全自动染色体分析系统标准操作程序.docx
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全自动染色体分析系统标准操作程序
全自动染色体分析系统标准操作程序
一.目的:
染色体分析系统是外周血、羊水细胞、绒毛组织的染色体进行阅读的基本条件。
二.使用范围:
外周血、羊水细胞和绒毛组织的染色体的阅读。
三.原理:
外周血、羊水细胞、绒毛组织的阅读条件要求极高。
要求具有高清晰的分辨率。
将干燥固定后的外周血染色体、羊水染色体、绒毛组织染色体在体外经吉姆萨等试剂染色后,制成的染色体标本,最后由染色体分析系统进行分类、分析和结果保存。
四、标准操作程序
(一)开始
1、不可移动相机方向,不可卸下物镜,不可更改聚光镜位置,如以下硬件方向及位置意外更改,系统必须重新校正!
2、开启显微镜电源(白色电源),开启显微镜开关(显微镜左下方的开关),开启电脑,L左键单击桌面上Metafer4捷径。
3、以下安全步骤必须在每次进行扫描前执行!
先转换到一个空的物镜位置,把一个玻片架放到载物台上,插入样本玻片到第一个玻片位置,在Metafer中,L左键单击第一个玻片位置,左键单击Stage–MovetoFocusPlane命令,手动转换到20x物镜位置(请不要使用自动物镜转换功能转换物镜以防止物镜与玻片发生碰撞),在软件的实时窗口中进行对焦,左键单击OK确认。
(二)MSearch–低倍寻找中期
1、全自动方法设定扫描
左键单击Setup,左键单击在Frame旁边的▲/▼按钮选择玻片架,左键单击No下的玻片位置编号(或X–代表激活在该玻片架上的所有位置),输入扫描设定:
Name,Mode,Classifier,SearchWindow。
自动低倍寻找中期+自动高倍采图:
Mode选MSearchTL;Classifier选LY-Auto;Sensitivity选6或以上;SearchWindow选WholeSlide。
左键单击OK按钮储存设定,左键单击Search按钮,在实时窗口中对焦样本.左键单击OK按钮确认对焦位置。
2、半自动方法设定扫描
左键单击Setup,左键单击在Frame旁边的▲/▼按钮选择玻片架,左键单击No下的玻片位置编号(或X–代表激活在该玻片架上的所有位置),输入扫描设定:
Name,Mode,Classifier,SearchWindow。
自动低倍寻找中期+自动高倍采图:
Mode选MSearchTL;Classifier选LY;Sensitivity选6或以上;SearchWindow选WholeSlide。
左键单击OK按钮储存设定;左键单击Search按钮;在实时窗口中对焦样本;左键单击OK按钮确认对焦位置。
(三)、选择要执行高倍采集的细胞
左键双击玻片位置打开低倍扫描数据(如沒有转换样本的位置),或右键单击玻片位置打开低倍扫描数据(如已转换样本的位置),左键单击Gallery按钮,左键单击MarkCell按钮(绿色勾按钮),左键单击要执行高倍采集的细胞,左键单击Close按钮关闭Gallery。
设定扫描:
左键单击Setup,左键单击在Frame旁边的▲/▼按钮选择玻片架左键单击No下的玻片位置编号(或X–代表激活在该玻片架上的所有位置),输入扫描设定:
Mode,Classifier高倍采图:
Mode选AutoCapt;Classifier选CaptMetaTL。
左键单击OK按钮储存设定,在玻片上手动加上镜油,L击Search按钮,在实时窗口中对焦样本,左键单击OK按钮确认对焦位置。
(四)使用Ikaros手动补拍中期细胞
方法一(需开启Metafer)
在Metafer中左键单击玻片位置打开低倍扫描数据(如沒有转换样本的位置),或R-玻片位置打开低倍扫描数据(如已转换样本的位置),在Metafer中左键单击Ikaros按钮打开Ikaros,在Ikaros中选择要补拍的中期图像,右键单击图像编号,左键单击重定位当前细胞命令,左键单击图像采集命令,按[F]激活对焦工具,在实时窗口中慢慢为中期细胞进行对焦,按[Enter]进行采图。
方法二(需开启MMC及Ikaros不需开启Metafer)
开启MMC,开启Ikaros,在Ikaros打开要重拍或补拍的中期细胞把显示在细胞下的MetaferRelative坐标分別输入到MMC中的TargetXY位置,然后左键单击Move进行细胞重定位(UseRelativeCoordinates?
选项必须勾上)。
(五)使用Ikaros进行核型分析
开启Ikaros,左键双击桌面上Ikaros捷径
1.寻找事件:
左键双击事件名域,在目录中左键双击要打开的事件名.
2.寻找中期图像:
在中期图像版面中左键双击图像编号域,在目录中左键双击要打开的中期图。
3寻找核型图像,在核型图像版面中左键双击图像编号域,在目录中左键双击要打开的核型图。
4.中期图像处理:
左键单击屏敝中期按钮屏敝,连续左键单击定义感兴趣区域,右键单击确认感兴趣区域,左键单击对象阈值按钮,向右移动鼠标(減少阈值)或向左移动鼠标(增加阈值),右键单击确认阈值设定,按[M放大中期,按[N]平均化信号,按[F5]增強带型。
5.分隔染色体:
左键单击分隔按钮,按[A]进行自动分隔功能,左键单击在轻微触撞的染色体上进行分隔,连续左键单击画分隔线,左键单击在重叠的(90°)染色体上进行分隔。
左键双击在染色体簇上开启动分离簇功能.左键单击在第一条染色体上塗第一条染色体的范围(按[+]放大工具;按[-]收小工具).右键单击确认范围.左键单击在第二条染色体上塗第二条染色体的范围...直至完成所有染色体.再次右键单击退出功能,左键单击对象校对按钮检查是否完成所有分隔对象校对(在对象校对中也可进行分隔功能)。
6.核型分析:
左键单击右上角的核型表,左键单击染色体选择染色体,左键单击染色体类別编号可插入染色体,左键单击第一条染色体再左键单击第二条染色体可交换位置,左键单击染色体旋转180°,同时按[Shift]+L击染色体旋转90°,中健单击染色体旋转X°,左键双击染色体上下移动染色体位置,向右移动鼠标(向上)或向左移动鼠标(向下).右键单击确认位置。
7.插入表意:
左键单击插入表意按钮,按[A]插入所有表意(按[刪除]刪除所有表意),或左键单击在染色体类別上插入个別表意,右键单击退出插入表意功能。
8.病人资料:
右键单击事件名域,左键单击事件数据命令,输入病人资料,左键单击关闭按钮储存更改.
9.样本接收:
左键单击MetaClient上的新增事件按钮,输入新建6人事件名,选择目录及要执行的行动,左键单击OK,打开事件数据输入病人资料,重复步骤1-4输入其他样本.
10.打印当天输入的样本接收单:
左键单击详细页,在时期位置中选择From–To,左键单击在From旁的▼按钮,然后左键单击Today.按[Ctrl]+[A]键盘键选择所有,左键单击(打印机图标)按钮,在Report中选择合适的报告格式,AF-receive=羊水样本接收报告,ALL-receive=所有样本接收报告,CB-receive=脐血样本接收报告,LY-receive=外周血样本接收报告,左键单击OK打印.
11.打印非当天输入的样本接收单:
左键单击详细页,在时期位置中选择Any,在过滤位置中选择送检时间,在值位置中输入要搜索的日期(日期格式必须统一为:
YYYY/MM/DD),按[Ctrl]+[A]键盘键选择所有,左键单击(打印机图标)按钮,在Report中选择合适的报告格式,AF-receive=羊水样本接收报告,ALL-receive=所有样本接收报告,CB-receive=脐血样本接收报告,LY-receive=外周血样本接收报告,左键单击OK打印.
12.打印样本月结单:
左键单击详细页,在时期位置中选择Any,在过滤位置中选择送检时间,在值位置中输入要搜索的日期(日期格式必须统一为:
YYYY/MM*),按[Ctrl]+[A]键盘键选择所有,左键单击(打印机图标)按钮,在Report中选择合适的报告格式,AF-result=羊水样本结果报告,ALL-result=所有样本结果报告,CB-result=脐血样本结果报告,LY-result=外周血样本结果报告,左键单击OK打印.
13.统计核型/阳性率:
左键单击统计统计统计统计页,在查询位置中选择要进行的统计,左键单击执行,在窗口位置中输入要搜索的日期(日期格式必须统一为:
YYYY/MM*),左键单击OK.
14.关闭系统:
关闭软件,关闭电脑,关闭显微镜电源.