《选三专题一基因工程》近几年高考题汇编.docx
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《选三专题一基因工程》近几年高考题汇编
《专题一基因工程》近几年高考题汇编
一、选择题
1．（2009安徽理综·4）2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展水母绿色荧光蛋白”的三位科学家。
将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达
出的蛋白质就会带有绿色荧光。
绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是
A．追踪目的基因在细胞内的复制过程B．追踪目的基因插入到染色体上的位置
C．追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布
D．追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构
2．（2009浙江理综·3）下列关于基因工程的叙述，错误的是
A．目的基因和受体细胞均可来自动、或微生物
B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶
C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性
D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达
3．（2009广东理科基础·45）钱永健先生因在研究绿色荧光蛋白方面的杰出成就而获2008年诺贝尔奖。
在某种生物中检测不到绿色荧光，将水母绿色荧光
蛋白基因转入该生物体内后，结果可以检测到绿色荧光。
由此可知
A．该生物的基因型是杂合的B．该生物与水母有很近的亲缘关系
C．绿色荧光蛋白基因在该生物体内得到了表达
D．改变绿色荧光蛋白基因的1个核苷酸对，就不能检测到绿色荧光
4．（2008浙江理综·4）已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指。
如果该线性DNA分
子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。
现有多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是
A．3B．4C．9D．12
5．（2007北京理综·2）利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需的产品。
下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是
A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因
B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA
C．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列
D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白
6．（2007全国Ⅱ·4）下列有关基因工程中限制性内切酶的描述，错误的是
A．一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列
B．限制性内切酶的活性受温度影响
C．限制性内切酶能识别和切割RNAD．限制性内切酶可从原核生物中提取
7．（2006四川理综·4）用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。
下列叙述错误的是
A．常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒
B．DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶
C．可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
D．导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
8．（2006江苏生物·15）我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。
下列叙述不正确的是
A．基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少
B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失
C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染
D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的
9．（2006广东生物·23）下列关于基因工程应用的叙述，正确的是
A．基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B．基因诊断的基本原理是DNA分子杂交
C．一种基因探针能检测水体中的各种病毒
D．原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良
10.（2011·浙江高考）将ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。
下列叙述错误的是（）
A.每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒
B.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点
C.每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada
D.每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子
11.（2010·浙江高考·T2）在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是
A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸
B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C.将重组DNA分子导入烟草原生质体
D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
12．（2010·江苏高考·T18）下列关于转基因植物的叙述，正确的是
A．转入到油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传入环境中
B．转抗虫基因的植物，不会导致昆虫群体抗性基因频率增加
C．动物的生长激素基因转入植物后不能表达
D．如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题
二、非选择题
13．（2009福建理综·32）（10分）转基因抗病
香蕉的培育过程如图所示。
质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。
请回答：
（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶，对进行切割。
（2）培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤
组织细胞的生长，欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有，作为标记基因。
（3）香蕉组织细胞具有，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。
图中
、
依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的
。
14．（2009山东35）（8分）人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。
已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：
请回答：
（1）过程①代表的是。
（2）过程②构建A基因表过载体时，必须使用___和
两种工具酶。
（3）过程③采用的实验技术是，获得的X是。
（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的所制备的疫苗。
对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行
比较；或用图中的进行特异性结合检测。
15．（2009江苏生物·34
）（7分）苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。
下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），据图回答下列问题。
（1）将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有__________种DNA片段。
（2）图中②表示HindⅢ与BamⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得_________种重组质粒；如果换用BstⅠ与BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得_________种重组质粒。
（3）目的基因插入质粒后，不能影响质粒的___。
（4）图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T-DNA导人植物细胞，并防止植物细胞中_________对T—-DNA的降解。
（5）已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。
而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞_________。
（6）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的_______基因频率的增长速率。
16.（2009广东A卷·39）（10分）
（1）饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。
利用蛋白质工程技术对其进行改造时，首先必须了解植酸酶的，然后改变植酸酶的，从而得到新的植酸酶。
（2）培育转植酸梅基因的大豆，可提高其作为饲料原料磷的利用率。
将植酸酶基因导入大豆细胞常用的方法是。
请简述获得转基因植株的完整过程。
（3）为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过_______转入猪的受精卵中。
该受精卵培养至一定时期可通过______方法，从而一次得到多个转基因猪个体。
（4）若这些转基因因动、植物进入生态环境中，对生态环境有何影响？
17．（2009天津理综·8-⑸）为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因水稻品种。
下图是获取植酸酶基因的流程。
据图回答：
①图中基因组文库____________（小于/等于/大于）cDNA文库。
②B过程需要的酶是______________；A、C过程中_____________（可以/不可以）使用同一种探针筛选
含目的基因的菌株。
③目的基因Ⅰ和Ⅱ除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中___________。
和_____________为模板直接进行PCR扩增，该过程中所用酶的显著特点是_________________________。
18．（2009安徽理综·31-⑸）紫花中的紫色物质是一种天然的优质色素，但由于B基因表达的酶较少，紫色物质含量较低。
设想通过基因工程技术，采用重组的Ti质粒转移一段DNA进入细胞并且整合到染色体上，以促进B基因在花瓣细胞中的表达，提高紫色物质含量。
右图是一个已插入外源DNA片断的重组Ti质粒载体结构模式图，请填出标号所示结构的名称：
①；②；③。
19．（09四川理综·31-⑵）有人试图利用细菌的抗病毒基因对不抗病大豆进行遗传改良，以获得抗病大豆品种。
①构建含外源抗病毒基因的重组DNA分子时，使用的酶有______________________。
②判断转基因大豆遗传改良成功的标准是_____________________________________，具体的检测方法________________________。
20．（2008山东理综·35）为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。
我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。
（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的处，DNA连接酶作用于
处。
（填“a”或“b”）
（2）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和法。
（3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用技术，该技术的核心是和。
（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的作探针进行分子杂交检测，又要用方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。
21．（2007天津理综·30）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kanr）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。
下图为获得抗虫棉的技术流程。
请据图回答：
（1）A过程需要的酶有
。
（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是。
（3）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入。
（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用作为探针。
（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。
①将转基因植株与杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1∶1。
②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为。
③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占%。
22．（2007山东理综·35）继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。
最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。
请回答：
（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是。
（2）进行基因转移时，通常要将外源基因转入中，原因是。
（3）通常采用技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。
（4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的细胞中特异表达。
（5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠体细胞的转入细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。
该技术称为。
23．（2008海南生物·26）下图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因。
tetR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。
已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、NamHI在内的多种酶的酶切位点。
据图回答：
（1）将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有、、三种。
若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行。
（2）用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。
之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是。
（3）目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是。
24．（2008广东生物·39）天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。
研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。
请回答下列问题：
（1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是，用将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，下一步将该DNA分子，以完成工程菌的构建。
（2）若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用检测。
将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一定时间后，加入碘液，工程菌周围出现透明圈，请解释该现象发生的原因。
（3）如何进一步鉴定不同的转基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小？
（4）微生物在基因工程领域中有哪些重要作用？
25.（2011·海南高考）回答有关基因工程的问题：
（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生末端。
若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生（相同、不同）黏性末端的限制酶。
（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是。
在用表达载体转化大肠杆菌时，常用处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为。
为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成，常用抗原—抗体杂交技术。
（3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的上。
26.（2011·山东高考）（8分）人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。
利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。
（1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可从已处死的雌鼠中获取。
（2）图中的高血压相关基因作为，质粒作为，二者需用切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有
有关。
（3）子代大鼠如果和，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。
27．（2010·福建高考·T32）红细胞生成素（EPO）是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。
由于天然EPO来源极为有限，目前临床上使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素（rhEPO），其简要生产流程如图。
请回答：
（1）图中①所指的是技术。
（2）图中②所指的物质是，③所指的物质是。
（3）培养重组CHO细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定期更换。
（4）检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。
分泌该单克隆抗体的细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓癌细胞融合而成。
28．（2010·江苏高考·T27）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。
请回答下列问题：
（1）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有个游离的磷酸基团。
（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越。
（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SrnaⅠ切割，原因是。
（4）与只使用EcoRI相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止。
（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入酶。
（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了。
（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。
29、（2010·上海高考·七）分析有关基因表达的资料，回答问题。
（9分）
取同种生物的不同类型细胞，检测其基因表达，结果如右图。
（1）.基因1～8中有一个是控制核糖体蛋白质合成的基因，则该基因最有可能是基因。
（2）.图所示细胞中功能最为近似的是细胞。
A.1与6B.2与5
C.2与3D.4与5
（3）.判断图中细胞功能近似程度的依据是。
（4）.现欲研究基因1和基因7连接后形成的新基因的功能，导入质粒前，用限制酶切割的正确位置是。
（5）.右上图是表达新基因用的质粒的示意图，若要将新基因插入到质粒上的A处，则切割基因时可用的限制酶是。
A.HindⅢB.EcoRIC.EcoBD.PstI
（6）.新基因与质粒重组后的DNA分子导入受体细胞的概率很小，因此需进行，才能确定受体细胞已含有目的基因。
（7）.在已确定有目的基因的受体细胞中，若质粒的抗青霉素基因缺失了两个碱基，将这样的受体细胞接种到含有青霉素的培养基中，该细胞中可能出现的结果是（多选）
A.抗青霉素基因不能转录B.基因1和7没有表达
C.基因1和7不能连接D.质粒上的酶切位置发生改变
30．（2010·海南高考·T26）请回答基因工程方面的问题：
（4）利用基因工程可以获得转基因牛，从而改良奶牛的某些性状。
基因工程的四个基本操作步骤是＿＿＿＿＿＿＿、基因表达载体的构建、＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿。
若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：
某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿和复制原点等。
将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是＿＿＿＿＿（显微注射法、农杆菌转化法），为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是＿＿＿＿＿（受精卵、乳腺细胞）。
《专题一基因工程》近几年高考题汇编答案
一、选择题
题号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
答案
C
D
C
C
D
C
B
D
B
C
A
A
13.⑴PstⅠ、EcoRⅠ//含抗病基因的DNA、质粒；
⑵抗卡那霉素基因；⑶全能性//脱分化、再分化。
14.⑴逆转录；
⑵限制性核酸内切酶（限制酶、限制性内切酶）//DNA连接酶（两空可以互换）；
⑶细胞融合//杂交瘤细胞；
⑷A蛋白//核酸（基因）序列//抗A蛋白的单克隆抗体。
15.
（1）4；
（2）21；（3）复制；（4）DNA水解酶；
（5）表面无相应的特异性受体；（6）抗性。
16.⑴空间结构//氨基酸序列；
⑵农杆菌介导的转化法//外源植酸酶基因→农杆菌→大豆细胞→大豆植株再生→鉴定；
⑶显微注射法//胚胎分割移植；
⑷减少环境中磷的污染，但该基因可能扩散到环境中。
17.①大于；②逆转录酶//可以；③DNAcDNA//耐高温。
18.①T-DNA；②标记基因；③复制原点。
19.①限制性内切酶和DNA连接酶；
②培育的植株具有病毒抗体//用病毒分别感染转基因大豆植株和不抗病植株，观察比较植株的抗病性。
20.⑴a，a；⑵基因枪（花粉管通道）；
⑶植物组织培养//脱分化（去分化）//再分化；
⑷耐盐基因（目的基因）一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中）。
21.⑴限制性内切酶和DNA连接酶；
⑵具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存；
⑶卡那霉素；⑷放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因；
⑸①非转基因植株//②3∶1//③100。
22.⑴显微注射；
⑵受精卵（或早期胚胎）受精卵（或早期胚胎细胞）具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达；
⑶DNA分子杂交（核酸探针）；
⑷膀胱上皮；⑸细胞核去核的卵核移植（或克隆）。
23.
（1）目的基因—载体连接物载体—载体连接目的基因—目的基因连接物分离纯化（其他合理答案也给分）；
（2）载体—载体连接物//目的基因—载体连接物载体—载体连接物；
（3）启动子mRNA；（4）EcoRI和BamHI（只答一个酶不给分）。
24.
（1）限制性核酸内切酶，DNA连接酶，导入酿酒酵母菌。
（2）DNA分子杂交；抗原-抗体杂交或淀粉酶活性，该工程菌产生的淀粉酶可分泌至培养基，水解淀粉后的区域，遇碘不再变蓝色，因此产生透明圈。
（3）测定相同培养条件下不同工程菌菌株的淀粉酶活性或酒精产量。
（4）①工具酶主要来自原核生物；②最重要的目的基因供体库之一；③目的基因的载体之一；④作为受体细胞；⑤提供用于发酵的工程菌。
25、
（1）平相同
（2）RNA聚合酶识别和结合的部位Ca2+分子杂交技术蛋白质
（3）T—DNA染色体DNA
26、
（1）卵巢
（2）目的基因载体同一种限制性内切酶限制性内切酶的切割位点
（3）检测到相应蛋白质出现高血压
27、（10分）
（1）PCR
（2）mRNArhEPO
（3）培养液（4）杂交端
28、
（1）0、2
（2）高
（3）SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因
（4）质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化
（5）DNA连接
（6）鉴定和筛选含有目的基因的细胞
（7）蔗糖为唯一含碳营养物质
29、
（1）.2
（2）.A
（3）.表达的相同基因最多，差异表达的基因最少（4）.B
（5）.C（6）筛选（7）.AB
30、（4）获取目的基因将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定人干扰素基因（或目的基因）终止子标记基因显微注射法受精卵
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