分光光度法测定韭菜灰中铁的含量.docx
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分光光度法测定韭菜灰中铁的含量
综合性、设计性实验报告
（本科学生）
姓名：
赵明熙
沙正龙
冯玉荣
赵玉
学号：
2011021153
2011021159
2011021141
2011021125
专业：
化学教育
班级：
2011级
实验课程名称：
分光光度法测定韭菜灰中铁的含量
指导教师及职称：
郭红老实高级实验师
开课学期：
2012至2013学年下学期
上课时间：
2013年6月4-5日
资源环境学院编印
一、实验设计方案
实验序号及名称：
分光光度法测定韭菜灰中铁的含量
实验时间：
2013.6.4-2013.6.5
小组合作：
是〇否〇
小组号：
4号成员：
赵明熙、沙正龙、赵玉、冯玉荣
一、实验目的：
1.熟悉掌握分光光度法测定铁含量的原理和方法。
2.进一步熟悉分光光度计和吸量管的使用方法。
3.采用邻二氮菲分光光度法对油菜和韭菜中铁的含量进行测定，为指导人们合理食用蔬菜进行补铁及开发蔬菜产品提供理论依据
二、实验设备及仪器组成：
1.材料：
新鲜的韭菜
2.仪器：
分光光度计电子分析天平500ml、250ml容量瓶50ml比色管烧杯滴管吸量管移液管坩埚高温炉水浴锅
3.试剂：
①铁标准溶液：
称取0.4317gNH4Fe（SO4）2·12H2O,加入20mL2moL/LHCl溶液，溶解后移入500mL容量瓶中,以蒸馏水稀释至刻度,摇匀,即得铁含量为100μg/mL的储备液,取25.0mL储备液于250mL容量瓶中,稀释为10.0μg/mL的铁标准溶液.
②邻二氮菲溶液:
1.5g/L（临用时配制,应先用少许酒精溶解,再用水稀释）
③盐酸羟胺溶液:
100g/L
④醋酸钠（NaAC）溶液:
1mol/L
⑤HCl溶液:
6mol/L（1+1）
⑥NaOH溶液:
0.1mol/L
三、理论依据及实验原理：
1.邻二氮菲（phen）和Fe2+在pH3～9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物Fe（phen）32+，其lgK=21.3，κ508=1.1×104L·mol-1·cm-1，铁含量在0.1～6μg·mL-1范围内遵守比尔定律。
其吸收曲线如图1-1所示。
显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+全部还原为Fe2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。
有关反应如下：
2Fe3++2NH2OH·HC1＝2Fe2++N2↑+2H2O+4H++2C1－
图1-1邻二氮菲一铁（Ⅱ）的吸收曲线
用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度（A），以溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值，即可计算试样中被测物质的质量浓度。
2.设计思路
新鲜韭菜→自来水清洗→蒸馏水清洗→烘干→煮沸→碳化→配制成250ml溶液→制作标准曲线→分别测铁含量。
3.样品处理：
干灰化法
取一定量的用大量蒸馏水洗过的新鲜韭菜，放入干蒸发皿中,称重,放入烘箱,烘2h,再放入坩埚中移入马弗炉中灰化10h、（注意升温速度不要太快,最高温500℃）。
冷却后，加入浓HCl2-3滴，6mol/LHCl1.00ml溶解，配制成250ml,再取10.00ml作为工作液分别测定铁的含量.
4.样品记录
样品
项目
干锅/g
鲜重/g
灰重/g
韭菜
4、实验内容、步骤（用流程图表示）及注意事项：
1.实验内容
①、标准曲线的绘制
取50.00mL比色管8个,分别准确加入10.0μg/mL的铁标液0.00、1.00、1.50、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL,各比色管中分别加入1.00mL100g/L盐酸羟胺溶液,摇匀静置2min，再各加入2.00mL1.5g/L邻二氮菲溶液及5.00mLNaAc溶液,加水至刻度，充分摇匀静置10min。
用1cm比色皿,以空白试剂作参比，在510nm波长处测定各溶液的吸光度。
以铁的质量浓度为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。
以标准曲线法测定未知溶液的浓度，并作平行试验。
②、韭菜灰中铁含量的测定
分别取10.00mL韭菜消化液于一容量瓶中。
加入1.00mL100g/L盐酸羟胺溶液,摇匀静置2min,再各加入2.00mL1.5g/L邻二氮菲溶液及NaAc溶液5.00mL（每加一次溶液都必须充分摇匀）,用蒸馏水定容,充分摇匀静置5min，测定溶液吸光度。
2.实验步骤
①、标准曲线制作
0.00ml1.00ml1.50ml2.00ml
4.00ml6.00ml
8.00ml10.00ml
10ug/ml铁标溶液1.00mL100g/L盐酸羟胺溶液
2.00mL1.5g/L邻二氮菲溶液
→5.00mL1mol/L的NaAc溶液，以蒸馏水稀释至刻度并充分摇匀→放置10min，以空白试剂做参比→用1cm比色皿，在波长为510nm情况下测定其吸光度→绘制标准曲线。
②、韭菜灰中铁含量的测定
10.00ml韭菜试液→50ml比色管→1.00mL100g/L盐酸羟胺溶液→2.00mL1.5g/L邻二氮菲溶液→5.00mL1mol/L的NaAc溶液→静止10min以空白试剂做参比→用1cm比色皿，在波长为510nm情况下测定其吸光度→计算试液中铁含量。
5、参考文献：
①成都科技大学分析化学教研组《分析化学实验》北京高等教育出版社、1999
②武汉大学《分析化学实验》化学：
高等教育出版社、1996
③叶世柏《食品理化方法检验指南》北京：
北京大学出版社、1991
④赵传孝等著《食品检验技术手册》北京：
中国食品出版社、1990
6、指导教师对实验设计方案的意见：
指导教师签名：
年月日
二、实验报告
1、实验目的、设备与材料、理论依据、实验方法步骤见实验设计方案
2、实验现象、数据或图谱记录：
①铁标准曲线的绘制
a、
铁标准曲线的绘制
波长：
510nm显色时间：
10min比色皿：
1cm参比液：
蒸馏水测定时间：
2013.6.4、测定人：
冯玉荣
取样体积/ml
质量/ug
测定体积/ml
Ao
A
A-A0
0.00
0
50
0
0.000
0.000
1.00
10
50
0
0.051
0.049
1.50
15
50
0
0.074
0.072
2.00
20
50
0
0.093
0.091
4.00
40
50
0
0.189
0.187
6.00
60
50
0
0.273
0.271
8.00
80
50
0
0.357
0.355
10.00
100
50
0
0.449
0.447
b、
铁标准曲线的绘制
波长：
510nm显色时间：
10min比色皿：
1cm参比液：
蒸馏水测定时间：
2013.6.4、测定人：
赵玉
取样体积/ml
质量/ug
测定体积/ml
Ao
A
A-A0
0.00
0
50
0
0
0
1.00
10
50
0
0.047
0.045
1.50
15
50
0
0.070
0.068
2.00
20
50
0
0.089
0.087
4.00
40
50
0
0.179
0.177
6.00
60
50
0
0.269
0.267
8.00
80
50
0
0.355
0.353
10.00
100
50
0
0.455
0.453
c、
铁标准曲线的绘制
波长：
510nm显色时间：
10min比色皿：
1cm参比液：
蒸馏水测定时间：
2013.6.4、测定人：
沙正龙
取样体积/ml
质量/ug
测定体积/ml
Ao
A
A-A0
0.00
0
50
0
0.000
0.000
1.00
10
50
0
0.053
0.051
1.50
15
50
0
0.079
0.077
2.00
20
50
0
0.098
0.096
4.00
40
50
0
0.183
0.181
6.00
60
50
0
0.287
0.285
8.00
80
50
0
0.384
0.382
10.00
100
50
0
0.479
0.477
d、
铁标准曲线的绘制
波长：
510nm显色时间：
10min比色皿：
1cm参比液：
蒸馏水测定时间：
2013.6.4、测定人：
赵明熙
取样体积/ml
质量/ug
测定体积/ml
Ao
A
A-A0
0.00
0
50
0
0.000
0.000
1.00
10
50
0
0.053
0.051
1.50
15
50
0
0.079
0.077
2.00
20
50
0
0.098
0.096
4.00
40
50
0
0.183
0.181
6.00
60
50
0
0.287
0.285
8.00
80
50
0
0.384
0.382
10.00
100
50
0
0.479
0.477
②、韭菜灰中铁含量的测定
a
韭菜灰中铁含量的测定
测定人：
冯玉荣测定日期：
2013.6.5
项目
编号
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
取样质量/g
1.0120
定容体积/ml
250.00
A
0.189
0.189
0.190
A0
0.002
0.002
0.002
A-A0
0.187
0.187
0.188
铁含量/ug
41.61
41.61
41.84
C/mg/L
4.161
4.161
4.184
C/mg/g
1.028
1.028
1.034
平均C/mg/g
1.030
偏差
-0.002
-0.002
0.004
相对平均偏差/%
0.2
b
韭菜灰中铁含量的测定
测定人：
赵玉测定日期：
2013.6.5
项目
编号
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
取样质量/g
1.0120
定容体积/ml
250.00
A
0.192
0.193
0.192
A0
0.002
0.002
0.002
A-A0
0.190
0.191
0.190
铁含量/ug
42.47
42.69
42.47
C/mg/L
4.247
4.269
4.247
C/mg/g
1.049
1.055
1.049
平均C/mg/g
1.051
偏差
-0.002
0.004
-0.002
相对平均偏差/%
0.2
c
韭菜灰中铁含量的测定
测定人：
沙正龙测定日期：
2013.6.5
项目
编号
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
取样质量/g
1.0120
定容体积/ml
250.00
A
0.196
0.196
0.197
A0
0.002
0.002
0.002
A-A0
0.194
0.194
0.195
铁含量/ug
41.06
41.06
41.27
C/mg/L
4.106
4.106
4.127
C/mg/g
1.014
1.014
1.020
平均C/mg/g
1.016
偏差
-0.002
-0.002
0.004
相对平均偏差/%
0.2
d
韭菜灰中铁含量的测定
测定人：
赵明熙测定日期：
2013.6.5
项目
编号
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
取样质量/g
1.0120
定容体积/ml
250.00
A
0.197
0.198
0.197
A0
0.002
0.002
0.002
A-A0
0.195
0.196
0.195
铁含量/ug
41.27
41.49
41.27
C/mg/L
4.127
4.149
4.127
C/mg/g
1.020
1.025
1.020
平均C/mg/g
1.022
偏差
-0.002
0.003
-0.002
相对平均偏差/%
0.2
C、
项目
编号
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
C/mg/g
1.030
1.051
1.016
1.022
平均C/mg/g
1.030
偏差
0.000
0.021
-0.014
-0.008
相对平均偏差/%
1.0
3、数据处理：
计算公式
样品中微量元素含量公式：
C（mg/g）=c1（mg/l）*v（l）/m（g）
式中：
C——每克样品中微量元素的含量；
C1——测定用样品中元素的浓度（由标准曲线查出），（mg/l）；
V——样品定容体积，L；
m——样品质量，g；
4.注意事项
①、分光光度计使用前应先预热30分钟；
②、手拿比色皿的毛玻璃面；
③、试剂加入顺序不能随意改动；
④、反应时间应控制足够长，保证反应完全；
⑤、测定顺序从稀到浓。
5、结论：
分光光度法测得韭菜灰中铁的含量为1.030mg/g
6、实验总结
（1）、本次实验成败之处及其原因分析：
本次实验系统、完整的完成了设计实验。
并使自己的动手能力、解决问题的能力等得到了训练。
但也有不足之处：
提前准备不充分，导致试样预处理不是很顺利；操作不规范等。
总得来说，是考虑不周、准备不充分等原因造成。
（2）、本实验的关键环节及改进措施：
①做好本实验需要把握的关键环节：
韭菜灰化、铁标准曲线的绘制、试样（韭菜）的溶解及相关处理、分光光度计的正确使用等。
②若重做实验，为实现预期效果，仪器操作和实验步骤应如何改进：
A、规范操作实验仪器（分光光度计），使测定结果更加精确；
B、韭菜灰化等操作应提前做好充分的准备；
（3）、对实验的自我评价：
本次实验总体是成功的。
在本次实验中，我真正体会到了理论联系实际的重要性。
让我知道凡事不能光说不做，有些事看着简单，做了才知道难。
做事应该脚踏实地，认真的做。
在这次实验中，我也看到了自己的不足之处，在今后的学习中应更加努力
7、指导教师评语及得分：
指导教师签名：
年月日
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