预购度动物疫病监测诊断试剂清单.docx
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预购度动物疫病监测诊断试剂清单
预购2019年度动物疫病监测诊断试剂清单
序号
种类
参数
数量
单价
金额
1
口蹄疫O型ELISA试剂盒
1．阻断ELISA
2．保存条件：
2~8℃保存；
3．敏感性：
98%
4．特异性：
99.2%
5．稳定性：
批内及批间差异≤3%。
6．试剂盒规格：
480孔（5板）/盒
7．试剂盒组成：
O型蛋白包被板，样品稀释液，阴性对照血清，阳性对照血清，酶标抗体，底物液，终止液，洗液。
8.操作步骤：
（1）使用前将试剂盒所有的组成恢复到室温（25+3℃），取出抗原被板；
（2）标记好样品、阳性对照和阴性对照（对照各做两孔），每孔加入样品稀释液80ul，然后加入样品血清、阳性对照、阴性对照各20ul后进行震荡混匀；
（3）室温孵育60分钟；
（4）洗板：
每孔加入洗液300ul，洗涤3次，最后在吸水纸上拍干；
（5）每孔加入100ul酶标抗体，室温孵育60分钟；
（6）重复步骤4，洗涤3次；
（7）每孔加入TMB底物反应液100ul.室温暗处放置15分钟。
（8）每孔加入终止液50ul，置酶标仪450nm波长处读数。
9．结果判定：
SN值＞0.6，阴性；SN值≤0.6，阳性。
10．试剂盒有效期12个月。
3盒
8900
26700
2
口蹄疫A型ELISA试剂盒
1．阻断ELISA
2．保存条件：
2~8℃保存；
3．敏感性：
98%
4．特异性：
99%
5．稳定性：
批内及批间差异≤3%。
6．试剂盒规格：
480孔（5板）/盒
7．试剂盒组成：
A型蛋白包被板，样品稀释液，阴性对照血清，阳性对照血清，酶标抗体，底物液，终止液，洗液。
8．操作步骤：
（1）使用前将试剂盒所有的组成恢复到室温（25+3℃），取出抗原被板；
（2）标记好样品、阳性对照和阴性对照（对照各做两孔），每孔加入样品稀释液80ul，然后加入样品血清、阳性对照、阴性对照各20ul后进行震荡混匀；
（3）室温孵育60分钟；
（4）洗板：
每孔加入洗液300ul，洗涤3次，最后在吸水纸上拍干；
（5）每孔加入100ul酶标抗体，室温孵育60分钟；
（6）重复步骤4洗涤3次；
（7）每孔加入TMB底物反应液100ul.室温暗处放置15分钟。
（8）每孔加入终止液50ul，置酶标仪450nm波长处读数。
9．结果判定：
SN值＞0.6，阴性；SN值≤0.6，阳性。
10．试剂盒有效期12个月。
2盒
8900
17800
3
兰耳病ELISA试剂盒
试剂盒内容：
PRRSV重组蛋白包被板、酶结合物浓缩液（10X）、阳性对照、阴性对照、稀释缓冲液14、稀释缓冲液3、浓缩洗涤液（20X）、底物溶液、终止液
1.酶结合物、阴阳性对照以及底物溶液必须在5℃（±3℃）下贮存。
2.其它试剂可放置+2℃～+26℃保存。
3.96孔╳5板，洗涤液和样品稀释液可用于IDVET所有系列产品。
检测步骤：
在使用前，所有的试剂盒组分都必须回复到室温（21℃±5℃）。
试剂应通过轻轻涡旋、旋转混合均匀。
1.微孔板样品预稀释：
1:
40倍
195μL样品稀释液14加入每孔。
5μL用于检测样品加入对照不需要稀释
加样：
100μL阴性对照（不需稀释）加入孔A1和B1。
100μL阳性对照（不需稀释）加入孔C1和D1。
100μL预稀释样品加入剩下孔内
提示：
加样后板震荡混匀（2min,200rpm）效果更佳且不会影响结果。
2.21℃（±5℃）下孵育30min±3min。
3.用300μL左右的洗涤液洗涤每个板孔5次。
在洗涤和加入下一个试剂前，避免孔变干。
4.用样品稀释液3按照1：
10的比例的稀释浓缩酶标结合物（10X）制备酶标结合物（1X）（1份浓缩洗涤液加9份样品稀释液3）。
5.吸取100μL的酶标记结合物（1X）加入到每孔中。
6.21℃（±5℃）下孵育30min±3min。
7.重复步骤3。
8.吸取100μL的底物溶液加入到每孔中。
9.21℃（±5℃）下暗室内孵育15min±2min。
10.在每孔中加入100μL的终止液终止显色反应。
11.在酶标仪的450nm波长读结果。
实验有效性：
在下列情形下实验有效：
阴性对照的平均OD小于等于0.150.ODNC≤≤0.150
阳性对照与阴性对照平均OD值差值大于等于0.150ODPC-ODNC≥0.150
结果判定：
对于每个样品，计算其S/P比值：
每个样品得出一个（S/P）：
S/P≤0.4，阴性；SN值＞04，阳性
2盒
11000
22000
4
猪瘟ELISA试剂盒
试剂盒内容：
包被的微量滴定板、酶结合物浓缩液（10X）、阳性对照、阴性对照、稀释缓冲液8、稀释缓冲液12、浓缩洗涤液（20X）、底物溶液、终止液
1.酶结合物、阴阳性对照以及底物溶液必须在5℃（±3℃）下贮存。
2.其它试剂可放置+2℃～+26℃保存。
3.96孔╳5板，洗涤液和样品稀释液可用于IDVET所有系列产品。
检测步骤：
在使用前，所有的试剂盒组分都必须回复到室温（21℃±5℃）。
试剂应通过轻轻涡旋、旋转混合均匀。
1.血清
1.加样：
50μL8号稀释液加入每孔。
50μL阳性对照加入孔A1和B1。
50μL阴性对照加入孔C1和D1。
50μL待检测样品加入剩下其他孔内。
2.2.37℃℃（±±2℃℃））下孵育45±4min（短时孵育）或在21℃℃（±±5℃℃））下孵育16-20
小时（过夜孵育）。
3.甩干板中液体，用300μL左右的洗涤液洗涤每个板孔3次。
在每一次洗涤后，甩去每个板孔中的液体，在最后一次甩干后，在吸干材料上用力扣板，吸去剩余的液体。
在洗涤和加入下一个试剂前，避免孔壁变干。
4.非常重要：
10X浓缩酶标记抗体用稀释缓冲液12进行10倍稀释（1份浓缩液+9份稀释液）。
吸取稀释的100μL的酶标抗体加入到每孔中。
5.21℃℃（±±5℃℃））下孵育30±3min。
6.甩干板中液体，用300μL左右的洗涤液洗涤每个板孔3次，洗涤过程中避免孔壁变干。
7.吸取100μL的底物溶液加入到每孔中。
8.21℃℃（±±5℃℃）下暗室避光孵育15min±2min。
9.在每孔中加入100μL的终止液终止显色反应。
10.在酶标仪的450nm波长读取OD值。
实验有效性：
在下列情形下实验有效：
阴性对照的平均OD大于0.7ODNC>0.7
阳性对照平均OD值小于阴性对照的30%ODPC/ODNC＜0.3
结果判定：
对于每个样品，计算其S/N百分比（S/N%）
每个样品得出一个（S/N%）
短时孵育或过夜孵育：
S/N%≤50%阳性；50%＜S/N%≤60%可疑；S/N%＞60%阴性。
3盒
5800
17400
5
禽流感H5-Re8株抗原
禽流感病毒H5亚型（Re-8株）血凝抑制试验抗原，用于H5亚型（Re-8株）禽流感病原检测。
2ml/瓶。
1.抗原为禽流感病毒接种SPF鸡胚培养，收获鸡胚尿囊液，经纯化、甲醛溶液灭活后，加适宜稳定剂，经冷冻真空干燥制成。
抗原效价不低于7Log2；
2.试剂在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；
3.试验结果阴阳性对照成立；
4.无菌检验、剩余水分测定、真空度测定按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合要求。
3瓶
260
780
6
禽流感H7抗原
禽流感病毒H7亚型血凝抑制试验抗原， 用于H7亚型禽流感病原检测。
2ml/瓶。
1.抗原为禽流感病毒接种SPF鸡胚培养，收获鸡胚尿囊液，经纯化、甲醛溶液灭活后，加适宜稳定剂，经冷冻真空干燥制成。
抗原效价不低于7Log2；
2.试剂在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；
3.试验结果阴阳性对照成立；
4.无菌检验、剩余水分测定、真空度测定按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合要求。
3瓶
260
780
7
禽流感H9抗原
1.抗原为禽流感病毒接种SPF鸡胚培养，收获鸡胚尿囊液，经纯化、甲醛溶液灭活后，加适宜稳定剂，经冷冻真空干燥制成。
抗原效价不低于7Log2；
2.试剂在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；
3.试验结果阴阳性对照成立；
4.无菌检验、剩余水分测定、真空度测定按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合要求。
2瓶
260
520
8
新城疫抗原
1.抗原为鸡新城疫病毒LaSota株接种SPF鸡胚培养，收获鸡胚尿囊液，经纯化、甲醛溶液灭活后，加适宜稳定剂，经冷冻真空干燥制成。
抗原效价不低于9Log2；
2.试剂在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；
3.试验结果阴阳性对照成立；
4．无菌检验、剩余水分测定、真空度测定按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合要求。
2瓶
220
440
9
布病虎红平板凝集抗原
1.主要成分及含量：
含灭活的布氏菌菌株
2.性状：
红色均匀悬浮液，久置后，上不澄清，底部有少量红色菌体沉淀。
3.作用与用途：
用于虎红平板凝集试验诊断布氏菌病。
4.用法与判定
取被检血清0.03mL与抗原0.03mL相混合，4分钟内观察结果。
凡出现“+”以上反应者判为阳性。
对出现阳性反应的动物，须进一步作补体结合试验或其他辅助诊断试验。
凝集反应判定标准：
++++ 凝集块呈菌丛状，凝块间液体明显清亮。
+++ 凝集反应较强，液体较清亮。
++ 形成较明显卷边，凝集块间液体稍清亮。
+稍能查到凝集，稍有卷边形成：
凝集物间液体呈红色。
－ 无凝集，呈均匀粉红色。
5.规格：
5mL/瓶
6.贮藏与有效期：
2～8℃保存，有效期为12个月。
7.有经农业部颁发的兽药生产的批准文号。
2瓶
160
320
10
禽流感H5-Re8株阳性血清
禽流感病毒H5亚型阳性血清（Re-8株），用于血凝抑制试验检测H5亚型（Re-8株）禽流感病毒试验的阳性对照。
2ml/瓶
1. 阳性血清系用禽流感病毒灭活疫苗接种SPF鸡，采血、分离血清，经冷冻真空干燥制成。
血凝一抑制效价不低于7Log2；
2.试剂在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；
3.试验结果阴阳性对照成立；
4.无菌检验、剩余水分测定、真空度测定按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合要求。
1瓶
260
260
11
禽流感H7阳性血清
禽流感病毒H7亚型阳性血清，用于H7亚型禽流感病原检测的阳性对照，2ml/瓶。
阳性血清系用禽流感病毒灭活疫苗接种SPF鸡，采血、分离血清，经冷冻真空干燥制成。
血凝一抑制效价不低于7Log2；
试剂在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；
试验结果阴阳性对照成立；
4.无菌检验、剩余水分测定、真空度测定按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合要求。
1瓶
260
260
12
禽流感H9阳性血清
1.阳性血清系用禽流感病毒灭活疫苗接种SPF鸡，采血、分离血清，经冷冻真空干燥制成。
•血凝一抑制效价不低于7Log2；
2.试剂在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；
3.试验结果阴阳性对照成立；
4.无菌检验、剩余水分测定、真空度测定按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合要求。
1瓶
260
260
13
新城疫阳性血清
1.阳性血清系用鸡新城疫灭活疫苗接种SPF鸡，采血、分离血清，经冷冻真空干燥制成。
血凝一抑制效价不低于8Log2；
2.试剂在2～8℃保存，有效期不少于1年；在-20℃以下保存，有效期不少于2年；
3.试验结果阴阳性对照成立；
4.无菌检验、剩余水分测定、真空度测定按现行《中国兽药典》附录进行检验，应符合要求。
1瓶
220
220
14
伪狂犬ELISA试剂盒（gB）
试剂盒内容：
gB病毒抗原包被、酶结合物浓缩液（10X）、阳性对照、阴性对照、稀释缓冲液4、稀释缓冲液3、浓缩洗涤液（20X）、底物溶液、终止液。
1.酶结合物、阴阳性对照以及底物溶液必须在5℃（±3℃）下贮存。
2.其它试剂可放置+2℃～+26℃保存。
3.96孔╳5板，相同名称的洗涤液和样品稀释液可用于IDVET所有系列产品。
检测步骤：
在使用前，所有的试剂盒组分都必须回复到室温（21℃±5℃）。
试剂应通过轻轻涡旋、旋转混合均匀。
1.血清
1.1短时间孵育
1.加样：
每孔加入50μL样品稀释液4。
孔A1和B1分别加入50μL阳性对照。
孔C1和D1分别加入50μL阴性对照。
剩下其他孔内加入50μL待检测样品
2.37℃（±2℃）下孵育45min±4min。
1.2过夜孵育
1.加样：
每孔加入75μL样品稀释液4。
孔A1和B1分别加入25μL阳性对照。
孔C1和D1分别加入25μL阴性对照。
剩下其他孔内加入25μL待检测样品
2.21℃（±5℃）下过夜孵育16-20小时。
1.3不过过夜孵育或是短时间孵育，以下1-9步骤相同
1.甩干板中液体，用300μL左右的洗涤液洗涤每个板孔3次。
在每一次洗涤后，甩去每个板孔中的液体，在最后一次甩干后，在吸干材料上用力扣板，吸去剩余的液体。
在洗涤和加入下一个试剂前，避免孔壁变干。
2.用稀释液缓冲液3按照1：
10的比例的稀释浓缩酶标结合物（10X）制备酶标结合物（1X）（1份浓缩洗涤液加9份样品稀释液）。
3.吸取100μL的酶标记结合物（1X）加入到每孔中。
4.37℃（±2℃）下孵育30min。
5.甩干板中液体，用300μL左右的洗涤液洗涤每个板孔3次，洗涤过程中避免孔壁变干。
6.吸取100μL的底物溶液加入到每孔中。
7.21℃（±5℃）下暗室避光孵育15min。
8.在每孔中加入100μL的终止液终止显色反应。
9.在酶标仪的450nm波长读结果。
实验有效性：
在下列情形下实验有效：
阴性对照的平均OD大于0.7ODNC>0.7
阳性对照平均OD值小于阴性对照的30%ODPC/ODNC＜0.3
结果判定：
对于每个样品，计算其S/N百分比（S/N）
每个样品得出一个（S/N）：
短时孵育：
S/N≤40%阳性；40%＜S/N%≤50%可疑；S/N%＞50%阴性。
过夜孵育：
S/N%≤30%阳性；30%＜S/N%≤40%可疑；S/N%＞40%阴性
1盒
4400
4400
15
伪狂犬ELISA试剂盒（gE）
试剂盒内容：
gE病毒抗原包被、酶结合物标准液、阳性对照、阴性对照、样品稀释液13、稀释缓冲液12、浓缩洗涤液（20X）、底物溶液、终止液
1.酶结合物、阴阳性对照以及底物溶液必须在5℃（±3℃）下贮存。
2.其它试剂可放置+2℃～+26℃保存。
3.规格：
96孔╳5板，相同名称的洗涤液和样品稀释液可用于IDVET所有系列产品。
检测步骤：
在使用前，所有的试剂盒组分都必须回复到室温（21℃±5℃）。
试剂应通过轻轻涡旋、旋转混合均匀。
1.血清
1.1短时间孵育
1.加样：
每孔加入20μL样品稀释液13。
孔A1和B1分别加入50μL阳性对照。
孔C1和D1分别加入50μL阴性对照。
剩下其他孔内加入50μL待检测样品。
2.37℃（±2℃）下孵育1h30±6min。
1.2过夜孵育（可以提高检测能力）
1.加样：
每孔加入80μL样品稀释液4。
孔A1和B1分别加入20μL阳性对照。
孔C1和D1分别加入20μL阴性对照。
剩下其他孔内加入20μL待检测样品。
2.21℃（±5℃）下过夜孵育（16-20小时）。
1.3不管过夜孵育或是短时间孵育，以下1-8步骤相同
1.甩干板中液体，用300μL左右的洗涤液洗涤每个板孔3次。
在每一次洗涤后，甩去每个板孔中的液体，在最后一次甩干后，在吸干材料上用力扣板，吸去剩余的液体。
在洗涤和加入下一个试剂前，避免孔壁变干。
4400
2.吸取100μL的酶标记结合物（直接使用）加入到每孔中。
3.21℃（±5℃）下孵育30±3min。
4.甩干板中液体，用300μL左右的洗涤液洗涤每个板孔3次，洗涤过程中避免孔壁变干。
5.吸取100μL的底物溶液加入到每孔中。
6.21℃（±5℃）下暗室避光孵育15min±2min。
7.在每孔中加入100μL的终止液终止显色反应。
8.在酶标仪的450nm波长读结果。
实验有效性：
在下列情形下实验有效：
阴性对照的平均OD大于0.7ODNC>0.7
阳性对照平均OD值小于阴性对照的30%ODPC/ODNC＜0.3
结果判定：
对于每个样品，计算其S/N百分比（S/N）
每个样品得出一个（S/N）：
短时孵育过夜孵育：
S/N≤60%阳性；60%＜S/N%≤70%可疑；S/N%＞70%阴性。
1盒
4400
4400
16
小反刍兽疫试剂盒
1.规格：
96孔╳4板。
竞争ELISA法检测小反刍兽疫病毒核蛋白的抗体。
检测绵羊、山羊的血清或血浆。
酶结合物、阴阳性对照以及底物溶液必须在5℃（±3℃）下贮存。
其它试剂可放置+2℃～+26℃保存。
2.检测步骤：
在使用前，所有的试剂盒组分都必须回复到室温（21℃±5℃）。
试剂应通过轻轻涡旋、旋转混合均匀。
2.1.加样：
每孔加入25μL样品稀释液13。
孔A1和B1分别加入25μL阳性对照。
孔C1和D1分别加入25μL阴性对照。
剩下孔内加入25μL样品用于检测。
2.237℃（±3℃）下孵育45min±4min。
2.3甩干板中液体，用300μL左右的洗涤液洗涤每个板孔3次。
在洗涤和加入下一个试剂前，避免孔壁变干。
2.4用样品稀释液4按照1：
10的比例的稀释浓缩酶标结合物（10X）制备酶标结合物（1X）（1份浓缩洗涤液加9份样品稀释液）。
2.5吸取100μL的酶标记结合物（1X）加入到每孔中。
2.621℃（±5℃）下孵育30min±3min。
2.7甩干板中液体，用300μL左右的洗涤液洗涤每个板孔3次。
在洗涤和加入下一个试剂前，避免孔壁变干。
2.8吸取100μL的底物溶液加入到每孔中。
2.921℃（±5℃）下暗处孵育15min±2min。
2.10在每孔中加入100μL的终止液终止显色反应。
2.11在酶标仪的450nm波长读结果。
3实验有效性：
在下列情形下实验有效：
阴性对照的平均OD大于0.7ODNC>0.7,阳性对照平均OD值小于阴性对照的30%ODPC/ODNC＜0.3
4结果判定：
对于每个样品，计算其竞争百分比（S/N%）
S/N%=
×100%
每个样品得出一个（S/N%）：
结果判定：
S/N≤50%阳性；50%＜S/N%≤60%可疑；S/N%＞60%阴性。
1盒
10000
10000
17
禽流感病毒H5亚型直接扩增荧光定量RT-PCR抗原
检测试剂盒
1.作用与用途：
本试剂盒反应buffer及酶抗干扰优势明显，因此可免于传统的核酸提取纯化。
适用于对各种组织、喉头拭子、泄殖腔拭子及全血等样本中的禽流感病毒H5亚型病毒RNA进行检测。
2.规格：
50头份/盒；
3.试剂盒组成：
直扩RT-qPCR反应液、直扩RT-qPCR酶混合液、禽流感病毒H5亚型直扩RT-qPCR引物探针、禽流感病毒H5亚型直扩RT-qPCR阳性对照、直扩RT-qPCR阴性对照、裂解液B1、裂解液B2；
4.灵敏性可检出10拷贝/微升以下病毒核酸，特异性98%以上；
5.有效期：
12个月。
4盒
3600
14400
18
禽流感病毒H7亚型直接扩增荧光定量RT-PCR抗原
检测试剂盒
1.作用与用途：
本试剂盒反应buffer及酶抗干扰优势明显，因此可免于传统的核酸提取纯化。
适用于对各种组织、喉头拭子、泄殖腔拭子及全血等样本中的禽流感病毒H7亚型病毒RNA进行检测。
2.规格：
50头份/盒；
3.试剂盒组成：
直扩RT-qPCR反应液、直扩RT-qPCR酶混合液、禽流感病毒H7亚型直扩RT-qPCR引物探针、禽流感病毒H7亚型直扩RT-qPCR阳性对照、直扩RT-qPCR阴性对照、裂解液B1、裂解液B2；
4.灵敏性可检出10拷贝/微升以下病毒核酸，特异性98%以上；
5.有效期：
12个月。
4盒
3600
14400
19
TAKARA
1.规格：
50头份/盒；
2.往样本中加入200μl的BufferVGB、20μl的ProteinaseK和10μl的CarrierRNA，充分混匀于56℃水浴温浴10分钟。
3.向裂解液中加入200μl无水乙醇，充分吸打混匀。
4.溶液移至吸附柱中，12,000rpm离心2分钟，弃滤液
5.将500μl的BufferRWA加入至吸附柱中，12,000rpm离心1分钟，弃滤液。
6.将700μl的BufferRWB加入吸附柱中，12,000rpm离心1分钟，弃滤液，并重复1次
7.空离心12,000rpm离心2分钟
8.将吸附柱安置于新的1.5ml离心管上，在吸附柱滤膜中央加入30～50μl的RNasefreedH2O，室温静置5分钟，12,000rpm离心2分钟洗脱DNA/RNA。
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1700
3400
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