届苏教版 基因工程单元测 试.docx

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届苏教版基因工程单元测试

基因工程单元测试

一、单选题

1．下列关于将目的基因导入受体细胞的描述中，不正确的是（）

A、基因表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合即完成了转化

B、农杆菌转化法是将目的基因导人植物细胞采用最多的方法，但对大多数单子叶植物并不适用

C、需通过某种处理使大肠杆菌成为感受态细胞，以便进一步完成转化

D、用相应的抗生素检测基因表达载体是否导入了受体细胞

【答案】A

【解析】基因表达载体DNA分子溶于缓冲液中并提供一定的温度才能与感受态细胞混合完成转化，A错误；农杆菌转化法是将目的基因导人植物细胞采用最多的方法，但对大多数单子叶植物并不适用，B正确；需通过某种处理使大肠杆菌成为感受态细胞，以便进一步完成转化，C正确；用相应的抗生素检测基因表达载体是否导入了受体细胞，D正确。

【考点定位】基因工程的原理及技术

2．培育抗草甘膦转基因大豆新品种的简易流程如图所示，下列叙述错误的是

A.用氯化钙处理农杆菌有利于重组质粒导入

B.需用含草甘膦的培养基筛选抗性芽

C.上述过程能定向诱导大豆胚尖产生抗草甘膦的突变

D.转基因大豆植株的不同组织中EPSPS蛋白含量不同

【答案】C

【解析】

试题分析：

氯化钙处理农杆菌可以增大细胞壁的通透性，故有利于重组质粒的导入，A项正确；因为转基因目的是为了获得抗草甘膦大豆幼苗，故在含草甘膦的培养中能生长的大豆幼苗即具有抗草甘膦抗性，B项正确；突变具有不定向性，故不能定向诱导大豆胚尖发生定向突变，C项错误；由于重组质粒导入大豆的胚尖，其它部分如根部并没有获得重组质粒，故该转基因大豆的不同组织中EPSPS蛋白的含量不同，D项正确。

考点：

本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。

3．基因工程所用的质粒分子至少含有一个标记基因，该标记基因的主要作用是

A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性

B.增加质粒分子在受体细胞中存活的机会

C.有利于对目的基因是否导入进行检测

D.便于与外源基因连接

【答案】C

【解析】本题考查基因工程的工具和质粒中所含的标记基因的作用，要求考生明确判断目的基因是否导入受体细胞是通过检测受体细胞内是否含有标记基因来进行判断的。

质粒是基因工程中最常用的运载体，作为运载体必需含有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择，即将目的基因导入受体细胞后，受体细胞内是否含有目的基因是需要通过检测受体细胞内有无标记基因来确定的，所以C正确，ABD错误。

【点睛】标记基因的种类及其作用：

1）质粒中标记基因的种类：

四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因等抗生素抗性基因，固氮基因等。

2）标记基因的作用是供重组DNA的鉴定和选择，其原因是基因工程中，构建的基因表达载体中目的基因和标记基因是连锁关系，彼此不分离，因此只要检测到受体细胞内含有标记基因，也就一定会含有目的基因。

4．“X基因”是DNA分子上一个有遗传效应的片段，若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，需在PCR反应中加入两种引物（注：

引物作用是与模板形成双链后在DNA聚合酶的作用下就可以继续链的延伸），两种引物及其与模板链的结合位置如下图甲所示。

经4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子，如下图乙所示，其中第⑤种DNA分子有几个

A．8B．6C．4D．2

【答案】A

【解析】

由图分析可知：

X基因第一次复制得到两个两种：

①和②；X基因第二次复制得到四个四种：

①复制得①和③、②复制得②和④；X基因第三次复制得到八个五种：

①复制得①和③、③复制得③和⑤、②复制得②和④、④复制得④和⑤；X基因第四次复制得到16个五种：

①复制得①和③、两个③复制得两个③和两个⑤、两个④复制得两个④和两个⑤、两个⑤得到4个⑤。

从上面的推测可知，第四轮循环产物中有8个⑤。

【考点定位】基因工程的原理及技术；PCR技术的基本操作和应用

5．炭疽杆菌之所以能引起美国人的恐慌,主要原因之一是它能产生两种成分为蛋白质的内毒素。

有的科学家将该菌的大型DNA分子破坏,该菌仍然能产生内毒素。

请分析推断,应该破坏该菌的什么结构,才能使它从根本上不再产生内毒素?

（）

A．核糖体B．细胞核C．内质网D．质粒

【答案】D

【解析】炭疽杆菌的遗传物质位于核区和质粒中，核区有一个大型的环状DNA分子，控制着炭疽杆菌的主要性状。

细菌质粒上一般含有几个到几百个基因，控制着细菌的抗药性、固氮、抗生素生成等性状，从题目中可以看出，已经将大型DNA分子破坏，说明核区不存在控制内毒素合成的DNA，那么，只有质粒中的DNA起作用，故选D。

【考点定位】细菌的遗传物质

【名师点睛】细菌可分为杆菌、球菌和螺旋菌。

细菌中拟核的大型环状的DNA分子控制细菌的主要遗传性状，质粒也控制部分性状。

审题时注意“将该菌的大型DNA的破坏”和“从根本上”的题眼。

6．下列关于基因工程的叙述正确的是（）

A、DNA连接酶能使两个黏性末端之间的碱基结合

B、限制性内切酶的切口一定是GAATTC的碱基序列

C、质粒是基因工程的唯一用作目的基因的运载工具

D、对目的基因进行大量复制的过程可称为分子“克隆”

【答案】D

【解析】

试题分析：

DNA迎接酶能催化两个黏性末端之间的脱氧核糖和磷酸的连接；A错。

不同的限制性内切酶的切口不同，所以不止一种；B错。

基因工程用作目的基因的运载工具除质粒外，还有植物病毒、噬菌体等，C错。

所以只有选项D是正确的。

考点：

本题考查基因工程的有关知识。

意在考查学生能理解所学知识要点，把握知识的内在联系的能力。

7．在生物工程技术的应用方面，描述正确的是

A．动物克隆的技术基础是动物细胞培养

B．人工诱变、细胞工程、基因工程等都能对微生物进行定向改造

C．植物组织培养是指离体的植物器官或细胞进行脱分化形成新个体

D．动物细胞融合技术的最重要用途是培养具有双亲优良性状的经济动物

【答案】A

【解析】

试题分析：

动物细胞培养是动物细胞工程的基础，A正确；细胞工程、基因工程等都能对微生物进行定向改造，人工诱变的原理是基因突变，具有不定向性，B错误；植物组织培养是指离体的植物器官或细胞进行脱分化和再分化形成新个体，C错误；动物细胞融合技术的最重要用途是制备单克隆抗体，D错误。

考点：

本题考查细胞工程、基因工程等相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。

8．农杆菌中的Ti质粒是植物基因工程中常用的运载体，相关叙述正确的是

A.Ti质粒是能够自主复制的单链DNA

B.Ti质粒中磷酸基团都与两个脱氧核糖相连接

C.重组Ti质粒的受体细胞只能是植物愈伤组织细胞

D.Ti质粒上的基因可全部整合到受体细胞染色体上

【答案】B

【解析】Ti质粒是能够自主复制的环形双链DNA分子，A错误；Ti质粒是双链DNA分子，其分子内部的磷酸基团都与两个脱氧核糖相连接，B正确；重组Ti质粒的受体细胞可以是植物愈伤组织细胞，也可以是其他的植物细胞，如植物的受精卵细胞，C错误；农杆菌有Ti质粒，Ti质粒上有一段T-DNA。

目的基因插入Ti质粒上的T-DNA中，导入农杆菌，让农杆菌侵染植物，农杆菌的Ti质粒上的T-DNA片段（内有目的基因）整合到受体细胞的染色体上，因此只有Ti质粒上的T-DNA片段（内有目的基因）而不是Ti质粒上的全部基因整合到受体细胞染色体上，D错误。

9．对基因治疗安全性的问题叙述不当的是：

A．基因治疗中最常用的载体是病毒，它们能自我复制

B．在基因治疗中，科学家抑制逆转录病毒的某种活性防止它们引起疾病，使之能被安全地使用

C．使用病毒载体运载基因，它们可能会更多地改变目标细胞

D．目的基因插入载体DNA的位置可能出现错误，导致癌症和其他损伤的产生

【答案】A

【解析】基因治疗中最常用的载体是病毒，此时科学家抑制逆转录病毒的某种活性防止它们引起疾病，使之能被安全地使用，它们不能自我复制。

10．下列不属于获取目的基因的方法是（）

A．“鸟枪法”B．转录法

C．反转录法D．根据已知氨基酸序列合成法

【答案】B

【解析】

试题分析：

“鸟枪法”是从供体细胞的DNA中直接分离获取目的基因的方法，A正确；转录形成的是RNA，因此转录法不是获取目的基因的方法，B错误；反转录法是人工合成目的基因的方法之一，C正确；根据已知氨基酸序列合成目的基因是人工合成目的基因的方法之一，D正确。

考点：

基因工程的原理及技术

11．蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，可制成防弹背心、降落伞绳等。

蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。

科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊作为乳腺生物反应器。

下列有关乳腺生物反应器的说法，错误的是（ ）

A.将蜘蛛丝蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等结合在一起构建成表达载体

B.可通过显微注射技术将表达载体导入羊的受精卵中

C.可用丝蛋白基因探针与该羊口腔上皮细胞mRNA杂交，检测目的基因是否发挥作用

D.上述培育转基因蜘蛛羊的过程涉及到基因工程、动物细胞培养、胚胎移植等技术

【答案】C

【解析】将蜘蛛丝蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等结合在一起构建成表达载体，这样可以保证目的基因只在乳腺细胞中表达，A项正确；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法，B项正确；丝蛋白基因只在乳腺细胞中表达，可用丝蛋白基因探针与该羊乳腺细胞mRNA杂交，检测目的基因是否转录形成mRNA，C项错误；上述培育转基因蜘蛛羊的过程涉及到基因工程、动物细胞培养、胚胎移植等技术，D项正确。

12．科研人员分别将蛋白C基因和蛋白G（葡萄糖转运蛋白）基因与空质粒连接，构建表达载体。

将空质粒和上述两种表达载体分别转入三组蛋白G缺陷细胞，在三种不同浓度的葡萄糖间隔刺激下，测定三组细胞的葡萄糖转运速率，结果如下图。

下列分析不正确的是

A.Ⅰ组实验的目的是排除空质粒对实验结果的影响

B.Ⅱ、Ⅲ组葡萄糖转运速率随葡萄糖浓度增加而减小

C.由实验结果推测蛋白C是一种葡萄糖转运蛋白

D.实验结果表明蛋白C的转运功能强于蛋白G

【答案】B

【解析】Ⅰ组是空白对照组，目的是排除空质粒对实验结果的影响，A正确；与对照组相比，Ⅱ、Ⅲ组葡萄糖转运速率随葡萄糖浓度增加而增加，B错误；Ⅲ组比Ⅱ组的实验效果明显，说明蛋白C也是一种葡萄糖转运蛋白，且其转运功能强于蛋白G，CD正确。

13．研究人员向肿瘤细胞中导入单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（HSV—TK），可将某种无毒性前体药物磷酸化，引起肿瘤细胞内一系列代谢变化，最终诱导肿瘤细胞的“自杀”。

相关分析错误的是

A.肿瘤细胞的形成是在致癌因子的作用下，细胞内的原癌基因和抑癌基因发生突变的结果

B.肿瘤细胞因导入HSV-TK发生的“自杀”属于细胞凋亡

C.治愈的肿瘤患者其HSV-TK能遗传给后代

D.将HSV-TK导入肿瘤细胞前，需要构建基因表达载体

【答案】C

【解析】肿瘤细胞（癌细胞）的形成是在致癌因子的作用下，细胞内的原癌基因和抑癌基因发生突变的结果，A项正确；向肿瘤细胞中导入单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（HSV—TK），可将某种无毒性前体药物磷酸化，引起肿瘤细胞内一系列代谢变化，最终诱导肿瘤细胞的“自杀”，由此可知：

肿瘤细胞因导入HSV-TK发生的“自杀”属于细胞凋亡，B项正确；该治疗方法属于基因治疗，治愈的肿瘤患者其HSV-TK不一定能遗传给后代，因为只有发生在配子中的遗传物质的改变才可遗传给下一代，C项错误；将HSV-TK导入肿瘤细胞属于基因工程范畴，在导入前，需要构建基因表达载体，D项正确。

【点睛】本题以“癌症的治疗”为载体，考查学生对细胞癌变的原因、细胞凋亡、基因工程的基本操作步骤、基因治疗的遗传学问题的理解能力。

解答此题的关键是明确上述基础知识，形成知识网络。

14．14．下图为DNA分子的某一片段,其中①②③分别表示某种酶的作用部位,则相应的酶依次是

A.DNA连接酶、限制性核酸内切酶、解旋酶

B.限制性核酸内切酶、解旋酶、DNA连接酶

C.解旋酶、限制性核酸内切酶、DNA连接酶

D.限制性核酸内切酶、DNA连接酶、解旋酶

【答案】C

【解析】根据图解，①表示氢键，使氢键断裂的是解旋酶；②表示核苷酸间连接形成的磷酸二酯键，使其断裂的酶是限制酶；③表示形成连接磷酸二酯键，相应的酶是DNA连接酶；C项正确。

【考点定位】酶在代谢中的作用

15．图示利用奶牛乳汁生产血清白蛋白的过程，分析错误的是

A．①经胰蛋白酶处理可得到③

B．图中涉及基因工程、动物体细胞核移植等技术

C．常用PCR技术扩增②

D．能实现②进入③的常用方法是基因

枪法

【答案】D

【解析】胰蛋白酶或胶原蛋白酶可以把组织分散成单个细胞。

图中涉及基因工程、动物体细胞核移植、胚胎的早期培养、胚胎移植等。

目的基因的扩增需要PCR技术。

故ABC正确。

②进入③的意思是目的基因进入受体细胞，此题受体细胞是动物细胞，应该用显微注射法。

D错误。

考点：

本题考查基因工程的原理及技术，意在考查能从课外材料中获取相关的生物学信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题的能力

16．16．许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ’基因，其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-gal和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。

基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞，过程如下图。

下列说法错误的是（）

A.基因工程中，构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，能遗传给后代，并表达和发挥作用

B.转化过程中，大肠杆菌应先用Ca2+处理，使其能够吸收周围DNA的状态

C.菌落颜色为白色的是菌落②

D.菌落③中的目的基因是否表达，可采用的检测办法是抗原—抗体杂交

【答案】C

【解析】试题分析：

基因工程的核心步骤是构建基因表达载体，目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，能遗传给后代，并表达和发挥作用，A正确；将目的基因导入大肠杆菌细胞之前，应先用Ca2+处理大肠杆菌，使其处于能吸收周围DNA的感受态，B正确；用限制酶EcoRI切割质粒时，会破坏质粒上的lacZ'基因，但切割后的质粒自身环化后，lacZ'基因又被修复，能表达产生B-半乳糖苷酶，在X-gal和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，所以菌落①②呈现蓝色；菌落③导入的是重组质粒，其lacZ'基因被破坏，不能表达产生B-半乳糖苷酶，在X-gal和IPTG存在下，菌落颜色为白色，C错误；检测目的基因是否表达产生蛋白质，可采用抗原一抗体杂交法，D正确。

考点：

本题主要考查基因工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。

17．α1抗胰蛋白酶缺乏症是北美常见的一种单基因遗传病，患者成年后会出现肺气肿及其他疾病，严重者甚至死亡。

利用基因工程技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人α1抗胰蛋白酶的转基因羊，从而更容易获得这种酶。

下列关于该过程的叙述中错误的是（）

A.载体上绿色荧光蛋白基因（GFP）的作用是便于筛选含有目的基因的受体细胞

B.将目的基因导入羊膀胱细胞中，将会更加容易得到α1抗胰蛋白酶

C.培养出的转基因羊的所有细胞中都含有该目的基因，故该羊有性生殖产生的后代也都能产生α1抗胰蛋白酶

D.目的基因与载体重组过程需要DNA连接酶的催化作用

【答案】C

【解析】根据题意，该基因工程中，载体上绿色荧光蛋白基因（GFP）的作用是便于筛选含有目的基因的受体细胞，A正确；将目的基因导入羊膀胱细胞中，可获得膀胱生物反应器，不受羊的性别限制，将会更加容易得到α1抗胰蛋白酶，B正确；培养出的转基因羊的虽然所有细胞中都含有该目的基因，但由于其为杂合子，故该羊有性生殖产生的后代不一定能产生α1抗胰蛋白酶，C正确；目的基因与载体重组过程需要DNA连接酶的催化作用，D正确。

18．下表为常用的限制性核酸内切酶及其识別序列和切割位点，有关说法正确的是

限制性核

酸内切酶

识别序列和

切割位点

限制性核酸

内切酶

识别序列和切

割位点

BamHⅠ

G↓GATCC

KpnⅠ

GGTAC↓C

EcoRⅠ

G↓AATTC

Sau3AⅠ

↓GATC

HindⅡ

GTY↓RAC

SmaⅠ

CCC↓GGG

（注：

Y表示C或T，R表示A或G）

A.限制性核酸内切酶的切点位于识别序列的内部

B.限制性核酸内切酶切割后不一定形成黏性末端

C.种限制性核酸内切酶只能识别一种脱氧核苷酸序列

D.不同限制性核酸内切酶切剂后一定形成不同的黏性末端

【答案】B

【解析】根据表格分析，限制性核酸内切酶的切点不一定位于识别序列的内部，也可能在识别位点的外部，如Sau3AⅠ，A错误；限制性核酸内切酶切割后不一定形成粘性末端，也可能是平末端，如HindⅡ、SmaⅠ，B正确；一种限制性核酸内切酶不一定只能识别一种脱氧核苷酸序列，如HindⅡ能识别多种序列，C错误；不同限制性核酸内切酶切割后也可以形成相同的粘性末端，如BamHⅠ和Sau3AⅠ，D错误。

19．下列关于转基因生物与环境安全的叙述正确的是（　　）

①转基因生物一定会带来生物的安全问题，所以要加以禁止

②重组的微生物在降解污染物的过程中可能产生二次污染

③种植抗虫棉可以减少农药的使用量，对环境没有任何负面影响

④如果转基因生物中有毒蛋白或过敏蛋白，可能会影响人体的健康

A.①②B.②③

C.③④D.②④

【答案】D

【解析】转基因生物可能会带来生物的安全问题，所以要合理利用，①错误；重组的微生物在降解污染物的过程中可能产生二次污染，造成环境安全问题，②正确；种植抗虫棉可以减少农药的使用量，保护环境，但转基因植物也可能会与野生植物杂交，造成基因污染，可能会对生物多样性构成潜在的风险和威胁，③错误；转基因花粉中若有毒蛋白或过敏蛋白，可能会通过食物链传递到人体内，造成食物安全问题，④正确。

综上所述，正确的有②④，故选D。

20．对图示的分析,正确的是（）

A.若此图表示基因工程的操作流程图,C表示重组质粒，则D是受体细胞

B.若此图表示单克隆抗体的制备,则A是经过免疫的T淋巴细胞,B是骨髓瘤细胞

C.若此图表示动物体细胞核移植过程,用胚胎分割技术可获得多个性别不同的克隆动物D

D.若此图表示植物体细胞杂交过程,则从C到D需用的技术是植物组织培养

【答案】AD

【解析】

试题分析：

基因工程中，目的基因与运载体（常用质粒）拼接形成重组质粒，然后导入到受体细胞中，C表示重组质粒，D是受体细胞，A正确；单克隆抗体是骨髓瘤细胞和经过免疫的B淋巴细胞融合后产生的杂交瘤细胞分泌的，B错误；胚胎分割技术属于无性繁殖，所得到的胚胎基因型是相同的，性别也相同，C错误；植物体细胞杂交过程中先获得杂种细胞，再对杂种细胞进行植物组织培养技术培育成植株，D正确。

考点：

本题考查基因工程和细胞工程，意在考查考生能从课外材料中获取相关的生物学信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题。

二、非选择题

21．已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的P蛋白为主要抗原。

根据下图回答问题：

（1）过程①代表的是________，该过程需要的原料是________。

与③过程中的碱基配对相比，①过程特有的碱基配对方式是________。

（2）除了B淋巴细胞外，图中能特异性识别抗原的细胞还有__________，（填编号）细胞识别的物质基础是________。

（3）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的________制成疫苗，该疫苗注射到人体内后，首先由________进行处理和呈递，最终激活B淋巴细胞。

【答案】逆转录四种脱氧核苷酸U—A⑥糖蛋白P蛋白吞噬细胞

【解析】试题分析：

本题综合考察了基因工程、免疫调节的相关内容。

病毒RNA通过逆转录过程形成DNA片段，将其导入受体细胞内形成P蛋白，抗原蛋白侵入机体，被吞噬细胞处理和呈递，最终形成体液免疫。

（1）过程①以RNA为模板形成DNA，属于逆转录过程，原料是四种脱氧核苷酸。

过程③是DNA单链碱基互补配对，与③相比，过程①特有的碱基配对方式是U—A。

（2）图中可以看出⑤能够分泌抗体，所以⑤是浆细胞；⑤的来源有⑥和B细胞，⑥是记忆细胞。

记忆细胞能够识别抗原。

（3）疫苗属于抗原，能够刺激机体产生免疫反应，图中的抗原物质是P蛋白。

抗原进入机体后首先由吞噬细胞进行处理和呈递，最终激活B淋巴细胞。

22．为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。

请回答问题：

（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用PCR技术从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因中获取转运肽基因，所含限制酶（ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ）的酶切位点如图甲所示。

若用_______和_______酶处理酶D基因和转运肽基因后，可得到____端与________端（填图中字母）相连的重组基因。

（2）将上述重组基因进一步处理，插入图乙所示Ti质粒的T-DNA中，构建____________并导入农杆菌中。

将获得的农杆菌接种在含________的固体平板上培养得到含重组基因的单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于转化的侵染液。

（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是_________，进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过_______技术，可培育成转基因油菜植株。

【答案】ClaⅠDNA连接AD基因表达载体（或“重组质粒”）四环素利用农杆菌将重组基因导入油菜细胞植物组织培养

【解析】试题分析：

本题考查基因工程、细胞工程，考查对基因工程工具、操作程序的理解和记忆。

解答此题，可根据酶D基因和转运肽基因所含限制酶的酶切位点选择限制酶以产生相同的粘性末端，根据Ti质粒上的标记基因筛选含重组基因的农杆菌菌落。

（1）据图甲可知，酶D基因的A端和转运肽基因的D端有共同的限制酶ClaⅠ的切点，用ClaⅠ和DNA连接酶处理酶D基因和转运肽基因，可得到A端与D端相连的重组基因。

（2）将重组基因插入图乙所示Ti质粒的T-DNA中，即可得到基因表达载体（重组质粒）。

Ti质粒中的四环素抗性基因可作为标记基因，将获得的农杆菌接种在含四环素的固体平板上培养，可得到含重组基因的单菌落。

（3）剪取油菜的叶片放入含有农杆菌的侵染液中一段时间，利用农杆菌能感染双子叶植物细胞的特性，将重组基因导入油菜细胞。

根据细胞的全能性，转基因油菜细胞可通过植物组织培养技术，培育成转基因油菜植株。

23．促红细胞生成素（EPO）是一种可以增加人体血液中红细胞数量、提高血液含氧量的激素，在运动项目中，人为地增加了血液中EPO的浓度，对提高运动员的运动成绩和提高运动员的耐力，也能够起到一定的作用，因此EPO是反兴奋剂检测中最主要的项目之一。

人类巳可通过基因工程合成EPO基因，并采用中国仓鼠卵巢细胞表达系统来获取产物。

其过程如下图:

请回答下列问题：

（1）①过程构成了基因表达载体，该载体的化学本质是_______，其中的启动子是识别和结合_______的部位，标记基因的作用是______________________。

（2）为了让供体母鼠超数排卵，需注射___________以排出更多的卵子，体外培养到___________（时期）与获能的精子相遇时，精子首先发生顶体反应，穿越___________，完成