临床检验主管技师 临床检验基础冲刺串讲.docx

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临床检验主管技师临床检验基础冲刺串讲

冲刺串讲

  血液检验部分

  核心串讲

  实战演练

  ●标本采集

  ●细胞计数

  ●细胞形态

  ●仪器检测

  标本采集

  

  一、血液生理概要

  一性一别

  一别:

血清与血浆的区别--血清缺ⅠⅡⅤⅧ

  一性:

粘滞性--受纤维蛋白原、球蛋白影响(二白)

  血浆抗凝出凝血,血清清白缺因子。

  

  二、采血方法

  三部、二注、四色

  1.三部:

  

  2.二注

  

(1)静脉采血法

  注意事项:

①暴露不明手指消毒可触摸;②只能外抽不内推;③拔下针头沿管壁缓慢注入。

  

(2)皮肤采血法

  注意事项:

①第1滴擦去且勿挤;②多项检查采血的顺序依次为血小板计数、红细胞计数、血红蛋白测定、白细胞计数等。

  3.四色

  真空采血管盖子颜色

u红色

 

化学、血清学、血库

v紫色

须颠倒混匀8次

全血细胞计数(CBC)

w淡蓝色

须颠倒混匀;血液与抗凝比例为9:

1

凝血检查(PT、APTT、因子测定)

x黑色

血液与抗凝剂比例为4:

1

血沉

  

  三、抗凝剂

  常用有4种

  

  

  四、血涂片制备

  二法,四因素,五标准

  1.二法

  ①手工推片→25°~30°夹角

  ②厚血膜涂片→疟原虫、微丝蚴

  2.四因素

  ①血滴大小

  ②推片与载玻片间夹角

  ③推片速度

  ④血细胞比容

  3.五标准

  一张良好血片

  ①厚薄适宜

  ②头体尾明显

  ③细胞分布均匀

  ④血膜边缘整齐

  ⑤并留有一定空隙

  

  五、血液细胞染色--瑞氏染色法

  1.瑞氏染料(ME)

  

  2.染色原理

  物理吸附与化学亲和作用

  嗜酸性物质→伊红+Hb、嗜酸性颗粒

  嗜碱性物质→亚甲蓝+细胞核蛋白、L及B胞质

  3.pH值的影响

  磷酸盐缓冲液(pH6.4~6.8)

  ①pH<pI→Pr带正电荷多→易与E-结合→染色偏红

  ②pH>pI→Pr带负电荷多→易与M+结合→染色偏蓝

  4.方法学评价

  瑞氏染色法:

最经典最常用。

细胞质、中性颗粒染色效果好。

  吉姆萨染色法:

细胞核、寄生虫(如疟原虫等)着色较好。

  贮存时间愈久,染色效果愈好。

  细胞计数

  【改良牛鲍计数板结构】

  1.高度--0.1mm,容积0.1μl

  2.白细胞计数区

  四角大方格--单线,16中

  3.红细胞和血小板计数区

  中央大方格四角和中央--双线,25中,每中单线16小

  4.计数原则

  压线细胞,数上不数下,数左不数右。

  

  【稀释液】

稀释液

成分及作用

RBC

Hayem液氯化钠(NaCl)---调节渗透浓度

硫酸钠(Na2S04)---防止红细胞聚集

氯化高汞(HgCl2)---防腐剂,有毒

网织红细胞

WHO推荐新亚甲蓝

煌焦油蓝乙醇溶液---玻片法

煌焦油蓝生理盐水溶液---试管法

白细胞

稀乙酸溶液破坏成熟红细胞

E

保护剂:

乙醇、丙酮、乙二醇。

着色剂:

溴甲酚紫、伊红、固绿等。

破坏其他细胞和增强E着色物质:

碳酸钾、草酸铵。

抗凝剂:

枸橼酸钠、EDTA。

防止乙醇和液体挥发剂:

甘油。

  【计算】

RBC

红细胞数/L=N×25/5×10×200×106/L

Ret

RBC

平均值

MCV=Hct/RBC(fl),MCH=Hb/RBC(pg),MCHC=Hb/Hct(g/L)

WBC

E

有核红细胞

白细胞影响

一:

直接将患者红细胞数减去白细胞数。

二:

在高倍镜下勿将白细胞计入,白细胞体积常比红细胞略大,中央无凹陷,细胞核隐约可见,无黄绿色折光。

  【参考值】

RBC

成年男性(4.0~5.5)×1012/L;女性(3.5~5.0)×1012/L;

新生儿(6.0~7.0)×1012/L

Hb

成年男性120~170g/L;成年女性110~150g/L;

新生儿170~200g/L

HCT

温氏法:

男性0.40~0.50;女性0.37~0.48

RBC平均值

MCV80~100fl;MCH26~34pg;MCHC320~360g/L

ESR

魏氏法<50岁:

男性0~15mm/h;女性0~20mm/h

WBC

成人(4~10)×109/L;新生儿(15~20)×109/L;

6个月~2岁(11~12)×109/L;儿童(5~12)×109/L

DC%

Nst1~5;Nsg50~70;E0.5~5;B0~1;L20~40;

M3~8

  【临床意义】

RBC

生理性和病理性减少;贫血

Hb

分级:

轻度(低于参考区间下限),中(9),重(6),极重(3)

HCT

作为补液的参考指标

RBC平均值

贫血的形态学分类:

正细胞、大细胞、单纯小细胞、小细胞低色素

RDW

MCV/RDW;小细胞均一/非均一;IDA与地中海贫血鉴别

ESR

妊娠妇女老人快,沉病快炎损伤恶,高球高胆轻中贫

Ret

判断骨髓造血、观察贫血疗效、骨髓移植后监测

WBC/DC

中性粒事儿真多,淋中6945两交叉,安静休息早晨,

低其它情况均增高。

四急一严一恶

中性粒点儿挺低,伤了副流再辐氯,自身免疫和脾亢。

传单百日肾移植,淋白粒缺淋增多,淋少放射肾化脓。

二移:

核左移、核右移

  【细胞形态】

  

  仪器检测

  1.电阻抗(库尔特)

  脉冲高细胞大,脉冲多细胞多。

  2.光散射

  (白细胞)

  ①激光与细胞化学法:

过氧化物酶E,N,M。

  ②VCS:

V细胞体积,C细胞内部结构,S细胞形态和核结构。

  ③电阻抗与射频法:

E,B,WBC,IMI。

  ④MAPSS法。

  0°前角大小

  10°狭角测内部

  90°垂直核分叶

  ﹣90°偏振E区分

  3.细胞直方图横为体积,纵为频

  

  实战演练

  若计数5个中方格中红细胞总数为350个,按法定单位,应报告为

  A.350万/mm3

  B.350万/μl

  C.3.5×106/L

  D.3.5×109/L

  E.3.5×1012/L

  

『正确答案』E

『答案解析』红细胞/L=N×25/5×10×106×200=N×1010=N/100×1012=350/100×1012=3.5×1012/L。

  在手工法进行白细胞计数时,计数四周四个大方格内的白细胞数为112个,血液稀释比例20倍,则白细胞的浓度为

  A.2.8×109/L

  B.4.0×109/L

  C.5.6×109/L

  D.11.2×109/L

  E.22.4×109/L

  

『正确答案』C

『答案解析』白细胞/L=4个大方格内白细胞数/4×10×20×106=N/20×109=112/20×109=5.6×109/L。

  最适宜凝血试验的抗凝剂是

  A.草酸钠

  B.枸橼酸钠

  C.肝素钠

  D.氟化钠

  E.EDTA-Na2

  

『正确答案』B

『答案解析』最适宜凝血试验的抗凝剂是枸橼酸钠。

  关于改良牛鲍计数板,错误的是

  A.每块计数板分为2个同样的计数池

  B.计数池与盖玻片高0.01mm

  C.计数池内有长、宽各3.0mm的方格

  D.计数池分为9个大格

  E.每个中方格用单线分为16个小方格

  

『正确答案』B

『答案解析』计数池与盖玻片高0.1mm。

  患儿女,2岁。

消瘦,易患感冒。

查体:

贫血貌。

血液检查结果:

RBC3.2×1012/L,HGB90g/L,MCV72fl,MCH24pg,MCHC280g/L,RDW18.9%,WBC及DC正常。

该患者的贫血类型属于

  A.小细胞均一性

  B.小细胞非均一性

  C.正常细胞均一性

  D.大细胞均一性

  E.大细胞非均一性

  

『正确答案』B

『答案解析』MCV正常值为80~100fl,该患者MCV减低,为小细胞贫血。

RDW为18.9%,升高,为不均一性,故该患者的贫血类型属于小细胞非均一性贫血。

  用血液分析仪电阻抗法进行血细胞计数时,下列细胞的参数与产生的脉冲信号高低成正比的是

  A.血细胞核的大小

  B.血细胞的比密

  C.血细胞体积的大小

  D.血细胞在计数孔移动的速度

  E.通过计数孔血细胞的数量

  

『正确答案』C

『答案解析』脉冲振幅越高,细胞体积越大;脉冲数量越多,细胞数量越多。

  HiCN的最大吸收峰位于

  A.450nm

  B.504nm

  C.540nm

  D.578nm

  E.630nm

  

『正确答案』C

『答案解析』HiCN的最大吸收峰位于540nm。

  白细胞五分类VCS检测原理是指

  A.阻抗、电导和光散射分类法

  B.阻抗、射频和特殊稀释液分类法

  C.多角度偏振光散射分类法

  D.光散射和细胞化学分类法

  E.化学染色和核酸荧光染色分类法

  

『正确答案』A

『答案解析』VCS指的是容量、电导和光散射法,利用电阻抗法原理测量细胞体积(V)。

  网织红细胞生成指数(RPI)的含义为

  A.网织红细胞占红细胞的数量

  B.网织红细胞占红细胞的比例

  C.网织红细胞的产生速度与正常人的比例

  D.网织红细胞的数量与正常人的比例

  E.幼稚网织红细胞的产生速度

  

『正确答案』C

『答案解析』RPI指的是网织红细胞生成指数,是网织红细胞生成相当于正常人的倍数。

  患者女,73岁。

因肺心病入院治疗,用全自动五分类血球计数仪连续2天检查PLT计数均在20×109/L。

与临床医师沟通了解到患者均无出血症状,血涂片检查有血小板聚集现象,提示仪器法计数血小板结果有误,采用手工法计数PLT221×109/L。

造成误差的根本原因是

  A.冷凝集现象

  B.标本凝固

  C.超出仪器计数范围

  D.药物影响

  E.EDTA抗凝剂影响

  

『正确答案』E

『答案解析』EDTA能引起血小板发生卫星现象(血小板围绕着中性粒细胞排列)。

这种情况出现的几率非常小,当出现该种情况时,要改用手工或用枸橼酸钠抗凝。

  A.0型

  B.Ⅰ型

  C.Ⅱ型

  D.Ⅲ型

  E.Ⅳ型

  1.红细胞内充满网状物,似丝状球体,主要见于骨髓内,此网织红细胞为

  

『正确答案』B

『答案解析』红细胞内充满网状物,似丝状球体,主要见于骨髓内,此网织红细胞为Ⅰ型。

  2.红细胞内网状结构稀少,呈不规则枝点状排列,似破网形,主要见于外周血,此网织红细胞为

  

『正确答案』D

『答案解析』红细胞内网状结构稀少,呈不规则枝点状排列,似破网形,主要见于外周血,此网织红细胞为Ⅲ型。

  A.再生障碍性贫血

  B.急性溶血性贫血

  C.缺铁性贫血

  D.巨幼红细胞性贫血

  E.慢性病贫血

  1.外周血检查中网织红细胞增高最可能诊断的疾病是

  

『正确答案』B

『答案解析』网织红细胞增多见于溶血性贫血、放射治疗和化学治疗后。

  2.大细胞贫血多见于

  

『正确答案』D

『答案解析』大细胞贫血多见于巨幼红细胞性贫血。

  对一位贫血患者行血液分析时发现,红细胞直方图出现双峰且底部变宽,此现象多见于

  A.巨幼细胞性贫血

  B.珠蛋白合成障碍性贫血

  C.缺铁性贫血有效治疗后

  D.再生障碍性贫血

  E.难治性贫血

  

『正确答案』C

『答案解析』对一位贫血患者行血液分析时发现,红细胞直方图出现双峰且底部变宽,此现象多见于缺铁性贫血有效治疗后。

  尿液检验部分

  核心串讲

  实战演练

  ●标本采集

  ●理学检查

  ●化学检查

  ●有形成分检查

  ●尿液分析仪检查

  核心串讲

  【尿液生成和样本采集及处理】

尿液生成

肾单位没有集合管,近曲小管重吸收

全部重吸葡萄糖,肌酐几乎不被吸

抗利尿激素调节远曲小管集合管

最终实现浓缩和稀释

尿液标本种类

晨尿:

血细胞、上皮细胞、病理细胞、管型等有形成分,以及人绒毛膜促性腺激素(hCG)

随机尿:

门诊及急诊检查

计时尿:

3h尿,1h尿排泄率检查

餐后尿,病理性糖尿、蛋白尿或尿胆原

尿标本处理

在2h内及时送检,最好在30min内完成检验,保存在2~8℃冰箱内,冷藏时间最好不超过6h

甲醛:

对尿细胞、管型等有形成分的形态结构有较好的固定作用

甲苯:

尿标本表面形成一层薄膜,阻止尿中化学成分与空气接触,常用于尿糖、尿蛋白等化学成分的定性或定量检查

浓盐酸:

用作定量测定尿17-羟、17-酮、肾上腺素、儿茶酚胺、Ca2+等标本防腐

冰乙酸:

用于检测尿5-羟色胺、醛固酮等的尿防腐

  【尿理学检查】

尿量

正常每天1~2L,超过2.5L为多尿

小于0.4L是少尿,小于0.1L是无尿

少尿肾前肾性肾后,肾前缺血浓缩容量低

肾性损害肾实质,肾后石瘤尿梗阻

尿颜色和透明度

肉眼血尿1mL,镜下血尿>3/HP

三杯泌尿疾病初步判,尿道出血第一杯,膀胱出血第三杯

肾输三杯均有血。

Hb尿溶血酱油色,血尿鉴别镜和隐

组织损伤Mb尿,深黄泡沫胆红素尿。

乳糜尿中淋巴和脂肪丝虫病为较常见。

加热混浊消失结晶尿,沉淀出现脓菌尿

加酸混浊消失磷碳酸盐,产生气泡碳酸盐

尿比密

SG与溶质呈正比,折射仪法NCCLS和CCCLS作为参考法

糖尿病多尿伴高比密,尿崩症少尿伴低比密

固定在1.010±0.003,提示肾脏稀释浓缩功能严重损害

尿崩症:

SG<1.003

尿渗量

尿渗量与溶质颗粒数量、电荷有关

评估肾脏浓缩较好指标

尿渗量:

600~1000mOsm/(kg·H2O)

尿味

氨臭膀胱尿潴留,鼠臭苯丙酮尿症

腐臭泌尿感染膀胱癌,烂苹果糖尿酸中毒

大蒜有机磷药中毒

  【尿液有形成分检查】

  尿细胞

  血尿均一非肾,非均一肾,肾源肾炎肾病综;

  尿中小白中性粒,肾盂肾炎见闪光;

  变性坏死脓细胞,小吞N大吞M,镜下脓尿>5;

  上皮细胞肾移磷,小管上皮病自身;

  移行大小圆中尾,鳞状扁平个最大。

  尿管型

  管型基质蛋白TH,尿液浓度和酸化,

  提供交替肾单位,透明偶见缩尿动,

  管型肾脏实质变,红管早期小球变,

  白管肾脏有感染,颗管细胞残蛋白,

  粗粒可变细颗粒,蜡管提示肾小管,

  脂肪尤见肾病综,宽大肾衰同管型。

  尿结晶

  生草尿非马磷碳,

  病胱胆酪亮胆磺。

  胱六边胆缺角,

  亮油滴酪羽毛。

  

  【尿液化学检查】

尿蛋白

(PRO)

1.蛋白尿:

尿液中蛋白质超过150mg/24h或超过100mg/L时,蛋白定性试验呈阳性。

2.①试带法对清敏感,可漏检本周蛋白;尿液pH值增高产生假阳性;②加热乙酸法:

为传统的经典方法,加热-加酸-再加热;③磺基水杨酸法:

与清、球、糖和本等均反应;确证试验;

3.生理:

功能、体位、摄入、偶然、老年、妊娠

病理:

肾前、肾性、肾后性

尿糖

(GLU)

1.糖尿:

当血糖浓度超过肾糖阈(>8.88mmol/L)或肾小管重吸收能力下降时,尿糖定性试验呈阳性。

2.①试带法用葡萄糖氧化酶法,检测葡萄糖的特异性强、灵敏度高、简便快速。

②班氏(Benedict)传统尿糖定性

3.血糖增高性糖尿:

代谢、摄入、应激、内分泌

血糖正常性糖尿:

家族、新生儿、后天、妊娠

尿酮体

(KET)

1.尿酮体是尿液中乙酰乙酸(占20%)、β-羟丁酸(占78%)及丙酮(占2%)的总称。

2.①试带法传统的湿化学亚硝基铁氰化钠法,是目前临床最常用的尿酮体筛检方法。

②Rothera法亚硝基铁氰化钠可与尿中的乙酰乙酸、丙酮起反应呈现紫色,但不与β-羟丁酸起反应。

3.尿酮体检查有助于糖尿病酮症酸中毒早期诊断

尿胆红素

(BIL)

1.①重氮法:

维生素C可抑制重氮反应而呈假阴性。

②氧化法:

Harrison法

2.胆红素在阳光照射下易转变为胆绿素,因此应用避光棕色容器

尿胆原和尿胆素

1.尿胆红素、尿胆原及尿胆素,俗称尿三胆。

胆红素和尿胆原,俗称尿二胆

2.Ehrlich法:

与对二甲氨基苯甲醛反应,生成樱红色化合物

本周蛋白

(BJP)

1.凝溶蛋白:

Ig轻链,加热至40~60℃时可发生凝固,温度升至90~100℃时可再溶解,而温度减低至56℃左右,又可重新凝固

2.对-甲苯磺酸法:

操作简便、灵敏度高,但特异性较差。

是较敏感的筛检试验方法。

3.主要用于多发性骨髓瘤、原发性淀粉样变性、巨球蛋白血症及其他恶性淋巴增殖性疾患

hCG

1.由胎盘合体滋养细胞分泌的一种具有促进性腺发育的糖蛋白激素。

妊娠8~10周(60~70d)时血清浓度达到高峰。

2.采用高效的抗hCGβ亚基单克隆抗体检查hCG;单克隆抗体二点酶免疫法在受精卵着床后5~7d即能检测出hCG

  【尿液分析仪检查】

项目

反应原理

注意事项

pH

pH指示剂

标本时间过长,pH↑

Pro

pH指示剂蛋白质误差法

清蛋白敏感

GLU

葡萄糖氧化酶

VitC、SG过高假阴性

过、次、强污染假阳性

BLD

Hb类过氧化酶法

VitC(>100mg/L)假阴性

BIL

偶氮反应法

避免阳光照射、

VitC-假阴性

URO

醛反应法

 

KET

亚硝基铁氰化钠法

不与β-羟丁酸反应

NIT

硝酸盐还原法

3个条件:

硝酸盐、硝酸盐还原酶及停留>4h。

VitC-假阴性

LEU

白细胞酯酶法(粒细胞)

中性粒细胞

SG

多聚电解质离子解离法

尿液pH≥7.0时,干化学测定结果的基础上增加0.005

VitC

还原法

血红蛋白、胆红素、葡萄糖及亚硝酸盐可产生严重的负干扰

  两种方法、两种形态不相符的情形

  ①分析仪法(+),镜检法(-):

  白细胞,白细胞破坏,中性粒细胞酯酶释放到尿中;

  红细胞,红细胞破坏释放出血红蛋白,多见肾病患者,尿中含有对热不稳定酶、肌红蛋白或菌尿。

  ②分析仪法(-),镜检法(+):

  白细胞,肾移植排异反应,以L为主,也可以M为主;

  红细胞,含有大量维生素C(>100mg/L)或试带失效。

  实战演练

  形成尿管型的主要基质蛋白是

  A.血浆蛋白浓度增高

  B.纤维蛋白浓度增高

  C.T-H蛋白浓度增高

  D.尿液液化

  E.草酸钙结晶增多

  

『正确答案』C

『答案解析』形成尿管型的主要基质蛋白是T-H蛋白浓度增高。

  蛋白尿指每升尿中蛋白浓度超过

  A.100mg

  B.150mg

  C.200mg

  D.250mg

  E.300mg

  

『正确答案』A

『答案解析』蛋白尿指每升尿中蛋白浓度超过100mg。

  肾糖阈超过

  A.3.6mmol/L

  B.6.1mmol/L

  C.7.0mmol/L

  D.8.88mmol/L

  E.11.1mmol/L

  

『正确答案』D

『答案解析』肾糖阈是8.88mmol/L。

  尿胆原检测最好收集

  A.晨尿

  B.早餐后2~4h尿

  C.午餐后2~4h尿

  D.晚餐后2~4h尿

  E.晚上12点尿液

  

『正确答案』C

『答案解析』尿胆原检测最好收集午餐后2~4h尿。

  尿中出现75%多形性红细胞,应考虑为

  A.肾结核

  B.急性肾小球肾炎

  C.急性膀胱炎

  D.肾结结石

  E.肾肿瘤

  

『正确答案』B

『答案解析』尿中出现75%多形性红细胞,应考虑为急性肾小球肾炎。

  干化学试带法pH测定所使用的指示剂是

  A.甲基红

  B.溴麝香草酚蓝

  C.中性红

  D.甲基红和溴麝香草酚蓝

  E.中性红和溴麝香草酚蓝

  

『正确答案』D

『答案解析』干化学试带法pH测定所使用的指示剂是甲基红和溴麝香草酚蓝。

  本周蛋白主要提示哪种疾病

  A.艾滋病

  B.移植物抗宿主病

  C.多发性骨髓瘤

  D.IgA缺乏症

  E.急性淋巴细胞白血病

  

『正确答案』C

『答案解析』本周蛋白主要提示多发性骨髓瘤。

  下列关于尿糖试带法测定的叙述,错误的是

  A.利用葡萄糖氧化酶法原理

  B.试剂中主要成分是葡萄糖氧化酶

  C.试剂中色原是邻联甲苯胺

  D.尿中所有的糖均起反应

  E.服用大剂量的VitC可致假阴性

  

『正确答案』D

『答案解析』大多数试带法不与乳糖、半乳糖、果糖及还原物质发生反应。

  尿液加酸后浑浊消失多为

  A.脓尿

  B.磷酸盐尿

  C.菌尿

  D.乳糜尿

  E.血尿

  

『正确答案』B

『答案解析』尿液加酸后浑浊消失多为磷酸盐尿。

  尿渗量测定主要用于了解

  A.肾小球滤过功能

  B.肾浓缩和稀释功能

  C.肾血管舒缩功能

  D.肾内分泌功能

  E.肾集合管分泌功能

  

『正确答案』B

『答案解析』尿渗量测定主要用于了解肾浓缩和稀释功能。

  大剂量VitC可引起尿试带法假阴性,但不包括

  A.GLU

  B.KET

  C.BIL

  D.BLD

  E.NIT

  

『正确答案』B

『答案解析』大剂量VitC不会引起尿试带法检测KET假阴性。

  梗阻性黄疸的特征是

  A.尿胆原阴性,尿胆红素阳性

  B.尿胆原阳性,尿胆红素阴性

  C.血中以间接胆红素增加为主

  D.尿胆原和尿胆红素均阴性

  E.尿胆原和尿胆红素均阳性

  

『正确答案』A

『答案解析』梗阻性黄疸的特征是尿胆原阴性,尿胆红素阳性。

  血红蛋白尿属于

  A.肾小球性蛋白尿

  B.组织性蛋白尿

  C.肾小管性蛋白尿

  D.溢出性蛋白尿

  E.混合性蛋白尿

  

『正确答案』D

『答案解析』血红蛋白尿属于溢出性蛋白尿。

  关于尿本-周蛋白的叙述,正确的是

  A.加热至80℃~100℃时,沉淀溶解

  B.不能自由通过肾小球滤过膜

  C.能通过近曲小管分泌

  D.加热30℃~50℃时沉淀

  E.免疫球蛋白轻链

  

『正确答案』E

『答案解析』尿本-周蛋白是免疫球蛋白轻链。

  通常尿10项试带不能测定

  A.比密

  B.蛋白

  C.葡萄糖

  D.胆红素

  E.维生素C

  

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