一例犬金黄色葡萄球菌病的诊断及药敏试验.pdf
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中国畜牧兽医2O1O年第37卷第9期兽医临床225一例犬金黄色葡萄球菌病的诊断及药敏试验赵永达。
黄显会(华南农业大学兽医学院兽医药理实验室,广州510642)中图分类号:
$858292文献标识码:
B文章编号:
1671-7236(2010)09022502金黄色葡萄球菌是引起化脓性感染的重要致病菌,广泛分布于自然界中。
2009年12月,一只宠物犬因腿部被咬伤,发生脓性感染。
采集宠物犬咬伤肿胀关节处脓液进行病原分离鉴定,分离的细菌为革兰氏阳性,单个、成对或成堆排列的球菌,生化试验鉴定为金黄色葡萄球菌。
通过药敏试验筛选出敏感药物,为金黄色葡萄球菌病的治疗提供科学依据。
1临床症状病犬主要表现为精神委顿,食欲减退,腿部关节肿胀,步态不稳,摇摆转圈,喜卧,皮肤触摸有粗糙感,局部有皮痂。
2实验室诊断21材料与方法211主要仪器设备生化培养箱、CO培养箱、收稿日期:
20100330普通显微镜、干烤箱、自动灭菌器、酒精灯、接种环、载玻片等。
212试剂血平板、麦康凯琼脂、MH琼脂、普通肉汤培养基、葡萄球菌生化鉴定管(TH一16S)、药敏试纸均购自杭州天和微生物试剂有限公司。
本试验所选药敏试纸共20种:
舒普深、利福平、万古霉素、甲氧苄啶、安灭菌、特美汀、氧氟沙星、强力霉素、氟哌酸、痢特灵、萘啶酸、氨苄青霉素、红霉素、克林霉素、罗红霉素、庆大霉素、头孢吡肟、四环素、阿奇霉素、环丙沙星。
3过氧化氢自制。
22细菌的分离培养按无菌操作要求,用接种环采取肿胀关节处脓液,划线接种到血平板,置37。
C培养24h;然后从培养好的血平板上挑取2个明显的单菌落接人装有5mL营养肉汤的试管中培养,18h后用革兰氏染色镜检。
EJ药物生物技术,2001a,8(3):
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641649HeterologousTransfusionofDogbyPolymerizedHemoglobinofPigJIAXinglin,CHENLinjing,DINGWei,YANGFeng,ZHAOJun(HunanAgriculturalUniversityVeterinaryFaculty,Changsha410128,China)Abstract:
TheobjectiveofthispaperwastostudytheeffectofthepighemoglobinassubstituteThehemoglobinwasextractedfromthepigSbloodandpolymerizedbyPEGandpurifiedbycentrifuged,thentransferredtOdogsBoththeclinicalindicatorsandbloodandurineindexweredetectedcontinuouslybeforeandaftertransfusionThedoghadntoccurredcoagulationandhemolyticreactionItshowedthathemoglobinpolymerizationcouldexistinthedogSbloodfor7daysbydetectingUrineTherewerenoadverseclinicaIreactionsoccuraftersecondtransfusionThepolymerizationofhemoglobinwillbebelierprospectsforclinicalapplicationinbloodsubstitutesKeywords:
polymerizedhemoglobin;dog;heterologoustransfusion;bloodsubstitute226兽医临床中国畜牧兽医2010年第37卷第9期23生化鉴定生化鉴定管试验:
挑取分离株纯培养物接种于精氨酸水解酶、磷酸酶、果糖、半乳糖等生化管内,37培养,12h后观察结果,随后持续观察1周。
凝固酶试验:
取未稀释的兔血浆及生理盐水各1滴,分别放于玻片上,挑取待检菌株的单个菌落,分别混于血浆和生理盐水中,立即观察结果。
如果与血浆混合后凝集成块,而与对照生理盐水混合后没有任何变化者,则判断为阳性。
过氧化氢酶试验:
将一待检菌落置于干净的玻片上,把浓度为3的过氧化氢滴到菌落上,如有气泡产生者则为阳性。
24药敏试验药敏试验按KB纸片扩散法操作,将分离纯化后的菌株经普通肉汤培养后,稀释至标准麦氏比浊管,用灭菌棉签蘸取稀释过的菌液,在普通琼脂平板上均匀涂布,盖上平板,置室温数分钟至培养基表面无明显液体,用无菌小镊子夹取药敏纸片平贴于琼脂平板表面,然后倒置于3恒温箱培养24h,测量抑菌环直径。
3结果与分析31细菌形态特征分离菌在血平板上均形成一致的金黄色,圆形,直径约为15mrn的菌落;油镜下观察到的细菌均为葡萄串状,也有少量单个或成对存在的革兰氏阳性球菌(图1)。
图1分离菌株菌落形态32生化鉴定结果生化鉴定结果见表l。
由表1可知,该分离菌为金黄色葡萄球菌。
表1细菌生化鉴定结果注:
+表示阳性,其中糖类均产酸不产气;一表示阴性,其中糖类不产酸不产气。
33药敏试验结果药敏试验结果见表2。
根据CLSI(2009)对结果进行判定,该菌株对舒普深、利福平、万古霉素、痢特灵、安灭菌、特美汀、氧氟沙星、强力霉素敏感;对氟哌酸、甲氧苄啶不敏感;对萘啶酸、氨苄青霉素、红霉素、环丙沙星、罗红霉素、庆大霉素、头孢吡肟、四环素、阿奇霉素、克林霉素具有耐药性。
表2药敏试验结果4讨论与小结从分离到的细菌菌落形态、细菌形态、生化鉴定结果来看,分离菌株为金黄色葡萄球菌。
根据药敏试验结果,建议使用舒普深或利福平来控制金黄色葡萄球菌病。
近年来,随着抗菌药物种类的不断增加及广泛应用,金黄色葡萄球菌的耐药性不断增加,给临床治疗造成了极大的困难。
本试验中金黄色葡萄球菌对萘啶酸、氨苄青霉素、氟哌酸、甲氧苄啶等十种药物有耐药性。
用药前应进行药敏试验,可避免抗生素的滥用,减少细菌耐药性的发生。
金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌,可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染。
日常生活中,人之间的接触或打喷嚏,被猫、狗咬伤等,都可感染金黄色葡萄球菌;此外,耐药菌可能通过食物、水源、毛发(尤其是猫、狗)和其他接触方式传递给人(于振清等,2006),给公共健康造成了严重威胁,因此,宠物动物携带的细菌及细菌的耐药性不容忽视。
宠物狗感染金黄色葡萄球菌的报道较少,而有研究结果表