培养基适用性验证方案.docx

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培养基适用性验证方案

培养基适用性验证方案

培养基适用性验证

第1页共7页

培养基适用性

验证

方案起草人：

日期：

年月日

方案审核人：

日期：

年月日

方案批准人：

日期：

年月日

1.验证目的…………………………………………………………………………3

2.参照标准…………………………………………………………………………3

3.验证项目…………………………………………………………………………3

4.验证小组人员及职责……………………………………………………………3-4

5.验证可接受的标准………………………………………………………………4

6.验证材料…………………………………………………………………………4-5

7.菌液制备…………………………………………………………………………5

8.适用性检查………………………………………………………………………5-6

9.控制菌检查………………………………………………………………………7

1.验证目的：

需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基及控制菌培养基应进行培养基的适用性检查。

本次验证的目的是确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基、麦康凯液体培养基和麦康凯琼脂培养基适合需氧菌、霉菌及酵母菌、大肠埃希菌的测定和控制菌适用性检查。

2.参照标准：

中国药典微生物限度检查法。

3.验证项目：

胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基、麦康凯液体培养基和麦康凯琼脂培养基的适用性检查

4.验证小组人员及职责：

4.1验证小组人员:

小组人员职务

姓名

所在部门

职务

组长

刘秀

质量管理部

经理

组员

郝枝桃

质量管理部

QC主任

组员

王和霞

质量管理部

检验员

组员

兰丹

质量管理部

检验员

4.2验证人员职责及要求

4.2.1按验证方案及相关文件实施验证。

4.2.2认真观察并做好验证原始记录。

4.2.3对实施验证的结果负责。

4.3验证中各部门的职责

4.3.1验证领导组职责

4.3.1.1制订验证总计划，负责全公司验证工作的管理。

4.3.1.2确定验证项目及验证项目负责人。

4.3.1.3负责验证方案的批准工作。

4.3.1.4负责验证资料及结果的审核工作。

4.3.1.5负责验证报告的批准工作。

4.3.2验证工作小组职责

4.3.2.1负责验证方案的起草工作。

4.3.2.2参与验证方案的讨论、确认工作。

4.3.2.3负责验证方案的实施。

4.3.2.4负责验证结果的分析、统计、报告工作。

4.3.2.5参与验证结果的评价工作。

4.3.3质量部职责

4.3.3.1负责验证方案的审核工作。

4.3.3.2负责验证过程中仪器、仪表、计量器具的校验工作。

4.3.3.3负责验证中各项检测工作，提供验证的检验记录、检验报告，对验证过程中的各项检验工作负责。

4.3.3.4负责验证资料和报告的审核工作。

4.3.3.5负责验证文件回收、归档管理工作。

5.合格标准：

被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平均数的70%，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。

6.试验材料：

6.1.被验证培养基：

沙氏葡萄糖琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基、胰酪大豆胨琼脂培养基、麦康凯液体培养基

6.2.仪器设备：

6.2.1.YX280B手提式不锈钢蒸锅

6.2.2.DH-360型电热恒温培养箱

6.2.3.250B生化培养箱

6.2.4.101型电热恒温培养箱

6.3.验证用培养基

名称

生产厂家

批号

胰酪大豆胨琼脂培养基

沙氏葡萄糖琼脂培养基

麦康凯琼脂培养基

麦康凯液体培养基

胰酪大豆胨琼脂对照培养基

沙氏葡萄糖琼脂对照培养基

麦康凯琼脂对照培养基

麦康凯液体对照培养基

6.4.验证用菌株：

（第代）

试验菌株

培养基

培养温度

培养时间（小时）

白色念珠菌

沙氏葡萄糖琼脂培养基

20-25℃

24-48h

黑曲霉

5-7天

金黄色葡萄球菌

胰酪大豆胨培养基

30—35℃

18-24h

大肠埃希菌

铜绿假单胞菌

7.菌液制备

7.1.取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、白色念球菌的新鲜培养物。

7.2.用0.9%的无菌氯化钠溶液，制成适宜浓度的菌悬液。

7.3.取黑曲霉的新鲜培养物加入3-5ml浓度为0.9%的无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。

7..4.采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管中。

7.5.用0.9%的无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的孢子悬液。

7.6.注意事项：

菌液制备后，如在室温下放置，应在2h内使用；如保存在2-8℃，可在24h内使用，黑曲霉孢子悬液可保存在2-8℃，在验证过的储存期内使用。

8、培养基适用性检查：

8.1分别接种不大于100cfu的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的菌液至胰酪大豆胨培养基。

8.2每株试验菌平行制备2个平板，混匀、凝固，置于30-35℃培养不超过3天计数。

8.3分别接种不大于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉的菌液至沙氏葡萄糖琼脂培养基。

8.4每个试验菌平行制备2个平板，混匀、凝固，置于20-25℃培养不超过5天计数。

8.5用对应的对照培养基代替被检培养基进行上述试验。

8.6结果判定：

被检培养基上的菌落平均数≥对照培养基上菌落平均数的70%，且菌落形态大少与对照培养基上的菌落一致，判定培养基的适用性试验检测符合规定。

试验时间年月日完成时间年月日

验证菌株

平皿号

供试品组

cfu∕ml

对照培养基组

cfu∕ml

回收率%

应≥70%

铜绿假单胞菌

（培养3天计数）

1

--

2

--

平均值

金黄色葡萄球菌

（培养3天计数）

1

--

2

--

平均值

大肠埃希菌

（培养3天计数）

1

--

2

--

平均值

白色念珠菌

（培养5天开始计数）

1

--

2

--

平均值

黑曲霉菌

（培养5天开始计数）

1

--

2

--

平均值

结论

试验人复核人

9、控制菌检查

控制菌检查用培养基的适用性检查项目包括促生长能力、抑制能力及指示特性的检查。

常见培养基适用性检测项目及所用菌株见下表。

大肠埃希菌

麦康凯液体培养基

促生长能力

大肠埃希菌

抑制能力

金黄色葡萄球菌

麦康凯琼脂培养基

促生长能力+指示特性

大肠埃希菌

9.1麦康凯液体培养基适用性检查

9.1.1促生长能力检查

9.1.1.1分别接种不大于100cfu的大肠埃希菌于被检培养基和对照培养基中。

9.1.1.2在35℃条件下培养24h，与对照培养基管比较。

9.1.1.3检查标准：

被检培养基管试验菌应生长良好。

检验结果：

9.1.2抑制能力检查

9.1.2.1分别接种不少于100cfu的金黄色葡萄球菌于被检培养基和对照培养基中。

9.1.2.2在35℃条件下培养24h，并将被检培养基与对照培养基管比较。

9.1.2.3检查标准：

被检培养基管和对照培养基管试验菌均不得生长

检验结果：

9.2麦康凯琼脂培养基适用性检查：

促生长能力+指示特性的检查

9.2.1.用涂布法分别接种不大于100cfu的大肠埃希菌于被检培养基和对照培养基平板上。

9.2.2在35℃条件下培养24h。

9.2.3检查标准：

被检培养基与对照培养基上试验菌生长的菌落大小、形态特征应、指示剂反应情况等应一致。

检验结果：

实验人：

复核人：

年月日年月日