海洋化学综合实验讲义汇总.docx

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海洋化学综合实验讲义汇总

海洋化学综合实验讲义

河北工业大学

海水资源高效利用化工技术教育部工程研究中心/海洋科学与工程学院学院

海洋技术系

实验一化学需氧量（COD）的测定

一、术语

化学需氧量：

水体中能被氧化的物质在规定条件下进行化学氧化的过程中所消耗氧化剂的量，以每升水样消耗的毫克数表示，通常记为COD。

化学需氧量主要反映水体受有机物污染的程度。

测定海水中化学需氧量，通常采用碱性高锰酸钾法，因为在酸性介质中氯离子有干扰。

二、目的要求

1.掌握碱性高锰酸钾法测定化学需氧量的测定原理及实验操作。

2.了解此法的实验条件及误差来源。

三、原理

在一定反应条件下，用强氧化剂氧化一升水中还原性物质所消耗的氧化剂的量，以氧的克数表示。

由于所用氧化剂不同，又可分为铬法，即重铬酸钾法（CODCr）；锰法，即高锰酸钾法（CODMn）或高锰酸钾指数。

CODCr主要用于测定淡水；CODMn可又分为酸性和碱性两种。

碱性高锰酸钾法是在碱性加热条件下，用已知量并且是过量的KMnO4氧化海水中的需氧物质，然后在硫酸酸性条件下用KI还原过量的KMnO4和MnO2，所生成的游离碘用硫代硫酸钠标准溶液滴定。

CODMn碱性主要用于测定海水。

反应式如下：

4MnO4-+3C+2H2O=4MnO2+3CO2+4OH-

2MnO4-（剩余）+10I-+16H+=2Mn2++5I2+8H2O

MnO2+2I-+4H+=Mn2++I2+2H2O

I2+2S2O32-=S4O62-+2I-

三、仪器

碘量瓶250ml

酸式滴定管25ml

封闭电炉1500W

移液管1ml，5ml，10ml

秒表或计时钟

四、试剂

（1）25%NaOH溶液：

称取25g氢氧化钠（NaOH），溶于100ml去离子水中，贮存于试剂瓶中。

（2）1+3硫酸溶液：

在搅拌下，将1体积的浓硫酸慢慢加入3体积的水中，趁热滴加高锰酸钾溶液至溶液呈微红色不褪色为止，贮存于试剂瓶中。

（3）0.001667mol/l碘酸钾溶液：

称取3.5670g碘酸钾（KIO3基准试剂，120℃烘干2小时，置于干燥器中冷却），溶于水中，全量移入1000ml棕色容量瓶中，稀释至标线，摇匀。

置于暗处，此溶液浓度为0.01667mol/l。

使用时稀释10倍，即得0.001667mol/l碘酸钾标准溶液。

（4）0.01mol/l硫代硫酸钠标准溶液：

称取25g硫代硫酸钠（Na2S2O3·5H2O）溶于1000ml新煮沸后冷却的水中，加入约0.2g碳酸钠，稀释至10升，摇匀，保存于棕色瓶中，置于暗处。

8-10天后标定其浓度，有效期为1个月。

浓度的标定：

移取10.00ml碘酸钾标准溶液，沿壁流入250ml碘量瓶中，用少量水冲洗瓶壁，加入0.5g碘化钾，沿壁注入1ml1+3硫酸溶液，塞好瓶塞，轻摇混匀，加少许水封口，在暗处放置2min。

轻轻旋开瓶塞，沿壁加入50ml水，用硫代硫酸钠溶液滴定至溶液呈淡黄色，加入1ml淀粉指示剂，继续滴定至溶液蓝色刚退去为止。

重复标定，至两次滴定读数小于0.05ml为止。

按

（1）计算其浓度：

式中：

—硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol/l；

—碘酸钾标准溶液的浓度，mol/l；

V—硫代硫酸钠标准溶液体积，ml。

（5）0.002mol/l高锰酸钾溶液：

称取KMnO43.2g溶于100ml水中，加热煮沸10分钟，冷却，转移到棕色试剂瓶中，稀释至10升混匀,放置7天后，用玻璃砂芯漏斗过滤。

浓度的标定：

移取10.00ml高锰酸钾溶液，于250ml碘量瓶中，加入0.5g碘化钾，加入1ml1+3硫酸溶液，塞好瓶塞，轻摇混匀，加少许水封口，在暗处放置2min。

轻轻旋开瓶塞，加入50ml水，用硫代硫酸钠溶液滴定至溶液呈淡黄色，加入1ml淀粉指示剂，继续滴定至溶液蓝色刚退去为止。

重复标定，至两次滴定读数小于0.05ml为止。

记录读数（V1）

（6）5g/l淀粉溶液：

称取1g可溶性淀粉，用少量水搅成糊状，加入100ml煮沸的水，混匀，继续煮至透明，冷却后加入1ml冰醋酸,稀释至200ml,盛于试剂瓶中。

（7）碘化钾

五、步骤

1．量取100ml水样于250ml于三角瓶中，加入1ml25%NaOH溶液，混匀，加10.00ml高锰酸钾溶液，混匀。

2．置于电热板或封闭电炉上加热至沸，准确煮沸10分钟（从冒出第一个气泡时开始计时），然后迅速冷却至室温。

用移液管加入1+3硫酸溶液5ml，加0.5g碘化钾，混匀，在暗处放置5分钟。

用已标定的硫代硫酸钠标准溶液滴定至溶液呈淡黄色，加入1ml淀粉指示剂，继续滴定至溶液蓝色刚退去为止，记下滴定数V2。

两平行双样滴定读数相差不超过0.10ml。

六、计算

按下式计算化学耗氧量（COD）

式中：

c—硫代硫酸钠的浓度，mol/l；

V1—标定高锰酸钾浓度时所消耗硫代硫酸钠溶液的体积，ml；

V2—滴定样品时所消耗硫代硫酸钠溶液的体积，ml；

七、注意事项

1．水样加热完毕后，应冷却至室温，再加入硫酸和碘化钾，否则游离碘挥发而造成误差。

2．化学需氧量的测定是在一定反应条件下试验的结果，是一个相对值，所以测定时应严格控制条件，如试剂的用量、加入试剂的次序、加热时间、加热温度的高低、加热前溶液的总体积等都必须保持一致。

3．用于配制碘酸钾标准溶液的纯水和器皿须经煮沸处理，否则碘酸钾溶液易分解。

八、思考题

1.碱性高锰酸钾法测定海水COD的局限性。

2.决定海水COD浓度的因素及实验条件是什么？

3.测定海水COD为什么用碱性高锰酸钾法？

4.与重铬酸钾法相比，高锰酸钾法在测定海水COD是具有什么优点？

5.在实验操作过程中应注意哪些问题？

实验二溶解氧（DO）的测定

一、术语

溶解氧是指溶解在海水中的氧气，用符号“DO”表示，单位为μmol/l或mg/l。

二、目的要求

1.掌握碘量法测定溶解氧的原理及实验操作。

2.了解此法的实验条件及误差来源。

三、原理

水中溶解氧与氯化锰和氢氧化钠反应，生成高价锰棕色沉淀。

加酸溶解后，在碘离子存在下即释放出与溶解氧含量相当的游离碘。

然后，以淀粉为指示剂，用硫代硫酸钠标准溶液滴定释放出的碘，根据滴定溶液消耗量计算溶解氧含量。

反应式如下:

MnCl2+2NaOH→Mn（OH）2（白）↓+2NaCl

2Mn（OH）2↓+O2→2MnO（OH）2↓

4Mn（OH）2↓+O2+2H2O→4Mn（OH）3↓

2Mn（OH）3↓+6H++2I-→2Mn2++I2+6H2O

MnO（OH）2↓+4H++2I-→Mn2++I2+3H2O

I2+2S2O32-→S4O62-+2I-

四、仪器

1．碘量瓶250ml

2．移液管5ml

3．酸式滴定管25ml

4.小碘量瓶125ml

5．锥形瓶250ml

五、试剂

1．氯化锰溶液：

称取210g氯化锰（MnCl2·4H2O）溶于水，用水稀释至500ml。

2．碱性碘化钾溶液：

称取250g氢氧化钠（NaOH），在搅拌下溶解于250ml水中，冷却后，加75g碘化钾（KI），用水稀释至500ml。

贮于棕色瓶中，用橡皮塞塞紧，避光保存。

3．1＋1硫酸溶液：

在搅拌下，将50ml浓硫酸小心地加到同体积的水中，盛于试剂瓶中。

4．5g/1淀粉溶液：

称取1g可溶性淀粉，用少量水搅成糊状，加入100ml煮沸的水，混匀，继续煮至透明，冷却后加入1ml冰醋酸,稀释至200ml,盛于试剂瓶中。

5．碘酸钾标准溶液cKIO3=0.0016670mol/l：

称取3.5670g碘酸钾（KIO3），优级纯，120℃烘干2小时，置于干燥器中冷却），溶于水中，全量移入1000ml棕色容量瓶中，稀释至标线，摇匀。

置于暗处，此溶液浓度为0.0166700mol/l。

使用时稀释10倍，即得0.001667mol/l碘酸钾标准溶液。

6．硫代硫酸钠溶液c（Na2S2O3·5H2O）=0.01mol/l：

称取25g硫代硫酸钠（Na2S2O3·5H2O）溶于煮沸放冷的水中，加2g碳酸钠，用水稀释至10l，贮于棕色瓶中，使用前标定。

标定方法同实验一。

7．硫酸，ρ=1.84。

六、测定步骤

1．取样和固定：

把玻璃管插到小碘量瓶底部（注意乳胶管内不得有气泡），慢慢注入海水（注意不要产生涡流），直到海水装满并溢出约瓶体积的一半时将玻璃管慢慢抽出，立即用移液管分别加入1ml氯化锰溶液，2ml碱性碘化钾溶液（移液管贴近液面加入），盖好瓶塞（注意不要有气泡），用手按住，将瓶上下颠倒30余次，使之混和均匀，放置暗处，平行取3份水样进行固定。

2．样品分析：

水样固定1小时后，或沉淀到瓶高的一半时，即可进行滴定。

打开瓶塞，小心倒出部分上清液于250ml三角瓶中，接着用移液管向样品瓶中加入1+1的硫酸2.0ml。

盖好瓶塞，上下颠倒数次，使沉淀物全部溶解，然后小心地把溶液倒入同一个三角瓶中，立即用硫代硫酸钠标准溶液滴定至溶液呈淡黄色，加入1ml淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好退去，然后把溶液倒回一部分于原样品瓶中，荡洗之后再倒入原三角瓶中，此时溶液又变回蓝色，再用硫代硫酸钠溶液滴定到蓝色消失，记录硫代硫酸钠溶液用量。

七、计算

根据上述反应，得知1mol硫代硫酸钠相当于0.5mol氧原子，即1ml0.01mol/l硫代硫酸钠溶液相当于0.08mg氧。

式中：

M——硫代硫酸钠标准溶液的浓度（mol/l）；

V——滴定消耗硫代硫酸钠标准溶液体积（ml）。

V瓶——样品瓶的体积（ml）

3——固定剂的体积

八、注意事项

1．当水样中含有亚硝酸盐时会干扰测定，可加入叠氮化钠使水中的亚硝酸盐分解而消除干扰。

其加入方法是预先将叠氮化钠加入碱性碘化钾溶液中。

2．如水样中含Fe3+达100ｇ～200g时，可加入1ml40％氟化钾溶液消除干扰。

3．如水样中含氧化性物质（如游离氯等），应预先加入相当量的硫代硫酸钠去除。

九、思考题

1.温克勒（Winkler）法测定溶解氧的误差来源及在实验中应如何操作以减少误差？

2.在实验操作过程中应注意哪些问题？

实验三生化需氧量（BOD5）的测定

一、实验目的

1．掌握五日培养法测定生化需氧量的基本原理和方法。

2．学会使用自动调温培养箱。

二、原理

生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在于水中的某些可氧化物质，主要是有机物质所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。

分别测定水样培养前的溶解氧含量和在20℃±1℃培养五天后的溶解氧含量，二者之差即为五日生化过程所消耗的氧量（BOD5）。

水体发生生物化学过程必须具备：

（1）水体中存在能降解的好气微生物。

（2）有足够的溶解氧。

（3）有微生物生长所需的营养物质。

因此在测定水样时须加入一定量的无机营养物质。

根据水样的情况进行一定比例的稀释，稀释水充分暴气等等。

三、仪器

1．自动调温培养箱（20℃±1℃）,不透光，以防光合作用产生溶解氧。

2．5l～20l细口玻璃瓶。

3．1000ml～2000ml量筒。

4．特制搅拌棒：

棒长应比所用量筒高度长20cm。

在粗铁丝下端装一个2mm厚，直径比量筒直径略小，并带有几个小孔的硬橡胶板。

5．培养瓶：

250ml～300ml特制的BOD瓶（带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口）或试剂瓶。

所用培养瓶的容积均需校准，编号纪录。

6．虹吸管：

供分取水样和添加稀释水用。

7．充氧泵

8．碘量瓶250ml

9．一般实验室常用仪器。

四、试剂

1．磷酸盐缓冲溶液：

将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4），21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4），33.4g磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O）和1.7g氯化铵（NH4Cl）溶于水中，稀释至1000ml。

此溶液的pH应为7.2。

2．硫酸镁溶液：

将22.5g硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀释至1000ml。

3．氯化钙溶液：

将27.5g无水氯化钙溶于水，稀释至1000ml。

4．三氯化铁溶液：

将0.25g三氯化铁（FeCl3·6H2O）溶于水，稀释至1000ml。

5．盐酸溶液（0.5mol/l）：

将40ml（ρ=1.18g/ml）盐酸溶于水，稀释至100ml。

6．碱性碘化钾溶液：

称取250g氢氧化钠（NaOH），在搅拌下溶解于250ml水中，冷却后，加75g碘化钾（KI），用水稀释至500ml。

贮于棕色瓶中，用橡皮塞塞紧，避光保存。

7.硫代硫酸钠溶液c（Na2S2O3=0.01mol/l）：

硫代硫酸钠溶液c（Na2S2O3·5H2O）=0.01mol/l：

称取25g硫代硫酸钠（Na2S2O3·5H2O）溶于煮沸放冷的水中，加2g碳酸钠，用水稀释至10l，贮于棕色瓶中，使用前标定。

标定方法同实验五。

8．5g/l淀粉指示剂：

称取1g可溶性淀粉，用少量水搅成糊状，加入100ml煮沸的水，混匀，继续煮至透明，冷却后加入1ml冰醋酸，稀释至200ml，盛于试剂瓶中。

五、分析步骤

1．稀释水的制备：

在5l～20l玻璃瓶内装入一定量的水，然后用无油空气压缩机或薄膜泵，将此水暴气2～8小时，使水中的溶解氧接近于饱和，也可以鼓入适量纯氧，盖严静置，备用。

使用前于每升水中加入磷酸盐缓冲溶液、硫酸镁溶液、氯化钙溶液、三氯化铁溶液各1ml，并混合均匀。

稀释水的pH值应为7.2，其BOD5，应小于0.2g。

2．水样采集和培养：

水样采集后，应在6小时内开始分析，若不能，则在4℃或4℃以下保存，而且不得超过24小时，并将贮存时间和温度与分析结果一并报告。

（1）对未受污染的水样，可直接取样，分装样品时，用虹吸方法将水样加满培养瓶，并让少量水溢出，盖上盖子，里面不能有气泡。

共加四瓶，两瓶125ml，两瓶250ml，其中125ml的两瓶用于直接测定当天水样中溶解氧的含量，另外250ml的两瓶经20℃±1℃五天培养后测定水样中溶解氧的含量。

（2）对于已受污染的水样，必须用稀释水稀释后再进行培养和测定。

水样稀释的倍数是测定的重要关键。

稀释倍数的选择可根据培养后溶解氧的减少量而定，其稀释程度应使培养中所消耗的溶解氧大于2g，而剩余溶解氧不少于1g为标准。

一般采用20%～75%的稀释量。

在初次做时，可对每个水样同时作2～3个不同的稀释倍数。

取一定体积的水样于1000ml量桶中，用虹吸方法引入稀释水至一定刻度，用一插棒式搅拌棒小心上下搅动，不可露出水面，以免带入空气，用虹吸方法将稀释后的水样分别装入2个125ml、2个250ml培养瓶中，其中125ml两瓶用于直接测定当天水样中溶解氧的量，250ml两瓶经20℃±1℃五天培养后测定水样中溶解氧的量。

另取四个250ml培养瓶用虹吸方法装满稀释水，两瓶当天测，两瓶经20℃±1℃五天培养后测定稀释水中溶解氧的量，作为空白对照。

（3）溶解氧的测定：

将经20℃±1℃五天培养后的水样的250ml培养瓶盖外的水倒去，小心打开盖子，加入1ml氯化亚锰溶液和2ml碱性碘化钾溶液（注意先加氯化亚锰，移液管尖接近液面）。

立即谨慎地将瓶盖好，不能有气泡，溢出的水倒掉，用手指按住瓶盖，用力反复颠倒培养瓶20次，直到沉淀与液体完全混合为止。

将培养瓶静置约1小时，当沉淀只占培养瓶体积1/2时，小心打开盖子，吸出清液略大于5ml，用移液管加入5ml硫酸溶液，盖上盖子，反复颠倒培养瓶，使沉淀完全溶解。

静置5分钟，小心打开瓶塞，，然后用已标定的0.01mol/l的硫代硫酸钠标准溶液滴定。

当溶液呈淡黄色时，加1ml淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚刚腿去。

记下滴定管读数。

六、计算

1．样品水样中溶解氧的计算：

式中：

M——硫代硫酸钠标准溶液的浓度（mol/l）；

V——滴定消耗硫代硫酸钠标准溶液体积（ml）。

2．不经稀释直接培养的水样

BOD5（g）=c1-c2………………………………

（2）

式中：

c1——水样在培养前的溶解氧浓度（g）；

c2——水样经5d培养后，剩余溶解氧浓度（g）。

2．经稀释后培养的水样

式中：

B1——稀释水在培养前的溶解氧浓度（g）；

B2——稀释水在培养后的溶解氧浓度（g）；

f1——稀释水在培养液中所占比例；

f2——水样在培养液中所占比例。

f1、f2的计算：

例如培养液的稀释比为3%，即3份水样，97份稀释水，则f1=97%=0.97，f2=3%=0.03。

如果两个或两个以上稀释倍数培养水样耗氧≥2g，剩余溶解氧≥1g时，取平均值为BOD5数值。

如果三个稀释倍数培养的水样均在上述范围之外，则应调整稀释倍数重做。

七、注意事项

1．配制试剂和稀释水的蒸馏水（或去离子水）不应含有有机质，苛性碱和酸。

2．稀释水应保持在20℃左右，并且在20℃培养5天后，溶解氧的减少量在0.5g以下。

3．水样培养期间，培养瓶口处应始终保持有水，经常检查培养箱的温度是否保持在20℃±1℃，样品在培养期间不能见光，以防止光合作用产生溶解氧。

实验四营养盐的测定—无机氮的测定

一、目的要求

1.通过实验了解靛酚蓝分光光度法测定海水中氨-氮的方法原理，掌握其实验条件及步骤。

2.了解亚硝酸盐氮的测定—萘乙二胺分光光度法的原理；硝酸盐氮的测定—锌镉还原萘乙二胺分光光度法的原理

二、原理

水中的无机氮分为硝酸盐氮、亚硝酸盐氮和氨氮，简称三氮。

此外氨氮又分为非离子氮（NH3）和离子氮（NH+4）,此两种状态的组成比决定于水的PH值。

三氮的测定方法如下：

1．氨氮的测定—靛酚蓝分光光度法

在弱碱性介质中，以亚硝酰铁氰化钠为催化剂，氨与苯酚及次氯酸盐反应生成靛酚蓝，在640nm测定吸光度，用标准曲线法测定。

2．亚硝酸盐氮的测定—萘乙二胺分光光度法

在酸性介质中，亚硝酸盐与磺胺进行重氮化反应，其产物再与盐酸萘乙二胺生成红色偶氮染料，在543nm出测定吸光值，用标准曲线法测定。

3．硝酸盐氮的测定—锌镉还原萘乙二胺分光光度法

先将水中的硝酸盐氮用锌粉和二氯化镉定量地还原为亚硝酸盐，然后按亚硝酸盐的测定方法，进行测定，扣除原有亚硝酸盐，得硝酸盐的含量。

三、仪器

722型分光光度计

移液管：

1ml；5ml；10ml

漏斗

具塞比色管：

50ml（带刻度）

具塞比色管：

25ml（带刻度）

四、试剂

1．100g-N铵标准贮备溶液：

称取0.4716g硫酸铵[（NH4）2SO4]（110℃烘1小时，置于干燥器中冷却），溶于少量水中，全量转入1000ml容量瓶中，加水至标线，混匀，加1ml三氯甲烷（CHCl3）,振摇混合，贮于棕色试剂瓶中，冰箱内保存。

此溶液浓度为1.00ml含氨氮100μg，其有效期半年。

10.0g-N铵标准使用溶液：

移取铵标准贮备溶液10.0ml置于100ml容量瓶中，加水稀释至标线，摇匀，即得铵标准贮备溶液。

临用时配制。

2．480g/l柠檬酸钠溶液：

称取240g柠檬酸钠（Na3C6H5O7·2H2O）溶于500ml水中，加入20ml0.5mol/l氢氧化钠和数粒防爆沸石，煮沸除氨直至溶液体积小于500ml，冷却后用水稀释至500ml，盛于聚乙烯瓶中，此溶液长期稳定。

3．苯酚溶液：

取38g苯酚（C6H5OH）和0.4g亚硝酰铁氰化钠[Na2Fe（CN）5NO·2H2O]，溶于少量水中，稀释至1000ml，混匀，盛于棕色试剂瓶中，冰箱内保存。

4．0.5mol/l硫酸溶液：

移取28ml硫酸（比重1.84，缓慢倾入水中，稀释至1升，混匀。

5．0.5mol/l氢氧化钠溶液：

称取10g氢氧化钠溶于1000ml水中，加热蒸发至500ml，盛于聚乙烯瓶中。

6．0.10mol/l硫代硫酸钠溶液：

称取25g硫代硫酸钠（Na2S2O3·5H2O），溶于少量水中，稀释至1L，加1g碳酸钠（Na2CO3），混匀，转入棕色试剂瓶中保存。

7．5g/l淀粉溶液：

5g/l淀粉指示剂：

称取1g可溶性淀粉，用少量水搅成糊状，加入100ml煮沸的水，混匀，继续煮至透明，冷却后加入1ml冰醋酸，稀释至200ml，盛于试剂瓶中。

8．次氯酸钠溶液：

市售有效氯含量不少于5.2%的次氯酸钠溶液，使用时先标定。

标定方法：

取50ml0.5mol/l硫酸溶液至100ml锥形瓶中，加入0.5g碘化钾，混匀，加入1ml待标定的次氯酸钠溶液，以0.1mol/l的硫代硫酸钠溶液滴定至淡黄色，加入5滴淀粉溶液，继续滴定至蓝色消失，计下硫代硫酸钠的体积，1.00ml相当于3.54mg有效氯。

9．1.50mg/ml次氯酸钠使用溶液：

用0.5mol/l的氢氧化钠溶液稀释一定量的已标定的次氯酸钠溶液，使其100ml中含有150mg有效氯，盛于聚乙烯瓶中保存于冰箱中，可稳定数周。

10．亚硝酸盐氮标准溶液：

称取0.4926g亚硝酸钠（NaNO2）（经110℃烘干1小时），溶于少量水中，转入1000ml容量瓶中至标线，摇匀，加1ml三氯甲烷（CHCl3）混匀，贮于棕色瓶中保存于冰箱。

此溶液浓度为100μg/ml-N，取上述溶液5ml于100ml容量瓶中，加水至标线，混匀，配成亚硝酸盐氮标准使用液，浓度为5.0μg/ml-N。

临用时配制。

11．10g/l磺胺溶液：

称取5g磺胺（NH2SO2C6H4NH2），溶于350ml盐酸溶液（1+6），用水稀释至500ml，盛于棕色瓶中。

12．1g/l盐酸萘乙二胺溶液：

称取0.5g盐酸萘乙二胺（C10H7NHCH2CH2NH2·2HCl）溶于500ml水中，盛于棕色试剂瓶中保存于冰箱。

13．硝酸盐氮标准溶液：

称取0.7218g硝酸钾（KNO3）（经110℃烘干1～2小时），溶于少量水中。

转入1000ml容量瓶中至标线，摇匀，加1ml三氯甲烷（CHCl3）混匀，贮于棕色瓶中保存于冰箱。

此溶液浓度为100μg/ml，取上述溶液10ml于100ml容量瓶中，加水至标线，混匀，配成硝酸盐氮标准使用液，浓度为10μg/ml。

临用时配制。

14．20%氯化镉溶液：

称取20g氯化镉（CdCl2·2.5H2O）加水至100ml，待溶解后分装于滴瓶中。

15．锌粉。

五、步骤

1．绘制标准曲线：

①取0.00、0.30、0.45、0.60、0.75ml、1.00ml铵标准使用液于6支50ml具塞比色管中，加水至标线，混匀。

系列各点的浓度分别为：

0、0.060、0.090、0.12、0.15、0.20g-N。

②在上述比色管中各加入1.5ml柠檬酸钠溶液，混匀，再加入1.5ml苯酚溶液，混匀，最后加入1.5ml次氯酸钠溶液，混匀，放置6小时以上（淡水样品3小时以上）。

③将样品和参比比色池都注满蒸馏水，用722分光光度计在640nm波长处，进行相互测量，所测定比色池的吸光度值Ac，应从读数中减去。

④以水为参比溶剂，用722分光光度计在640nm波长处，测定吸光度值Ai。

其中O浓度为A0。

以（Ai-A0）为纵坐标，氨—氮浓度（g）为横坐标，绘制标准曲线。

2.水样测定（双样）

取移过滤澄清的待测水样于50ml具塞比色管中，以下按②、③步骤测定水样的吸光度值AW。

同时取50ml无氨蒸馏水，置于50ml具塞比色管中，按水样测定步骤测定空白吸光度值Ab。

查标准曲线或用线性回归方程计算水样中的铵氮浓度（g）。

五、计算

1．测定海水样品，若绘制标准曲线用盐度相近的无氨海水时，可由Aw-Ab值查标准曲线直接得出氨氮浓度g。

2．对于海水或河口区水样，若绘制标准曲线，用无氨蒸馏水，则水样的吸光度值Aw扣除分析空白吸光度Ab后，还应根据所测水样的盐度乘上相应的盐误差校正系数f，即据f（Aw-Ab）值查标准曲线或用线性回归方程计算水样中氨氮的浓度g。

盐误差校正系数表

S

0～8

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