实验室常用溶液及试剂配制.docx
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实验室常用溶液及试剂配制
实验室常用溶液及试剂配制
实验室常用溶液、试剂的配制
表一 普通酸碱溶液的配制
名称
（分子式）
比重
（d）
含量
（w/w%）
近似摩尔浓度
（mol/L）
欲配溶液的摩尔浓度（mol/L）
6
3
2
1
配制1L溶液所用的ml数（或g）
盐酸
（HcL）
1.18～1.19
36～38
12
500
250
167
83
硝酸
（HNO3）
1.39～1.40
65～68
15
381
191
128
64
硫 酸
（H2SO4）
1.83～1.84
95～98
18
84
42
28
14
冰醋酸
（Hac）
1.05
99.9
17
253
177
118
59
磷 酸
（H3PO4）
1.69
85
15
39
19
12
6
氨水（NH3·H2O）
0.90～0.91
28
15
400
200
134
77
氢氧化钠（NaOH）
（240）
（120）
（80）
（40）
氢氧化钾（KOH）
（339）
（170）
（113）
（56.5）
表二 常用酸碱指示剂
指示剂
PKHIn
变色范围pH
酸色
碱色
配制方法
百里酚蓝
（麝香草酚蓝）
1.65
12.～2.8
红
黄
0.1%的20%乙醇溶液
甲基橙
3.4
3.1～4.4
红
橙黄
0.05%水溶液
溴甲酚绿
4.9
3.8～5.4
黄
蓝
0.1%的20%乙醇溶液或0.1g指示剂溶于2.9ml0.05mol/LNaOH加水稀释至100ml
甲基红
5.0
4.4～6.2
红
黄
0.1%的60%乙醇溶液
溴百里酚蓝
（麝香草酚蓝）
7.3
6.2～7.3
黄
蓝
0.1%的20%乙醇溶液
中性红
7.4
6.8～8.0
红
黄橙
0.1%的60%乙醇溶液
百里酚蓝
（第二变色范围）
9.2
8.0～9.6
黄
蓝
0.1%的20%乙醇溶液
酚酞
9.4
8.0～10.0
无色
红
0.5%的90%乙醇溶液
百里酚酞
10.0
9.4～10.6
无色
蓝
0.1%的90%乙醇溶液
表三 混合酸碱指示剂
指示剂组成（体积比）
变色点pH
酸色
碱色
备注
一份0.1%甲基橙水溶液
一份0.25%靛蓝二磺酸钠水溶液
4.1
紫
绿
灯光下可滴定
一份0.02%甲基橙水溶液
一份0.1溴甲酚绿钠盐水溶液
4.3
橙
蓝绿
PH3.5黄色
PH4.05绿黄
PH4.3浅绿
三份0.1%溴甲酚绿20%乙醇溶液
一份0.2%甲基红60%乙醇溶液
5.1
酒红
绿
颜色变化极鲜明
一份0.2%甲基红乙醇溶液
一份0.1%次甲基蓝乙醇溶液
5.4
红紫
绿
PH5.2红紫
PH5.4暗蓝
PH5.6绿色
一份0.1%溴甲酚绿钠盐水溶液
一份0.1%绿酚红钠盐水溶液
6.1
黄绿
蓝紫
PH5.6蓝绿
PH5.8蓝色
PH6.0浅紫
PH6.2蓝紫
一份0.1%溴甲酚紫钠盐水溶液
一份0.1溴百里酚蓝钠盐水溶液
6.7
黄
紫蓝
PH6.2黄紫
PH6.6紫
PH6.8蓝紫
一份0.1中性红乙醇溶液
一份0.1次甲基蓝乙醇溶液
7.0
蓝紫
绿
PH7.0为蓝绿
必须保存在棕色瓶中
一份0.1甲酚红钠盐水溶液
三份0.1%百里酚蓝钠盐水溶液
8.3
黄
紫
PH8.2玫瑰色
PH8.4紫色
一份0.1%百里酚蓝50%乙醇溶液
三份0.1酚酞50%乙醇溶液
9.0
黄
紫
PH9.0绿色
表四 容量分析基准物质的干燥
基准物质
干燥温度和时间
基准物质
干燥温度和时间
碳酸钠（NaCO3）
500～650℃，40-50min
氯化物（NaCl）
500-650℃，干燥40-50min
草酸钠（H2C2O4）
150-200℃，1-1.5h
硝酸银（AgNO3）
室温，硫酸干燥器中至恒温
草酸（H2C2·2H2O）
室温，空气干燥2-4h
碳酸钙（CaCO3）
120℃，干燥至恒重
硼砂（Na2B2O·10H2O）
室温，在NaCl和蔗糖饱和液的干燥器中，4h
氧化锌（ZnO）
800℃灼烧至恒重
邻苯二甲酸氢钾（KHC6H4O4）
100-120℃，干燥至恒重
锌（Zn）
室温，干燥器24h以上
重铬酸钾（K2Cr2O7）
100-110℃，干燥3-4h
氧化镁（MgO）
800℃灼烧至恒重
表五 缓冲溶液的配制
1、 氯化钾-盐酸缓冲溶液
0.2mol/LKCl（ml）
50
50
50
50
50
50
50
0.2mol/LHCl（ml）
97.0
64.3
41.5
26.3
16.6
10.6
6.7
水（ml）
53.0
85.5
108.5
123.7
133.4
139.4
143.3
PH（20℃）
1.0
1.2
1.4
1.6
1.8
2.0
2.2
2、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液
0.2mol/LKHC6H4O4（ml）
50
50
50
50
50
0.2mol/LHCl（ml）
46.70
32.95
20.32
9.90
2.63
水（ml）
103.30
117.05
129.68
140.10
147.37
PH（20℃）
2.2
2.6
3.0
3.4
3.8
3、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液
0.2mol/LKHC6H4O4（ml）
50
50
50
50
50
0.2mol/LHCl（ml）
0.40
7.50
17.70
29.95
39.85
水（ml）
149.60
142.50
132.20
120.05
110.15
PH（20℃）
4.0
4.4
4.8
5.2
5.6
4、 乙酸-乙酸钠缓冲溶液
0.2mol/LHAc（ml）
185
164
126
80
42
19
0.2mol/LNaAc（ml）
15
36
74
120
158
181
PH（20℃）
3.6
4.0
4.4
4.8
5.2
5.6
5、 磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液
0.2mol/LKH2PO4（ml）
50
50
50
50
50
50
0.2mol/LNaOH（ml）
3.72
8.60
17.80
29.63
39.50
45.20
水（ml）
146.26
141.20
132.20
120.37
110.50
104.80
PH（20℃）
5.8
6.2
6.6
7.0
7.4
7.8
6、 硼砂-氢氧化钠缓冲溶液
0.2mol/L硼砂（ml）
90
80
70
60
50
40
0.2mol/LNaOH（ml）
10
20
30
40
50
60
PH（20℃）
9.35
9.48
9.66
9.94
11.04
12.32
7、 氨水-氯化铵缓冲溶液
0.2mol/LNH3·H2O（ml）
1
1
1
2
8
32
0.2mol/LNH4Cl（ml）
32
8
2
1
1
1
PH（20℃）
8.0
8.58
9.1
9.8
10.4
11.0
8、 常用缓冲溶液的配制
PH
配制方法
3.6
NaAc·3H2O8g，溶于适量水中，加6mol/LHAc134ml，稀释至500ml
4.0
NaAc·3H2O20g 溶于适量水中，加6mol/LHAc134ml，稀释至500ml
4.5
NaAc·3H2O32g 溶于适量水中，加6mol/LHAc 68ml，稀释至500ml
5.0
NaAc·3H2O50g 溶于适量水中，加6mol/LHAc 34ml，稀释至500ml
8.0
NH4Cl 50g 溶于适量水中，加15mol/LNH3·H2O 3.5ml，稀释至500ml
8.5
NH4Cl 40g 溶于适量水中，加15mol/LNH3·H2O 8.8ml，稀释至500ml
9.0
NH4Cl 35g 溶于适量水中，加15mol/LNH3·H2O 24ml，稀释至500ml
9.5
NH4Cl 30g 溶于适量水中，加15mol/LNH3·H2O 65ml，稀释至500ml
10
NH4Cl 27g 溶于适量水中，加15mol/LNH3·H2O 197ml，稀释至500ml
实验室常用试验方法2
九、柠檬酸（C6H8O7·H2O）
称取试样1.5g（精确到0.0002g）于三角瓶内，加入水50ml溶解，加酚酞指示剂3滴，用1mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色为终点，同时做空白试验。
计算：
X%（一水）=（V1-V0）×C×0.06404 m×（1-0.08566）×100
X%（无水）=（V1-V0）×C×0.06404 m×100
V1-----消耗氢氧化钠标准溶液的体积，ml；
V0-----空白所消耗氢氧化钠标准溶液的体积，ml；
C------氢氧化钠标准溶液浓度，mol/L；
m---样品质量。
十、钙含量测定（磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca（H2PO4）2·H2O、钙粉等）
称取2g（精确到0.0002g）样品，用10ml盐酸（1+1）溶解，转移至100ml容量瓶中定溶，用移液管吸取10ml于250ml锥形瓶中，加50ml水，5ml蔗糖溶液（25g/L），2ml三乙酸胺（1+1），1ml乙二胺（1+1），1滴孔雀绿指示液（1g/L），滴加氢氧化钾溶液（200g/L）至无色，再过量10ml，加0.1g盐酸羟胺（每加一种试剂都要摇匀），加钙黄绿素少许，在黑色背景下用0.05mol/L的EDTA标准溶液滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为滴定终点。
Ca%= C×V×0.4008 m×100
C------EDTA标准溶液的浓度，mol/L；
V-----消耗EDTA标准溶液的体积，ml；
m----样品质量。
（二）氟（Fˉ）含量的测定：
1、标准曲线的绘制；
2、试样含量的测定：
称取0.5g（精确到0.0002g）置于50ml纳氏比色管中，加1mol/L盐酸10ml，密闭提取1h（不时摇动），避免粘于管壁，提取后加总离子强度缓冲液25ml，加水至刻度，以滤纸过滤。
以氟电极测平衡电位值。
结果计算：
X=C×50×1000 m×1000=50C m
X-----试样中氟含量，
m---试样质量，g；
C-----据电位值查得的浓度，
总离子强度缓冲液：
现配现用，3mol/L乙酸钠；0.75mol/L柠檬酸钠，配成（1+1）。
测定时，用蒸馏水洗电极装置至值为-370以后。
（三）磷（P）的测定
磷标准曲线的绘制：
准确移取磷标准溶液（分析纯的磷酸二氢钾，在105℃干燥1h，冷却后称取0.2195g，溶于1L的容量瓶中，加硝酸3ml，用水稀释至刻度，得到50ug/ml溶液），分别吸取0.0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、15.0ml于50ml容量瓶中，各加入磷显色液（钒-钼酸铵显色液：
偏钒酸铵1.25g，加250ml硝酸于1000ml容量瓶中；钼酸铵25g于烧杯中，加400ml水溶解，冷却下，将此液倒入容量瓶中，定容）10ml，用蒸馏水定容，摇匀放置10min以上，以0.0为参比，在400nm波长测定各溶液的吸光度。
以横坐标为磷含量，纵坐标为吸光度，作标准曲线。
样品的测定（磷酸氢钙）：
移取测钙时所用的试样溶液5ml于100ml容量瓶中，用水定容，摇匀，准确移取2ml于50ml容量瓶中，加磷显色液10ml，用水定容，测其吸光度。
P%=W×稀释倍数 m×106×100
W----以吸光度算出的浓度，
m----试样质量，g。
十一、硫酸铜（CuSO4·5H2O）
鉴别：
1、Cu2+，取试样溶液，加0.5ml乙二胺四乙酸二钠溶液（15%，m/v），0.5ml氢氧化钠溶液（0.1mol/L），1ml乙酸乙酯，振摇，有机层显黄棕色。
2、SO42-，取试样溶液，置于白色瓷板上，加BaCl2溶液（5%，m/v），即有白色沉淀生成，在盐酸和硝酸中不溶。
测定：
称取0.35g左右（精确到0.0002g）置于碘量瓶中，加50ml水溶解，40ml冰乙酸，2g碘化钾（10mlKI溶液），摇匀，于暗处放置10min，用Na2S2O3标准溶液滴定至淡蓝色，加2ml淀粉，继续滴定至无蓝色（或蓝色刚刚消失为终点）。
硫酸铜%=C×V×0.06355 m×100
C------Na2S2O3标准溶液的浓度，mol/L；
V-----消耗Na2S2O3标准溶液体积，ml；
m-----样品质量，g。
十二、硫酸锌（ZnSO4·H2O）
称取0.2g试样，加50ml水溶解，加3g酒石酸钾钠，2ml浓氨水，50mg络黑体，用EDTA标准溶液（0.05mol/L）滴定至紫色变为纯蓝色。
ZnSO4%=C×V×0.06537 m×100%
C-----EDTA标准溶液的浓度，mol/L；
V-----消耗EDTA标准溶液的体积，ml；
m----样品质量。
十三、硫酸亚铁（FeSO4·H2O）
称取0.35g试样于250ml三角瓶中，加50ml水，5ml浓硫酸（缓慢加入），2ml浓磷酸，冷却至室温，用0.1mol/L高锰酸钾标准溶液滴定至粉红色即为终点。
FeSO4%=C×V×0.05585 m×100%
C-----高锰酸钾标准溶液的浓度，mol/L；
V-----消耗高锰酸钾标准溶液的体积，ml；
m----试样的质量。
十四、砷
1、 原理：
在酸性介质中，金属锌将砷化物还原为砷化氢，砷化氢在溴化汞试纸上形成棕黄色砷斑与标准砷进行比较。
2、试剂：
盐酸（HCl），碘化钾（KI），氧化亚锡盐酸溶液（40%、m/v），无砷金属锌，乙酸铅棉花·溴化汞试纸，砷标准溶液（1ug/ml）。
3、测定：
称取1g试样（精确到0.01g）置于广口瓶中，用水稀释至70ml，加6ml盐酸，摇匀，加1g碘化钾（5mlKI溶液、200g/L），再滴加氯化亚锡，直到溶液由黄色变成无色或白色，摇匀，放置10min，加2.5g无砷金属锌，装好置于暗处25-30℃放置1-1.5h，溴化汞试纸所呈棕黄色不得深于标准。
十五、硫酸镁（MgSO4）
无色结晶或白色粉末。
称取试样1g（精确到0.0002g），用水溶解，转移至100ml容量瓶中，定容，准确吸取25ml溶液至250ml锥形瓶中，加30ml水，10ml氨-氯化铵缓冲溶液（PH=10），及5滴铬黑体指示剂（0.5%），用EDTA滴定至溶液由紫红色变为纯蓝色为终点。
X%=C×V×0.02431 m×100
C------EDTA标准溶液的浓度，mol/L；
V-----消耗EDTA标准溶液的体积，ml；
m----样品质量，g。
另：
沸石粉、滑石粉、石膏粉和膨润土，只测Pb、Cd和As。
三、维生素
一、甜菜碱盐酸盐
1、原理，采用非水滴定法，用乙酸汞将甜菜碱盐酸盐转化为乙酸盐和难电离的氯化汞，在乙酸介质中用高氯酸滴定溶液对生成的乙酸盐进行滴定。
2、试剂，①冰乙酸；②乙酸汞溶液，将50g乙酸汞研细，加1000ml冰乙酸溶解，置棕色瓶中，密闭保存。
③结晶紫指示剂；2g/L，取2g结晶紫，加100ml冰乙酸；④高氯酸标准滴定液，0.1mol/L的溶液。
3、测定
取试样预先在105℃烘箱中干燥至恒重，称取干燥试样0.4g（精确到0.0002g），加50ml冰乙酸加热溶解，加25ml乙酸汞溶液，冷却，加结晶紫指示剂2滴，用0.1mol/L的高氯酸标准溶液滴定到溶液呈绿色，同时作空白试验。
X%=（V-V0）×C×0.01536 M×100
C----高氯酸标准溶液的浓度mol/L
V---试验组消耗高氯酸标准溶液的体积ml
V0---空白组消耗高氯酸标准溶液的体积ml
m---试样质量。
二、氯化胆碱
称取经105℃干燥至恒重的试样1g（精确到0.0002g），置于100ml容量瓶中，加水70ml混匀，在约80℃水浴上加热15min，取出，在电动振荡器振荡20min，用水定容至100ml，过滤，吸取10ml滤液于100ml高型烧杯中，在冰箱内冷却到5℃以下，加10ml雷氏盐溶液（2%），不时搅拌反应30min（再令沉淀静置陈化15min），然后将沉淀定量到转移到事先在105℃烘干至恒重的玻璃砂芯坩埚中，减压抽滤，在用水洗涤沉淀3-4次，每次10ml，将装有沉淀的坩埚滤器放入烘箱，105℃烘2h称重。
氯化胆碱%= 沉淀重×3.3045样品重量×100%
雷氏盐甲醇溶液（2%）：
2g雷氏盐，溶于100ml甲醇中，放置于低温下保存。
胺盐定性分析：
称取3-4g试样，煮50ml水至70-80℃，在加样品，摇匀充分溶解，过滤于150ml三角瓶中，加入1ml浓硫酸，摇匀，将滤液煮沸，用氨制硝酸盐试剂沾滤纸测其气，观察试纸颜色是否发黑，继续煮1-2min，从电炉上取下放冷，加40%氢氧化钠5ml再煮沸，用PH湿润试纸测其蒸气的PH值，PH在7-8为合格。
氨制硝酸银溶液：
取硝酸银1g，加水20ml，滴加氨试剂（取浓氨水400ml，加水至1000ml），边加边搅拌，至棕色沉淀将近全溶，过滤，置于棕色瓶中，在暗处保存。
（二）仲裁法（非水滴定法）：
原理：
采用非水滴定法，用乙酸汞将氯化胆碱转化成乙酸盐和难电离的氯化汞，在乙酸介质中，以高氯酸对生成的乙酸盐进行滴定。
试剂：
5%乙酸汞溶液、50g/L（称取5g乙酸汞研细，用微热的冰乙酸溶解并稀释至100ml，在棕色瓶中密封保存；0.2%结晶紫、2g/L（称取0.2g，加100ml冰乙酸）
测定步骤：
称取试样0.3g（精确到0.0002g）置于100ml锥形瓶中，加20ml冰乙酸，2ml乙酸酐，10ml乙酸汞溶液和2滴结晶紫指示剂，摇匀，用高氯酸标准溶液滴定至溶液呈纯蓝色。
即为终点。
同时做空白试验。
X%=C×（V1-V0）×139.63 m×1000×100
C-----高氯酸标准溶液的浓度，mol/L；
V1----试验组消耗高氯酸溶液的体积，ml；
V0----空白组消耗高氯酸溶液的体积，ml；
m----样品的质量，g。
139.63-----氯化胆碱的分子量。
三、维生素B6
称0.15g样品（精确到0.0002g），加冰乙酸20ml，乙酸汞溶液5ml，温热溶解，放冷，加结晶紫指示剂1滴，用高氯酸标准溶液滴定至溶液呈蓝绿色，同时做空白校正。
VitB6%=（V-V0）×F×0.02056 m×100
V----样品溶液耗高氯酸标准溶液的体积，ml；
V0----空白溶液耗高氯酸标准溶液的体积，ml；
F-----高氯酸标准溶液浓度，mol/L；
m-----样品重，g。
本法适用于化学合成制得的vitB6。
四、维生素B2（核黄素）
避光操作，称取0.075g（精确到0.0002g），置于烧杯中，加冰乙酸1ml和水75ml，加热溶解后，加水稀释放冷，移置500ml容量瓶中，用水定容。
摇匀，吸取10ml于100ml容量瓶中，加1.4%乙酸钠溶液7ml。
并用水定容，同时做空白试验作对照。
以444nm波长测吸光度。
VitB2%=A 323×L×C×100= 50A 323m×100%
A-----样品吸光度；
323----维生素B2的系数；
L----光路长度1cm；
C-----100ml溶液中样品的g数。
五、维生素C（包被）
称取0.2g于250ml三角瓶中，加水100ml（煮沸，冷却），10ml冰乙酸，1ml1%淀粉指示剂，用0.1mol/L碘标准溶液滴定至溶液为蓝色。
VitC%=V×F×0.00886 m×100
V-----消耗碘标准溶液的体积，ml；
m----试样质量，g；
F---浓度校正系数（碘标液/样品液浓度）碘标准溶液的浓度，mol/L。
四、氨基酸
一、赖氨酸硫酸盐含量的测定
1、标准曲线的绘制
标准贮备液：
称取L-赖氨酸2克左右于1000ml容量瓶中,加1mol/L盐酸1ml用水溶解，定容。
则浓度大约在0.2mg/ml.
标准曲线的绘制:
分别吸取3.0,5.0,10.0,11.0,12.0,13.0和14.0ml标准贮备液于100ml容量瓶中,加水定容摇匀.在以上各容量瓶中分别吸取2.00ml于比色管中,然后在每只比色管中再加10ml印三酮显色液,不定容,用力振摇.于沸水浴中水浴40分钟.立即冷却至室温.同时作空白（只是不加分解液）.在分光光度计上于475nm波长处,以空白调零,测量各吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,作图.
2、样品的测定：
:
称取样品1.5克左右,加1mol/L的盐酸7ml充分溶解样品，用水定容，过滤，吸取2.00ml于100ml容量瓶中，加水定容，摇匀。
其它同作标准曲线的步骤。
测出吸光度。
3、计算：
于标准曲线上查出所测样品的浓度，代入公式
X（%）= C×500 M
C--------为从标准曲线上查得的样品的浓度。
M-------样品的质量。
500-----为样品稀释的倍数和转变为百分含量的系数。
（空白加样品液和空白试液。
）
（一）原理：
赖氨酸在PH≤3.0是与茚三酮反应生成红色化合物，其颜色深浅与赖氨酸含量存在性性关系。
（二）试剂：
1、茚三酮A液，称取茚三酮1.50g于烧杯中，量取110ml乙二醇-甲谜于烧杯中，溶解。
2、茚三酮B液，称取1.80g二水氯化铜（CuCl2·2H2O）于烧杯中，再量取0.1mol/L柠檬酸39ml于烧杯中，搅拌使其溶解。
3、将A、B两液全部转入1000ml容量瓶中定容，摇匀得茚三酮显色液。
4、赖氨酸空白显色液、称取1.80g二水氯化铜（CuCl2·2H2O）于烧杯中，再量取0.1mol/L柠檬酸39ml于烧杯中，搅拌使其溶解。
转移至1000ml容量瓶中定容，摇匀即可。
二
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