RF5301PC荧光分光光度计验证方案讲解学习.docx
《RF5301PC荧光分光光度计验证方案讲解学习.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《RF5301PC荧光分光光度计验证方案讲解学习.docx（14页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。
RF5301PC荧光分光光度计验证方案讲解学习
RF-5301PC荧光分光光度计验证方案
RF-5301PC荧光分光光度计验证方案
（编号：
）
起草人：
部门：
起草日期：
年月日
审核人：
、、
（验证领导小组）
部门：
、、
审核日期：
年月日
批准人：
部门：
批准日期：
年月日
**公司
2012年03月
验证目录
01.验证项目
02.概述
03.验证目的
04.验证条件
05.验证合格标准
06.验证范围
07.验证人员
08.验证内容与方法
09.验证数据分析
10.验证结论与偏差说明
11.再验证
12.验证时间安排
13.附件
1.验证项目
RF-5301PC荧光分光光度计验证方案
2.概述：
2.1RF-5301PC荧光分光光度计：
设备编号：
QC-016
某些物质受到光照射而被激发之后，会发射出比照射波长稍长的光，这种光称为荧光。
对于给定物质来说，当激发光的波长和强度固定、液层的厚度固定、溶液的浓度较低时，荧光强度与荧光物质的浓度c有如下关系：
F=kc
荧光分光光度计就是根据上述原理，对可发射荧光的物质进行定性、定量测量的分析仪器。
我公司的荧光分光光度计是于2010年7月购置，其生产厂为日本岛津公司，主要用于铝的检测。
2.3技术参数：
型号：
RF-5301PC
电源电压：
220V，50HZ
体积：
长667×宽530×高270mm
工作时间：
连续
工作环境条件：
环境温度：
15～35℃
相对温度：
40%～80%
电压波动：
220V±10%
无影响仪器使用的振动和电磁干扰
生产厂家：
日本岛津公司。
3.验证目的
按照GMP的要求，需要对该仪器进行安装确认、运行确认、性能确认，以确定目前的实验室环境能否满足该仪器的正常操作和使用，仪器是否具有良好的检测性能，能否满足验证可接受标准和日常分析测试工作的需要。
4.验证条件
4.1验证前必须对设备所用仪表进行校验，且在有效期内。
4.2验证试验过程中所用的标准溶液、空白溶液在使用前必须符合规定。
4.3验证试验所用的清洁器具和玻璃容器应按SOP程序清洁并符合要求。
5验证合格标准
5.1仪器外观及工作环境满足要求
5.2波长示值误差限与重复性
5.2.1波长示值误差限：
优于±2.0nm
5.2.2波长重复性：
≤1.0nm
5.3检出极限：
5×10-10g/ml
5.4测量线性：
r≥0.995
5.5荧光光谱峰值强度重复性：
≤1.5%
5.6稳定性
5.6.1在10分钟内零线漂移≤1.5%
5.6.2荧光强度示值上限在10分钟内的漂移不超过±1.5%
5.7仪器性能满足要求
6.验证范围
本方案适用于RF-5301PC荧光分光光度计的验证
7.验证人员
7.1验证人员职责、分工
7.1.1确认与验证委员会
·负责验证方案的审批；
·负责验证数据及结果的审批；
·负责验证报告的审批；
·负责发放验证证书；
·负责再验证周期的确认。
7.1.2验证工作小组组长
·负责验证方案的制定并组织实施；
·负责收集验证、试验记录，并对结果进行分析，起草验证报告,上报确认与验证委员会。
7.1.3工程设备部：
·负责验证所需仪器、设备的安装、调试及校正；
·负责量具的检验及校正。
7.1.4质量管理部
·负责监督验证的具体实施。
7.1.5质量控制实验室
·负责验证的准备工作；
·负责根据本验证方案的具体实施。
7.2验证方案实施单位责任人
实施部门
责任人
签名
确认与验证委员会
验证工作小组组长
工程设备部
质量保证室
质量控制实验室
7.3验证工作小组人员
部门
姓名
部门
姓名
质量控制实验室
质量保证室
质量控制实验室
工程设备部
8.验证内容与方法
8.1安装确认
8.1.1文件资料的确认
下列文件资料是否齐全，是否符合要求
序号
文件资料
存放地
1
仪器采购订单
2
原版操作说明书
3
仪器操作SOP
4
仪器维护保养SOP
5
仪器使用记录
6
仪器维护保养、检修记录
结论：
检查人：
日期：
8.1.2售后服务
维修单位：
联系电话：
地址：
传真：
联系人：
结论：
检查人：
日期：
8.1.3关键设备及消耗备品
仪器名称
荧光分光光度计
仪器型号
RF-6301PC
制造厂商
仪器编号
使用科室
质量控制实验室
放置地点
关键设备
设备名称
型号
生产厂家
备品
名称
生产厂家和型号
数量
存放处
结论：
检查人：
日期：
8.1.4安装检查
对照使用说明书要求安装，确认仪器外观，环境、电源等符合要求。
检查内容
要求
方法
结果
外观
标识齐全，固件紧固良好，各旋钮、按键和开关均能正常工作，
目测
环境
室内不得存放与实验室无关的易燃、易爆和强腐蚀的物质，无强烈的机械振动和电磁干扰。
目测
环境温度
15℃～35℃
温湿度表测
环境相对湿度
40%～80%
温湿度表测
安装位置
仪器应平稳而牢固地安置在工作台上
按要求安装
电源线
与插孔吻合
按要求安装
结论：
检查人：
日期：
8.1.5软件安装情况检查
项目
安装情况检查
安装的软件
文件格式
安装位置
数据文件保存位置
工作站安装
结论：
检查人：
日期：
8.1.6安装确认结论
所有物品与检查清单相符，仪器外观符合规定，实验室电设计安装合理，实验室环境良好，软件安装正确无误。
结论：
检查人：
日期：
复核人：
日期：
8.2运行确认
8.2.1确认所需的材料
8.2.1.1玻璃仪器
计量玻璃仪器需彻底清洗并经检定，一般玻璃仪器要保证洁净。
8.2.1.2标准物质：
硫酸奎宁荧光标准物质
8.2.1.3工作标准溶液
8.2.1.3.10.05mol/L硫酸溶液：
1000ml的容量瓶中加入适量的蒸馏水，用移液管移取浓硫酸2.7ml，注入容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，并混合均匀后放置备用。
8.2.1.3.2硫酸奎宁标准溶液（1×10-5g/ml）：
将硫酸奎宁固体试剂在干燥器中放置24h以上。
在分析天平上准确称取5.00mg的硫酸奎宁标准物质于500ml容量瓶中，用适量的硫酸溶液溶解，然后用0.05mol/L硫酸溶液稀释至刻度，混合均匀。
8.2.1.3.3硫酸奎宁标准溶液（1×10-6g/ml）：
用移液管移取1×10-5g/ml硫酸奎宁溶液25ml，倾入250ml容量瓶中加入0.05mol/L硫酸溶液稀释至刻度，混合均匀。
8.2.1.3.4以此类推4×10-7g/ml硫酸奎宁标准溶液，8×10-7g/ml硫酸奎宁标准溶液，1×10-9g/ml硫酸奎宁标准溶液按下表配制
欲配标准溶液
所取标准母液
质量浓度/（g/ml）
配置体积/ml
质量浓度/（g/ml）
配置体积/ml
1×10-6
250
1×10-5
25
1×10-7
100
1×10-6
10
4×10-7
100
1×10-5
4
8×10-7
100
1×10-5
8
1×10-6
100
1×10-7
1
8.2.2波长示值误差与波长重复性
8.2.2.1激发侧单色器波长示值误差与波长重复性
将发射侧单色器置零级位置，将漫反射板（或无荧光的白色滤纸条）放入样品室，仪器的响应时间设置为“快”，扫描速度设置为“中”或采用手动方式，使用实际可行的最窄狭缝宽度，对激发侧单色器在（350～550）nm的波长范围进行扫描，在所得到的谱图上寻找450.1nm附近的光谱峰，并确定其峰位置。
连续测量三次，按公式
（1）和
（2）分别计算波长示值误差和重复性。
波长示值误差：
（1）
式中：
—波长测量值；
—参考波长值（450.1nm）。
波长重复性
（2）
8.2.2.2发射侧单色器波长示值误差与波长重复性
将激发侧单色器置零级位置，将漫反射板（或无荧光的白色滤纸条）放入样品室，仪器的响应时间设置为“快”，扫描速度设置为“中”或采用手动方式，使用实际可行的最窄狭缝宽度，对激发侧单色器在（350～550）nm的波长范围进行扫描，在所得到的谱图上寻找450.1nm附近的光谱峰，并确定其峰位置。
连续测量三次，按公式
（1）和
（2）分别计算波长示值误差和重复性。
波长示值误差及波长重复性结果
激发单色器
测量值
发射单色器
测量值
结论：
检查人：
日期：
8.2.3检出极限
用0.05mol/L硫酸溶液做空白溶液，选取质量浓度为1×10-9g/ml硫酸奎宁标准溶液，灵敏度置最高档，选择适当的狭缝宽度，根据激发波长在350nm、发射波长在450nm左右的原则，设定两侧的波长。
对空白溶液与标准溶液进行连续交替11次测量。
如果在测量中，有一次数据确认是由外界干扰或操作引起的较大误差，应将该次数据剔除。
由下式计算每次测量的荧光强度：
式中：
—标准溶液的荧光强度；
—空白溶液的荧光强度
荧光强度测量值的平均值为
式中：
—测量次数
检出极限指二倍于标准偏差读数的物质浓度，用符号DL来表示：
式中：
—11次测量的平均荧光强度
—标准溶液的质量浓度
—单次测量的标准偏差
检出极限结果
1
7
2
8
3
9
4
10
5
11
6
=
=
=
=
结论：
检查人：
日期：
8.2.4测量线性
用0.05mol/L硫酸溶液作空白溶液，适当选择灵敏度挡和狭缝，依次测量下表的各质量浓度硫酸奎宁标准溶液。
根据激发波长在350nm、发射波长在450nm左右的原则，设定两侧的波长
硫酸奎宁标准溶液
标准溶液编号
1
2
3
4
标准溶液质量浓度
1×10-7
4×10-7
8×10-7
1×10-6
测量线性结果
质量浓度
1×10-7
4×10-7
8×10-7
1×10-6
线性相关系数r=
结论：
检查人：
日期：
8.2.5光谱峰值强度的重复性
根据激发波长在350nm、发射波长在450nm左右的原则，设定两侧的波长。
用1×10-7g/ml的硫酸奎宁溶液，见光3min后，对发射波长从365nm至500nm重复扫描三次。
光谱峰值强度的重复性按下式计算
式中：
—光谱峰强度读数
光谱峰值强度的重复性结果
测量次数
1
2
3
荧光强度/%
结论：
检查人：
日期：
8.2.6稳定性
8.2.6.1调节灵敏度中等程度。
关闭闸门，记录10min内的漂移。
8.2.6.2置激发波长和发射波长为450nm。
置激发和发射狭缝宽度为10nm。
漫反射板放入样品室，调节灵敏度，使示值为90%，见光3min后，观察10min内示值的变化。
稳定性结果
项目
零线
示值上限
稳定性/%
10min
结论：
检查人：
日期：
8.2.7运行确认结论
仪器的波长示值误差与波长重复性，检出极限，测量线性，稳定性，重复性各项数据准确无误，操作符合标准操作规程，各项均应符合验证标准，
结论：
检查人：
日期：
复核人：
日期：
8.3性能确认
使用供试品确认仪器性能符合使用要求，对公司使用该仪器的不同品种各三批进行检测，以确保仪器满足实验要求。
性能确认检测结果
产品名称
产品批号
产品代码
检验日期
检验依据
检测项目
标准规定
检验结果
结论：
检查人：
日期：
8.4采用文件
8.4.1《RF-5301PC荧光分光光度计标准操作规程》（SOP-ZL1019-02-00）
8.4.2《RF-5301PC荧光分光光度计维护保养标准操作规程》（SOP-ZL1109-02-00）
8.4.3《RF-5301PC荧光分光光度计使用说明书》
8.4.4《荧光分光光度计检定规程》（JJG537-2006）
9.验证数据分析
仪器工作环境，波长准确度与波长重复性，分辨率，基线稳定性，灵敏度，检出限均重复性，仪器外观应符合验证合格标准。
如有少量数据超过上述标准，则应由质量控制实验室、质量管理部共同进行分析，找出不合格原因，修订验证方案，再实施，直至符合验证标准。
10.验证结果与结论（对验证结果的评价和建议）
质量控制实验室部负责收集各项验证、试验结果记录，根据验证、试验结果起草验证报告，报验证委员会。
验证委员会负责对验证结果进行综合评审，作出验证结论，发放验证证书，确认RF-5301PC荧光分光光度计验证周期，对验证结果的评审应包括：
10.1验证试验是否有遗漏？
10.2验证实施过程中对验证方案有无修改？
修改原因、依据以及是否经过批准？
10.3验证记录是否完整？
10.4验证试验结果是否符合标准要求？
偏差及对偏差的说明是否合理？
是否需要进一步补充试验？
11再验证
11.1依据验证结果，确定再验证周期，报验证委员会审批；
11.2如RF-5301PC荧光分光光度计主要部件更换后，必须进行再验证。
12.验证时间安排
由验证工作小组**负责实施。
具体时间为
待验证实施结束，写出验证报告，报验证委员会审批。
13.附件
《检验原始记录》
升级会员 