毕业论文格式带具体标注.docx
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毕业论文格式带具体标注
摘要
人白细胞介素13（interleukin13，IL－13）是近年来发现的一种细胞因子，是造血因子家族的新成员，具有调节B淋巴细胞及单核细胞、抑制HIV复制、促进原始造血前体细胞的增殖及分化等功能。
本论文用超声波核化学渗透两种细胞粉碎方法对IL－13基因工程菌进行了细胞破碎实验，并系统地考察了pH、温度、时间、化学试剂等因素对细胞破碎效果的影响，得出了最佳的细胞破碎核包涵体融解工艺条件。
将破碎后的菌悬液用双水相萃取的方法进行了目标产物的初步分离纯化，并对双水相体系的各影响因素进行了深入细致的研究。
这将为我们进一步地研究以包涵体形式存在于基因工程菌内地目标产物分离纯化新方法打下良好的基础。
关键词：
IL－13，包涵体，细胞破碎，双水相，分离
正文与关键词之间空一行
字体TimesNewRoman，三号加粗，行间距21磅，段前后间距分别为12磅、18磅
Abstract
Interleukin（IL-13）isarecentlydescriedproteinandamemberofthefamilyofhematopoietics.ItisaproteininvitromodulatorofBlymphocyteandmonocytefunctions.Recently,itwasreportedthatitalsocouldinhibittheHIVreplicationinmonocyteandregulateproliferationanddifferentiationofprimitivehematopoieticsprogenitorcells.Inthisstudy,wetrydisruptingJM109cellsbymeansofultrasonicandchemicalosmosis,primarilytestingthefunctionsofpH,temperature,time,chemicalreagentandsoon,andachievinganoptimalprocessofcelldisruptionandinclusionsolution.Inaddition,wecarryonthepartitionofGST-IL-13byaqueoustwo-phasesystemandcarefullychecktheeffectsofthemainprocessingparameters.
Keywords：
IL-13,inclusion,celldisruption,aqueoustwo-phase,Partition
字体TimesNewRoman小四，行间距21磅，段前后间距为0
空一行
“Keywords”加粗，“keywords”前空两个字符
宋体小四，正文间距21～25磅，可适当调节；段前后间距为0
论文题目作为页眉（附录部分除外），宋体五号，居中
第一章前言
1.1发展生化“下游”技术的意义
正文部分：
宋体小四，行间距21磅，段前后间距为0
现代生物技术的迅猛发展使当今世界发生了日新月异的变化。
迄今为止，人们已经能够设计、制造、生产多种具有重要价值的蛋白质，如胰岛素（insulin）、白细胞介素（interleukin）、干扰素（interferon）、促红细胞生长素（EPO）和肿瘤坏死因子（TNF）等。
……
1.2基因工程蛋白质分离纯化的原则
加一空格
生物产品有许多使生物高分子，必须考虑到产品的变性和活性恢复等问题。
如果选取的条件合适，也可以通过耦合不同技术来改进分离工艺。
一般认为，要实现基因工程蛋白质分离纯化的高效率、高纯度和低成本必须做到以下几点：
1
标题另起一行居右，黑体四号，行距21磅，段前后间距均为12磅
使用温和、高效的方法；
②尽可能地减少操作步骤；
③减少化学和生化试剂地使用。
Prokopakis等提出了优化分离纯化步骤的基本规则，用以指导分离纯化操作的改进。
具体规则如下：
①选择分离操作必须基于产品的物理化学性质和生化性质；
②高产量的杂蛋白必须要除去；
③最高效率地利用目标产物与杂质间地理化性质差异；
字体Timesnewroman，小四，右上角标
④尽可能地将高效的步骤放在前面；
⑤把操作最困难的步骤放在最后[1,2]。
1.3现有白细胞介素－13的分离纯化方法
1993年，Mckenzie首次提出白细胞介素－13（IL－13）的名字，此后，人们逐渐发现了IL－13的许多生物学活性：
刺激前髓样细胞（TF－1）的增殖，直接诱导原始造血前体细胞（Lin－Sca－1＋）的增殖及分化；……
第二章实验材料与方法
2.1概述
本论文主要从IL－13地分离纯化入手，将传统的细胞破碎和双水相萃取（选择PEG盐系统）用于IL－13的提纯。
2.2.实验材料与方法
标题另起一行，黑体小四号，行距21磅，段前后间距均为6磅
……
标题前空两格“，下同
1．菌种培养
①母液的配置
……
2操作方法
按事先计算，取一定量的PEG母液、盐母液核细胞碎片固体（超声波破碎，4000r/min离心收集），用NaOH或盐酸调节pH值，加水至要求的浓度；
……
3
公式前后各空一行
计算
GST－IL－13的萃取率：
（2－1）
用公式编辑器，单倍行距，居中
居右
……
第三章实验结果与讨论
3.1GST-IL-13的培养
3.2GST-IL-13总含量的测定
3.3化学破碎
3.3.1pH的影响
pH对蛋白质释放的影响见图3.8。
pH的作用主要是影响蛋白质的电离平衡，从而影响到其融解性。
JM109菌的细胞壁蛋白在微碱性师的融解性较高，同时这又很接近细胞本身的生长环境，故蛋白质不会发生结构上的改变。
从图中也可以知道，pH以8.0左右为宜。
图前后空一行
图3.8pH化学破碎的影响
……
3.4双水相萃取的研究
本文分别考察了PEG600，PEG1540，PEG4000，PEG6000与不同的盐（硫酸铵、硫酸镁、硫酸钠、磷酸钠）构成的双水相体系，系统分析了蛋白质、GST－IL－13和细胞碎片的分布规律。
五号宋体居中，段前、后间距分别为0磅、6磅
3.4.1不同PEG分子量萃取结果的影响
表3.4平均相对分子质量对双水相萃取结果的比较
相组成
A
B
C
D
蛋白收率/%
64.3
69.5
68.7
41.2
GST－IL－13/%
58.1
78.4
71.5
18.9
成相情况
上清、下微浊
上下清
上清、下浊
上下相浑浊
上下两根线粗3/2磅，中间一根1/2磅
A.PEG600（26％），硫酸铵（14％）；B.PEG1540（25%），硫酸铵（12%）；
C.PEG600（25％），硫酸铵（8％）；D.PEG1540（20%），硫酸铵（10%）；
……
第四章结论与展望
4.1结论
⑴通过正交实验设计，对化学渗透法破碎JM109菌的各影响因素进行了实验研究和显著性分析，确定了各影响因素显著性的大小，并对各显著因子进行了单独实验，确定处适宜的破碎条件为盐酸胍7.0mol/L,TritonX-1000.5%，pH为8.0。
⑵综合比较了超声波细胞……
4.2对进一步研究的展望
本实验对基因工程菌JM109中以包涵体形式存在的外源融合蛋白GST－IL－13进行了细胞破碎（超声波法、化学渗透法）、包涵体融解、双水相萃取等方面的实验研究，确定了最佳的细胞破碎、双水相萃取的工艺路线和工艺条件，并取得较为满意的结果，为下一步的研究工作奠定了良好基础。
进一步的研究工作主要包括：
⑴目标产物GST－IL－13的进一步纯化。
⑵目标产物GST－IL－13的酶切和折叠复性实验，尽可能地提高酶切效率和蛋白切割后的高级结构的重建。
⑶切割后的IL－13的活性检测，以及影响性的相关因素研究。
通过对GST－IL－13分离纯化系统的研究，可为用基因工程菌大量生产基因工程药物提供一个理论和方法上的借鉴。
黑体三号居中，文字之间可加一空格，行间距21磅，段前后间距分别为12、18磅
参考文献
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化学工业出版社，1992:
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[5]李欣.世界石油市场发展趋势预测.国务院发展研究中心信息网:
2000,2
[6]AllamarajuSubrahmanyam.ProfessionalJavaServerProgrammingJ2EEEdition.WroxPress，2001
正文五号宋体，折行后与文字对齐，行间距21磅
黑体三号居中，两字间加四个空格；行间距21磅，段前、后间距分别为12、18磅
致谢
对给予各类资助、指导和协助完成研究工作，以及提供各种条件的单位及个人表示感谢。
致谢应实事求是，切忌浮夸与庸俗之词。
宋体小四，行间距为21磅，段前后间距为0
附录1
小四号黑体居左，行距21磅
小三号黑体，行间距21磅，段前、后间距12、18磅
透析袋的准备
1、将透析袋剪成合适长度；
2、在250mL烧杯中加入2%NaHCO3和0.1mol/L的EDTA；
3、将透析袋装入其中，煮沸10min；
4、用蒸馏水彻底洗涤；
5、蒸馏水中煮10min；
小四号宋体，行间距18磅，段前、后间距为0
6、冷却后4℃；
……
声明
本人郑重声明：
所呈交的学位论文（毕业设计说明书），是本人在导师指导下，独立进行研究（设计）工作的总结。
尽我所知，除文中已经注明引用的内容外，本学位论文的研究成果不包含任何他人享有著作权的内容。
对本论文所涉及的研究工作做出贡献的其他个人和集体，均已在文中以明确方式标明。
签名：
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