血常规检查的方法与意义.docx
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血常规检查的方法与意义
血常规检查的方法与意义
（1）标本
用EDTA-K20.2ul抗凝静脉血1ml,
（2）试剂及仪器
血液细胞自动化分析仪
（3）操作
1）门诊：
a）收到血常规标本后，查看核对检验项目，立即编号，放混匀器上混匀3分钟。
b）如有血型立即用玻片法和试管法测定血型，输入电脑。
c）血标本检测，结果入库。
d）对于中间细胞比较多的应当手工涂片染色分类，对于血小板等图形不好或结果异常较大的应手工复查。
e）结果核对后，在半小时内报告。
2）病房：
a）采集血常规标本后，立即编号，试管加盖后放于专用试管架上放入HMX上自动混匀，
b）如有血型用玻片法和试管法测定血型，输入电脑。
c）血标本上机检测，结果入库。
d）对于分类图形不好的结果应当手工涂片染色分类，对于血小板等结果图形不好或结果异常较大的应手工复查。
（复查条件）
（4）项目
代号
中文名
单位
WBC
白细胞计数
×109/L
LY%（LY）
淋巴细胞分类
%
MO%
单核细胞分类
%
NE%（GR）
中性细胞分类
%
LY#
淋巴细胞计数
×109/L
MO#
单核细胞计数
×109/L
NE#
中性细胞计数
×109/L
RBC
红细胞计数
×1012/L
HGB
血红蛋白
g/L
HCT
红细胞压积
MCV
平均红细胞体积
fl
MCH
平均红细胞血红蛋白含量
pg
MCHC
平均红细胞血红蛋白浓度
g/L
RDW
红细胞分布宽度
PLT
血小板计数
×109/L
MPV
平均血小板体积
fl
PCT
血小板比积
%
PDW
血小板分布宽度
EO%
嗜酸性细胞分类
%
BO%
嗜碱性细胞分类
%
EO#
嗜酸性细胞计数
×109/L
BO#
嗜碱性细胞计数
×109/L
（5）特殊规定
在检验血常规时,科室所有工作人员及同志如发现以下样本结果过高可过低,务必作登记,复查和及时报告,以备查询。
1.血红蛋白低于100g/L.
2.白细胞低于3000/ul.
3.血小板低于8万/ul.
4.发现白细胞分类异常图形时.
5.发现其中一项过高时,或是临床指定要镜检时.
（6）临床意义
（6．1）WBC计数
参考范围
4-10×109/L
1、增加
（l）生理性：
初生儿、妊娠末期、分娩期、经期、饭后、剧烈运动后、冷水浴后及极度恐惧与疼痛等。
（2）病理性：
大部分化脓性细菌所引起的炎症、尿毒症、严重烧伤、传染性单核细胞增多症、传染性淋巴细胞增多症、急性出血、组织损伤、手术创伤后、白血病等。
2．减少
病毒感染、伤寒、副伤寒、黑热病、疟疾、再生障碍性贫血、极度严重感染、X线及镭照射、肿瘤化疗后、非白血性白血病等。
（6．2）白细胞分类计数
（6.2.1）染色液
1.瑞氏—姬姆萨复合染色液
I液
取瑞氏染粉lg、姬姆萨染粉1g，加入甲醇（分析纯），充分振摇，第二天加甘油10ml,混匀即能使用。
Ⅱ液
pH6．4—6．8磷酸盐缓冲液（或用H2O替代缓冲液）
磷酸二氢钾（无水）6．648磷酸氢二钠（无水）2．56g加少量蒸馏水溶解，用磷酸盐调整pH，加水至1000ml。
染色
置玻片于染色架上，滴加染液3—5滴，使其迅速盖满血膜，约1min后，滴加缓冲液5一10滴，轻轻摇动玻片或对准血片吹气，与染液充分混和，5一10min后用水冲去染液，待干。
或染色液盖满血片后半分钟即可水洗镜检。
2．快速染色液
I液:
磷酸二氢钾6．648
磷酸氢二钠2．56g
水溶性伊红Y4g（或伊红B2．5g）
蒸馏水1000ml
石炭酸40ml
煮沸，待冷备用。
Ⅱ液；
亚甲蓝4g
蒸馏水1000m1
高锰酸钾2．48g
煮沸，待冷备用。
染色
把干燥血片浸入快速染色液的I液中30s，水洗，再浸入Ⅱ液30s，水洗待干。
注：
本染色法除了能快速用于急症外，对玻片质量要求也不高。
随着染液多次使用，可适当延长染色时间或更换新液。
3．30s快速单一染色液
贮存液
瑞氏染粉2．0g
姬姆萨染粉0．68
天青E0．6g
甘油10．0ml
聚乙烯D比咯烷酮（PVP）20．0g
甲醇1000mI
磷酸盐缓冲液（pH6.2-6．8）
磷酸二氢钾6．648
磷酸氢二钠0．268
石炭酸4．0ml
蒸馏水加至1000mI
应用液
l液、2液按3：
1比例混合放置14天后备用。
染色
将染液铺满血膜或将血片浸入染色缸内，30s后用自来水冲洗。
注：
加表面活性剂PVP可增加染料的溶解度并起稳定作用，加入天青E可缩短染色时间。
（6.2.2）参考范围
LY:
18．7％-47％
LY#：
（1．0—3．3）×109／L
MO:
3．5％-7．9％
MO#：
（0．2—0．7）×109／L
GR:
46．0％一76．5％
GR#：
（1．8—6．4）×109／L
1．增多
（l）中性粒细胞：
急性化脓感染、粒细胞白血病、急性出血、溶血、手术后、尿毒症、酸中毒、急性汞中毒、急性铅中毒等。
（2）嗜酸性粒细胞：
变态反应、寄生虫病、某些皮肤病、某些血液病、手术后、烧伤等。
（3）嗜碱性粒细胞：
慢性粒细胞白血病、何杰金病、癌转移、铅及铋中毒等。
（4）淋巴细胞：
百日咳、传染性单核细胞增多症、慢性淋巴细胞白血病、麻疹、腮腺炎、结核、传染性肝炎等。
（5）单核细胞：
结核、伤寒、亚急性感染性心内膜炎、疟疾、黑热病、单核细胞白血病、急性传染病的恢复期等。
2．减少
（l）中性粒细胞：
伤寒、副伤寒、疟疾、流感、化学药物中毒、X线和镭照射、抗癌药物化疗、极度严重感染、再障、粒细胞缺乏等。
（2）嗜酸性粒细胞：
伤寒、副伤寒以及应用肾上腺皮质激素后。
（3）淋巴细胞：
多见于传染病急性期、放射病、细胞免疫缺陷等。
（6.3）常见的异常白细胞形态的变化
在外周血象中，除了各类白血病幼稚细胞外，通常能见到一些细胞形态上的异常变化。
（6.3.1）中性粒细胞
1．核象变化：
反映中性粒细胞的成熟程度。
正常血象中有少量杆状核细胞出现，它与分叶核细胞之间的比值约占1：
13。
（1）核左移：
是指杆状核细胞增多，常见于感染。
如晚幼粒、中幼粒等细胞增多为核象极度左移，多见于类白血病反应或白血病。
①伴白细胞总数增高的核左移：
称再生性左移，常见于急性化脓性感染，如大叶性肺炎等。
②白细胞总数不增加或减低的核左移：
称退行性左移，常见于严重感染、机体抵抗力低下时，如伤寒、伴感染中毒性休克的败血症等。
（2）核右移：
是指不仅分叶核粒细胞增多，且分叶过多，常见4叶、5叶（正常时多分3叶），这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现。
常见于营养性巨幼细胞性贫血和使用抗代谢药物后。
此外，在疾病进行期突然出现核象右移，表示预后不良。
2.毒性变化：
严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等症时，中性粒细胞可出现形态变异。
（l）细胞大小不均：
为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。
（2）毒性颗粒：
胞浆中部分或全部颗粒变粗，着色深，颗粒的分布及大小不等。
可能为中性颗粒成熟过程中发生变性所致。
（3）空泡：
可在胞浆或核中出现，常为多个，被认为是细胞脂肪变性后未能着色所致。
（4）Dohle体：
脑浆内出现嗜碱性点、线、梨形或云雾状物质，可能为核浆发育不平衡所致，为细胞严重毒性变的表现。
（5）核棘突：
胞核有各种形态的芽状突出，临床意义尚不明确，可能与中毒、癌转移、严重放射损伤等有关。
3.退行性变：
表现为胞体肿大，结构模糊，边缘不清。
胞核可呈固缩、肿胀、破碎、溶解等变化，退行变可以是细胞衰老死亡的表现。
（6.3.2）淋巴细胞
淋巴细胞形态变异在多种疾病如各种病毒感染、传染性单核细胞增多症最为常见。
此外，疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等亦可见，统称为异型淋巴细胞。
传染性单核细胞增多症患者血液中常可出现3种异型淋巴细胞，即空泡型、不规则型和幼稚型。
（6.4）血红蛋白
[参考值]
男:
120-160g/L
女:
110-150g/L
（6.5）红细胞分布宽度
RDW为反映红细胞体积异质性的参数，常以所测得红细胞体积大小的变异系数（CV％）来表示。
它比血涂片上红细胞形态大小不均的观察更为客观、准确。
RDW增大时有临床意义。
（l）用于缺铁性贫血（IDA）的诊断与疗效观察：
缺铁性贫血时RDW增大，尤其是MCV尚处于参考值范围时（缺铁性贫血时MCV应下降）RDW增大更是早期缺铁的指征；MCV减小时，RDW增大更为显著，当给予铁剂治疗有效时，RDW将比给药前更大，以后逐渐降至正常水平。
产生这种现象的原因，主要是因补铁后产生网织红细胞，及正常红细胞生成并释放人血与给药前的小红细胞并存，故RDW先增大，随着正常红细胞的增多和小红细胞的减少，RDW便逐渐降至参考范围。
（2）用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊断：
IDA和轻型地中海性贫血时，MCV均可减小。
但IDA时RDW增大，而轻型地中海性贫血时RDW正常。
（3）用于贫血的分类（Bessman分类法）：
MCV只能反映红细胞平均体积的大小，不能代表红细胞体积大小的异质性，对红细胞体积大小的评价，过去靠血涂片上红细胞形态的观察，这种观察常受血涂片制作以及观察者的主观因素的影响较大，而且不能定量，RDW能较好地反映红细胞体积的异质性，把MCV和RDW结合用于对贫血的分类将更为完善（表l—l—2）。
表l-1-2BessmanMCV／RDW贫血分类
类别
MCV
RDW
正常
→
→
缺铁性贫血
↓
↑
巨幼细胞性贫血
↑
↑
溶血性贫血
↑
↑
铁粒幼细胞贫血
→
↑
再生障碍性贫血
→
→
单纯小细胞性贫血
↓
→
注：
→无变化;↑增大;↓减少
（6.6）平均血小板体积
MPV的临床意义要结合PLT变化才有价值。
（1）鉴别血小板减少的原因：
①当骨髓造血功能损伤致血小板减少时，MPV减少；
②当血小板在周围血液中破坏增多时，导致血小板减少，MPV增大；
③血小板分布异常致血小板减少时，MPV正常。
（2）MPV增大可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征：
骨髓造血功能衰竭时，MPV与PLT同时持续下降；造血功能抑制越严重，功能恢复时，MPV增大常先于PI。
T升高。
MPV越小；当造血
（3）其他方面应用：
①MPV增大：
见于骨髓纤维化、原发性血小板减少性紫痰（ITP）、血栓性疾病及血栓前状态、脾切除、慢粒、巨大血小板综合征、镰刀细胞性贫血等。
②MPV减小：
见于脾亢、化疗后、再障、巨幼细胞性贫血等。
（6.7）.血小板比积（plateletcrit，PCT）
参考范围
男0．108％-0．272％
女0．114％一0．282％
PCT与PLT和MPV正相关，所以PLT、MPV的增减均可使PCT发生变化。
增高：
见于骨髓纤维化、脾切除、慢粒等。
减低：
见于再障、化疗后、血小板减少症等。
（6.8）血小板体积分布宽度（plateletvolumedistributionwidth，PDW）
参考范围
0．155-0．181（15．5％-18．1％）
（以血小板体积变异系数CV％表示）PDW是反映血小板体积大小的异质性参数。
增大：
急非淋化疗后、巨幼细胞性贫血、慢粒、脾切除、巨大血小板综合征、血栓性疾病等。
（6.9）血细胞体积分布直方图的应用
（l）红细胞体积分布直方图：
将MCV和RDW配合直方图分析，可直接观察红细胞体积的分布情况。
①只现一个峰：
见于正常人、缺铁性贫血（峰左移）、巨幼细胞性贫血（峰右移）。
②可现两个峰：
缺铁性贫血给予铁剂治疗有效时，可出现一个小红细胞峰和另一个正红细胞（或网织红细胞）峰。
巨幼（红）细胞性贫血给予叶酸、维生素Bl2治疗有效时亦可见两个峰。
（2）白细胞体积分布直方图：
静脉血比毛细管血白细胞数量略低。
中档的血细胞分析仪一般为三分群，它是根据加入溶血剂后，白细胞膜通透性改变而发生皱缩，不同类型的白细胞皱缩后体积有明显差别，每个皱缩白细胞通过血细胞分析仪的微孔时产生的脉冲信号经放大、甄别后，微机处理数据得到其体积分布直方图。
淋巴细胞群为35—90fI大小
中间细胞群为90一160fl大小
粒细胞群为160—450fI大小
三群细胞的百分比与白细胞数量的乘积为其绝对数
正常人白细胞体积分布直方图，可见两个明显分离的峰，左峰为小细胞群（淋巴细胞），右峰为大细胞群（粒细胞），两峰之间为中间细胞群的分布。
急性白血病时，由于异常的原始、幼稚细胞增多，可见中间细胞明显增高，这时直方图上见一个峰，峰值常在90一160fl之间。
这时必须推片染色镜检。
（3）血小板体积分布直方图：
正常人血小板体积主要分布在2—20fl之间，21—30fI之间有少量大血小板，一般仪器以30fI为最大的分析界标。
血小板体积增大时，直方图会出现明显拖尾现象。
有小红细胞或红细胞碎片干扰时，直方图尾部会抬高。
（6.10）三种红细胞参数平均值的计算
1、原理
根据红细胞、血红蛋白浓度和红细胞比积，计算红细胞平均容量、红细胞平均血红蛋白量、红细胞平均血红蛋白浓度，用作贫血的形态学分类。
2、计算方法
（1）平均红细胞体积（meancorpuscularvolume，MCV）：
是指每个红细胞的平均体积，以飞升（fI）为单位。
每L血液中红细胞体积（L）×1015
MCV＝──────────────＝××fl
每L血液红细胞数（个）
（2）平均红细胞血红蛋白含量（meanCorpuscularhemoglobin，MCH）：
是指每个红细胞内所含血红蛋白的平均量，以皮克（pg）为单位。
每L血液中血红蛋白浓度（g）×1012
MCH＝──────────────＝××pg
每L血液红细胞数（个）
（3）平均红细胞血红蛋白浓度（meanCorpuscularhemoglobinconcentration，MCHC）：
是指平均每L红细胞中所含血红蛋白浓度（g/L）。
每L血液中血红蛋白g数（g/L）
MCHC＝──────────────＝××g/L
每L血液红细胞比积（L/L）
3、临床意义
正常人和各型贫血时红细胞平均参考值表
平均值
MCH（pg）
MCV（fl）
MCHC（g/L）
正常
27-31
82-95
320-360
大细胞性贫血
↑
↑
-
正常细胞性贫血
-
-
-
单纯小细胞性贫血
↓
↓
-
小细胞低色素性贫血
↓
↓
↓
注：
-正常;↑增大;↓减少
（6.11）红细胞参数
1、红细胞（redbloodceII，RBC）
男（4．0-5．5）×1012／L
女（3．5-5．0）×1012／L
2、血红蛋白（hemoglobin，HGB）
男120一160g／L
女l10-150g／L
3、红细胞比积（hematocrit，HCT）
男0．40—0．50（40％一50％）
女0．35—0．45（35％一45％）
A2、嗜酸性粒细胞直接计数
[标本]
EDTA-K210ul抗凝静脉血1ml
[原理]
手工法
血液中嗜酸性粒细胞在含有伊红的低渗溶液中被染成红色，而红细胞及其他白细胞破裂或溶解。
仪器法（VCS原理）
[试剂]
手工法
嗜酸性粒细胞直接计数的稀释液种类较多，各有一定的优缺点，尚待大家继续实验，找出最佳配方。
下列3种稀释液供参考。
1．Hinkelmann液
伊红0．2g
95％石炭酸0．5m1
40％甲醛0．5ml
蒸馏水加到100m1
2．乙醇—伊红稀释液
90％乙醇30ml
甘油10ml
碳酸钾lg
枸橼酸钠0．5g
20g几伊红液10ml
蒸馏水加至100m1
本配方背景清晰，嗜酸性粒细胞着色鲜明，缺点是含10％甘油，比较粘稠，细胞不易混匀，故计数前必须充分振摇。
3．伊红—丙酮稀释液
20g/L伊红液5mI
丙酮5mI
蒸馏水90ml
新鲜配制效果好，每周配1次。
仪器法
五分类血细胞仪及专用试剂
[操作]
手工法
1．小试管中加稀释液0．38mI。
2．常法取末梢血20μl，加入管内混匀，待红细胞溶解后两侧充池。
3．静置3—5min，用低倍镜（必要时用高倍镜）镜下计数10个大方格内嗜酸性粒细胞数。
仪器法
操作同血常规
[计算]
10个大方格内嗜酸性粒细胞数×20×lO＝嗜酸性粒细胞/L
[参考值]
（50-300）×106／L（50-300／μl）
[附注]
l.血液稀释后应于1h内计数完毕，否则嗜酸性粒细胞会逐渐被破坏，使结果偏低或不易辨认。
2.充池前要充分混匀，但又不宜用力过猛，特别是使用含甘油的稀释液要适当延长混匀时间。
3.注意与中性粒细胞区别,以免误认,中性粒细胞一般不着色,但也有着浅红色的,其颗粒较小。
4．住院病人采标本时间力求统一，以免受日间生理变化的影响。
5．用白细胞总数与分类百分率求得的绝对值不如直接计数结果准确。
[临床意义]
1．直接计数主要用于观察传染病预后、手术和烧伤病人的预后及测定肾上腺皮质功能。
2．其他变化的临床意义同白细胞分类计数中嗜酸性粒细胞的增减。
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