发酵罐操作.docx

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发酵罐操作

发酵罐操纵

操纵前请卖力检讨冷水机.空压机.反响器.进出水管.气管情形.填好应用解释书.

开机：

先打开其他单元上的开关,再打开主机面前的开关.

关机：

先把掌握器上所有单元的参数状况调到off,把进气开关打开后关机;关机时先

关掌握器后面的开关,再关其他单元上的开关.

灭菌操纵

1.取下马达,平放于桌上.罐顶端套上黑色呵护帽.

2.由罐上取下温度传感器,该传感器不须要灭菌.

3.取下PH电缆线,盖上红色呵护帽;将PH电极要插到底.务必拧紧电极的高低两个固定螺帽.PH电极灭菌前要标定.PH电极标定：

接好电缆后拧开电极的固定螺帽（第一个）,将PH电极掏出后用去离子水冲洗清洁后,轻轻用面纸吸干上面的水后先放入尺度溶液4.01中校订,等掌握器上数据稳固后在setzero处输入4.01（不管现实数值的微弱不同）;输入完闭后从尺度液中掏出电极,冲洗.吸干后放入7.00的尺度溶液中,等掌握器上数据稳固后在setspan处输入7.00（不管现实数值的微弱不同）.PH电极校订后不要关掌握器.

4.取下DO电缆线,DO电缆接口处用锡箔纸包好后套上黑色帽.DO电极灭菌完后标定.DO电极要插到底,拧紧电极的高低两个固定螺帽.灭菌前要留意溶氧电极里头的呵护液是否还有,没有则要进行添加.

5.取下消泡或液位电缆线,将消泡或液位电缆插到底,灭菌后定位到所须要的高度后就不要再压下去.消泡电极的高度离液面约1.5cm处.

6.拆下发酵罐上和冷凝器上的进.出水管,拆下的同时要用夹子夹住拆下水管的接头处,以防水流出.

7.发酵罐上的过滤器的两头多要用夹子夹逝世,过滤器的出口处用锡箔包好,所有过滤器的两头多要用夹子夹住.发酵完毕倒罐后留意检讨过滤器是否被打湿,如有则赶紧用吸球将个中的液体吹出.

8.用铁夹夹逝世收成管上的硅胶管以防在灭菌锅内跑液.收成管不必时上面必定要卡逝世不移走.

9.在灭菌前.将发酵罐的六个固定螺帽拧松出气,其他螺帽必定要拧紧！

灭菌完后打开高压锅后连忙将其拧紧,留意戴上手套防止被烫伤.

10.酸不要放高压锅内灭菌,将空的酸液瓶上的过滤器用锡箔包好,并将瓶盖拧松出汽.灭菌完后去失落锡箔过滤器上的锡箔纸作为出汽口.（留意与酸瓶相连的硅胶管不要卡逝世）;碱液瓶和硅胶管可以一路灭菌（与碱液瓶相连的硅胶管要卡逝世）.

11.取下电热夹套将其平铺于桌面.

12.灭菌前调剂好搅拌叶的地位,底下的搅拌叶尽量接近空气散布器,上面的一个地位调剂到所加发酵液的中央地位.

13.取样器的地位不要接近挡板的地位,尽量靠中央地位.

14.灭菌前将取样器的吸球取下.所有的硅胶管不要靠到高压锅的内壁上.

灭菌完毕后

1.将六个松开的固定螺帽和酸碱瓶盖拧紧.

2.去失落包在过滤器上的锡箔纸和卡硅胶管的夹子.

3.装上马达,若马达内侧润滑油干了,涂上适量的凡士林.

4.接上溶氧电缆线落后行DO电极标定：

灭菌完后接上DO电极的电缆线后在setzero

处输入0;将反响器的空气流量掌握在1L/min,Agitation调到100r/min留宿,早上开在setspan处输入100后按确认键.

5.等温度降到发酵所需温度时接好各进出水管.PH电缆线,消泡电缆线.

6.在放入温度电极之前,先往温度电极的进口里滴加甘油,拔出电极后中断滴加到冒出止.留意温度电极要插到底.

7..检讨空压机的输出压力,应在0.7~1.0kg/cm3规模内.

8.消泡剂的硅胶管要按从下往上次序在泵上装配.

冷水机工作温度的设定

开机：

接好进出水管→打开总电源→进行温度设计→打开轮回泵→开端制冷

关机：

先关制冷开关→关轮回泵开关→同时将进.出水口阀门封闭→关上电源

温度设定：

开机→面板显示“PP0.0”→按“移位键”和“调剂键”后显示“PP0.1”

→按SET键确认→此时面板显示上限值,按“移位键”和“调剂键”设定上限值→按SET键确认→此时面板显示下限值,按“移位键”和“调剂键”设定下限值→按SET键确认→再按SET键→再按SET键→面板显示停滞标记“”,按SET键回到测量显示,设置停滞.

上述操纵停滞后预备接种

接种预备：

预备好铁挡板.打火机.酒精喷壶.接种圈.装95%乙醇的珐琅缸容器.尖头钳子.运动扳手,接种瓶.

接种操纵

1.移开接种口邻近的胶管,将铁挡板围住接种口后用酒精喷壶朝接种口处喷酒精后点着,（留意：

假如有火焰顺着酒精溢出铁板外,则须要吹灭铁板两侧溢出的火焰.）

2.将接种圈沾酒精点着后套住接种口处,将扳手或钳子沾酒精后拧开螺帽后用钳子将其夹住拿出,吹灭螺帽和钳子上的火焰后敏捷放入装95%乙醇的珐琅缸容器里.

3.将接种瓶在火焰处拔开后敏捷倒入发酵罐内.完毕后用钳子夹出螺帽拧上.全部进程确保无菌操纵！

溶氧设定：

发酵模式下溶氧的掌握由有四种情形：

按off键→按control键→按Auto键→setup→cascade→选择以下四种模式.

1.None状况：

溶氧的掌握重要经由过程增长空气流量和设定好固定的转速来掌握.

2.Agit状况：

溶氧的掌握重要经由过程进步转速来掌握,此状况在空气流量保持不变的情形下溶氧跟着细胞消费降低时经由过程增长转速来进步溶氧程度.直到转速达到设订的转速上限值为止.该进程为主动掌握.

3.02状况：

该状况重要经由过程掌握氧气与空气的混杂百分比来掌握.溶氧跟着氧气百分比的增长而增长.为主动掌握进程.

4.Agit/02状况：

该状况中溶氧的掌握先是经由过程进步转速来增长的,当转速达到设定的上限值时若现实溶氧值仍没达到所须要的设定值,此时转速掌握在上限值,开端以从小到大的百分比主动进步氧气的进入量,直到达到所设定的溶氧值邻近为止.该进程亦为主动掌握进程.

留意：

在应用Agit状况和Agit/02状况时,若现实溶氧值与设定值相差太大,则要确保所设定的搅拌转速上限值不要太大,不然转速会刹时内增大带来太大的剪切力和大量的泡沫.现实操纵中可以同时经由过程空气流量计的手动掌握来帮助操纵.

按off键→按control键→按Auto键→setup→此时界面中消失的PGain和lGain为两个出厂设定好的参数,不要修改.

其他掌握操纵：

选择U1：

1.开机后→按use键→按U1～U4单元的Fermentation或cellculture键选择发酵模式或细胞造就模式;中断按翻阅键→分离对U1～U4单个单元进行掌握操纵.

2.Tem→按off键→按control键→按Auto键→按setpoint键,输入设定值→按肯定键→按DispHi输入上限值后按肯定键→按DispLo输入下限值后按肯定键;输入值如有错误按删除键后更改.

搅拌设定：

按off键→按control键→按Auto键→按setpoint键→输入设定转速值→按肯定键→DispHi和DispLo值的设定如上.

PumpA:

1.off→按control键→按manual→按setpoint设定百分比（以10秒为单位,如键入20%暗示转2秒停8秒：

100%暗示中断运转）→DispHi和DispLo的设定同上.PumpB和PumpC的设定与PumpA雷同.

2.off→按control键→按Antiforma（消泡）键→weton和wetoff分离调节液位的高下.

3.PumpC临时没有衔接蠕动泵;蠕动泵3与碱相连,蠕动泵4与酸相连.

PH值设定：

1.off→按control键→按Auto键→按setpoint键→输入设定值后按肯定键→DispHi和DispLo值的设定如上.

dO2值设定：

按off键→按control键→按Auto键→按setpoint键→输入设定值后按肯定键.

O2流量设定：

按control键→按Auto键→按setpoint键输入设定的百分比.

Unit2.Unit3.Unit4的操纵同上.

GRJD生物发酵罐的操纵规程及留意事项

一.发酵罐.生物发酵罐应用前的技巧预备

1.对发酵罐操纵人员上岗前的技巧培训：

GRJD发酵罐是机电一体化的高科技装备,是以;操纵人员上岗前必须进行技巧培训,使他们熟习全部发酵体系的工作道理.管路.阀门的操纵程序,并对空压机.电热蒸汽产生器能准确操纵应用.未经培训的人员,不得单独上岗操纵.

2.在发酵罐开机应用之前,应先检讨电源是否正常,空压机.蒸汽产生器.轮回水体系是否能正常工作.

3.检讨全部体系上的阀门.接头及紧固螺钉是否拧紧.

4.开动空压机,用0.15Mpa压力,检讨发酵罐.过滤器.管路.阀门的密封机能是否优越,有无泄露.

5.溶氧仪.pH仪.PLC体系应依据应用解释书进行检讨.校订.

6.上岗人员对上述发酵罐的各项必须能闇练操纵.

二.空消

在投料前,气路.料路.发酵罐必须用蒸汽进行灭菌,清除所有逝世角的杂菌,包管体系处于无菌状况.

1.空气管路的空消

（1）空气管路上有除水减压阀,和除菌过滤器.除水减压阀不克不及用蒸汽灭菌,

是以在空气管路通蒸汽前,必须将通向除水减压阀的阀门KQF1关逝世,使蒸汽经由过程蒸汽过滤器然落后入除菌过滤器.

（2）空消进程中,除菌过滤器下端的排气阀应微微开启,清除冷凝水.

（3）空消时光应中断40分钟阁下,当装备初次应用或长期不必后启动时,最好采取间歇空消,即第一次空消后,暂定3～5小时再空消一次,以便清除芽孢.

（4）经空消后的过滤器,应通气吹干,约20～30分钟,然后将气路阀门封闭.

2.发酵罐空消

（1）发酵罐是将蒸汽直接通入罐内进行空消.

（2）空消时,应将罐上的接种口,排气阀,及料路阀门微微打开,使蒸汽经由过程这些阀门排出,同时保持罐压为0.13～0.15Mpa.

（3）空消时光为30～40分钟,特别情形下,可采取间歇空消.

（4）空消停滞后,应将罐内冷凝水排失落.

留意：

1.发酵罐空消时,应将夹套内的水放失落,空消时最好将夹套排水阀打开,以防夹套水排不净.

2.空消时,溶氧.pH电极应掏出,可以延伸其应用寿命.

三.实消

实消是当发酵罐罐内参加造就基后,用蒸汽对造就基进行灭菌的进程.

1.空消停滞后,起首需将pH.Do电极校订好后装入罐体中的接头中,然后将配好的造就基从加料口参加罐内,此时夹套内应无冷却水.

2.造就基在进罐之前,应先糊化,一般造就基的配方量以罐体全容积的70％阁下盘算（泡沫多的造就基为65％阁下,泡沫少的造就基可达75～80％）,斟酌到冷凝水和接种量身分,加水量约为罐体全容积的50~60％阁下,加水量的若干与造就基温度和蒸汽压力等身分有关,需在实践中探索.

3.为了削减蒸汽冷凝水,实消先应用夹套通蒸汽对造就基进行预热,保持夹套压力≤0.1Mpa,待造就基温度到达90℃后,封闭夹套蒸汽,改为直接向罐内通入蒸汽.

4.当罐压升至0.12Mpa,温度升到121~123℃时,掌握蒸汽阀门开度,保持罐压不变,30分钟后停滞供汽.

5.打开冷却水的进排阀门,在夹套内通水冷却.

留意：

1.在夹套通水冷却时,罐压会急剧降低,当罐内压力降至0.05Mpa时,微微开启排气阀和进气阀,开启电机进行通气搅拌,加快冷却速度,并保持罐压为0.05Mpa,直到罐温降至接种温度.

四.接种.造就

1.本装备采取火焰封口接种,接种前应事先预备好酒精棉花.钳子.镊子和接种环.

2.菌种装入三角烧瓶内,接种量依据工艺请求肯定.

3.将酒精棉花围在接种口四周点燃,用钳子或铁棒拧开接种口,此时应向罐内通气,使接种口有空气排出.

4.将三角瓶的菌种在火环中央倒入罐内.

5.将接种口盖在火焰上灭菌后拧紧.

6.接种后即可通气造就,罐压保持在0.05Mpa.

7.发酵温度依据工艺请求而定,经由过程调节轮回水的温度来掌握发酵温度,当情形温度高于发酵温度时,需用冷水降温.

8.溶氧量的大小重要经由过程调节进气量来实现.

9.pH的调节是由掌握体系经由过程履行机构（蠕动泵）主动加碱来实现.

10.泡沫报警是由泡沫探头探测到泡沫液位旌旗灯号在触摸屏上以指导灯的情势来实现.

11.在发酵半途要取样检讨时,可经由过程取样口取样.取样前,取样管路阀门需用蒸汽灭菌,防止杂菌污染而引起误导,取样停滞后同样要用蒸汽冲洗取样管道阀门.

五.出料

1.本装备的出料是应用罐压将发酵液从出料管道排出,依据发酵液的浓度,罐压可掌握在0.05～0.1Mpa.

2.出料后掏出溶氧.pH电极,进行清洗保养.

3.出料停滞后,应连忙放水清洗发酵罐及料路管道阀门,并开动空压机,向发酵罐供气搅拌,将管路中的发酵液冲洗清洁.

六.发酵罐的维修与保养

1.安顿装备的情形应整洁.湿润.通风优越,水.汽不得直接泼到电器上.

2.装备启用之后,必须实时清洗,防止发酵液干结在发酵罐及管路.阀门内.

3.消融溶氧.pH探头.内心,应按划定请求保养存放,压力表.安然阀.温度

仪每年应校准一次.

4.装备停滞应用时应清洗.吹干.过滤器的滤芯应掏出清洗.凉干,妥当保管,法兰压紧螺母应松开,防止密封圈永远变形.