届高考一轮生物复习创新版限时规范训练38a.docx

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届高考一轮生物复习创新版限时规范训练38a

限时规范特训

1．（2017·安徽安庆二模）尿素分解菌能在如表所示配方的培养基上生长、形成菌落。

回答下列问题：

（1）从物理形态上看,上述培养基属于________培养基；从用途上看,上述培养基属于________培养基。

（2）当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于__________________,此时平板上的菌落数较能准确地反映样品中的活菌数。

（3）培养过程中,常选择菌落数在________的平板统计计数,统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,原因是

___________________________________________________。

（4）尿素分解菌经X射线照射后不能正常生长,添加某种维生素后能正常生长,试解释其原因：

_____________________________。

答案　

（1）固体　选择（性）

（2）样品稀释液中的一个活菌

（3）30～300　两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的是一个菌落

（4）经X射线照射后导致尿素分解菌发生基因突变,从而缺少合成某种维生素必需的酶

解析　

（1）培养基配方中含有琼脂（凝固剂）,所以是固体培养基；培养基中的氮源只有尿素,因此能筛选出尿素分解菌,属于选择培养基。

（2）当样品稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌,此时通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中的活菌数。

（3）为了保证结果准确,一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。

即使样品稀释度足够高,但仍有可能两个或多个细菌细胞连到一起,此时平板上观察到的只是一个菌落,因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。

（4）用X射线照射尿素分解菌,可能诱导其发生基因突变,若基因突变使尿素分解菌缺少合成某种维生素必需的酶,则不能在缺某种维生素的培养基中生长。

2．（2017·甘肃兰州一模）微生物在生产中有重要应用,回答下列有关微生物的问题：

（1）家庭酿制葡萄酒所用的微生物主要是________；家庭腌制泡菜的过程中,用水封坛的作用是__________________________。

（2）实验室中配置的培养基在使用前需用________法进行灭菌；在配制筛选耐盐细菌的选择培养基时,除加入基本营养物质外还需加入________。

（3）某兴趣小组调查某品牌1g牛奶中细菌数量时,若统计出在稀释倍数为103的实验组的平板上平均菌落数为30个,所用稀释液的体积为0.2ml,则每克牛奶样品中的细菌数为________。

若空白对照组的一个平板上出现了7个菌落,这种结果说明在此实验中出现了______现象；为获取可靠实验数据,需____________________。

答案　

（1）酵母菌　制造缺氧环境,利于乳酸菌繁殖和抑制杂菌

（2）高压蒸汽灭菌　高浓度食盐

（3）1.5×105个　污染　再次配制培养基重新实验

解析　

（1）家庭酿制葡萄酒是利用酵母菌在无氧条件下产生酒精；家庭腌制泡菜利用的微生物是厌氧型的乳酸菌,用水封坛的作用是制造缺氧环境,以利于乳酸菌繁殖,同时可以抑制杂菌生长。

（2）培养基灭菌用高压蒸汽灭菌法进行；在配制筛选耐盐细菌的选择培养基时,除加入基本营养物质外还需加入高浓度食盐。

（3）某兴趣小组调查某品牌1g牛奶中细菌数量时,若统计出在稀释倍数为103的实验组的平板上平均菌落数为30个,所用稀释液的体积为0.2ml,则每克牛奶样品中的细菌数为30÷0.2×103＝

1.5×105（个）。

若空白对照组的一个平板上出现了7个菌落,说明实验中培养基被污染；为获取可靠实验数据,需再次配制培养基重新实验。

3．（2017·河南三门峡二模）某实验小组对酸奶中乳酸菌的数量进行了测定,取6支灭菌的试管,分别加入9mL灭菌的生理盐水,标号A1、A2、A3、A4、A5、A6,吸取1mL酸奶样液加入试管A1中,然后另取一支吸管从A1中吸取1mL溶液,加入A2中,依此类推,最后从试管A6中取0.1mL样液进行涂布计数,涂布三个平板,其菌落数分别为251、265、276个。

请回答下列问题：

（1）培养乳酸菌除了必要的营养物质外,还需将培养基的pH调至________________。

（2）制备乳酸菌的培养基过程中,对培养皿灭菌的常用方法是________________,倒平板时培养基的温度不能太低,原因是__________________________；待平板冷凝后,要将平板倒置,其目的是________________________________。

（3）该实验小组对乳酸菌接种所采用的方法是________________,根据三个平板中菌落数,可推测原酸奶中乳酸菌的浓度为__________________个/mL,该方法测定的乳酸菌的含量和实际值相比,一般________（填“偏大”或“偏小”）。

（4）为了使测量结果更加准确,该实验对照组的设置是

____________________________________________。

答案　

（1）中性或微碱性

（2）干热灭菌法　温度太低会导致培养基凝固,无法铺展均匀　防止平板冷凝后,培养皿盖上凝结的水珠落入培养基中造成污染

（3）稀释涂布平板法　2.64×109　偏小

（4）另增设一组培养基,接种等量灭菌的生理盐水

解析　

（1）乳酸菌是一种细菌,制备细菌培养基时,需将培养基的pH调至中性或微碱性。

（2）制备培养基过程中,对培养皿灭菌的常用方法是干热灭菌法,温度太低会导致培养基凝固,无法铺展均匀,因此倒平板时培养基的温度不能太低；待平板冷凝后,要将平板倒置,其目的是防止平板冷凝后,培养皿盖上凝结的水珠落入培养基中造成污染。

（3）取6支灭菌的试管,分别加入9mL灭菌的生理盐水,标号A1、A2、A3、A4、A5、A6,吸取1mL酸奶样液加入试管A1中,然后另取一支吸管从A1中吸取1mL溶液,加入A2中,依此类推,最后从试管A6中取0.1mL样液进行涂布计数,这种接种方法是稀释涂布法。

根据操作步骤可推知得到101、102、103、104、105、106倍的稀释液,从试管A6中取0.1mL样液进行涂布计数,三个平板中菌落数

分别为251、265、276个,可推测原酸奶中乳酸菌的浓度为

÷0.1×106＝2.64×109（个/mL）。

稀释涂布平板法测定活菌数目时,由于相邻的细菌可能形成一个菌落,因此测定值可能比实际值小。

（4）为了使测量结果更加准确,需要另增设一组培养基,接种等量灭菌的生理盐水。

4．为了分离和纯化高效分解石油的细菌,科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图1所示的实验。

请回答下列问题：

（1）配制好的培养基通常使用____________法灭菌。

步骤③与步骤②中培养基成分相比,最大的区别是____________________________。

（2）同学甲进行步骤④的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图2所示。

该同学的接种方法是________________,出现图2结果可能的操作失误是________________。

（3）步骤⑤需要振荡培养,原因是______________________。

（4）步骤⑤后取样测定石油含量的目的是______________________________。

（5）为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力________。

（6）通常情况下,在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________和________。

无菌技术要求实验操作应在酒精灯________附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。

答案　

（1）高压蒸汽灭菌　步骤③的培养基中石油是唯一碳源

（2）稀释涂布平板法　涂布不均匀

（3）使石油分布均匀,与细菌充分接触,有利于细菌的繁殖（答案合理即可）

（4）筛选出分解石油能力最强的细菌

（5）强　（6）干热灭菌　高压蒸汽灭菌　火焰

解析　

（1）培养基的灭菌方法常采用高压蒸汽灭菌法。

步骤③的培养基中石油是唯一的碳源,步骤②会有其他有机物作为碳源。

（2）图2中的菌落不是呈线形分布,所以采用的接种方法应是稀释涂布平板法。

图2中的菌落分布不均匀,应是操作中涂布不均匀引起的。

（3）步骤⑤应进行振荡培养,其目的是使加入的石油分布均匀,石油与细菌充分接触,有利于细菌的繁殖。

（4）步骤⑤后取样测定石油的含量,可以得知被细菌分解的情况,如果含石油越少,则说明细菌分解的石油越多,这样可以筛选出分解石油能力最强的细菌。

（5）降解石油能力越强的菌株,在菌落周围形成的分解圈越大。

（6）实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌（如接种环）、干热灭菌（如培养皿）、高压蒸汽灭菌（如培养基）等。

无菌操作要求在整个实验过程中操作都在酒精灯火焰附近进行,以避免周围微生物的污染。

5．（2017·山东泰安一模）多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物质,呈油状液体,污染土壤后,很难清除。

研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用,为消除这种污染,科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株。

（1）筛选分解多氯联苯的菌株时,应将土壤样品____________________,接种到以________为唯一碳源的培养基上,从功能上讲,该培养基属于________________。

（2）对初步提取到的菌株要进行________,一般操作方法有两种,如图是________法。

（3）若要测定培养液中酵母菌的菌体数,可在显微镜下直接计数,若用______________________法统计菌落数,在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间,这样做的目的是____________________________________________________。

（4）将1ml酵母菌溶液稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接

入0.1ml稀释液经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、57、

58,据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为________________。

答案　

（1）稀释（溶解）　多氯联苯　选择培养基

（2）纯化　平板划线

（3）稀释涂布平板（或涂布平板）　检验培养基平板灭菌是否成功（倒平板是否感染杂菌或是否彻底灭菌）

（4）5.7×107个/L

解析　

（1）筛选分解多氯联苯的菌株时,应将土壤样品稀释,接种到以多氯联苯为唯一碳源的培养基上；只有能分解多氯联苯的菌株才能在这样的培养基中生存,因此从功能上讲,该培养基属于选择培养基。

（2）对初步提取到的菌株要进行分离纯化,一般操作方法有两种,即平板划线法和稀释涂布平板法,图示是利用平板划线法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

（3）若要测定培养液中酵母菌的菌体数,可在显微镜下用血细胞计数板直接计数。

若用稀释涂布平板法统计菌落数,在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间,这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格。

（4）由题意知1ml水样中的菌落数是（56＋57＋58）÷3÷0.1×100＝

5.7×104（个）,每升水样中的活菌数为5.7×104×103＝5.7×107（个）。

6．（2017·山东济宁一模）请回答下列与微生物的分离、培养等有关的问题：

（1）某培养基的配方：

KH2PO4、NaNO3、MgSO4·7H2O、KCl、葡萄糖、H2O,如果使用该培养基来筛选土壤中分解尿素的细菌,则应去除的成分是________,同时需要添加的成分是________。

（2）琼脂是从海藻中分离获得的多糖物质,在培养基中常常需要加入琼脂,其作用是________。

（3）如图表示的微生物接种方法称为________,图示接种需要对接种环采用_______灭菌,先后灭菌_______次。

（4）已知稀释倍数为106（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL）,平板上分解尿素的细菌菌落数的平均值为233,则每毫升样品中菌落数是________________。

答案　

（1）NaNO3　尿素　

（2）作为凝固剂

（3）平板划线法　灼烧　6　（4）1.165×109个

解析　

（1）根据培养基配方可知,题干所给的培养基配方中氮源是NaNO3,若此培养基用于培养分解尿素的细菌,则应该使用以尿素为唯一氮源的选择培养基,即需要去除NaNO3,同时需要添加尿素。

（2）在培养基中常常需要加入琼脂,其作用是作为凝固剂。

（3）如图表示的微生物接种方法称为平板划线法,图示接种需要对接种环采用灼烧灭菌,由于每次划线前后均需要灼烧灭菌,因此需要先后灭菌6次。

（4）根据题意可知,每毫升样品中的菌落数＝平板上菌落数的平均值÷体积×稀释倍数＝233÷0.2×106＝1.165×109（个）。

7．（2017·湖北重点中学第二次联考）我国规定每升饮用水中大肠杆菌不能超过3个。

某兴趣小组尝试对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测,操作简图如图甲,伊红美蓝培养基配方如图乙。

回答下列相关问题：

（1）图甲中滤膜的孔径应________（“大于”或“小于”）大肠杆菌。

受此启发,对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌？

________________。

（2）配制图乙中的基础培养基时,除了水分、无机盐以外,还应加入________（一种营养成分）以及________。

伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色,从功能上划分,该培养基属于________培养基。

（3）该小组通过统计____________的数目,计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。

理论上他们的统计值要比实际________（“偏高”或“偏低”）,理由是_______________________________________。

答案　

（1）小于　用滤膜过滤除菌　

（2）氮源　琼脂　鉴别　（3）黑色菌落　偏低　两个或多个大肠杆菌连在一起时,平板上只能观察到1个菌落

解析　

（1）图甲操作的目的是用滤膜过滤待测水样,以获得大肠杆菌,因此滤膜的孔径应小于大肠杆菌。

受此启发,对某些不耐高温的试剂,可以用滤膜过滤除菌。

（2）各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。

图乙中的乳糖可为微生物的生长提供碳源,据此可知：

在配制图乙中的基础培养基时,除了水分、无机盐以外,还应加入氮源。

在固体培养基上大肠杆菌才能形成菌落,因此还需要加入琼脂。

伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色,从功能上划分,该培养基属于鉴别培养基。

（3）由“伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色”可知：

该小组通过统计黑色菌落的数目,计算出单位体积样品中大肠杆菌数目。

当两个或多个大肠杆菌连在一起时,平板上只能观察到1个菌落,所以理论上他们的统计值要比实际偏低。

8．（2017·黑龙江大庆一中高三段考）据报道,某地空气样本中检测出A、B、C3种抗生素的耐药性基因,只有存在于某种活菌中的耐药性基因才能感染人体。

为研究此地空气中是否存在这些耐药性活菌,某研究小组做了以下实验,步骤如下：

①配制培养基并灭菌；

②制作无菌平板,并收集、培养空气中的活菌；

③对步骤②得到的活菌进行分离纯化；

④设置若干实验组和对照组,进行相关操作；

⑤将各组平板置于适宜温度的恒温箱中培养一段时间,观察菌落的生长情况。

回答下列问题：

（1）步骤①中的灭菌方法是________________________。

（2）步骤③中接种的方法是__________________________。

（3）若步骤②中得到的菌落类型有5种,则步骤④中需要设计至少________个实验组,对实验组的操作是____________________。

（4）若将所得菌落接种到含有____________培养基中,形成的菌落呈________色,则表明可能存在大肠杆菌,从功能角度分析此培养基属于________培养基。

答案　

（1）高压蒸汽灭菌法

（2）平板划线法（或稀释涂布平板法）

（3）15　接种每种活菌的培养基中分别添加A、B、C抗生素

（4）伊红美蓝　黑　鉴别

解析　

（1）培养基灭菌方法一般是高压蒸汽灭菌。

（2）微生物常见的接种的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。

（3）根据实验目的可知,要在“空气样本中检测出A、B、C3种抗生素的耐药性基因”,并且步骤②中得到的菌落类型有5种,因此步骤④中需要设计至少3种抗生素×5种菌落＝15个实验组,对实验组的操作是接种每种活菌的培养基中分别添加A、B、C抗生素。

（4）若将所得菌落接种到含有伊红美蓝的培养基中,形成的菌落呈黑色,则表明可能存在大肠杆菌。

从功能角度分析此培养基属于鉴别培养基。