EdU检测细胞增殖.pdf
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广州市锐博生物科技有限公司发表于：
2009-11-0216:
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广州市锐博生物科技有限公司细胞增殖检测新技术细胞增殖检测新技术EdU取代取代BrdU直接测定DNA合成是细胞增殖检测的最准确方法之一，是测定物质毒性、评估药物安全评价、细胞健康的基本方法，其中以前常用的方式是利用胸腺嘧啶核苷酸类似物BrdU进行检测。
因为在细胞周期的S期，和细胞一起孵育的BrdU能渗入DNA分子中，再结合BrdU抗体与渗入DNA的BrdU特异性结合，就能够检测到DNA复制活跃的细胞。
但BrdU有一大缺点，就是需要变性DNA后才能与抗体结合，但这就破坏了DNA双链结构，影响了其他染料的结合染色，导致染色弥散，准确性降低等问题。
哈佛大学医学院细胞生物学家AdrianSalic就认为：
“为了能够暴露BrdU的抗原表位，必须用高浓度的盐酸，乙酸或酶解，但经历了如此严重的处理后，细胞原本精巧细致的结构在显微镜下就变得惨不忍睹了。
”事实上，现在有一种新的检测方法能避免这种情况的发生EdU检测。
EdU（5-乙炔基-2脱氧尿嘧啶核苷）也是一种胸腺嘧啶核苷类似物，但其连有的炔羟基团在天然化合物中很少见，在细胞增殖时能够插入正在复制的DNA分子中，基于EdU与染料的共轭反应可以进行高效快速的细胞增殖检测分析，可以有效地检测处于S期的细胞百分数。
与传统的免疫荧光染色（BrdU）检测方法相比，更简单，更快速，更准确。
EdU只有BrdU抗体大小的1/500，在细胞内更容易扩散，不需要严格的样品变性（酸解、热解、酶解）处理，有效地避免了样品损伤，有助于在组织、器官的整体水平上观测细胞增殖的真实情况，具有更高的灵敏度和更快的检测速度。
AdrianSalic特别强调：
“与传统的免疫荧光染色不同，EdU反应能在几分钟内完成，且不需要进行严格的样品变性处理，使得组织成像更简单易行。
”细胞增殖检测方法基于EdU与Apollo？
荧光染料的完美结合准确检测新合成的DNA，简单，快速，准确。
这种检测方法非常快速，且只需简单的几个步骤，因此也适用于高通量筛选试验，如在药物筛选中检测加药后细胞的活力。
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细胞增殖检测EdUBrdU图1BrdU与EdU检测原理示意图表1BrdU与EdU检测优缺点比较图2BrdU需要DNA变性后才能与抗体结合，导致BrdU、Hoechst染色弥散，边缘模糊不清；而EdU边缘清晰完整，检测更灵敏、更准确EdU可以检测新合成的DNA，而EU则可以检测新合成的RNA。
EU是一种尿嘧啶核苷类似物，能够在RNA转录时期代替尿嘧啶（U）渗入正在合成的RNA分子，基于EU与Apollo？
荧光染料的特异性反应进行RNA检测。
EU能够在体内和体外水平检测时间和空间上RNA合成的变化，能够更方便地研究RNA转录位点，结合相关抗体标记能够检测与RNA有相互作用的蛋白。
结合EdU和EU进行检测新合成的DNA和新合成的RNA，可以深入开展细胞增殖、细胞周期、细胞毒性、DNA复制及修复、信号通路等方面的研究。
目前EdU和EU检测试剂盒已经由广州市锐博生物科技有限公司成功实现商品化，详情咨询请联系：
广州市锐博生物科技有限公司；电话：
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