国家自然科学基金预算模板.docx
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(三)资金预算说明
购置单项经费5万元以上固定资产及设备等,须逐项说明与项目研究的直接相关性及必要性。
1、设备费
由于本单位已经具备良好的科研条件,本课题预算内无价值5万元以上的大型设备费用,也无需购置价值5万元以下小型仪器设备,仅需要升级现有的显微镜,增加显微成像系统:
2.5万元。
厂家:
Olympus,型号:
U-TOV.5XC。
2、材料费
主要用于购买:
各类试剂盒;各种抗体;细胞培养耗材,常规生物化学及分子生物学试剂及耗材。
共计39万元(详见下表)。
动物肿瘤模型的构建与饲养共计8万元。
总计47万元。
(1)各类试剂盒,如对细胞迁移侵袭能力检测的试剂盒,检测细胞活力的试剂盒,以及进行DNA,RNA提取和下游靶基因检测的各种试剂盒。
具体明细如下,合计约6.67万元。
序号
材料名称
计量
单位
单价(元)
购置
数量
金额
(万元)
1
反转录试剂盒(Toyobo)
盒
1500
5
0.75
2
荧光定量PCR试剂盒(Toyobo)
盒
1200
5
0.6
3
细胞转染试剂盒(Fermentas)
支
1400
5
0.7
4
RNA干扰试剂盒(Fermentas)
盒
2600
2
0.52
5
质粒小提试剂盒(Omega)
盒
600
8
0.48
质粒中量提取试剂盒(GE)
盒
3500
2
0.75
6
质粒大量提取试剂盒(10次GE)
盒
3000
1
0.3
7
报告基因检测试剂盒(Promega)
盒
6500
1
0.65
8
DNA纯化试剂盒(Promega)
盒
1000
5
0.5
9
免疫荧光试剂盒(Invitrogen)
盒
2500
1
0.25
10
免疫组化试剂盒(Milipore)
盒
2000
2
0.4
11
MTT活力检测试剂盒(Sangon)
盒
1000
1
0.1
12
trans-well试剂盒(Milipore)
盒
3200
1
0.32
13
EMSA试剂盒(Milipore)
盒
3500
1
0.35
合计
6.67
(2)各种抗体,应用于免疫印迹分析,免疫组织/细胞化学染色、免疫共沉淀等,主要为检测蛋白表达、蛋白在组织或细胞内的定位,及研究蛋白间相互作用。
具体明细如下,合计约9.54万元。
序号
材料名称
计量
单位
单价
(元)
购置
数量
金额
(万元)
1
OVOL2抗体(Sigma)
支
3000
4
1.2
2
Smad4抗体(Abcam)
支
3000
4
1.2
3
Smad7抗体(Up-state)
支
2800
1
0.28
4
Smad2抗体(Up-state)
支
2800
1
0.28
5
Smad3抗体(Up-state)
支
2800
1
0.28
6
E-cadherin抗体(Abcam)
支
2800
1
0.28
7
Vimentin抗体(R&D)
支
2800
1
0.28
8
N-cadherin抗体(Milipore)
支
2800
1
0.28
9
Fibronectin抗体(Milipore)
支
2800
1
0.28
10
HA抗体(Sigma)
支
3500
2
0.7
11
Flag抗体(Sigma)
支
3500
2
0.7
12
Myc抗体(Sigma)
支
3500
2
0.7
13
ZEB1抗体(SantaCruz)
支
2000
1
0.2
14
ZEB2抗体(SantaCruz)
支
2000
1
0.2
15
Twist1抗体(SantaCruz)
支
2000
1
0.2
16
Twist2抗体(SantaCruz)
支
2000
1
0.2
17
Snail抗体(SantaCruz)
支
2000
1
0.2
Slug抗体(SantaCruz)
支
2000
1
0.2
P300抗体(SantaCruz)
支
2000
1
0.2
TβRI抗体(Milipore)
支
2800
1
0.28
磷酸化TβRI抗体(Milipore)
支
3200
1
0.32
Smurf1抗体(Milipore)
支
2800
1
0.28
β-actin抗体(SantaCruz)
支
2000
2
0.4
酶标二抗(SantaCruz)
支
2000
1
0.2
荧光二抗(SantaCruz)
支
2000
1
0.2
合计
9.54
(3)细胞培养耗材,如各种细胞培养基、胎牛血清、特殊细胞培养用细胞因子及细胞培养皿、细胞培养板、细胞冻存管等。
具体明细如下,合计约11.35万元。
序号
材料名称
计量
单位
单价(元)
购置
数量
金额
(万元)
RPMI1640(Gibco)
盒
200
20
0.4
3
DMEM(Gibco)
盒
200
30
0.6
4
F12K培养基(Gibco)
瓶
250
10
0.25
5
新生牛血清(国产-四季青)
瓶
150
20
0.3
6
胎牛血清(Gibco)
瓶
2000
10
2
7
谷氨酰胺Glutamax(Gibco)
瓶
300
10
0.3
8
青链霉素(Gibco)
瓶
200
10
0.2
9
非必需氨基酸(Gibco)
瓶
200
10
0.2
10
丙酮酸钠(Gibco)
瓶
200
10
0.2
12
TGFβ1蛋白(Gibco)
支
3000
4
1.2
13
35mm细胞培养皿(Corning)
箱
1000
5
0.5
15
60mm细胞培养皿(Corning)
箱
800
10
0.8
16
100mm细胞培养皿(Corning)
箱
1000
15
1.5
17
96孔细胞培养板(Corning)
箱
1200
5
0.6
18
24孔细胞培养板(Corning)
箱
1000
10
1
19
6孔细胞培养板(Corning)
箱
800
15
1.2
20
2ml冻存管(Corning)
箱
1000
1
0.1
合计
11.35
(4)常规生物化学及分子生物学试剂及耗材,包括各类低值生化试剂、化学药品和实验室常用耗材等。
具体明细如下,合计11.44万元。
序号
材料名称
计量
单位
单价(元)
购置
数量
金额
(万元)
胰蛋白胨(OXOID)
瓶
280
4
0.112
酵母粉(OXOID)
150
2
0.03
1
GST凝胶4B(GE)
瓶
2400
2
0.48
2
ProteinA/GAgarose(GE)
瓶
3500
4
1.4
3
DNALadder(Fermentas)
支
180
10
0.18
4
蛋白Marker(Fermentas)
支
450
10
0.45
5
DNA限制性内切酶(Fermentas)
支
120
10
0.12
6
高保真DNA聚合酶(Promega)
支
1500
8
1.2
7
TaqDNA聚合酶(Takara)
支
500
16
0.8
8
蛋白酶抑制剂混合物(Roche)
盒
3000
4
1.2
9
胰蛋白酶(Gibco)
瓶
350
10
0.35
Puromycine(Sigma)
支
1200
1
0.12
G418(Milipore)
支
1200
1
0.12
11
SB431542(sigma)
支
1000
2
0.2
Trizol-RNA提取试剂(200ml)
瓶
1800
2
0.36
胶片(8x10,100张)
盒
300
2
0.06
ECL化学发光试剂(50ml,GE)
盒
600
4
0.24
一次性滤器(50个)
盒
300
4
0.12
PCR用薄壁管(Axygen)
盒
2300
8
1.84
12
WB用PVDF膜(Milipore)
卷
2000
4
0.8
13
15ml离心管(500个,Corning)
箱
600
2
0.12
14
50ml离心管(500个Corning)
箱
800
2
0.16
15
1ml移液枪头(500个)
包
16
20
0.032
16
200ul移液枪头(1000个)
包
15
50
0.075
17
10ul移液枪头(1000个)
包
14
50
0.07
18
1.5mlEP管(500个)
包
18
50
0.09
19
0.5mlEP管(1000个)
包
25
50
0.125
20
1mlRnasefree移液枪头(96个,Axygen)
盒
30
50
0.15
200ulRnasefree移液枪头(96个,Axygen)
盒
27
50
0.135
Rnasefree1.5mlEP管(500个,Axygen)
包
60
10
0.06
Rnasefree0.2mlPCR管(1000个,Axygen)
包
240
10
0.24
合计
11.44
(5)常位移植瘤裸鼠模型、转基因小鼠肿瘤模型的构建与饲养:
本课题研究的一个技术手段就是在动物水平研究乳腺癌侵袭转移表型。
课题研究任务中应用了常位小鼠模型、MMTV-PyVT小鼠模型、OVOL2转基因小鼠模型以及MMTV-PyVT/OVOL2双转基因小鼠模型等4个品系小鼠。
按照经验,这些小鼠的饲养、维持,每月的平均费用约2000元,保守按照40个月的周期计算,共需要
2000x40=8万元,
这只是保守预算,因为这还没包括转基因小鼠制作费用,原因是小鼠模型为课题组原先拥有。
3、测试化验加工费
①大量转基因与基因敲除小鼠标本和大量临床肿瘤标本的石蜡切片与冰冻切片的制作、染色费用,委托厦大医学院病理科完成。
②厦大生命科学院分析仪器中心独立核算,拥有大量大型仪器,如激光共聚焦扫描显微镜、超速离心机,并有专人操作,这些都是本实验所需要。
①实验中大量引物合成以及基因序列测定等。
以上各项合计4万元,详见下表
序号
材料名称
计量
单位
单价(元)
购置
数量
金额
(万元)
1
激光共聚焦扫描显微镜
小时
250
40
1
2
超速离心机
管
25
200
0.5
3
组织切片制作与染色
片
20
400
0.8
4
siRNAoligo合成
对
500
20
1
5
DNA序列测定
次
40
100
0.4
6
DNA引物合成
100bp
150
20
0.3
合计
4
4、燃料动力费
本课题专用的