推荐下载关于高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸黄芩苷连翘苷汉黄.docx
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关于高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄
【编者按】：
医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果
的论说性文章。
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关于高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄
【摘要】：
目的建立同时测定双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷和汉黄芩
素含量的高效液相色谱法。
方法采用VP-ODSC18色谱柱（250mm4.6mm,5流动相：
乙腈-0.2%磷酸溶液梯度洗脱;流速：
1.0mL/min;检测波长：
278nm。
结果绿原酸在
0.44～6.60g范围内线性关系良好（r=0.9991）,平均回收率为97.0%;黄芩苷在0.52～6.18
g范围内线性关系良好（r=0.9991）,平均回收率为98.98%;连翘苷在0.20～2.04g范围内
线性关系良好（r=0.9993）,平均回收率为103.55%;汉黄芩素在0.13～1.76g范围内线性关
系良好（r=0.9991）,平均回收率为96.49%。
结论本方法简便可行、准确、快速,可用于
双黄连口服液中上述4种成分的含量测定。
1
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【关键词】双黄连口服液绿原酸黄芩苷连翘苷汉黄芩素高效液相色谱法含量
测定
Abstract：
ObjectiveToestablishaHPLCmethodforthedeterminationofchlorogenic
acid,baicaliin,forsythinandwogonininShuanghuanglianoralliquid.MethodsThecolumn
wasVP-ODSC18（250mm4.6mm,5m）.Themobilephaseconsistedofacetonitrile-0.2%
phosphoricacidwithgradientelution.Theflowratewas1.0mL/minandthedetection
wavelengthwasat278nm.ResultsThecalibrationcurveswerelinearwithintherangeof
0.44～6.60g（r=0.9991）forchlorogenicacid,0.52～6.18g（r=0.9991）forbaicaliin,0.20～
2.04g（r=0.9993）forforsythin（r=0.9993）and0.13～1.76g（r=0.9991）forwogonin,
respectively.Theaveragerecoveryofthemwere97.0%（RSD=1.1%）,98.98%（RSD=1.1%）,
103.55%（RSD=1.1%）and96.49%（RSD=1.1%）,respectively.ConclusionThemethodis
simple,practicable,accurateandrapid.Itcanbeappliedtocontentdeterminationof
chlorogenicacid,baicaliin,forsythinandwogonininShuanghuanglianoralliquid.
Keywords：
Shuanghuanglianoralliquid;chlorogenic
acid;baicaliin;forsythin;wogonin;HPLC
双黄连口服液由金银花、黄芩及连翘经提取精制而成,具有辛凉解表、清热解毒功效,
对于上呼吸道感染、扁桃体炎、咽炎、病毒性肺炎等细菌和病毒感染性疾病有一定疗
效。
其中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩素是其主要活性成分。
2005年版《中华人
民共和国药典》（一部）采用高效液相色谱法只测定了绿原酸、黄芩苷、连翘苷的含量
2
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[1],而且是采用包括甲醇-醋酸-水、乙腈-醋酸-水的不同流动相分别测定。
本试验参照文
献[2],通过优化色谱条件,建立了不经提取分离,利用梯度洗脱法同时测定上述4种成分
含量的高效液相色谱法,具有简便可行、准确、快速的特点,减少了配制流动相的步骤和
进样次数,提高了工作效率,取得了满意效果。
1仪器与试药
岛津LC-10ATvp高效液相色谱仪;SPD-10Avp紫外可见检测器;CLSS-VP色谱工作
站;CTO-10ASvp柱温箱;7725i手动进样器。
绿原酸对照品（批号110753-200212）、黄芩
苷对照品（批号110715-200514）、连翘苷对照品（批号110821-200609）、汉黄芩素对照品
（批号110514-200403）均由中国药品生物制品检定所提供。
双黄连口服液由中国人民解
放军252医院药剂科提供,批号20070115、20070121、20070212。
甲醇、乙腈均为色谱
纯,磷酸为分析纯,水为三蒸水。
2方法与结果
2.1色谱条件与系统适应性试验
色谱柱：
岛津VP-ODSC18柱（250mm4.6mm,5流动相：
乙腈（A）-0.2%磷酸溶液
（B）（A+B=100%）作梯度洗脱,t=06min,A：
27%;t=610min,A：
30%;t=1015min,A：
3
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60%;t=1525min,A：
90%;流速：
1.0mL/min;检测波长：
278nm;柱温：
25℃;进样量20
L。
在上述色谱条件下,4种待测组分与邻近组分达到了基线分离,理论塔板数按绿原酸
峰计算不低于3000。
2.2溶液的制备
2.2.1对照品溶液的制备
精密称取绿原酸、黄芩苷、连翘苷和汉黄芩素对照品适量,置10mL容量瓶中,加50%
甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,分别制成浓度为1.10、1.03、0.51、0.44mg/mL的对照品
母液。
2.2.2供试品溶液的制备
精密吸取双黄连口服液1.0mL,置50mL容量瓶中,加50%甲醇溶解并稀释至刻度,摇
匀,0.45m微孔滤膜过滤,即得。
2.2.3阴性对照溶液的制备
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按处方比例及制备工艺,分别制备缺金银花、黄芩、连翘的阴性对照样品,按供试品溶
液的制备方法制成阴性对照品溶液。
2.3线性关系考察
分别精密吸取绿原酸对照品母液0.20、0.40、0.75、1.50、3.0mL,黄芩苷对照品母液
0.25、0.50、1.0、2.0、3.0mL,连翘苷对照品母液0.20、0.40、0.60、1.20、2.0mL,汉黄
芩素对照品母液0.15、0.25、0.50、1.0、2.0mL,对应加入10mL量瓶中,加甲醇稀释至
刻度,摇匀,配制成5个浓度的混合对照品溶液,进样测定,记录色谱图。
以峰面积为纵坐
标,分别以绿原酸、黄芩苷、连翘苷和汉黄芩素进样量为横坐标,绘制标准曲线,得回归方
程。
绿原酸：
Y=1.04107X+1.40105,r=0.9996;黄芩苷：
Y=3.87106X-1.26104,r=0.999
9;连翘苷：
Y=6.44105X+1.74104,r=0.9999;汉黄芩素：
Y=6.30106X+1.45105,r=0.999
9。
结果表明,绿原酸进样量在0.44～6.60g范围内,黄芩苷进样量在0.52～6.18g范围内,
连翘苷进样量在0.20～2.04g范围内,汉黄芩素进样量在0.13～1.76g范围内,线性关系
良好。
2.4精密度试验
精密吸取绿原酸、黄芩苷、连翘苷和汉黄芩素混合对照品溶液注入液相色谱仪,连续
进样5次,绿原酸峰面积RSD=1.12%,黄芩苷峰面积RSD=0.86%,连翘苷峰面积
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RSD=0.72%,汉黄芩素峰面积RSD=0.58%。
结果表明,所选方法精密度良好。
2.5稳定性试验
精密吸取同一供试品溶液,分别在0、2、4、6、8、10、12、24h进样,测定样品中绿
原酸、黄芩苷、连翘苷和汉黄芩素的峰面积,结果绿原酸RSD=1.74%,黄芩苷
RSD=2.04%,连翘苷RSD=1.81%,汉黄芩素RSD=2.38%,表明样品溶液在24h内稳定。
2.6重复性试验
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关于中成药不合理用药处方分析
【关键词】门诊处方;不合理用药;中成药
笔者对北京一所三级甲等综合性医院的门诊中成药处方进行了调查,对其中不合理用
药的处方进行了分类统计,现将结果介绍如下。
1资料与方法
随机抽取该院门诊2007年3-12月中成药处方20340张,占同期处方总量的4.6%。
依
据相关中医药理论知识、药品说明书、《处方管理办法》和《北京市基本医疗保险和工
伤保险药品目录》进行分类统计。
2结果
不合理用药处方分类统计共发现不合理用药处方1362张,占所抽取处方的6.69%。
其
中,用药与诊断不符、重复用药、用药禁忌问题较为突出。
详见表1。
表1不合理用药
处方情况分析（略）
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3分析
3.1用药与诊断不符3.1.1盲目按病名或症状用药如牛黄清胃丸功效为清胃泻火、
通便,误用于治疗胃炎;热炎宁颗粒适应症为风热感冒,误用于治疗胆囊炎;根痛平片适应
症为颈椎病,误用于治疗头痛;开胸顺气丸适应症为饮食内停、气郁不舒导致的胸胁胀
满、胃脘疼痛,误用于治疗肺炎等。
3.1.2错用药物如舒肝和胃丸适应症为两胁胀满、
食欲不振、打嗝呕吐、胃脘疼痛、大便失调,误用于治疗泌尿道感染;迈之灵片适应症为
静脉曲张、创伤后静脉性水肿和痔静脉曲张的内、外痔急性发作,误用于治疗皮炎;牛黄
上清丸适应症为目赤耳鸣、咽喉肿痛、口舌生疮、牙龈肿痛、大便燥结,误用于治疗膝
骨关节病。
3.2重复用药
即同时使用2种以上组方基本相同的药物治疗一种疾病。
如牛黄上清丸合清热解毒
颗粒治疗上呼吸道感染;清咽滴丸合牛黄上清丸、牛黄清火丸治疗咽炎;消痛贴膏合麝香
壮骨膏、狗皮膏治疗骨关节痛;益胆片合胆康胶囊治疗胆结石症;松龄血脉康胶囊合牛黄
降压片治疗高血压;八正合剂合热淋清颗粒治疗泌尿系感染;新清宁片合牛黄解毒片治疗
便秘;使用感冒清热颗粒合感冒清热软胶囊治疗感冒。
3.3违禁用药
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3.3.1药品说明书中提到的特殊人群用药禁忌
在给患者开具处方时,没有按照说明书中的要求使用。
例如：
高血压慎用正天丸;急性
胃炎忌用根痛平颗粒（片）;感冒患者不宜服用左归丸、生脉饮、坤宝丸、颈复康颗粒、
皮肤病血毒丸、八珍颗粒、六味地黄丸、活力苏口服液、大补阴丸和仙灵骨葆胶囊,以
及糖尿病患者禁用含糖颗粒制剂、蜜丸和口服液等。
3.3.2未掌握适应证
给胃炎患者同时开具温胃舒胶囊（用于胃脘冷痛）和养胃舒胶囊（用于胃脘灼热）;给感冒
患者同时开具用于风寒感冒的感冒清热颗粒和用于风热感冒的双黄连口服液、银翘解
毒颗粒,或同时开具葛根汤颗粒和双黄连口服液。
3.3.3十八反、十九畏
如含有醋芫花和甘遂的祛痰止咳颗粒与含有甘草的通宣理肺丸、镇咳宁胶囊等药同
时应用。
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3.4超范围用药
3.4.1超出说明书中的日用量
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精密称取同一批号5份样品,按供试品溶液制备方法制备,进样,记录峰面积,结果绿原
酸RSD=1.48%,黄芩苷RSD=1.53%,连翘苷RSD=1.34%,汉黄芩素RSD=1.58%,表明方法
重复性良好。
2.7阴性对照试验
分别取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液,按2.1项下色谱条件进样测定,绘制
色谱图。
结果阴性对照溶液在供试品溶液及对照品溶液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷和
汉黄芩素保留时间相应位置上均无吸收峰出现,表明阴性对照无干扰。
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2.8加样回收率试验
精密量取同一批号0.2mL双黄连口服液4份于50mL容量瓶中,分别加入绿原酸、黄
芩苷、连翘苷和汉黄芩素对照品溶液适量,加50%甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,0.45m
微孔滤膜过滤。
按2.1项下色谱条件进样测定其含量,计算加样回收率,结果见表1。
表
1绿原酸、黄芩苷、连翘苷和汉黄芩素回收率测定结果（略）
2.9样品含量测定
取3批样品,按2.2.2项下方法分别制成供试品溶液,精密吸取对照品溶液和供试品溶
液注入液相色谱仪,按2.1项下色谱条件测定,用外标法计算样品中绿原酸、黄芩苷、连
翘苷和汉黄芩素的含量,结果见表2。
表2样品含量测定结果（略）
3讨论
3.1供试品溶液制备方法的选择
2005版《中华人民共和国药典》（一部）高效液相色谱法测定绿原酸的含量时对供试
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品溶液处理采用加水稀释样品的方法,测定黄芩苷的含量时采用50%甲醇超声处理20
min,测定连翘苷的含量时采用过中性氧化铝柱洗脱。
文献报道也多采用上述方法[3-
6]。
我们在试验中观察到：
50%甲醇超声处理20min与50%、100%甲醇溶解、过滤所
得色谱峰的峰面积结果无明显区别,而溶解过滤操作更为简便易行,所以,选择甲醇溶解过
滤供试品。
制备供试品溶液使用纯甲醇和50%甲醇做溶剂所得色谱峰的峰形、峰面积
均无明显区别,从节约成本的角度出发,本试验最终选择50%甲醇溶解、过滤制备供试品
溶液。
3.2检测波长的选择
本试验对绿原酸、黄芩苷、连翘苷和汉黄芩素4种对照品进行了200～400nm紫外
光谱扫描,结果表明,绿原酸在218nm处有较强的吸收,在240nm和295nm处有次强吸
收;黄芩苷在278nm处有较强的吸收,在315nm处有次强吸收;连翘苷在228nm处有较
强的吸收,在278nm处有次强吸收;汉黄芩素在278nm处有一个最大吸收峰。
考虑到连
翘苷和汉黄芩素在样品中含量较低,而绿原酸和黄芩苷在样品中含量较高,为了提高连翘
苷和汉黄芩素检测灵敏度,以选择汉黄芩素的最大吸收波长278nm作为检测波长,提高
汉黄芩素的检测灵敏度,减少4个成分峰之间峰高的差别。
3.3流动相的选择
我们在试验中发现,甲醇与水混合压力明显增高,而乙腈同样与水混合并不如此。
与甲
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醇相比,乙腈的洗脱能力强,且粘度较小,柱压大小比较合适,可以满足色谱系统流速在1.0
mL/min条件下检测的要求,并且系统分离效果较好,峰形对称,柱效高,保留时间适宜。
因
此,综合来看,乙腈-水系统要优于甲醇-水系统。
试验中观察到,乙腈-磷酸比乙腈-水做流
动相所得的色谱峰要稍微敏锐,拖尾减少。
而且,我们曾经尝试对磷酸的浓度进行
0.1%～1.0%调节,发现在此范围内对峰形的变化无明显影响,从保护色谱柱的角度考虑,
决定采用乙腈-0.2%磷酸溶液作为流动相。
3.4洗脱方式的选择
本制剂为中药复方,成分较复杂,且黄芩苷与汉黄芩素分别为黄酮苷和黄酮苷元,极性差
别较大,采用等度洗脱法难以达到有效分离。
曾选用乙腈-0.2%磷酸（30∶70）的色谱条件,
绿原酸与邻近组分分离效果不佳,而汉黄芩素的对照品在40min左右出峰,保留时间明
显延长,样品溶液在同一保留时间里未发现相应的色谱峰。
采用梯度洗脱的方法,在检测
过程的前6min保持乙腈的比例为27%,使绿原酸与邻近组分达到基线分离;6～25min
将乙腈的比例逐步提高到90%,一方面缩短汉黄芩素的出峰时间,更重要的是通过大幅度
增加乙腈的浓度来提高洗脱效果,结果汉黄芩素对照品在22.5min左右出峰,供试品与对
照品在同一保留时间里有一相应的色谱峰,分离效果较好,峰形对称。
在此条件下,黄芩苷
和连翘苷的保留时间适宜,峰形对称,分离度好,从而可以将上述4种成分同时测定。
【参考文献】
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仅供参阅！
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[S].北京：
化学工业出版社,2005.405-
406.
[2]金永新,要林青,杨晓冬,等.RP-HPLC法同时测定复方鱼腥草片中绿原酸、连翘
苷、黄芩苷的含量[J].中国药师,2004,7（7）：
524-526.
[3]刘芳.高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸的含量[J].湖北中医杂
志,2003,25（9）：
46-47.
[4]陈玉谊.HPLC测定双黄连口服液中黄芩苷的含量[J].海峡药学,2003,15（4）：
47-48.
[5]张玉洁,黄海欣.HPLC测定双黄连口服液中连翘苷的含量[J].华西药学杂
志,2005,20（4）：
360-361.
14
[键入文字]
[6]方崇波.高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸和黄芩苷的含量[J].医药导
报,2004,23（12）：
951-952
医药卫生栏目
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