。

4.Z-DNA为左手螺旋。

5.hn-RNA是真核生物mRNA的前体。

6.用Sanger的链末端终止法测定DNA一级结构时，链终止剂是双脱氧核苷三磷酸。

7.维系DNA双螺旋结构稳定的力主要有氢键和碱基堆积力。

8.在碱性条件下，核糖核酸比脱氧核糖核酸更容易降解，其原因是因为核糖核酸的每个核苷酸上-OH的缘故。

9.DNA复制时，连续合成的链称为前导链；不连续合成的链称为随从链。

10.DNA合成的原料是四种脱氧核糖核苷三磷酸；复制中所需要的引物是RNA。

11.DNA合成时，先由引物酶合成RNA引物，再由DNA聚合酶Ⅲ在其3′端合成DNA链，然后由DNA聚合酶Ⅰ切除引物并填补空隙，最后由DNA连接酶连接成完整的链。

12.细菌的DNA连接酶以NAD为能量来源，动物细胞和T4噬菌体的DNA连接酶以ATP为能源。

13.大肠杆菌RNA聚合酶的全酶由α2ββ′σ组成，其核心酶的组成为α2ββ′。

14.RNA转录过程中识别转录启动子的是σ因子，协助识别转录终止部位的是ρ因子。

15.真核细胞mRNA合成后的成熟过程包括戴帽、加尾、剪接、甲基化修饰。

16.遗传信息由RNA传递到DNA的过程称为逆转录，由逆转录酶催化。

17.反密码子第1位碱基和密码子第3碱基的配对允许有一定的摆动，称为变偶性。

18.在原核细胞翻译起始时，小亚基16SrRNA的3′端与mRNA5′端的SD序列之间互补配对，确定读码框架，fMet-tRNAf占据核糖体的P位点位置。

19.细胞内多肽链合成的方向是从N端到C端，而阅读mRNA的方向是从5′端到3′端。

20.在形成氨酰-tRNA时，由氨基酸的羧基与tRNA3′末端的羟基形成酯键。

为保证蛋白质合成的正确性，氨酰tRNA合成酶除了对特定氨基酸有很强的专一性之外，还能将“错误”氨基酸从氨酰化-tRNA复合物上水解下来。

21.转肽酶催化生成的化学键是肽键，该酶还具有酯酶活性。

22.肽链延伸包括：

进位、成肽、和移位。

23.翻译延长阶段的进位，是指氨酰-tRNA进入A位。

翻译延长阶段的转位是指mRNA与核糖体做相对运动。

24.体内大多数蛋白质形成正确的构象需要分子伴侣的帮助，某些蛋白质的折叠还需要二硫键互换酶和脯氨酰肽酰异构酶的催化。

25.正调控和负调控是基因表达的两种最基本的调节形式，其中原核细胞常用负调控模式，而真核细胞常用正调控模式。

26.在原核细胞中，由同一调控区控制的一群功能相关的结构基因组成一个基因表达调控单位，称为启动子，其调控区包括启动基因和操纵基因。

27.有些基因的表达较少受环境的影响，在一个生物体的几乎所有细胞中持续表达，因此被称为管家基因；另有一些基因表达极易受环境的影响，在特定环境信号刺激下，相应的基因被激活，基因表达产物增加，这种基因是可诱导的基因，相反，如果基因对环境信号应答时被抑制，这种基因是可阻遏的基因。

28.在基因重组技术中，切割DNA用限制性核酸内切酶，连接DNA用DNA连接酶。

29.除噬菌体外，质粒和病毒也是分子克隆的常用载体。

30.用动物病毒DNA改造的基因载体有腺病毒载体和反转录病载体。

用于植物基因工程的常用载体是Ti质粒。

31.将重组质粒导入细菌称转化，将噬菌体DNA转入细菌称转导。

32.Southern印迹法、Northern印迹法和Western印迹法是分别用于研究DNA、RNA和蛋白质转移和鉴定的几种常规技术。

二、选择题

1.有关核酸的杂交（A,C,D）

A.DNA变性的方法常用加热和碱变性

B.相同来源的核酸才能通过变性而杂交

C.不同来源的核酸复性时，若全部或部分碱基互补就可以杂交

D.杂交可以发生在DNA与DNA之间，RNA与DNA，RNA与RNA之间

E.把待测DNA标记成探针进行杂交

2.DNA的复性速度与以下哪些有关（E）

A.温度B.分子内的重复序列C.pHD.变性DNA的起始浓度E.以上全部

3.某DNA分子中腺嘌呤的含量为15%，则胞嘧啶的含量应为（D）

A．15%B．30%C．40%D．35%E．70%

4.DNA变性是指（D）

A．分子中磷酸二酯键断裂B．多核苷酸链解聚

C．DNA分子由超螺旋→双螺旋D．互补碱基之间氢键断裂

E．DNA分子中碱基丢失

5.寡聚dT-纤维素柱层析用于（D）

A.从总DNA中分离纯化质粒DNAB.从总核蛋白中分离DNP

C.除去杂蛋白D.从总RNA中纯化mRNA

6.关于双螺旋结构学说的叙述哪一项是错误的（C）

A.由两条反向平行的脱氧多核苷酸链组成

B.碱基在螺旋两侧，磷酸与脱氧核糖在外围

C.两条链间的碱基配对非常严格，A与T间形成三个氢键，G与C间形成两个氢键

D.碱基对平面垂直于中心轴，碱基对之间的作用力为范德华力

E.螺旋每转一圈包含10个碱基对

7.下列关于双链DNA碱基含量关系，哪一个是错误的（B）

A．A=T，G=CB．A+T=G+CC．A+G=C+TD．A+C=G+T

8.下列是几种DNA分子的碱基组成比例。

哪一种的Tm值最高（A）

A．A+T=15%B．G+C=25%C．G+C=40%D．A+T=80%

9．DNA复制时，下列哪一种酶是不需要的（E）

A．DNA指导的DNA聚合酶B．DNA连接酶C．拓朴异构酶D．解链酶

E．限制性内切酶

10.DNA复制中的引物是（C）

A．由DNA为模板合成的DNA片段B．由RNA为模板合成的RNA片段

C．由DNA为模板合成的RNA片段D．由RNA为模板合成的RNA片段

E．引物仍存在于复制完成的DNA链中

11.DNA复制时，子链的合成是（C）

A.一条链5′→3′，另一条链3′→5′B．两条链均为3′→5′

C．两条链均为5′→3′D．两条链均为连续合成E．两条链均为不连续合成

12.在E.coli细胞中DNA聚合酶Ⅰ的作用主要是（C）

A.DNA复制B.E.coliDNA合成的起始C.切除RNA引物D.冈崎片段的连接

13.需要DNA连接酶参与的过程有（A）

A．DNA复制B．DNA体外重组C．DNA损伤的切除修复D．RNA逆转录

14.DNA损伤的光修复作用是一种高度专一的修复方式，它只作用于紫外线引起的（A）

A.嘧啶二聚体　B.嘌呤二聚体　C.嘧啶-嘌呤二聚体　D.为两个单独的嘧啶碱基

15.真核细胞RNA聚合酶Ⅱ催化合成的是（B）

A．18SRNAB．mRNAC．tRNAD．5SRNAE．rRNA

16.转录指下列哪一过程（B）

A.以RNA为模板合成DNAB.以DNA为模板合成RNA

C.以RNA为模板合成蛋白质D.以DNA为模板合成DNA

17.hnRNA是（B）

A.存在于细胞核内的tRNA前体B.存在于细胞核内的mRNA前体

C.存在于细胞核内的rRNA前体D.存在于细胞核内的snRNA前体

18.基因有两条链,与mRNA序列相同（T代替U）的链叫做（A）

A.有义链　B.反义链　C.重链　D.cDNA链

19.下列关于逆转录酶的叙述哪一个是错误的（D）

A.它以RNA为模板指导DNA的合成B.它也可以DNA为模板指导DNA的合成

C.它具有RNaseH活性D.逆转录酶的作用不需要引物

20.多肽链的氨基酸序列取决于（D）

A．tRNAB.18SrRNAC.28SrRNAD．mRNAE.氨基酰-mRNA合成酶

21.密码GGC的对应反密码子是（A）

A．GCCB.CCGC.CCCD.CGCE.GGC

22.关于密码子，错误的叙述是（C）

A．每一密码子代表一种氨基酸B.某些密码子不代表氨基酸

C．一种氨基酸只有一种密码子D.甲硫氨酸只有一种密码子

E.密码子有种族特异性

23.一个N端为丙氨酸的20肽，其开放的阅读框架至少应该由多少个核苷酸残基组成？

（C）

A．60个B.63个C.66个D.57个E.69个

24.氨基酰-tRNA中，tRNA与氨基酸的结合键是（E）

A．盐键B.磷酸二酯键C.肽键D.糖苷键E.酯键

25.原核生物和真核生物翻译起始不同之处（B）

A．真核生物的Shine-Dalgarno序列使mRNA与核糖体结合

B．真核生物帽子结合蛋白是翻译起始因子之一

C．IF比eIF种类多

D．原核生物和真核生物使用不同起始密码

E．原核生物有TATAAT作为翻译起始序列，真核生物则是TATA

26.关于核蛋白体转肽酶，错误的叙述是（C）

A．转肽不需要GTPB.转肽不需要ATPC．活性中心在小亚基

D.活性中心在大亚基E．活性中心与rRNA有关

27.一个氨基酸参入多肽链，需要（B）

A．两个ATP分子B．一个ATP分子，两个GTP分子

C．一个ATP分子，一个GTP分子D．两个ATP分子，一个GTP分子

E．两个GTP分子

28.信号肽段的作用是（C）

A．指导DNA合成的启动B．指导多肽链糖基化C．引导多肽进入内质网D．指导RNA合成的启动E．指导蛋白质合成的启动

29.多肽链合成后，其Ser可（B）

A．乙酰化B．糖基化C．磷酸化D．甲基化E．硫酸化

30.蛋白质合成后加工不包括（D）

A．蛋白质的磷酸化B．信号肽的切除C．蛋白质的糖基化

D．酶的构像变化E．蛋白质的乙酰化

31.以下哪一种抑制剂只能抑制真核生物的蛋白质合成（C）

A．氯霉素B.红霉素C．放线菌酮D．嘌呤霉素E．四环素

32．一个操纵子通常含有（B）

A.一个启动序列和一个编码基因B.一个启动序列和数个编码基因

C.数个启动序列和一个编码基因D.数个启动序列和数个编码基因

E两个启动序列和数个编码基因

33．有关操纵子学说的论述，正确的是（B）

A.操纵子调控系统是真核生物基因调控的主要方式

B.操纵子调控系统是原核生物基因调控的主要方式

C.操纵子调控系统由调节基因、操纵基因、启动子和结构基因组成

D.诱导物与阻遏蛋白结合启动转录

E.诱导物与启动子结合而启动转录

34．转录因子是（C）

A.调节DNA结合活性的小分子代谢效应物B.调节转录延伸速度的蛋白质

C.调节转录起始速度的蛋白质D.调节转录产物分解速度的蛋白质

E.促进转录产物加工的蛋白质

35．阻遏蛋白（阻抑蛋白）识别操纵子中的（C）

A.启动基因B.结构基因C.操纵基因D.内含子E.调节基因

36.在下列哪种情况下，乳糖操纵子的转录活性最高（A）

A.高乳糖，低葡萄糖B.高乳糖，高葡萄糖C.低乳糖，低葡萄糖

D.低乳糖，高葡萄糖E.不一定

37.顺式作用元件是指（E）

A.基因的5ˊ侧翼序列B.基因的3ˊ侧翼序列C.基因的5ˊ和3ˊ侧翼序列

D.基因的5ˊ和3ˊ侧翼序列以外的序列E.具有转录调节功能的特异DNA序列

38.反式作用因子是指（E）

A.具有激活功能的调节蛋白B.具有抑制功能的调节蛋白

C.对自身基因具有激活功能的调节蛋白D.对另一基因具有激活功能的调节蛋白

E.对另一基因有调节功能的蛋白质因子

39.下列关于限制性内切酶的叙述哪一项是错误的（C）

A.它能识别DNA特定的碱基顺序，并在特定的位点切断DNA

B.切割点附近的碱基顺序一般呈回文结构

C.它能专一性降解经甲基化修饰的DNA

D.是重组DNA的重要工具酶

E.主要从细菌中获得

40.基因工程中，不常用到的酶是（C）

A.限制性核酸内切酶B.DNA聚合酶C.DNA解链酶D.DNA连接酶E.反转录酶

41下列哪项不能作为表达载体导入真核细胞的方法？

（D）

A.磷酸钙转染B.电穿孔C.脂质体转染D.氯化钙转染E.显微注射

42.重组体的筛选方法有（A）

A.抗药标志筛选B.标记补救C.分子杂交D.免疫化学E.酶联免疫检测

43.cDNA是指（D）

A.在体内合成的与病毒DNA或RNA互补的DNA

B.在体外经反转录合成的与DNA互补的DNA

C.在体外经转录合成的与DNA互补的RNA

D.在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA

E.在体内经转录合成的与DNA互补的RNA

44．建cDNA文库时，首先需分离细胞的（C）

A.染色体DNAB.线粒体DNAC.总mRNAD.tRNAE.rRNA

三、

三、判断题

（√）1.生物体内，天然存在的DNA分子多为负超螺旋。

（√）2.RNA分子可以发生热变性，并有增色效应。

（×）3.水分子可以插入天然DNA分子双螺旋空隙中。

（×）4.从结构基因中的DNA序列可以推出相应的蛋白质序列。

（√）5.提高盐浓度可使DNA分子的熔点（Tm）升高。

（√）6.RNA的局部螺旋区中，两条链之间的方向也是反向平行的。

（×）7.在E.coli细胞和真核细胞中都是由DNA聚合酶Ⅰ切除RNA引物。

（×）8.逆转录酶催化RNA指导的DNA合成不需要RNA引物。

（×）9.RNA病毒不含DNA基因组，根据中心法则它必须先进行反转录，才能复制和增殖。

（×）10.原核细胞和真核细胞的RNA聚合酶都能够直接识别启动子。

（×）11.大肠杆菌染色体DNA由两条链组成，其中一条链充当模板链，另外一条链充当编码链。

（×）12．由于遗传密码的通用性，用原核生物表达真核基因不存在技术障碍。

表达出的蛋白质通常是有功能的。

（×）13.氨酰-tRNA合成酶可以通过合成反应的逆反应切除误载的氨基酸。

（×）14.所有氨酰-tRNA合成酶的作用都是把氨基酸连接在tRNA末端核糖的3ˊ-羟基上。

（×）15.在核糖体上形成肽链所需的能量，由水解GTP来提供。

（×）16.生物合成蛋白质时，A位的氨基酸转移到P位，使P位的肽链延长，A位空载的-tRNA随后便脱落。

（×）17.蛋白质能够折叠成何种三维结构，主要是由分子伴侣决定的。

（√）18.高等真核生物的大部分DNA是不为蛋白质编码的。

（√）19.大多数管家基因编码低丰度的mRNA.

（×）20.乳糖可以诱导乳糖操纵子的表达，所以乳糖对乳糖操纵子的调控属于正调控系统。

（√）21.某些蛋白质既可以作为阻遏蛋白又可以作为激活蛋白参与基因表达的调控。

（√）22.准备用原核生物表达真核基因时，最好通过cDNA获取目的基因。

（√）23.用原核生物表达真核生物的糖蛋白，其表达产物不会有正常的生物学功能。

（×）24.Ti质粒可以随土壤农杆菌进入植物细胞。

（×）25.用λ噬菌体作克隆载体时，外源DNA片断越小，克隆的成功率越高。

（√）26.基因克隆选择的宿主细胞必须无限制性核酸内切酶。

（×）27.采用蓝白斑选择法时，蓝色菌落或噬菌斑是含有重组载体的克隆。

（√）28．若1个氨基酸有3个遗传密码，则这3个遗传密码的前两个核苷酸通常是相同的。

四、名词解释（每题2分，共20分）

1.增色效应（hyperchromiceffect）；

核酸从双链变为单链的无规则卷曲状态时，在260nm处的吸光度增加，称“增色效应”。

2.分子杂交（molecularhybridization）；

不同的DNA片段之间，DNA片段与RNA片段之间，如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性，形成新的双螺旋结构。

这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交。

3.聚合酶链式反应（PCR）；

聚合酶链式反应（PCR）是扩增样品中的DNA量和富集众多DNA分子中的一个特定的DNA序列的一种技术。

在该反应中，使用与目的DNA序列互补的寡核苷酸作为引物，进行多轮的DNA合成。

其中包括DNA变性，引物退火和在TapDNA聚合酶催化下的DNA合成。

4.DNA的变性与复性（denaturationandrenaturationofDNA）；

DNA的变性是指DNA双螺旋区的氢键断裂，变成单链并不涉及共价键的断裂。

DNA的复性是指变性DNA在适当条件下，又可使两条彼此分开的链重新缔合成为双螺旋结构。

5.Tm；

通常把加热变性DNA使增色效应达到最大增量一半时的的温度称为该DNA的熔点或熔解温度，用Tm表示。

6.内含子与外显子

内含子是指结构基因中存在于外显子之间的非编码序列，也是基因中不表达的序列，属插入序列。

外显子是指基因中编码蛋白质的序列。

7.半保留复制；

DNA复制的一种方式。

每条链都可用作合成互补链的模板，合成出两分子的双链DNA，每个分子都是由一条亲代链和一条新合成的链组成。

8.冈崎片段；

相对比较短的DNA链（大约1000核苷酸残基），是在DNA的滞后链的不连续合成期间生成的片段，这是ReijiOkazaki在DNA合成实验中添加放射性的脱氧核苷酸前体观察到的。

9.复制体；

一种多蛋白复合体，包含DNA聚合酶，引发酶，解旋酶，单链结合蛋白和其它辅助因子。

复制体位于每个复制叉处，进行染色体DNA复制的聚合反应。

10.编码链；

双链DNA中，不能进行转录的那一条DNA链，其核苷酸序列与转录生成的RNA的序列一致（在RNA中是以U取代了DNA中的T）。

11.内含子；

在转录后的加工中，从最初的转录产物除去的内部的核苷酸序列。

术语内含子也指DNA中编码相应RNA的区域。

12.外显子（exon）

既存在于最初的转录产物中，也存在于成熟的RNA分子中的核苷酸序列。

术语外显子也指DNA中编码相应RNA的区域。

13.遗传密码；

DNA编码链或mRNA上的核苷酸，以3个为一组（三联体）决定1个氨基酸的种类，称为三联体密码。

mRNA的三联体密码是连续排列的，因此，mRNA的核苷酸序列可以决定蛋白质的一级结构。

14.摆动假说；

mRNA上的密码子与tRNA上的反密码子相互辩认，大多数情况是遵从碱基配对规律的。

但也可出现不严格的配对，这种现象就是遗传密码的摆动性，tRNA分子上有相当多的稀有碱基，例如次黄嘌呤（inosine,I）常出现于三联体反密码子的5′端第一位，它和mRNA密码子第3位的A、C、U都可以配对。

15.SD序列；

位于mRNA分子AUG起始密码子上游约8～13个核苷酸处，由4～6个核苷酸组成的富含嘌呤的序列，以-AG-GA-为核心。

SD序列同16SrRNA近3′-末端的序列互补，在核糖体与mRNA的结合过程中起重要作用。

16.信号肽；

是未成熟的分泌性蛋白质中可被细胞转运系统识别的特征性氨基酸序列。

有碱性N-末端区、疏水核心区及加工区三个区段。

蛋白质被转运到细胞的一定部位后，信号肽即被切除。

17.多聚核糖体

是由1个mRNA分子与一定数目的单个核糖体结合而成的串珠状排列。

每个核糖体可以独立完成一条肽链的合成，所以多个核糖体上可以同时进行多条肽链的合成，可以加速蛋白质的合成速度，提高模板mRNA的利用率。

18.操纵子；

原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起，转录生成一个mRNA，然后分别翻译成几种不同的蛋白质。

这些蛋白可能是催化某一代谢过程的酶，或共同完成某种功能。

这些结构基因与其上游的启动子，操纵基因共同构成转录单位，称操纵子。

19.启动子；

是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，包括至少一个转录起始点。

在真核基因中增强子和启动子常交错覆盖或连续。

有时，将结构密切联系而无法区分的启动子、增强子样结构统称启动子。

20.增强子；

是一种能够提高转录效率的顺式调控元件，最早是在SV40病毒中发现的长约200bp的一段DNA，可使旁侧的基因转录提高100倍，其后在多种真核生物，甚至在原核生物中都发现了增强子。

增强子通常占100～200bp长度，也和启动子一样由若干组件构成，基本核心组件常为8～12bp，可以单拷贝或多拷贝串连形式存在。

21.衰减子；

在原核生物的Trp操纵子结构中，第一个结构基因与启动子P之间有一个区域含Trp密码子，称衰减子。

当环境中Trp浓度很高时，它可通过编码并翻译，使正在转录的mRNA形成终止信号，从而终止Trp操纵子的表达。

这种转录衰减实质上是转录与一个前导肽翻译过程的偶联，它是原核生物特有的一种基因调控机制。

22.反式作用因子；

大多数真核转录调节因子由某一基因表达后，通过与特异的顺式作用元件相互作用（DNA-蛋白质相互作用），或通过与基它调节因子的相互作用（蛋白质-蛋白质相互作用），反式激活另一基因的转录，故称反式作用蛋白或反式作用因子。

23.顺式调控元件：

指可影响自身基因表达活性的真核DNA序列。

根据顺式作用元件在基因中的位置、转录激活作用的性质及发挥作用的方式，分为启动子、增强子及沉默子等。

24.降解物基因活化蛋白；

也就是cAMP受体蛋白（cAMPreceptorprotein,CRP），它与cAMP的复合物可以促进某些原核操纵子（如乳糖操纵子）的转录。

25.克隆技术；

“克隆”作为名词指相同的分子或细胞构成的群体，或一个共同的祖先通过无性繁殖所得到的群体，作为动词指获取“克隆”的过程。

克隆技术特指获取“克隆”的过程，包括分子克隆，细胞克隆等技术。

26.限制性核酸内切酶；

就是识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类核酸内切酶。

限制性核酸内切酶存在于细菌体内，与相伴存在的甲基化酶共同构成细菌的限制、修饰体系，限制外源DNA，保护自身DNA，对保持细菌遗传物质的稳定具有重要意义。

限制性核酸内切酶分为三类，其中的Ⅱ类酶能特异性在一定的核苷酸序列处切割双链DNA，因而在基因工程中得到广泛的应用。

27.基因组DNA文库；

利用限制性核酸内切酶将染色体DNA切割成一定大小的片段，将这些片段分子与适当的克隆载体拼接成重组DNA分子，继而转入受体菌，使每个细菌内都携带一种重组DNA分子。

不同细菌中的重组DNA分子可能包含不同的染色体DNA片段，这样，只要得到的转化细菌所携带的重组DNA分子种类足够多，则全部转化细菌所携带的各种染色体片段就代表了染色体的整个基因组。

存在于转化细菌内，由克隆载体所携带的所有基因组DNA片段的集合称基因组DNA文库。

基因组DNA文库涵盖了基因组的全部基因信息。

28.cDNA文库

以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。

基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达，而且处在不同环境条件、