试验一生态因子的综合测试技术.docx

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试验一生态因子的综合测试技术

实验一气象因素的综合测试技术

目的和意义

生态因子是指环境中对生物的生长、发育、繁殖和分布能产生直接或间接影响的环境要素。

各种生态因子构成生物的生态环境，而生物个体或群体在某一和地段上所占有的生态环境就是它的生境。

在长期的进步过程中，植物不仅逐步适应了它所在的生境，而且对其生境能产生某种程度的改造作用。

因此，植物与生态因子的相互关系是生态学研究的基本内容之一，并已经在实践中得到广泛应用。

本实验通过对太阳辐射强度、温度、湿度、水分、土壤等生态因子的测定，使学生掌握几种常见的胜利生态测定仪器的工作原理及使用方法，并通过不同群落或同一群落不同部位生态因子的质量和数量的比较，认识植物与环境之间的相互联系。

生态因子的综合测定技术包括:

太阳辐射强度的观测、大气降水的观测、蒸发量的测定、空气和土壤温度的测定、空气湿度的测定、土壤水分和养分的测定、水质分析。

一、太阳辐射强度的观测

太阳辐射强度的观测包括直接辐射、天空总辐射、散射辐射、地面反射辐射。

这里以天空总辐射为例作一介绍。

仪器与设备

仪器的设备原理是以物体的热电效应为基础的。

由康铜-铜制成热电堆，热电堆将吸收的热能转化为电能，输出为电压，其输出量的大小与辐射强度成正比。

仪器的感应主体由透光罩、感应器、干燥器等组成。

透光罩是双层石英罩，既可以滤去投在黑片上的大气长波辐射，也可以防止风吹去黑白片上的热量。

感应器下面的干燥器内装硅胶，以吸收罩内水分。

辐射观察的记录器是灵敏地较高的电流表，常称为辐射电流表或微安表。

辐射电流表的读数单位为毫安，经换算，可得出以cal/（cm2.min）为单位的辐射能。

测量时，将天空辐射表热电堆的热端（+）和冷锻（—）分别与辐射电流表的正极和负极相接。

方法和步骤

（1）用仪器罩盖住感应面，松开电流表的绝电器，从零点读数，并记录观测时间。

（2）暴露感应面，待电流指针稳定性，每隔10~20s读数1次，连续读3次。

二、大气降水的观测

大气降水是指从天空降落到地面上的液态水或固态水，这部分水在蒸发之前（固态水需要一个融化过程）渗透、流失而积聚在水平面上的水层深度即为降水量，以mm为单位，取1位小数。

目前常用的测量降水量的仪器有雨量器、虹吸式雨量计和翻斗式遥测雨量计。

这里以虹吸式雨量计为例进行介绍。

仪器与设备

虹吸式雨量计（图1-1）由承水器

（1）、浮子室

（2）、自记钟（3）、记录笔（5）和外壳（6）等组成，由图1-1所示。

降水从承水器的承水口（6）落入，由盛水器的锥形大漏斗汇总经导水管流入小漏斗（7）和进水管至浮子室。

此时浮子室内水位上升，浮子（8）升高并带动固定在浮子杆（9）上之记录笔上升。

同事装在钟筒上的自记纸（4）随自记钟旋转，由装有自计墨水的笔尖在自记纸上画出曲线。

当笔尖达自记纸10mm线上时，浮子室内液面即达到虹吸管（10）的弯曲部分（12），由于虹吸作用，水从虹吸管中自动溢出，浮子下降至笔尖指零线时停住，继续降水时重复上述动作。

方法与步骤

（1）将虹吸式雨量计安装在观测场平整的地面上，用三根钢丝绳牢固，以免因震动使记录发生变化，承水口面用水平仪调整至水平。

（2）把自计纸卷在钟筒上，再把自计钟上满发条放在支柱上（11）的钟抽上，注意齿轮的啮合情况是否良好。

（3）将虹吸管的短弯曲端插入浮子室出水管内，并用连接器密封紧固。

（4）将笔尖注入自计墨水，用手指夹住记录笔杆，使笔尖接触纸面。

对准时间消除齿隙。

（5）用清水缓慢倒入盛水器至虹吸作用开始出现止，虹吸管溢流停止后笔尖停留在零线上。

偏离多时，要拧松笔杆固定螺钉（13）进行粗调；微调时，用手指扳动记录笔杆，调节笔杆指零线。

虹吸作用应在10mm上开始，若未达到或超过10mm线，需旋松虹吸管连接器，上下移动虹吸管。

若虹吸作用不正常溢流时间超过14s时，则是虹吸管弯曲部分脏污，可取下虹吸管，用软布系于绳中央，先用肥皂水，后用清水拖擦洗净。

若虹吸时有气泡产生，不能溢完，说明虹吸管内漏气，可用白蜡或凡士林的油脂混合物涂堵密封。

当仪器工作正常时，雨量记录有如下特点：

无雨时，记录为水平线；有雨时，记录为平滑的上升曲线；当水从浮子室溢出时，记录为垂直线，贮水筒（14）备校验降水量用。

蒸发量的测定

蒸发量是指在一定口径的蒸发器中，水因蒸发而降低的深度。

蒸发量以mm为单位，取一位小数。

测定蒸发量可采用小型蒸发器。

仪器与设备

蒸发器是由钝化成金黄色的铜质皿和镀锌钝化成彩虹色的钢质防禽圈组成。

皿是由内径20cm的承水口、圆筒以及出水嘴构成。

方法与步骤

（1）蒸发器的安装。

在观测场地内的安置地点竖一圆柱，柱顶安一圈架，将蒸发器安放其中，蒸发器口缘面用水平仪调整至水平，距地面高度70cm。

（2）测量每天20：

00进行观测，测量前一天20：

00注入的20mm清水（即今日原量）经24h蒸发剩余的水量，计入观测簿余量栏。

然后倒掉余量，重新量取20mm（干燥地区和干燥季节需量取30mm）清水注入蒸发器内，并计入观测簿次日原量栏。

（3）蒸发量的计算

式中：

E—蒸发量，mm;Q—原量，mm;P—降水量，mm;R—余量，mm。

四、空气和土壤温度的测定

地面观测中测定的是离地面1.5m高度处的气温。

气温的测定包括三项：

空气温度、空气最高温度、空气最低温度。

土壤温度的测定包括地表温度（0cm地温）、地中浅层温度（5、10、15、20cm）及较深层（40、80、160、320cm）的温度。

仪器与测定方法

常用测定温度的仪器有最高温度表、最低温度表、曲管地温表、直管地温表、自计温度计等。

1.最高温度表

最高温度表专门用于测定一定时间间隔内的最高温度，其构造与普通温度表不同。

它的感应部分内有一玻璃针，深入毛细管使感应部分与毛细管之间形成一窄道（有的是感应部分和毛细血管想接触特别狭窄）。

感应球内水银体积膨胀产生压力，压力大于窄道处摩擦力可将水银挤过摘到进入毛细管，毛细管中水银柱上升，温度下降时，球部内水银收缩，由于窄道极小，窄道摩擦力大于水银柱的内聚力而不能缩回感应部分，水银就在此处中断。

因而处在窄道上部的水银柱顶端的示度就是一定时间内曾经出现过的最高温度值。

调整方法：

手握住表身，球部向下，磁版面与甩动方向平行；手臂向外伸出约300的角度，用大臂将表前后450范围内甩动，毛细管内水银就可落入球部，使示度接近当时的干球温度。

调整后，放回时应先放球部再放表身。

动作要迅速，避免日光直接照射，甩动角度不得过大，以防止球部翘起。

2.最低温度表

最低温度表是用来专门测定一定时间间隔内的最低温度的仪器。

它的测温液是酒精，它的毛细管内有一哑铃型的小游标。

最低温度表水平放置时，游标停留在某一位置。

当温度上升时，酒精膨胀绕过游标而上升，而游标由于其顶端对管壁有足够的摩擦力，能维持在原位不动；然而当温度下降时，酒精柱收缩到与游标顶端相接触，由于酒精面的表面张力比游标对管壁的摩擦力要大，游标不致突破酒精柱而借表面张力将游标带下去。

由此可知，游标只降低不能升高，所以游标远离球部一端的示度，既是一定时间间隔内曾经出现过的最低温度。

调整方法：

抬高最低温度表的感应部分，表身倾斜，使游标回到酒精柱的顶端游标停止滑动，再把温度表放回原处，先放表身，后放球部。

3.曲管地温表

曲管地温表是测定浅层（5~20cm）土壤温度使用最普遍的温度计。

这种温度计是具有乳白玻璃插入式温标的水银温度表，标杆近球部弯曲成1350的角，温度计下部的毛细管与玻璃套管之间充满棉花或草灰，其作用是消除温度表上部和埋在地下的部分因温度不同而引起陶罐内空气对流而产生的读数不准确性。

一套曲管地温表包括4支不同长度的温度计，可供测定5、10、15、20cm深处的土壤温度。

在更深的土层中测定地温则可使用直观地温表。

4.直管地温表

直管地温表分内外两个部件，外部鞘筒由铁管或硬胶管制成，如由硬胶管制成的鞘筒，其下端连接一个传热良好的铜管；内部部件是一支装在特制铜套管中的水银温度表，表球部与套管之间充满铜屑，形成了良好的传到介质，并提高温度表的惯性。

特制铜套管被系在链子上或木板上端与鞘筒帽相连接。

每组直管地温表共4~8根，可供测定0.2m、0.4m、0.6m、0.8m、1.2m、1.4m、1.6m、2.4m和3.2m深处的土壤温度。

5.自记温度计

自记温度计是连接记录温度变化过程的变形温度计。

仪器由感应部分、杠杆系统和钟筒三部分组成。

感应部分的双金属片是由两条不同性质的金属（铜和铁）薄片沿平面焊接成双层的一块平板，温度变化时，它的两个组成部分因膨胀量不同引起挠曲。

如果双金属片作出弧形，并将它的一端固定不动，那么在温度改变时引起变形，其自由端将发生移动，并通过杠杆系统放大传递给杠杆长臂是那个的笔尖，使装有甘油墨水的笔尖与钟筒上的记录纸相接触。

钟筒的转动是靠装在钟筒下部时钟装置驱动的，于是记录纸上得到连续的温度变化记录。

特制的记录纸印有弧形坐标线，横坐标表示时间，纵坐标表示温度。

自记钟有“日记型”（钟转1周为24h）和“周计型”（钟转1周为7d）。

日计型纸每一小格代表10min或15min，周计型的每一小格2h，温度刻度每小格1℃。

五、空气温度的测定

仪器与测定方法

测定空气湿度的常用仪器有干湿球温度表、通风干湿表、毛发湿度计等。

1.干湿球温度表

由两支型号完全相同的温度表组成，一支球部包有湿纱布称为湿球，另一个称为干球。

由于纱布上的水分不断蒸发，消耗的潜热使湿球及其附近的薄层空气降温。

另一方面湿球与流经其周围的空气发生热量交换，当湿球因蒸发而散失的热量与从周围空气中获得的热量相平衡时湿球温度维持稳定。

干湿球产生温差，通过温差测得空气湿度的大小。

2.空气湿度的计算

E—绝对湿度（即水蒸气的密度）,g/cm3;E—湿球温度下饱和蒸汽压，atm;t—干球温度，℃；p—当时大气压，atm；A—干湿球系数。

2.通风干湿表

通风干湿表携带方便，精确度较高，是一种适于野外测定空气温湿度的良好仪器。

通风干湿表两支温度表的球部由双层金属管保护着，金属管表面镀镍，可将照到球部的太阳光及其他物体的辐射热反射出去。

通风装置主要由通风器及三通管组成，通风器内有一个风扇，当风扇转动时，空气从双层金属保护套管下部被吸入，绕温球部向上流动，经中央圆管从通风扇窗口排出，这样就可以使球部出于2.5m/s恒定速度的气流中。

此外，温度表两侧各有一金属保护板，仪器还附有贮水皮囊、防风罩及挂钩等。

读数前4~5min要湿润纱布。

湿润纱布时，仪器必须保持垂直，先把水囊里的蒸馏水挤到离玻璃管口约1cm处，然后将玻璃管插入户管稍微停留，待纱布湿润后，使水回到水囊中。

湿球纱布湿润后，启动通风干湿表把风扇发条上好，等2~4min左右，待风扇风速恒定时，进行读数，先读干球，后读湿球。

3.发毛湿度计

发毛湿度计是自动记录相对湿度连续变化的仪器，它的结构由三个部分组成。

感应部分：

一束脱脂人发（40~42根），发术的两端用毛发压板固定于毛发支架上。

传感放大部分：

毛发束中央借小钩与仪器的传递放大部分相连接，传递部分由两个弯曲的杠杆即双曲臂组成。

上区臂带有平衡锤使毛发束总是处于微微拉紧状态。

上、下曲臂杠杆分别借平衡锤和笔杆的重量得以轻轻保持接触。

当相对湿度增大时，发束伸长，平衡锤下降，迫使笔杆抬起，笔尖上移；相对湿度减小时，发束缩短，平衡锤抬起，笔杆由于本身重量而往下落，比肩下降，指示出相对湿度变小。

自计部分：

同自计温度计。

思考题

1.测定辐射强度、降水、温度、蒸发、湿度主要有哪些仪器，它们各自的工作原理是什么？

2.观测百叶箱、降水量仪、地表温度计和土壤温度计的布置及其观测方法。

实验二土壤水分、养分的测定（拟增设）

（一）土壤水分的测定

目的与意义

土壤水分含量测定有两个目的：

一是了解田间土壤的实际含水状况，以便及时进行灌溉、保墒或排水，以保证作物的正常生长；二是作为各项分析结果计算的基础。

测定田间土壤实际含水量的方法很多，所用仪器也不同，在土壤物理分析中有详细介绍，这里重点介绍风干土样水分的测定。

仪器、设备与材料

土钻，土壤筛（孔径1mm），铝盒，分析天平，电热恒温烘箱，干燥器（内盛变色硅胶）。

方法与步骤

1.土样的选取和制备

（1）风干土样：

选取有代表性的风干土壤样品，压碎，通过1mm筛，混合均匀后备用。

（2）新鲜土样：

在田间用土钻取有代表性的新鲜土样，刮去土钻中的上部浮土，将土钻中部所需深度处的土壤约20g，捏随后迅速装入已知准确质量的铝盒内，盖紧，装入木盒或其他容器，带回室内，将铝盒外表擦拭干净，立即称重测定水分。

2.风干土样水分的测定

取铝盒在105℃恒温箱中烘烤约2h，移入干燥器内冷却至室温，称重，精确至0.001g。

用角勺将风干土样拌匀，舀取约5g，均匀的平铺在铝盒中，盖好，称重，精确至0.001g。

将铝盒盖揭开，放在盒底下，置于己预热至105±2℃的烘箱中烘烤6~8h。

取出，盖好，移入干燥器内冷却至室温，立即称重。

风干土样水分的测定应做两份平行测定。

3.新鲜土样水分的测定

将盛有新鲜土样的铝盒在分析天平上称重，揭开盒盖，放在盒底下，置于已预热至105±2℃的烘箱中，烘烤12h。

取出，盖好，在干燥器中冷却至室温，立即称重。

新鲜土样水分的测定应做3分平行测定。

4.土壤水分计算

式中：

W—水分含量，%；W1—烘干前铝盒及土样质量，g；W2—烘干后铝盒及土样质量,g；W3—烘干空铝盒质量,g。

（二）土壤有机质的测定

目的和意义

土壤有机质是土壤中各种营养元素，特别是氮、磷的重要来源。

它还含有刺激植物生长的胡敏酸类等物质。

由于它具有胶体特性，能吸附较多的阳离子，因而使土壤具有保肥力和缓冲性。

它还能使土壤疏松和形成结构，从而可改善土壤的物理性状。

它也是土壤微生物必不可少的碳源和能源。

因此，除低洼地土壤外，一般来说，土壤有机质含量的多少，是土壤肥力髙低的一个重要指标。

仪器、设备及试剂

1.仪器与设备

硬质试管，油浴消化装置（括油浴锅和铁丝笼），可调温电炉，秒表，自动控温调节器。

2.试剂

（1）0.8000mol/L重铬酸钾标准溶液：

称取经130℃烘干的重铬酸钾（K2CrO7，分析纯）39.2245g溶于水中，定容至1000mL。

（2）0.2mol/LFe3SO4溶液：

称取硫酸亚铁（Fe3SO4.7H2O，化学纯〉56.0g溶于水中，加浓硫酸5mL，用水稀释至1L。

（3）指示剂：

①邻啡罗啉指示剂：

称取邻啡罗啉（分析纯）1.485g与Fe3SO4.7H2O0.695g，溶于100mL水中。

②2-羧基代二苯胺（o-phenylanthranilicacid，又名邻苯氨基苯甲酸,C13H11O12N）指示剂：

称取0.25g试剂于小研钵中研细，然后倒入100mL小烧杯中，加人0.1mol/LNaOH溶液12mL，并用少量水将研钵中残留的试剂冲洗入100mL烧杯中，将烧杯放在水浴上加热使其溶解，冷却后稀释定容到250mL放置澄清或过滤，用其清液。

方法和步骤

1.样品制备

称取通过0.149mm（100目）筛孔的风干土样0.1~1g（精确到0.0001g），分别放入一干燥的硬质试管中用移液管准确加入0.8000mol/L重铬酸钾标准溶液5mL（如果土壤中含有氯化物需先加Ag2SO40.1g）,用注射器加人浓H2SO45mL充分摇匀，管口盖上弯颈小漏斗。

2.测定

（1）将置于铁丝笼中的8~10支试管（每笼有1~2个空白试管），放人温度为185~190℃的石蜡油浴锅中，并控制电炉，使油浴锅内温度始终维持在170~180℃，待试管内液体沸腾发生气泡时开始计时，煮沸5min，取出试管，稍冷后擦净试管外部油液。

（2）冷却后，将试管内物质倾入250mL锥形瓶中，用水洗净试管内部及小漏斗，使三角瓶内溶液总体积达到60~70mL，保持混合液中硫酸浓度为2~3mol/L，然后加人2-羧基代二苯胺指示剂12~15滴，此时溶液呈棕红色。

用标准的0.2mol/L硫酸亚铁滴定，滴定过程中不断摇动三角瓶，直至溶液的颜色由棕红经紫色变为暗绿（灰蓝绿色），即为滴定终点。

如用邻啡罗啉指示剂，加指示剂2~3滴，溶液的变色过程中由橙黄→蓝绿→砖红色即为终点。

记取FeSO4滴定体积（V，单位mL）。

每一批样品测定的同时，进行2~3个空白试验，即取0.500g粉状二氧化硅代替土样，其他步骤与试样测定相同。

记取FeSO4滴定体积（V，单位mL）取其平均值。

3.计算

（1）土壤有机碳含量（SOC）

式中：

SOC—土壤有机碳含量,g/kg；c—重铬酸钾标准溶液的浓度，mol/L;V0—空白滴定用去FeSO4体积，mL;3.0—1/4碳原子的摩尔质量,g/mol;1.1一氧化校正系数；m—风干土样质量,g；k—将风干土换算成烘干土的系数。

（2）土壤有机质含量（SOM）

式中：

SOM—土壤有机质含量,g/kg；1.724—为土壤有机碳换成土壤有机质的平均换算系数。

注意事项

①有机质高于50g/kg者,称取土样0.1g，含有机质为20~30g/kg者，称土样0.3g，少于20g/kg者称取0.5g以上。

②土壤中氯化物的存在可使结果偏高。

因为氯化物也能被重铬酸钾所氧化，因此，盐土中有机质的测定必须防止氣化物的干扰，少量氯可加人少量Ag2SO4，使氯根沉淀下来。

Ag2SO4的加入,不仅能沉淀氯化物，而且有促进有机质分解的作用。

但Ag2SO4的用量不能太多，约加0.1g，否则生成沉淀，影响滴定。

③必须在试管内溶液表面开始沸腾才开始计算时间。

掌握沸腾的标准尽量一致，然后继续消煮5min，消煮时间对分析结果有较大的影响，故应尽量记时准确。

④消煮好的溶液颜色，一般应是黄色或黄中稍带绿色，如果以绿色为主，则说明重辂酸钾用量不足。

在滴定时若消耗硫酸亚铁量小于空白用量的1/3，有氧化不完全的可能，应弃去重做。

（三）土壤中全氮、水解氮含置的测定

土壤中氮素绝大部分为有机的结合形态。

无机形态的氮一般占全氮的1%~5%。

土壤有机质和氮素的消长，主要决定于生物积累和分解作用的相对强弱以及气候、植被、耕作制度诸因素，特别是水热条件，对土壤有机质和氮素含量有显著的影响。

1.土壤全氮量的测定

测定土壤全氮量的方法主要可分为干烧法和湿烧法两类。

湿烧法就是常用的凯氏法。

这个方法是丹麦人凯道尔（J.Kjedahl）于1883年用于研究蛋白质变化的，后来被用来测定各种形态的有机氮。

由于设备比较简单易得，结果可靠，为一般实验室所采用。

下面介绍目前广泛采用的半微量凯氏法。

样品在加速剂的参与下，用浓硫酸消煮时，各种含氮有机化合物，经过复杂的高温分解反应，转化为氨，与硫酸结合成硫酸铵。

碱化后蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以标准酸溶液滴定，求出土壤全氮含量（不包括全部硝态氮）。

包括硝态和亚硝态氮的全氮测定，在样品消煮前，需先用高锰酸钾将样品中的亚硝态氮氧化为硝态氮后，再用还原铁粉使全部硝态氮还原，转化成铵态氮。

在高温下硫酸是一种强氧化剂，能氧化有机化合物中的碳而分解有机质。

仪器、设备和试剂

1.仪器

消煮炉，半微量蒸馏装置，半微量滴定管（5mL）。

2.试剂

（1）10ml/LNaOH溶液：

称取420g工业用固体NaOH于硬质琅,烧杯中，加蒸馏水400mL溶解，不断搅拌，冷却后倒入塑料试剂瓶，加塞，（放置几天）待Na2CO3沉降后，将清液虹吸入盛有160mL无CO2的水中，以去CO2的蒸馏水定容至1L。

（2）甲基红—溴甲酚绿混合指示剂：

0.5g溴甲酚绿和0.1g甲基红溶于100mL95%的乙酵中。

（3）20g/LH3BO3：

20g（化学纯）溶于1L水中，每升H3BO3溶液中加入甲基红—溴甲酚绿混合指示剂5mL，并用稀酸或稀碱调节至微紫红色，此时该溶液的pH为4.8。

指示剂用前与硼酸混合，此试剂宜现配，不宜久放。

（4）混合加速剂：

100gK2SO4,10gCuSO4.5H2O和1gSe粉混合研磨，通过80号筛充分混匀，贮于具塞瓶中。

消煮时每毫升H2SO4加0.37g混合加速剂。

（5）0.02ml/mol硫酸标准溶液：

量取2.83mLH2SO4，加水稀释至5000mL，然后用标准碱或硼砂标定。

（6）高锰酸钾溶液：

25g高锰酸钾溶于500mL去离子水，贮于棕色瓶中。

（7）还原铁粉:

磨细通过孔径0.149mm（100目）筛。

方法和步骤

1.样品制备

称取风干土样（通过0.149mm筛）1.0000g。

2.土样消煮

（1）不包括硝态氮和亚硝态氮的消煮：

将土样送入干燥的凯氏瓶底部，用少量无离子水（0.5~1mL）湿润土样后，加入2g加速剂和5mL浓硫酸，摇匀，将开氏瓶倾斜置于300W变温电炉上，用小火加热，待瓶内反应缓和时（10~15min），加强火力使消煮的土液保持微沸，加热的部位不超过瓶中的液面，以防瓶壁温度过高而使铵盐受热分解，导致氮素损失。

消煮的温度以硫酸蒸气在瓶颈上部1/3处冷凝回流为宜。

待消煮液和土粒全部变为灰白稍带绿色后，再继续消煮1h。

消煮完毕，冷却，待蒸馏。

在消煮土样的同时，做两份空白测定，除不加土样外，其他操作皆与测定土样相同。

（2）包括硝态和亚硝态氮的消煮：

将土样送入干燥的凯氏瓶底部，加1mL高锰酸钾溶液，摇动凯氏瓶，缓缓加入1:

1硫酸2mL，不断转动凯氏瓶，然后放置5min，再加入1滴辛醇。

通过长颈漏斗将0.50g（±0.01g）还原铁粉送入凯氏瓶底部，瓶口盖上小漏斗，转动凯氏瓶，使铁粉与酸接触，待剧烈反应停止时（约5min），将凯氏瓶置于电炉上缓缓加热45min（瓶内土液应保持微沸，以不引起大量水分丢失为宜）。

待凯氏瓶冷却后，通过长颈漏斗加2g加速剂和5mL浓硫酸，摇匀。

按上述

（1）的步骤，消煮至土液全部变为黄绿色，再继续消煮1h消煮完毕，冷却，待蒸馏。

在消煮土样的同时，做两份空白测定。

3.氨的蒸馏

（1）蒸馏前先检查蒸馏装置是否漏气，并通过水的馏出液将管道洗净。

（2）待消煮液冷却后，用少量无离子水将消煮液全部转入蒸熘器内，并用水洗涤凯氏瓶4~5次（总用水量不超过30~35mL）。

若用半自动式自动定氮仪，不需要转移，可直接将消煮管放入定氮仪中蒸馏。

于150mL锥形瓶中，加入20g/L硼酸指示剂混合液5mL，放在冷凝管末端，管口置于硼酸液面以上3~4cm处。

然后向蒸馏室内缓缓加入10mol/LNaOH溶液20mL，通入蒸汽蒸馏，待馏出液体积约50mL时，即蒸馏完毕。

用少量已调节至pH4.5的水洗涤冷凝管的末端。

4.测定

用0.01mol/LH2SO4或0.01mol/LHCI标准溶液滴定熘出液，至馏出液由蓝绿色刚变为紫红色为止。

记录所用酸标准溶液的体积（单位mL）。

空白测定所用酸标准溶液的体积，一般不得超过0.4mL。

5.土壤全氮量计算

式中：

N一土壤全氮含量（g/kg）;V一滴定试液时所用酸标准溶液的体积，mL；V0一滴定空白时所用酸标准溶液的体积，mL;c—H2SO4或HCI标准溶液浓度，mol/L;14—氮原子的摩尔质量，g/mol;m—烘干土样的质量，g。

两次平行测定结果允许绝对偏差：

土壤含氮量>1.0g/kg时，不得超过0.005%；含氮1.0—0.6g/kg时，不得超过0.004%；含氮<0.6g/kg时，不得超过0.003%。

注意事项

（1）对于微量氮的滴定还可以用另一更灵敏的混合指示剂，即0.099g溴甲酚绿和0.066g甲基红溶于100mL乙醇中