秦艽规范化炮制技术研究项目试验研究实施方案DOC 37页.docx
《秦艽规范化炮制技术研究项目试验研究实施方案DOC 37页.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《秦艽规范化炮制技术研究项目试验研究实施方案DOC 37页.docx（28页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。
秦艽规范化炮制技术研究项目试验研究实施方案DOC37页
科技型中小企业技术创新资金专项
秦艽规范化炮制技术研究项目
试验研究实施方案
***
2007年12月
科技型中小企业技术创新资金专项
秦艽规范化炮制技术研究项目
试验研究实施方案
一、项目研究内容
1．秦艽饮片规范化炮制技术研究
（1）秦艽饮片规范化炮制环境构建技术研究。
按照《药品（饮片）生产质量管理规范（GMP）》的要求，完善秦艽饮片规范化炮制硬件设施设备，健全产品质量管理制度体系，对秦艽规范化炮制、质量检测车间、设备、空气、水质进行定期监测和安全性评价，针对性地采取环境保护措施，使各项环境指标符合《药品（饮片）生产质量管理规范（GMP）》和《中药饮片GMP认证检查评定标准》。
（2）秦艽饮片规范化浸润技术研究。
——浸润因素影响试验。
采用卧式滚动喷雾润药机完成秦艽药材浸润。
试验因素为浸润水量、浸润时间，每个因素3个水平。
其中浸润水量分别选取倍、倍、倍3个水平，浸润时间分别选取30分钟、40分钟、50分钟3个水平。
共构成（2×9=）18个试验组合，分别测定浸润后每1个试验组合的秦艽饮片性状和药理成分含量，探讨不同浸润水量、浸润时间对秦艽饮片性状和药理成分含量的影响。
每个试验组合重复3次，获取54组产品性状和药理成分含量数据。
（3）秦艽饮片规范化烘干技术研究。
——在浸润因素影响试验的基础上，进行烘干因素影响试验。
采用立式翻转自控烘干机完成秦艽饮片烘干。
试验因素为烘干温度、烘干时间，每个因素3个水平。
其中烘干温度分别选取50度、60度、70度3个水平，烘干时间分别选取20分钟、30分钟、40分钟3个水平。
共构成（2×9×9=）162个试验组合，分别测定烘干后每1个试验组合的秦艽饮片性状和药理成分含量，探讨不同烘干温度、烘干时间对秦艽饮片性状和药理成分含量的影响。
每个试验组合重复3次，获取486组产品性状和药理成分含量数据。
（4）秦艽饮片规范化包装贮运技术研究。
——在浸润因素影响试验和烘干因素影响试验的基础上，进行包装贮运因素影响试验。
采用中药饮片标准包装材料，运用普通包装机、真空包装机完成秦艽饮片包装。
试验因素为包装方式、贮运时间、贮运温度，包装方式因素设真空包装、非真空包装2个水平，贮运温度因素设常温库、阴凉库2个水平，贮运时间因素设3个月、6个月、12个月3个水平。
共构成（2×81×12=）1944个试验组合，分别测定到期后每1个试验组合的秦艽饮片性状和药理成分含量，探讨不同包装方式、贮运时间、贮运温度对秦艽饮片性状和药理成分含量的影响。
每个试验组合重复3次，获取5832组产品性状和药理成分含量数据。
（5）秦艽饮片规范化炮制技术集成研究。
——（浸润+烘干+包装贮运）因素影响组合试验。
在进行“烘干因素影响试验”时，以“浸润因素影响试验”各试验组合、各重复浸润的中间产品为参试材料，按照二阶级完成试验组合；在进行“包装贮运因素影响试验”时，以“烘干因素影响试验”各试验组合、各重复烘干的中间产品为参试材料，按照三阶级完成2124个试验组合，分别测定每组合试验后秦艽饮片性状和药理成分含量，每个试验组合重复3次，获取6372组产品性状和药理成分含量数据。
运用正交旋转回归统计分析，探讨不同环境因素，不同浸润水量、浸润时间，不同烘干温度、烘干时间，不同包装方式、贮运时间、贮运温度对秦艽饮片性状和药理成分含量的影响。
筛选、组装配套和验证秦艽饮片炮制最佳工艺方案，开发秦艽饮片规范化炮制技术体系。
项目试验组合与测定样本数
炮制工艺流程环节
浸润环节
含量测定样本个数
烘干环节
含量测定样本个数
包装贮运环节
含量测定样本个数
合计
炮制工艺条件因素
水量
时间
温度
时间
包装
方式
贮藏
温度
贮藏
时间
炮制工艺因素水平
倍
30分钟
1
50度
20
分钟
1
真空
包装
阴凉库
3个月
1
3
6个月
1
3
12
个月
1
3
常温库
……
3
5
非真空包装
……
……
6
8
30
分钟
1
……
……
……
12
14
40
分钟
1
……
……
……
12
14
60度
……
3
……
……
……
36
38
70度
……
3
……
……
……
36
38
40分钟
1
……
……
9
……
……
……
108
118
50分钟
1
……
……
9
……
……
……
108
118
倍
……
3
……
……
27
……
……
……
324
354
倍
……
3
……
……
27
……
……
……
324
354
单次试验组合数
9
81
972
1062
单次试验测样本数
9
81
972
1062
3次重复组合数
27
243
2916
3186
3次重复样本数
27
243
2916
3186
（注：
符号“……”意为“同上”，省略了试验组合的一一标示）。
2．制定和验证《宁夏秦艽饮片规范化炮制操作规程（SOP）》
（1）标准依据
（2）生产工艺
（3）操作规程（含领料、净选、浸润、切制、烘干、筛选、包装、入库规程）
（4）生产设备
（5）劳动定员
（6）物料平衡
（7）技术安全
（8）包材质量标准
（9）原药材、中间产品、成品质量标准
原药材质量标准（含标准依据、性状、鉴别、浸出物、含量测定）
中间产品质量标准（含标准依据、性状、鉴别、浸出物、含量测定）
成品质量标准（含标准依据、性状、鉴别、浸出物、含量测定）
3．制定《宁夏秦艽饮片质量标准》
（1）药品名称
（2）药材来源
（3）炮制工艺
（4）产品性状
（5）产品鉴别
（6）产品检查
（7）浸出物
（8）含量测定
（9）性味与归经
（10）功能与主治
（11）用法与用量
（12）包装与规格
（13）贮藏条件
（14）有效期
二、项目实施进度
1．2007年12月～2008年3月，完成秦艽规范化炮制环境构建技术研究。
按照《药品（饮片）生产质量管理规范（GMP）》的要求，健全管理制度体系，对监测车间、设备、空气、水质并进行安全性评价，针对性地采取环境保护措施，使各项环境指标符合《药品（饮片）生产质量管理规范（GMP）》和《中药饮片GMP认证检查评定标准》。
2．2008年4月～9月，完成秦艽饮片规范化炮制技术研究第1轮（第1个重复）试验。
按照“浸润因素影响试验”→“烘干因素影响试验”→“包装贮运因素影响试验”的顺序组合1062个试验，测定每个试验后秦艽饮片性状和药理成分含量，获取1062组产品性状和药理成分含量数据。
3．2008年10月～2009年3月，完成秦艽饮片规范化炮制技术研究第2轮（第2个重复）试验。
按照“浸润因素影响试验”→“烘干因素影响试验”→“包装贮运因素影响试验”的顺序组合1062个试验，测定每个试验后秦艽饮片性状和药理成分含量，获取1062组产品性状和药理成分含量数据。
制定《宁夏秦艽饮片规范化炮制操作规程（SOP）》、《宁夏秦艽饮片质量标准》。
4．2009年4月～9月，完成秦艽饮片规范化炮制技术研究第3轮（第3个重复）试验。
按照“浸润因素影响试验”→“烘干因素影响试验”→“包装贮运因素影响试验”的顺序组合1062个试验，测定每个试验后秦艽饮片性状和药理成分含量，获取1062组产品性状和药理成分含量数据。
验证《宁夏秦艽饮片规范化炮制操作规程（SOP）》、《宁夏秦艽饮片质量标准》。
5．2009年10月～12月，完成《秦艽规范化炮制技术研究报告》及相关资料，申请项目组织单位组织评审、鉴定、验收、登记成果。
发表论文3篇论文。
三、项目技术规程
（一）试验研究规程
【工艺依据】：
《中华人民共和国药典》2005年版一部及其附录《中药材炮制通则》；***《中药饮片炮制技术规程总则》、《秦艽规范化炮制试验设计与实施方案》。
【试验操作】：
依照***《试验研究管理文件（SMP）》、《试验研究岗位标准操作规程（SOP）》、《秦艽规范化炮制试验设计与实施方案》及本技术规程进行。
【试验材料】：
龙胆科植物秦艽（Gentianamacrophyllapall.）的烘干根（同产地同一批）。
【功能主治】：
祛风湿，清湿热，止痹痛。
用于风湿痹痛，筋脉拘挛，骨节酸痛，日晡潮热，小儿疳积发热。
【贮存】：
基本条件——置通风烘干处；具体条件——见试验研究技术设计。
1、试验工艺流程图：
2、操作过程及工艺条件
试验材料:
栽培于宁夏六盘山区农耕地，生长年限为4年的龙胆科植物秦艽（Gentianamacrophyllapall.）的烘干根，其质量性状符合《中华人民共和国药典》2005年版一部规定。
领料：
由净选工序的领料员按批实验指令领取规定的数量，填写领料单，核对原料检验报告单号。
重复
批次
浸润水量
（倍）
1
1
共354个测定样品，每个测定样品投料250克，共需88.5公斤,领料90公斤。
每批次样本数：
（浸润水量1×浸润时间3（+3）×烘干温度3×烘干时间3（+27）×包装方式2×贮藏温度2×贮藏时间3=[324（+30）]=354个样）。
2
共354个测定样品，每个测定样品投料250克，共需88.5公斤,领料90公斤。
3
共354个测定样品，每个测定样品投料250克，共需88.5公斤,领料90公斤。
2
同1
3
同1
净选：
将秦艽原药材置操作间内拣选台上，去净杂质、霉变等不符合要求的部分，按大小分开，分别置周转箱内，转入下道工序。
喷洗：
将净选后的秦艽放入洗药箱，将洗药箱放在洗药池内垫板上，使用饮用水喷淋洗涤，直至冲洗干净。
以见本色、无尘土杂质为标准，喷洗时间控制在5-10分钟。
取出分别置周转箱内，转入下道工序。
浸润：
按照《秦艽规范化炮制试验研究设计》浸润。
，检测性状质量。
置周转箱内，转入下道工序。
浸润试验每次重复试验因素水平
浸润
水量
浸润
时间
水量监测
性状质量检测
剩余水量
浸润后
药材重量
性状
鉴别
浸出物
测定
含量
测定
生物碱
试验
荧光反应
倍
30分钟
40分钟
50分钟
倍
30分钟
40分钟
50分钟
倍
30分钟
40分钟
50分钟
切制：
取浸润后的秦艽，用转盘式切药机切制，本品的厚片为2-4mm，调整刀与刀口的距离3mm，试切，合格后开始操作，片形应匀称，片厚应均匀。
置周转箱内，转入下道工序。
本工序收率93-100%。
烘干：
按照《秦艽规范化炮制试验研究设计》，将切制后的秦艽饮片用翻板式烘干机烘干，铺药厚度不超过3cm。
温度分别为50℃、60℃、70℃。
烘干时间为20分钟、30分钟、40分钟。
烘干后监测药材重量，检测性状质量。
置周转箱内，转入下道工序。
烘干
温度
烘干
时间
烘干后
药材重量
性状
鉴别
浸出物
测定
含量
测定
生物碱
试验
荧光反应
50℃
20分钟
20分钟
40分钟
60℃
20分钟
20分钟
40分钟
70℃
20分钟
20分钟
40分钟
筛选：
用自动筛选机选择适合的筛网筛去药屑，拣去不合格的饮片，置周转箱内，转入下道工序。
本工序收率90-100%。
包装：
按照《秦艽规范化炮制试验研究设计》包装。
，将经筛选的秦艽饮片分别用真空、普通两种方法包装。
在试验标签上印好相应内容，按规定分装、封口；监测统计重量；转入下道工序。
按照《秦艽规范化炮制试验研究设计》，将内包完好的成品放入指定规格的大箱中，包装规格根据大箱实际尺寸，打好封带；或装入外包袋中，贴好外包标签，具体包装要求：
内包袋规格：
35×25cm；
外包袋规格：
120×90cm
包装规格：
1Kg×32袋/袋
贮藏：
按照《秦艽规范化炮制试验研究设计》，将经过外包后的秦艽饮片送入成品待验区,接到合格报告单后转入合格区入库。
贮藏条件：
分别为阴凉库、常温库。
贮存时间：
分别为3个月、6个月、12个月。
包装
贮藏
包装后
药材重量
性状
鉴别
浸出物
测定
含量
测定
贮藏条件
贮藏
时间
生物碱
试验
荧光反应
真空包装
阴凉库
3个月
6个月
9个月
常温库
3个月
6个月
9个月
普通包装
阴凉库
3个月
6个月
9个月
常温库
3个月
6个月
9个月
完成贮藏时间后监测药材重量，检测性状质量。
3、参考依据：
《中华人民共和国药典》2005年版一部190页。
4、设备一览表：
设备名称
规格型号
设备制造企业
生产能力
洗药池、润药池
100-300Kg/h
转盘式切药机
QYJ-100型
上海南崛中药机械公司
200-500Kg/h
翻板烘干机
CJGD-20型
新昌县暖通设备厂
100-300Kg/h
筛药机
SYJ-B
上海南崛中药机械公司
180-650Kg/h
5、技术安全、工艺卫生条件及劳动保护：
生产操作前，仔细检查电路及动力设施，排除不安全隐患。
不得用手触摸机器的传动及转动部位，发生故障时，立即切断电源，通过维修人员修理。
压力设备严禁撞击、敲打，不准超压、超温。
车间设消火栓，灭火器定点存放，并有专人负责，操作人员都会使用灭火器。
各岗位职工按炮制规定穿戴好工作服、鞋、帽、口罩、手套等。
工艺卫生按《炮制过程管理规程》执行。
6、物料平衡统计：
净选工序的物料平衡值（实际值/理论值）应为97-99%。
切制工序的物料平衡值（实际值/理论值）应为98-100%。
筛选工序的物料平衡值（实际值/理论值）应为93-99%。
内包工序的物料平衡值（实际值/理论值）应为99-100%。
产品物料平衡值（实际值/理论值）应为88-100%。
计算公式：
实际值（炮制后数量＋杂质＋药屑）
物料平衡值%=×100%
理论值（炮制前）
7、包材质量标准：
（1）包装用塑料袋质量标准
【标准依据】公司内部规定。
【材质】为白色或透明的聚乙烯塑料制品；无毒\无味。
【外观】周正平整，无漏气、洁净无污染。
【破损率】≤3%。
【印刷】文字、图案、标志应正确、清晰、深浅色泽一致。
【规格尺寸】长35cm，宽27cm，厚双面丝
（2）包装箱质量标准
【标准依据】中华人民共和国国家标准GB6543-86。
【材质】面纸应为300g/m2瓦楞纸。
【外观】箱体方正，表面不允许有明显的损坏和污迹，切边表面裂损宽度不超过8mm，破损率小于1%。
【纸箱接头】纸箱接缝的黏合剂涂布应均匀充分，无多余的黏合剂溢出。
当棉纸分离时，接缝依然粘合不分。
【压痕线】纸箱的压痕线宽度，不大于17mm。
折线居中，不得有破裂断线，箱壁不允许有多余的压痕线。
【摇盖】纸箱摇盖经开、合1800往复5次以上，外面层不得有裂缝，内面层裂缝长度总和不得大于70mm。
（3）外包袋质量标准
为白色塑料编织袋，应方正、整齐，无皱折，无污染，洁净。
规格为120×90cm。
秦艽规范化炮制试验研究包装标签
项目编码
项目编码与处理水平
技术
负责人
工艺
操作员
完成时间
成品质量检测
处理
单位
水平
浸润水量
性状描述
浸润水量
烘干温度
烘干时间
生物碱试验
包装方式
荧光反应
贮藏温度
浸出物
贮藏时间
含量测定
8、试验研究岗位定员：
岗位
技术
负责人
工艺操作员
定员
姓名
采购
2
净选
2
浸润
2
切制
2
烘干
2
筛选
1
包装
2
贮藏
1
检验
2
9、成品、半成品、原辅料的质量标准及检查方法
成品内控质量标准：
【标准依据】《中国药典》2005年版一部。
【性状】类圆形薄片。
表面黄棕色或灰黄色，有纵向或扭曲的纵皱纹。
质硬而脆，易折断，切面略显油性，皮部黄色或棕黄色，木部黄色。
气特异，味苦、微涩。
【鉴别】
（1）生物碱试验：
取本品粗粉2g，加三氯甲烷-甲醇-浓氨试液（75：
25：
5）混合液30ml，浸泡2小时，滤过，滤液置水浴上浓缩至约1ml，加1mol/L盐酸溶液2ml，继续蒸去三氯甲烷，放冷，滤过。
取滤液分置二支试管中，一管加碘化汞钾试液，即生成淡黄白色沉淀；另一管加碘化铋钾试液，即生成棕红色沉淀。
（2）荧光反应：
取本品横断面，置紫外光灯（365nm）下观察，显黄白色或金黄色荧光。
【浸出物】照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法（附录XA）测定,用乙醇作溶剂,不得少于%。
【含量测定】照高效液相色谱法（附录VID）测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（1：
4）为流动相；检测波长为254nm。
理论板数按龙胆苦苷峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备精密称取龙胆苦苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含的溶液，即得。
供试品溶液的制备取本品粉末（过三号筛）约0.5g，精密称定，加甲醇20ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液减压加回收至干，残渣用适量甲醇溶解，滤过，转移至50ml，量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取1ml，置5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品按烘干品计算，含龙胆苦苷（C16H20O9）不得少于%。
【贮藏】置通风烘干处。
中间产品质量参照《中间产品质量标准通则》：
净选：
去净非药用部分，无碎屑、无杂质，无泥沙。
洗制：
见本色，以彻底洗净药材表面及隐藏部位的泥沙杂质为标准。
润制：
外观应药透水尽，质地松软适中。
便于保持有效成分和利于切制。
切制：
应切面整齐，外形匀称。
饮片切制规格在规定的范围之内。
烘干：
干湿度均匀，保持固有色泽。
筛选：
筛选后的饮片应无异形片及药屑。
原药材质量标准
【标准依据】《中华人民共和国药典》2005版一部190页。
本品为龙胆科植物秦艽（GentianamacrophyllaPall.）的烘干根。
春、秋二季采挖，除去泥沙；秦艽及麻花艽晒软，堆置“发汗”至表面呈红黄色或灰黄色时，摊开晒干，或不经“发汗”直接晒干；小秦艽趁鲜时搓去黑皮，晒干。
【性状】秦艽（Gentianamacrophyllapall.）呈类圆柱形，上粗下细，扭曲不直，长10～30cm，直径1～3cm。
表面黄棕色或灰黄色，有纵向或扭曲的纵皱纹。
顶端有残存茎基及纤维状叶鞘。
质硬而脆，易折断，断面柔润，皮部黄色或棕黄色，木部黄色。
气特异，味苦、微涩。
【鉴别】
（1）取本品粗粉2g，加三氯甲烷－甲醇－浓氨试液（75∶25∶5）混合液30ml，浸泡2小时，滤过，滤液置水浴上浓缩至约1ml，加1mol/L盐酸溶液2ml，继续蒸去三氯甲烷，放冷，滤过。
取滤液分置二支试管中，一管加碘化汞钾试液，即生成淡黄白色沉淀；另一管加碘化铋钾试液，即生成棕红色沉淀。
（2）取本品横断面，置紫外光灯（365nm）下观察，显黄白色或金黄色荧光。
【浸出物】照醇浸出物测定法项下的热浸法（附录ⅩA）测定，用乙醇作溶剂，不得少于%。
【含量测定】按照高效液相色谱法（附录ⅥD）测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇－水（1∶4）为流动相；检测波长为254nm。
理论板数按龙胆苦苷峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备精密称取龙胆苦苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含的溶液，即得。
供试品溶液的制备取本品粉末（过三号筛）约0.5g，精密称定，加甲醇20ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液减压回收至干，残渣用适量甲醇溶解，滤过，转移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取1ml，置5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品按烘干品计算，含龙胆苦苷（C16H20O9）不得少于%。
【炮制】除去杂质，洗净，润透，切厚片，晒干。
【性味与归经】辛、苦，平。
归胃、肝、胆经。
【功能与主治】祛风湿，清湿热，止痹痛。
用于风湿痹痛，筋脉拘挛，骨节烦痛，日晡潮热，小儿疳积发热。
【用法与用量】3～9g。
【贮藏】置通风烘干处。
（二）原料检验技术规程
1.目的：
建立秦艽（Gentianamacrophyllapall.）检验标准操作规程，为操作过程规范化提供依据。
2.职责：
化验员。
3.范围：
适用于秦艽原药材检验。
4.内容：
．性状及其判定
，上粗下细，扭曲不直，长10～30cm，直径1～3cm。
表面黄棕色或灰黄色，有纵向或扭曲的纵皱纹，顶端有残存茎基及纤维状叶鞘。
质硬而脆，易折断，断面柔润，皮部黄色或棕黄色，木部黄色。
气特异，味苦、微涩。
，则判符合规定；若不相符，则判不符合规定。
．理化鉴别
生物碱试验：
取本品粗粉2g，加三氯甲烷-甲醇-浓氨试液（75：
25：
5）混合液30ml，浸泡2小时，滤过，滤液置水浴上浓缩至约lml，加lmol/L盐酸溶液2ml，继续蒸去三氯甲烷，放冷，滤过。
取滤液分置二支试管中，一管加碘化汞钾试液，即生成淡黄白色沉淀；另一管加碘化铋钾试液，即生成棕红色沉淀。
则判符合规定；若其中任何一项不显相应反应，则判不符合规定。
荧光反应：
取本品横断面，置紫外光灯（365nm）下观察，若显黄白色或金黄色荧光，则判符合规定；若不显相应颜色，则判不符合规定。
．浸出物
，用乙醇作溶剂。
，则判符合规定；若少于%，则判不符合规定。
．含量测定
；甲醇-水（1：
4）为流动相；检测波长为254nm。
理论板数按龙胆苦苷峰计算应不低于3000。
，加甲醇制成每lml含的溶液，即得。
，加甲醇20ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液减压回收至干，残渣用适量甲醇溶解，滤过，转移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取lml，置5ml量瓶中
升级会员 