药物分析实验指导.docx

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药物分析实验指导

药物分析实验指导

怀化学院化学化工系

药学教研室

二○一二年十二月

实验一氯化钠的杂质检查

实验二葡萄糖注射液的质量分析

实验三苯甲酸钠的含量测定

实验四阿司匹林片的分析

实验五异烟肼片的含量测定

实验六片剂的崩解度和脆碎度的检测

实验七蒸馏水的杂质检查

附录1~3药品检验操作标准原料药检验报告书

成品检验报告书

标准液配制及标定记录

实验一氯化钠的杂质检查

一、目的

1.了解药物杂质检查的意义。

2.掌握杂质检查的原理和方法。

3.掌握杂质限量的计算方法。

二、实验内容

1.酸碱度

取本品5.0g，加水50ml溶解后，加溴麝香草酚蓝指示液2滴。

如显黄色，加氢氧化钠液（0.02mol/L）0.10ml，应变为蓝色；如显蓝色或绿色，加盐酸液（0.02mol/L）0.2ml，应变为黄色。

2.溶液的澄清度

取本品5.0g，加水25ml溶解后，溶液应澄清。

3.碘化物

取本品的细粉5.0g，置瓷蒸发皿内，滴加新配制的淀粉混合液[取可溶性淀粉0.25g，加水2ml，搅匀，再加沸水至25ml，随加随搅拌，放冷，加硫酸液（0.025mol/L）2ml，亚硝酸钠试液3滴与水25ml，混匀]适量使晶粉湿润，置日光下（或日光灯下）观察，5分钟内晶粒不得显蓝色痕迹。

4.溴化物

取本品2.0g，加水10ml使溶解，加盐酸3滴与氯仿1ml，边振摇边滴加2％氯胺T溶液（临用新制）3滴，氯仿层如显色，与标准溴化钾溶液（精密称取在105℃干燥至恒重的溴化钾0.1485g，加水使溶解成100ml，摇匀）1.0ml用同一方法制成的对照液比较，不得更深。

5.硫酸盐

取本品5.0g，加水溶解成约40ml（溶液如显碱性，可滴加盐酸使成中性），溶液如不澄清，应滤过，置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸2ml，摇匀，即得供试溶液。

另取标准硫酸钾溶液1.0ml置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，加稀盐酸2ml摇匀，即得对照溶液。

于供试溶液与对照溶溶中，分别加入25％氯化钡溶液5ml，用水稀释使成50ml，充分摇匀，放置10分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较、供试品管浊度不得更浓。

6.钡盐

取本品4.0g，加水20ml，溶解后，滤过，滤液分为两等份，1份中加稀硫酸2ml，另一份中加水2ml，静置15分钟，两液应同样澄清。

7.钙盐

取本品2.0g，加水10ml使溶解，加氨试液1ml，摇匀，加草酸铵试液1ml，5分钟内不得发生浑浊。

8.镁盐

取本品1.0g，加水20ml使溶解，加氢氧化钠试液2.5ml与0.05％太坦黄溶液0.5ml，摇匀，产生的颜色与标准镁溶液（精密称取在800℃炽灼至恒重的氧化镁16.58mg，加盐酸2.5ml与水适量使溶解成1000ml，摇匀）1.0ml，用同一方法制成的对照液比较，不得更深。

9.钾盐

取本品5.0g，加水20ml溶解后，加稀醋酸2滴，加四苯硼钠溶液（取四苯硼钠1.5g，置乳钵中，加水10ml研磨后，再加水40ml，研匀，用质密的滤纸滤过，即得）2ml，加水使成50ml，如湿浑浊，与标准硫酸钾溶液12.3ml用同一方法制成的对照液比较，不得更浓。

10.干燥失重

取供试品，混合均匀（如为较大的结晶，应先迅速捣碎，使成2mm以下的小粒）。

分取约lg，平铺在130℃干燥至恒重的扁形称瓶中，厚度不超过5mm，精密称定。

将瓶盖取下，置称瓶旁，或将瓶盖半开，置烘箱内于130℃干燥约2～3小时后，将称瓶盖好，取出，置干燥器中放置40分钟后，精密称定重量。

再按上述方法自“将瓶盖取下……”起，继续干燥1～2小时，依法操作，至恒重为止。

从减失重量和取样量计算供试品的干燥失重（规定不得超过0.5％）。

11.铁盐

取本品5.0g，加水溶解成25ml，置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释成35ml后，加30％硫氰酸铵溶液3ml，再加水适量稀释成50ml，摇匀。

如显色，立即与标准铁溶液1.5ml用同一方法制成的对照液比较，不得更深。

12.重金属

取本品5.0g，加水20ml溶解后，置25ml纳氏比色管中，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml与水适量使成25ml，加硫代乙酰胺试液（临用前取5.0ml混合液，加4%硫代乙酰胺溶液1ml，水浴加热20秒，冷却，立即使用）2ml，摇匀，放置2分钟，置白纸上，自上向下透视。

如显色，立即与标准铅溶液1.0ml用同一方法的对照液比较，不得更深。

13.砷盐

仪器装置：

如图1，A为100ml标准磨口锥形瓶，B为中空的标准磨口塞，上连导气管C（外径8.0mm，内径6.0mm），全长约180mm。

D为具孔的有机玻璃旋塞，其上部为圆形平面，中央有一圆孔，孔径与导气管C的内径一致，其下部孔径与导气管C的外径相适应。

将导气管C的顶端导入旋塞下部孔内，并使管壁与旋塞的圆孔恰相吻合，粘合固定，E为中央具有圆孔（孔径6.0mm）的有机玻璃旋塞盖，与D紧密吻合。

测试时，于导气管C中装入醋酸铅棉花60mg（装管高度约60～80mm），再于旋塞D的顶端平面上放一片溴化汞试纸（试纸大小以能覆盖孔径而不露出平面外为宜），盖上旋塞E并旋紧，即得。

标准砷斑的制备：

精密量取标准砷溶液2ml，置A瓶中，加盐酸5ml与水21ml，再加碘化钾试液5ml与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10分钟后，加锌粒2g，立即照上法装妥的导气管C密塞于A瓶上，并将A瓶置25～40℃水浴中，反应45分钟后，取出溴化汞试纸，即得。

检查法，取本品5.0g，置A瓶中，加水23ml溶解后，加盐酸5ml，照标准砷斑的制备，自“加碘化钾试液5ml”起，依法操作，将生成的砷斑与标准砷斑比较，不得更深。

三、说明

药物杂质检查必须注意按规定的检查条件，严格遵守平行原则。

平行原则是指样品与标准必须在同一条件下进行反应与比较。

即应尽量选择容积、口径和色泽相同的比色管，在同一光源、同衬底上，以相同的方式（一般是自上而下）观察，所加入的试药种类、用量、加入顺序和反应时间等也应一致。

四、思考题

1.杂质检查的意义是什么?

2.药物中杂质来源主要有哪些途径?

什么是一般杂质?

什么是特殊杂质?

3.药物杂质检查应严格遵循什么原则?

实验二葡萄糖注射液的质量分析

一、目的

1.掌握葡萄糖注射液杂质检查的原理和方法。

2.掌握杂质限量的计算方法。

二、实验内容

本品为葡萄糖或无水葡萄糖的灭菌水溶液。

含葡萄糖（C6H12O6.H2O）应为标示量的95.0％～105.0％。

1、性状本品为无色或几乎无色的澄明液体；味甜。

2、鉴别取本品，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀。

3、检查pH值应为3.2～5.5（附录ⅥH）。

5-羟甲基糠醛精密量取本品适量（约相当于葡萄糖1.0g），置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（附录ⅣA），在284nm的波长处测定，吸收度不得大于0.32。

重金属取本品适量（约相当于葡萄糖3g），必要时，蒸发至约20ml，放冷，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml与水适量使成25ml，依法检查（附录ⅧH第一法），按葡萄糖含量计算，含重金属不得过百万分之五。

不溶性微粒取装量为100ml或100ml以上的本品1瓶，依法检查（附录ⅨC）,应符合规定。

细菌内毒素取本品，依法检查（附录ⅪE），每1ml中含内毒素量应小于0.5EU。

其他应符合注射剂项下有关的各项规定（附录ⅠB）。

4、含量测定

精密量取本品适量（约相当于葡萄糖75mg），置碘量瓶中，加水稀释至5ml，加含碳酸钠14.3%及碘化钾4.0%的缓冲液25ml，再精密加入0.05mol/L碘滴定液25ml，密塞，在20℃下

暗处准确放置30min后，加2mol/L盐酸35ml，并立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液进行滴定，至终点时，加淀粉指示剂，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。

每1ml碘滴定液（0.05mol/L）相当于9.008mg的无水葡萄糖（C6H12O6）或相当于9.909mg的葡萄糖（C6H12O6·H2O）.

实验三苯甲酸钠的含量测定

一、目的

掌握双相滴定法测定苯甲酸钠含量的原理和操作

二、操作

取本品1.5g，精密称定，置分液漏斗中，加水约25ml，乙醚50ml与甲基橙指示液2滴，用盐酸滴定液（0.5mol/L）滴定，随滴随振摇，至水层显持续橙红色，分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水5ml洗涤，洗涤液并入锥形瓶中，加乙醚20ml，继续用盐酸滴定液（0.5mol/L）滴定，随滴随振摇，至水层显持续橙红色，即得，每1ml的盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于72.06mg的C7H5O2Na。

本品按干燥品计算，含C7H5O2Na不得少于99.0％

三、说明

1.苯甲酸钠为有机酸的碱金属盐，显碱性，可用盐酸标准液滴定。

在水溶液中滴定时，由于碱性较弱（Pkb=9.80）突跃不明显，故加入与水不相溶混的溶剂乙醚提除反应生成物苯甲酸，使反应定量完成，同时也避免了苯甲酸在瓶中析出影响终点的观察。

2.滴定时应充分振摇，使生成的苯甲酸转入乙醚层。

3.在振摇和分取水层时，应避免样品的损失，滴定前，应用乙醚检查分液漏斗是否严密。

四、思考题

1.乙醚为什么要分两次加入?

第一次滴定至水层显持续橙红色时，是否已达终点?

为什么?

2.分取水层后乙醚层用5ml水洗涤的目的是什么?

实验四阿司匹林片的分析

一、目的

1.掌握片剂分析的特点及赋形剂的干扰与排除方法。

2.掌握阿司匹林片鉴别、检查、含量测定的原理及方法。

二、操作

（一）鉴别

1.取本品的细粉适量（约相当于阿司匹林0.1g），加水10ml煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。

2.取本品的细粉（约相当于阿司匹林0.5g），加碳酸钠试液10ml，振摇后，放置5分钟，滤过，滤液煮沸2分钟，放冷，加过量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并发生醋酸的臭气。

（二）检查

1、游离水杨酸

取本品的细粉适量（约相当于阿司匹林0.1g），加无水氯仿3ml，不断搅拌2分钟，用无水氯仿湿润的滤纸滤过，滤渣用无水氯仿洗涤2次，每次1ml，合并滤液与洗液，在室温下通风挥发至干；残渣用无水乙醇4ml溶解后，移至100ml量瓶中，用少量5％乙醇洗涤容器、洗液并入量瓶中，加5％乙醇稀释至刻度，摇匀，分取50ml，立即加新制的稀硫酸铁铵溶液[取盐酸液（1mol/L）1ml，加硫酸铁铵指示液2ml后，再加水适量使成100ml]1ml，摇匀；30秒钟内如显色，与对照液（精密称取水杨酸0.1g，置1000ml量瓶中，加冰醋酸1ml，摇匀，再加水适量至刻度，摇匀，精密量取1.5ml，加无水乙醇2ml与5％乙醇使成50ml，再加上述新制的稀硫酸铁铵溶液1ml，摇匀）比较，不得更深。

2、溶出度

取本品1片，照溶出度测定法第一法（2000年药典二部附录），以稀盐酸24ml加水至1000ml为溶剂，转蓝转速为每分钟100±5转，依法操作，经30分钟时，取溶液10ml滤过，精密量取续滤液3ml置50ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠液5ml，置水浴中煮沸5分钟，放冷，加硫酸液2.5ml；并加水稀释至刻度，摇匀。

照分光光度法，在303nm的波长处测定吸收度，按C7H6O3的吸收系数E

）为265计算，再乘以1.304，计算出每片的溶出量；不得少于标示量的80％。

其他应符合片剂项下有关的各项规定（2000年中国药典二部）。

（三）含量测定

取本品10片，精密称定，研细，精密称出适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，振摇，使阿司匹林溶解，加酚酞指示